一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯的方法，其特征在于：用MS培養(yǎng)基+復合卡拉膠+α-萘乙酸鈉配制適宜馬鈴薯組培苗生長的培養(yǎng)基，將經(jīng)過預培養(yǎng)的脫毒組培苗置于本發(fā)明的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)12天，脫毒馬鈴薯組培苗根莖健壯，煉苗移栽成活率高。與現(xiàn)有馬鈴薯組培苗培養(yǎng)基相比，本發(fā)明培養(yǎng)基具有成本低、經(jīng)濟效益好的優(yōu)點。
【專利說明】一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于植物栽培培養(yǎng)【技術領域】，尤其涉及一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯的方法 。
【背景技術】
[0002]通過馬鈴薯原原種脫毒可以有效提供產(chǎn)量和改善品質，從而馬鈴薯原原種脫毒技術受到越來越廣泛的應用。然而，馬鈴薯脫毒原原種薯必須采用組織培養(yǎng)的方法才能得到，目前，馬鈴薯組織培養(yǎng)技術采用的培養(yǎng)基投資成本高，嚴重影響了經(jīng)濟效益，主要是合成培養(yǎng)基成分中必須添加植物生長必需的各種元素，尤其是價格昂貴的微量元素，造成了脫毒馬鈴薯原原種薯生產(chǎn)成本過高而不能廣泛應用。同時，馬鈴薯脫毒組培苗分化培養(yǎng)后直接煉苗移栽，組培苗的健壯程度及品質優(yōu)劣嚴重影響栽培的成活率及馬鈴薯的品質。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于:提供一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯的方法，采用MS培養(yǎng)基+復合卡拉膠+ α -萘乙酸鈉配制適宜馬鈴薯組培苗生長的培養(yǎng)基，實現(xiàn)馬鈴薯脫毒組培苗快速生長、根莖健壯、生命力強的目的。
[0004]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案如下:
[0005]一、一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養(yǎng)基，其特征在于:馬鈴薯脫毒組培用培養(yǎng)基組成包括:
[0006]復合卡拉膠:100~120g/L ；
[0007]大量元素=NH4NO3LO ~1.2g/L、KNO3L 3 ~1.5g/L、CaCl2.4Η200.3 ~0.35g/L、MgSO4.7H200.2 ~0.25g/L、KH2PO40.1 ~0.12g/L ；
[0008]微量元素:ΚΙ0.2 ~0.25mg/L、H3BO3L O ~1.5mg/L、MnSO4.4Η205.5 ~6.0mg/L、ZnSO4.4Η202.0 ~2.5mg/L、Na2MoO4.2Η200.04 ~0.05mg/L、CuSO4.5Η200.008 ~0.01mg/L、CoCl2.6Η200.008 ~0.01mg/L、FeSO4.7Η209.5 ~10.0mg/L、CrCl3.6Η200.009 ~0.01mg/L ；
[0009]生長調節(jié)劑:α-萘乙酸鈉7.5mg/L;
[0010]有機成分:肌醇25mg/L、苯甲酸鈉24~25mg/L ；
[0011]其他:蔗糖30g/L、適量去離子水。
[0012]所述的復合卡拉膠由40%雞糞和60%卡拉膠復合而成，其中，所述的卡拉膠為I型卡拉膠，復合卡拉膠的制作方法是:(1)回收的雞糞高溫干燥除臭；(2)卡拉膠中加入適量去離子水，升溫至70~80°C至其完全溶解；(3)經(jīng)干燥除臭的雞糞加入去離子水至其含水量為35% ； (4)步驟(2)中的卡拉膠和步驟(3)中的雞糞混合攪拌均勻后，冷卻至室溫，待用。
[0013]二、馬鈴薯脫毒組培用培養(yǎng)基的制備方法，具體步驟如下:
[0014]1、稱取除復合卡拉膠以外的培養(yǎng)基其余成分，加入去離子水溶解，為了加快溶解，可加熱升溫50~60°C直至所有組分徹底溶解；
[0015]2、將步驟I所制備的溶液加入復合卡拉膠中，加熱升溫70~80至卡拉膠完全溶解，攪拌混合5分鐘；
[0016]3、分別用lmol/L的鹽酸和lmol/L的氫氧化鈉調節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.8~6.0 ;
[0017]4、將制備的培養(yǎng)基在120°C、1.2MPa條件下高溫高壓消毒20~30分鐘，即可制得本發(fā)明固體培養(yǎng)基。
