提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其操作步驟是：在喜樹種子發(fā)芽的第5～7天，將南方紅豆杉枝葉水提取液添加到喜樹種子發(fā)芽床中，在添加后的第6～8小時(shí)，喜樹種子終止發(fā)芽。此時(shí)發(fā)芽的喜樹種子可用于10-甲氧基喜樹堿的提取。與未處理的喜樹種子相比，本發(fā)明提供的方法獲得的喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿的含量可提高25倍以上。
【專利說明】提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物化學(xué)和植物生理生態(tài)學(xué)研究領(lǐng)域，具體涉及一種促進(jìn)喜樹種子內(nèi)10-甲氧基喜樹堿生成的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]喜域iCamptotheca acuminata Dence)為國家II級重點(diǎn)保護(hù)野生植物,其全株均含有一類吲哚類生物堿一喜樹堿及其衍生物(Thomas et al.，2004)。喜樹堿類衍生物具有顯著抗腫瘤活性(Azrak et al., 2011 ；0rzechowska et al., 2012),全球?qū)ο矘鋲A類抗腫瘤藥品的需求逐年增加，目前市場份額已超過10億美元(生物醫(yī)藥網(wǎng)，2012)。10-甲氧基喜樹堿是喜樹種子中存在的天然喜樹堿衍生物，研究發(fā)現(xiàn)，其活性比喜樹堿大、毒性喜樹堿小(楊士平，2009)，但由于其在喜樹種子內(nèi)的含量低，沒有工業(yè)利用價(jià)值。如果能通過適當(dāng)方法，提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量，則可使喜樹種子用于10-甲氧基喜樹堿的工業(yè)提取成為可能。到目前未止，尚未見提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法。因此本發(fā)明旨在提供一種提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其特征在于，按如下步驟操作:
(1)將3層濾紙放在培養(yǎng)皿里，培養(yǎng)皿中加水使濾紙充分吸濕，浙去多余水分，把喜樹種子直接放在水潤濕的濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，放進(jìn)發(fā)芽箱進(jìn)行發(fā)芽；
(2)發(fā)芽的第5~7天，將南方紅豆杉枝葉水提取液添加到步驟(1)所述的水潤濕的濾紙上；
(3)在添加南方紅豆杉枝葉水提取液后的第6~8小時(shí)，喜樹種子終止發(fā)芽。
[0004]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的南方紅豆杉枝葉水提取液通過如下流程得到:將南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到粉末I，水與粉末I按質(zhì)量比100:1~1000:1混合、回流提取I~3小時(shí)，過濾得到的濾液即為南方紅豆杉枝葉水提取液。
[0005]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的添加，其特征在于，南方紅豆杉枝葉水提取液與發(fā)芽喜樹種子質(zhì)量比為1:10~1:8。
[0006]與未處理的喜樹種子相比，本發(fā)明提供的方法獲得的發(fā)芽喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿的含量可提高25倍以上。此時(shí)發(fā)芽的喜樹種子可用于10-甲氧基喜樹堿的工業(yè)提取。
【具體實(shí)施方式】
[0007]下面通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述。
[0008]實(shí)施例1本實(shí)施例提供的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，按如下步驟操作:
(1)將3層濾紙放在培養(yǎng)皿里，培養(yǎng)皿中加水使濾紙充分吸濕，浙去多余水分，把喜樹種子直接放在水潤濕的濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，放進(jìn)發(fā)芽箱進(jìn)行發(fā)芽；
(2)發(fā)芽的第7天，將南方紅豆杉枝葉水提取液添加到步驟(1)所述的水潤濕的濾紙
上；
(3)在添加南方紅豆杉枝葉水提取液后的第6小時(shí)，喜樹種子終止發(fā)芽。
[0009]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的南方紅豆杉枝葉水提取液通過如下流程得到:將南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到粉末I，水與粉末I按質(zhì)量比1000:1混合、回流提取2小時(shí)，過濾得到的濾液即為南方紅豆杉枝葉水提取液。
[0010]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的添加，其特征在于，南方紅豆杉枝葉水提取液與發(fā)芽喜樹種子質(zhì)量比為1:8。
