一種黑木耳液體培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種黑木耳液體培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法，液體培養(yǎng)基的配比為：每1L水中溶解豆粕酶解液250-400ml、葡萄糖15-45g、亞硒酸鈉1-3g、碘酸鉀1.5-3.5g、硫酸鋅1-4g、硫酸鎂1-2g和維生素B120-30mg；本發(fā)明具有配制方便、成本低、微量元素豐富的特點(diǎn)，相比于傳統(tǒng)黑木耳的培養(yǎng)方法，有效的縮短了黑木耳的培養(yǎng)時(shí)間，適合產(chǎn)業(yè)化推廣。
【專利說明】一種黑木耳液體培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食用菌加工【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種黑木耳液體培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]黑木耳(Auricularia auricula)屬于真菌門、擔(dān)子菌綱、木耳目、木耳科、木耳屬，是一種著名的藥食兼用大型真菌，有菌絲體和子實(shí)體組成。木耳多糖是木耳的主要活性成分，具有抗腫瘤、抗血栓、抗衰老、降血糖、降血脂和調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。此外，黑木耳中的鐵含量是各種葷素食品中含量最豐富的，食用黑木耳可及時(shí)為人體補(bǔ)充足夠的鐵質(zhì)。菌絲體是黑木耳的營(yíng)養(yǎng)器官，相當(dāng)于高等綠色植物的根、莖、葉，是黑木耳的主體。黑木耳的子實(shí)體，又稱單子果，是我們烹飪食用的部分。
[0003]目前黑木耳的栽培方法已形成固定的模式，即將木屑、麩皮、棉子皮、農(nóng)作物秸桿粉碎物、礦物質(zhì)等裝入專用的耐高溫塑料袋中，經(jīng)過高溫殺菌、接種、培養(yǎng)、割口出耳，出耳時(shí)，或?qū)⒊龆鯍煸谂锸抑?，或?qū)⒊龆Q立擺放在地面上，但是大規(guī)模栽培普遍存在產(chǎn)量低，品質(zhì)差，污染率高，產(chǎn)量不穩(wěn)定等問題，已成為袋載木耳發(fā)展的瓶頸，急需得到解決和提聞。
[0004]在食用菌加工【技術(shù)領(lǐng)域】中，有一些利用在液態(tài)條件下培養(yǎng)菌體的相關(guān)報(bào)道，它們具有菌體生長(zhǎng)快，條件容易控制等優(yōu)勢(shì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)缺陷，而提供一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法。
[0006]為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的所采用的技術(shù)方案是:一種黑木耳液體培養(yǎng)基，其特征在于，具有以下配比:每IL水中溶解豆柏酶解液250-400ml、葡萄糖15_45g、亞硒酸鈉l_3g、碘酸鉀1.5-3.5g、硫酸鋅l_4g、硫酸鎂l-2g和維生;所述豆柏酶解液是將豆柏與等質(zhì)量的水混合，調(diào)解pH值為8-10，隨后添加4000-6000U/g的堿性蛋白酶，在55_70°C下水解2-3h后煮沸水解液，蒸煮20-30min后，用2_4層紗布過濾，得到豆柏酶解液。
[0007]優(yōu)選的，黑木耳液體培養(yǎng)基的配比為:每IL水中溶解豆柏酶解液350mL、葡萄糖40g、亞硒酸鈉2.5g、碘酸鉀2g、硫酸鋅3g、硫酸鎂1.5g和維生素BJOmg。
[0008]一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟:
[0009](I)分裝:將上述配制的液態(tài)培養(yǎng)基50-100mL，分裝至250mL的三角瓶中密封；
[0010](2)滅菌:將步驟(1)密封的三角瓶滅菌,獲得滅菌培養(yǎng)基；
[0011](3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟(2)得到的冷卻后的滅菌培養(yǎng)基中，獲得接種培養(yǎng)基；
[0012](4)培養(yǎng):將步驟(3)得到的接種培養(yǎng)基在搖床中震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)后獲得二級(jí)菌種。[0013]所述步驟(2)中所述滅菌的溫度為115-120°C，滅菌時(shí)間為10_15min。
[0014]所述步驟(3)中所述滅菌培養(yǎng)基的接種量為每個(gè)三角瓶中接入1-2塊0.5-1.0cm2的菌塊。
[0015]所述步驟(4)中所述接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度為23_28°C，培養(yǎng)時(shí)間4天，搖床震蕩速度 150_200rpm。
[0016]一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于具體包括以下步驟:
[0017](I)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶50-100mL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0018](2)滅菌，將步驟⑴所得密封三角瓶在115-120°C下，滅菌10-15min，獲得滅菌培
