一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,由以下組分組成:硝酸銨,硝酸鉀,氯化鈣,硫酸鎂,磷酸二氫鉀,碘化鉀,硼酸,硫酸錳,硫酸鋅,鉬酸鈉,硫酸銅,氯化鈷,乙二胺四乙酸鐵鈉,肌醇,煙酸,鹽酸吡哆醇,鹽酸硫胺素,蔗糖,瓊脂,水。使用本發(fā)明的培養(yǎng)基能促使馬鈴薯組培苗的生長(zhǎng)速度,從接種之日起到株高長(zhǎng)至8厘米所需要的時(shí)間僅為20天,大大提高了組培苗剪切、轉(zhuǎn)接的工作效率。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基,具體涉及一種能促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。【背景技術(shù)】
[0002]目前,國(guó)內(nèi)外進(jìn)行馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)所使用是MS培養(yǎng)基,但是一般情況下在MS培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的組培苗需30天左右株高才能夠長(zhǎng)至8厘米,且主莖較細(xì)弱,分枝細(xì)長(zhǎng)且較多,交織在一起,不利于剪切轉(zhuǎn)接操作,導(dǎo)致轉(zhuǎn)接時(shí)工作效率低,同時(shí)由于組培苗長(zhǎng)勢(shì)較弱,假植或移栽時(shí)緩苗時(shí)間較長(zhǎng),成活率相對(duì)也較低。由于傳統(tǒng)的MS培養(yǎng)基存在以上缺點(diǎn),國(guó)內(nèi)外的研究人員也對(duì)其配方進(jìn)行了各種改良,但是效果并不明顯。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的 培養(yǎng)基。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0005]一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,以IL培養(yǎng)基計(jì),由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1567.5 ~1732.5mg,硝酸鉀(KNO3) 1805 ~1995mg,氯化鈣(CaCl2.2Η20) 418 ~462mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化鉀(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.1 ~17.7mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.Η20) 72 ~78mg,肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,煙酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,瓊脂 6650 ~7350mg,余量為水。
[0006]優(yōu)選的是:以IL培養(yǎng)基計(jì),由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1650mg,硝酸鉀(KNO3) 1900mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)440mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg,碘化鉀(KI)0.83mg,硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.9mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,煙酸(C6H5NO2) 0.5mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.5mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg,蔗糖(C12H22O11) 30000mg,瓊脂 7000mg,余量為水。
[0007]—種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基的制備方法,包含以下步驟:
[0008]a、準(zhǔn)確稱(chēng)取除瓊脂外的培養(yǎng)基其余組分,加蒸餾水充分溶解后,定容;
[0009]b、準(zhǔn)確稱(chēng)取瓊脂并加入到定容好的溶液中,加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解;
[0010]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至5.5-5.7 ;
[0011]d、將配制好的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中,于121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘,制得本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0012]進(jìn)一步地:步驟a后不加入瓊脂,制得本發(fā)明的不含瓊脂的培養(yǎng)基。
[0013]一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基的使用方法,在無(wú)菌操作臺(tái)上,每50ml含有瓊脂的培養(yǎng)基中扦插入10-12個(gè)馬鈴薯組培苗莖段,在環(huán)境溫度20-22°C、24小時(shí)光照的組培室內(nèi)培養(yǎng)10天后再加入IOml不含瓊脂的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)10天。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的培養(yǎng)基,能快繁馬鈴薯組培苗,在24小時(shí)光照、室內(nèi)溫度20-22°C的條件下,組培苗生長(zhǎng)迅速,從接種之日起到株高長(zhǎng)至8厘米所需要的時(shí)間為20天,植株生長(zhǎng)健壯,葉色濃綠,莖桿粗壯,分枝少,大大提高了組培苗剪切、轉(zhuǎn)接的工作效率,同時(shí)也大幅提高了其假植、移栽的成活率。
【具體實(shí)施方式】
[0015]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】做進(jìn)一步說(shuō)明。
[0016]本發(fā)明提供一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,以IL培養(yǎng)基計(jì),由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1567.5~1732.5mg,硝酸鉀(KNO3) 1805~1995mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)418 ~462mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化鉀(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸錳(MnSO4.4Η20) 16.1 ~17.7mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.Η20) 72 ~78mg,肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,煙酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,瓊脂 6650 ~7350mg,余量為水。
[0017]其制備方法為:
[0018]a、準(zhǔn)確稱(chēng)取除瓊脂外的培養(yǎng)基其余組分,加蒸餾水充分溶解后,定容;
[0019]b、準(zhǔn)確稱(chēng)取瓊脂并加入到定容好的溶液中,加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解;
[0020]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至
5.5-5.7 ;
[0021]d、將配制好的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中,于121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘,制得本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0022]進(jìn)一步地:步驟a后不加入瓊脂,制得本發(fā)明的不含瓊脂的培養(yǎng)基。