[0018]三、馬鈴薯脫毒組培苗培養(yǎng)方法:[0019]馬鈴薯脫毒組培苗預培養(yǎng):將馬鈴薯脫毒組培苗置于15%蔗糖水溶液中進行培養(yǎng)，其中，控制溫度為25~27°C，光照控制2000~30001x，光照時長15小時，經(jīng)過15~18天的培養(yǎng)后，然后轉入所述的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；
[0020]馬鈴薯脫毒組培苗培養(yǎng)基復壯培養(yǎng):經(jīng)過預培養(yǎng)的馬鈴薯脫毒組培苗放入所述的密封的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，其中，接種密度為20~30%，培養(yǎng)基溫度控制:晝溫20~25V最適宜，夜溫10~12°C ;空氣相對濕度控制50~70% ;日光照15~17小時，光照強度為2000~30001x。經(jīng)過12天復壯培養(yǎng)，馬鈴薯脫毒組培苗生長健壯，生命力強。
[0021]與現(xiàn)有馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法相比，本發(fā)明培養(yǎng)的馬鈴薯脫毒組培苗長勢良好，根莖健壯，生命力頑強；本發(fā)明采用回收雞糞代替部分營養(yǎng)元素，降低了投資成本，提高經(jīng)濟效益，同時實現(xiàn)了經(jīng)濟循環(huán)利用；采用卡拉膠代替瓊脂，成本低且組培苗長勢更優(yōu)，生長速度更快；配方中添加CrCl3.6H20，促進組培苗生長；采用α -萘乙酸鈉為生長調節(jié)劑，增強組培苗抗旱能力，同時使組培苗健壯優(yōu)異。
【具體實施方式】
[0022]為了說明本發(fā)明的的技術方案，下面結合具體實例做進一步說明。
[0023]實施例1
[0024]1、馬鈴薯脫毒組培用培養(yǎng)基組成包括:
[0025]復合卡拉膠:100g/L ;
[0026]大量元素:ΝΗ4Ν031.0g/L、KNO3L 3g/L、CaCl2.4Η200.3g/L、MgSO4.7Η200.2g/L、KH2PO40.lg/L ；
[0027]微量元素:ΚΙ0.2mg/L、H3BO3L Omg/L、MnSO4.4H205.5mg/L、ZnSO4.4H202.0mg/L、Na2MoO4.2H200.04mg/L、CuSO4.5H200.008mg/L、CoCl2.6H200.008mg/L、FeSO4.7H209.5mg/L、CrCl3.6H200.009mg/L ；
[0028]生長調節(jié)劑:α -萘乙酸鈉7.5mg/L ；
[0029]有機成分:肌醇25mg/L、苯甲酸鈉24mg/L ；
[0030]其他:蔗糖30g/L、適量去離子水。
[0031]制作復合卡拉膠:(1)回收的雞糞經(jīng)高溫干燥除臭；(2)卡拉膠中加入適量去離子水，升溫至70~80°C至其完全溶解；(3)經(jīng)干燥除臭的雞糞加入去離子水至其含水量為35%; (4)步驟(2)中的卡拉膠和步驟(3)中的雞糞混合攪拌均勻后，冷卻至室溫，待用。
[0032]2、馬鈴薯脫毒組培用培養(yǎng)基的制備方法，具體步驟如下:
[0033](I)稱取除復合卡拉膠以外的培養(yǎng)基其余成分，加入去離子水溶解，為了加快溶解，可加熱升溫50~60°C直至所有組分徹底溶解；[0034](2)將步驟(1)所制備的溶液加入復合卡拉膠中，加熱升溫70~80至卡拉膠完全溶解，攪拌混合5分鐘；
[0035](3)分別用lmol/L的鹽酸和lmol/L的氫氧化鈉調節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.8~6.0 ;
[0036](4)將制備的培養(yǎng)基在120°C、1.2MPa條件下高溫高壓消毒20~30分鐘，即可制得本發(fā)明固體培養(yǎng)基。
[0037]3、馬鈴薯脫毒組培苗培養(yǎng)方法:
[0038]馬鈴薯脫毒組培苗預培養(yǎng):將馬鈴薯脫毒組培苗置于15%蔗糖水溶液中進行培養(yǎng)，其中，控制溫度為25~27°C，光照控制2000~3000Ix，光照時長15小時，經(jīng)過15~18天的培養(yǎng)后，然后轉入所述的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；