[0011]與未處理的喜樹種子相比，本發(fā)明提供的方法獲得的發(fā)芽喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿的含量提高了 25.3倍。
[0012]實(shí)施例2
本實(shí)施例提供的提 高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，按如下步驟操作:
(1)將3層濾紙放在培養(yǎng)皿里，培養(yǎng)皿中加水使濾紙充分吸濕，浙去多余水分，把喜樹種子直接放在水潤濕的濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，放進(jìn)發(fā)芽箱進(jìn)行發(fā)芽；
(2)發(fā)芽的第5天，將南方紅豆杉枝葉水提取液添加到步驟(1)所述的水潤濕的濾紙
上；
(3)在添加南方紅豆杉枝葉水提取液后的第8小時(shí)，喜樹種子終止發(fā)芽。
[0013]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的南方紅豆杉枝葉水提取液通過如下流程得到:將南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到粉末I，水與粉末I按質(zhì)量比500:1混合、回流提取3小時(shí)，過濾得到的濾液即為南方紅豆杉枝葉水提取液。
[0014]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的添加，其特征在于，南方紅豆杉枝葉水提取液與發(fā)芽喜樹種子質(zhì)量比為1:9。
[0015]與未處理的喜樹種子相比，本發(fā)明提供的方法獲得的發(fā)芽喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿的含量提高了 27.8倍。
[0016]實(shí)施例3
本實(shí)施例提供的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，按如下步驟操作:
(1)將3層濾紙放在培養(yǎng)皿里，培養(yǎng)皿中加水使濾紙充分吸濕，浙去多余水分，把喜樹種子直接放在水潤濕的濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，放進(jìn)發(fā)芽箱進(jìn)行發(fā)芽；
(2)發(fā)芽的第6天，將南方紅豆杉枝葉水提取液添加到步驟(1)所述的水潤濕的濾紙
上；
(3)在添加南方紅豆杉枝葉水提取液后的第7小時(shí)，喜樹種子終止發(fā)芽。
[0017]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的南方紅豆杉枝葉水提取液通過如下流程得到:將南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到粉末I，水與粉末I按質(zhì)量比100:1混合、回流提取I小時(shí)，過濾得到的濾液即為南方紅豆杉枝葉水提取液。
[0018]所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的添加，其特征在于，南方紅豆杉枝葉水提取液與發(fā)芽喜樹種子質(zhì)量比為1:10。
[0019]與未處理的喜樹種子相比，本發(fā)明 提供的方法獲得的發(fā)芽喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿的含量提高了 33.6倍。
【權(quán)利要求】
1.本發(fā)明所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其操作步驟是: (1)將3層濾紙放在培養(yǎng)皿里，培養(yǎng)皿中加水使濾紙充分吸濕，浙去多余水分，把喜樹種子直接放在水潤濕的濾紙上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，放進(jìn)發(fā)芽箱進(jìn)行發(fā)芽； (2)發(fā)芽的第5~7天，將南方紅豆杉枝葉水提取液添加到步驟(1)所述的水潤濕的濾紙上； (3)在添加南方紅豆杉枝葉水提取液后的第6~8小時(shí)，喜樹種子終止發(fā)芽。
2.權(quán)利要求1所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的南方紅豆杉枝葉水提取液通過如下流程得到:將南方紅豆杉枝葉干燥、粉碎得到粉末I，水與粉末I按質(zhì)量比100:1~1000:1混合、回流提取I~3小時(shí)，過濾得到的濾液即為南方紅豆杉枝葉水提取液。
3.權(quán)利要求1所述的提高喜樹種子中10-甲氧基喜樹堿含量的方法，其中步驟(2)所述的添加，其特征在 于，南方紅豆杉枝葉水提取液與發(fā)芽喜樹種子質(zhì)量比為1:10~1:8。
【文檔編號】A01P21/00GK103975668SQ201410122210
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年3月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月30日
【發(fā)明者】不公告發(fā)明人 申請人:東北林業(yè)大學(xué), 趙春建