[0023]實(shí)施例1:
[0024]一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,以IL培養(yǎng)基計(jì),由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1650mg,硝酸鉀(KNO3) 1900mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)440mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg,碘化鉀(KI)0.83mg,硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.9mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,煙酸(C6H5NO2) 0.5mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3-HCl)0.5mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg,蔗糖(C12H22O11) 30000mg,瓊脂7000mg,余量為水。
[0025]上述培養(yǎng)基的制備方法,包含以下步驟:[0026]a、準(zhǔn)確稱(chēng)取除瓊脂外的培養(yǎng)基其余組分,加蒸餾水充分溶解后,定容;
[0027]b、準(zhǔn)確稱(chēng)取瓊脂并加入到定容好的溶液中,加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解;
[0028]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至5.5-5.7 ;
[0029]d、將配制好的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中,于121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘,制得本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0030]進(jìn)一步地:步驟a后不加入瓊脂,制得本發(fā)明的不含瓊脂的培養(yǎng)基。
[0031]將上述制備方法制得的培養(yǎng)基,用于繁殖馬鈴薯組培苗,其方法為:在無(wú)菌操作臺(tái)上,每50ml含有瓊脂的培養(yǎng)基中扦插入10-12個(gè)馬鈴薯組培苗莖段,在環(huán)境溫度20_22°C、24小時(shí)光照的組培室內(nèi)培養(yǎng)10天后再加入IOml不含瓊脂的培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)10天。
[0032]使用本實(shí)施例中的培養(yǎng)基,對(duì)不同的馬鈴薯組培苗進(jìn)行培養(yǎng),其典型結(jié)果如下:
[0033]1、宣威市馬鈴薯種薯研發(fā)中心組培室利用本實(shí)施例的培養(yǎng)基和方法快繁馬鈴薯組培苗,2011年3月17日剪切接種,室內(nèi)溫度設(shè)定為22°C,24小時(shí)光照,2011年4月6日組培苗株高長(zhǎng)至 厘米,生長(zhǎng)時(shí)間是20天,組培苗生長(zhǎng)健壯,葉色濃綠,莖桿粗壯,平均莖粗
0.19厘米,平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.5個(gè)。
[0034]2、云南農(nóng)業(yè)大學(xué)薯類(lèi)作物研究所組培室利用本實(shí)施例的培養(yǎng)基和方法快繁馬鈴薯組培苗,2011年3月6日剪切接種,室內(nèi)溫度設(shè)定為20°C,24小時(shí)光照,2011年3月27日組培苗株高長(zhǎng)至8厘米,生長(zhǎng)時(shí)間是21天,組培苗生長(zhǎng)健壯,葉色濃綠,莖桿粗壯,平均莖粗0.17厘米,平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.7個(gè)。
[0035]3、云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院組培室利用本實(shí)施例的培養(yǎng)基和方法快繁馬鈴薯組培苗,2011年4月7日剪切接種,室內(nèi)溫度設(shè)定為21°C,24小時(shí)光照,2011年4月27日組培苗株高長(zhǎng)至8厘米,生長(zhǎng)時(shí)間是20天,組培苗生長(zhǎng)健壯,葉色濃綠,莖桿粗壯,平均莖粗0.18厘米,平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.6個(gè)。
[0036]相同條件下,使用MS培養(yǎng)基保存的馬鈴薯組培苗,2011年4月7日剪切接種,2011年5月7日組培苗株高長(zhǎng)至8厘米,生長(zhǎng)時(shí)間是31天,組培苗生長(zhǎng)較弱,葉色淡綠,莖桿細(xì)弱彎曲,分枝較多且細(xì)弱,平均莖粗0.12厘米,平均每株苗莖節(jié)數(shù)4.1個(gè)。
[0037]本發(fā)明所描述的具體實(shí)施例只用于對(duì)該培養(yǎng)基的具體實(shí)現(xiàn)過(guò)程的詳細(xì)描述,而不是對(duì)該培養(yǎng)基的限定。任何對(duì)此產(chǎn)品進(jìn)行的修飾與改良,在專(zhuān)利范圍或范疇內(nèi)同類(lèi)或相近物質(zhì)的替代與使用,均屬于本發(fā)明專(zhuān)利范圍,受此專(zhuān)利保護(hù)。
【權(quán)利要求】
1.一種促進(jìn)馬鈴薯組培苗快速生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,其特征在于:以IL培養(yǎng)基計(jì),由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1567.5~1732.5mg,硝酸鉀(KNO3) 1805~1995mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)418 ~462mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化鉀(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸錳(MnSO4.4Η20) 16.1 ~17.7mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 72 ~78mg,肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,煙酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,瓊脂 6650 ~7350mg,余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于,以IL培養(yǎng)基計(jì),由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1650mg,硝酸鉀(KNO3) 1900mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)440mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg,碘化鉀(KI)0.83mg,硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.9mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,煙酸(C6H5NO2) 0.5mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3-HCl)0.5mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg,蔗糖(C12H22O11) 30000mg,瓊脂7000mg,余量 為水。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103931500SQ201410165582
【公開(kāi)日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月19日
【發(fā)明者】張新永, 包媛媛, 宋雷 申請(qǐng)人:云南農(nóng)業(yè)大學(xué)