[0039]馬鈴薯脫毒組培苗培養(yǎng)基復壯培養(yǎng):經(jīng)過預培養(yǎng)的馬鈴薯脫毒組培苗放入所述的密封的固體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，其中，接種密度為20~30%，培養(yǎng)基溫度控制:晝溫20~25°C最適宜，夜溫10~12°C;空氣相對濕度控制50~70%;日光照15~17小時，光照強度為2000~30001χ。經(jīng)過12天復壯培養(yǎng)，馬鈴薯脫毒組培苗生長健壯，生命力強，即可進行煉苗移栽。
`[0040]采用本發(fā)明提供的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法培養(yǎng)后，以3天為期限測定組培苗的株高、葉片數(shù)、根數(shù)、根長、莖粗、苗鮮重、葉色。
[0041]隨機抽選20株組培苗進行測定，測定其各項指標，平均結果見下表1:
[0042]
【權利要求】
1.一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法，其特征在于:將馬鈴薯脫毒組培苗置于15%蔗糖水溶液中進行預培養(yǎng)，溫度控制為25~27°C，光照控制2000~30001x，光照時長15小時，經(jīng)過15~18天的預培養(yǎng)后，馬鈴薯脫毒組培苗放入密封的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，接種密度為20~30%，培養(yǎng)基溫度控制:晝溫20~25°C最適宜，夜溫10~12V’空氣相對濕度控制50~70%，日光照15~17小時，光照強度為2000~30001x，培養(yǎng)12天。
2.一種根據(jù)權利要求1所述的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養(yǎng)基，其特征在于:所述的培養(yǎng)基組分為: 復合卡拉膠:100~120g/L ； 大量元素:NH4NO31.0 ~1.2g/L、KNO3L 3 ~1.5g/L、CaCl2.4Η200.3 ~0.35g/L、MgSO4.7H200.2 ~0.25g/L、KH2PO40.1 ~0.12g/L ； 微量元素:ΚΙ0.2 ~0.25mg/L、H3BO3L O ~1.5mg/L、MnSO4.4Η205.5 ~6.0mg/L、ZnSO4.4Η202.0 ~2.5mg/L、Na2MoO4.2Η200.04 ~0.05mg/L、CuSO4.5Η200.008 ~0.01mg/L、CoCl2.6Η200.008 ~0.01mg/L、FeSO4.7Η209.5 ~10.0mg/L、CrCl3.6Η200.009 ~0.01mg/L ； 生長調節(jié)劑:α -萘乙酸鈉7.5mg/L ； 有機成分:肌醇25mg/L、苯甲酸鈉24~25mg/L ； 其他:蔗糖30g/L、適量去離子水。
3.如權利要求2所述的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于:馬鈴薯脫毒組培用培養(yǎng)基的制備方法如下:(1)稱取除復合卡拉膠以外的培養(yǎng)基其余成分，加入去離子水溶解，為了加快溶解，可加熱升溫50~60°C直至所有組分徹底溶解；(2)將步驟I所制備的溶液加入復合卡拉膠中，加熱升溫70~80至卡拉膠完全溶解，攪拌混合5分鐘；(3)分別用lmol/L的鹽酸和lmol/L的氫氧化鈉調節(jié)培養(yǎng)基pH值為5.8~6.0 ; (4)將制備的培養(yǎng)基在120°C、1.2MPa條件下高溫高壓消毒20~30分鐘，即可制得本發(fā)明固體培養(yǎng)基。
4.如權利要求2所述的一種馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用的培養(yǎng)基，其特征在于:所述的復合卡拉膠由40%雞糞和60%卡拉膠復合而成，優(yōu)選的卡拉膠為I型卡拉膠。
5.如權利要求3所述的馬鈴薯脫毒組培苗提純復壯方法所用培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于:所述的復合卡拉膠的制作方法是:(1)回收的雞糞高溫干燥除臭；(2)卡拉膠中加入適量去離子水，升溫至70~80°C至其完全溶解；(3)經(jīng)干燥除臭的雞糞加入去離子水至其含水量為35% ; (4)步驟(2)中的卡拉膠和步驟(3)中的雞糞混合攪拌均勻后，冷卻至室溫，待用。
【文檔編號】A01H4/00GK103518624SQ201310528666
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月31日 優(yōu)先權日:2013年10月31日
【發(fā)明者】李愷, 屠建章, 張才強, 吳成秀, 火有仁 申請人:定西市凱凱生態(tài)園植物快繁有限公司