養(yǎng)基;
[0019](3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟(2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶1-2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0020](4)培養(yǎng):將步驟(3)所得接種培養(yǎng)基置于150_200rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在23-28 °C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
[0021]本發(fā)明的原理為:在培養(yǎng)基中以豆柏作氮源、葡萄糖作碳源、亞硒酸鈉作為硒源，并加入少量的硫酸鎂、硫酸鋅和碘酸鉀；鎂元素是許多酶的活化劑，在培養(yǎng)基中能促進(jìn)碳水化合物的新陳代謝、核酸的合成、磷酸鹽的轉(zhuǎn)化；硫酸鋅可用于防止病害，它也是一種補(bǔ)充黑木耳鋅微量元素的肥料；碘酸鉀作為一種被允許的食品添加劑加入到培養(yǎng)基中不但能夠有助于黑木耳生產(chǎn)，而且能夠提升黑木耳中對(duì)人體有益的碘含量。
[0022]本發(fā)明涉及一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其有益效果是:具有配制方便、成本低、微量元素豐富的特點(diǎn)，相比于傳統(tǒng)黑木耳的培養(yǎng)方法，有效的縮短了黑木耳的培養(yǎng)時(shí)間，適合產(chǎn)業(yè)化推廣。黑木耳在本發(fā)明提供的培養(yǎng)基中4天即可達(dá)到較高的菌體量及足夠的菌球數(shù)，可為后期進(jìn)行人工栽培提供充足的二級(jí)菌種，有利于人工栽培研究的推進(jìn)。
【具體實(shí)施方式】
[0023]以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0024]實(shí)施例1
[0025]一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其原料配方的組成為:豆柏酶解液250mL,葡萄糖15g,亞硒酸鈉Ig,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BfOmg,水1000mLo
[0026]按上述配方，將豆柏與等量的水混合后煮沸，蒸煮30min后，過濾后得到的豆柏酶解液250mL,與葡萄糖15g,亞硒酸鈉Ig,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BfOmg和水1000mL混合。
[0027]應(yīng)用上述液體培養(yǎng)基對(duì)黑木耳進(jìn)行培養(yǎng)的方法，步驟如下:
[0028]I)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶80mL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0029]2)滅菌，將步驟I)所得密封三角瓶在120°C下，滅菌lOmin，獲得滅菌培養(yǎng)基；[0030]3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0031]4)培養(yǎng):將步驟3)所得接種培養(yǎng)基置于170rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
[0032]本實(shí)施例1生產(chǎn)的黑木耳，菌絲球數(shù)量多，小而密實(shí)，菌絲干重達(dá)到6.3g/L,同時(shí)富含鐵、鋅、硒、碘、鎂等多種微量元素。
[0033]實(shí)施例2
[0034]一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其原料配方的組成為:豆柏酶解液400mL,葡萄糖45g,亞硒酸鈉3g,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BJOmg,水1000mL0
[0035]按上述配方，將豆柏與等量的水混合后煮沸，蒸煮30min后，過濾后得到的豆柏酶解液400mL,與葡萄糖45g,亞硒酸鈉3g,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BJOmg和水1000mL混合。
[0036]應(yīng)用上述液體培養(yǎng)基對(duì)黑木耳進(jìn)行培養(yǎng)的方法，步驟如下:
[0037]I)分裝:將配制 好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶80mL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0038]2)滅菌，將步驟I)所得密封三角瓶在120°C下，滅菌lOmin，獲得滅菌培養(yǎng)基；
[0039]3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0040]4)培養(yǎng):將步驟3)所得接種培養(yǎng)基置于170rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
[0041]本實(shí)施例2生產(chǎn)的黑木耳，菌絲球數(shù)量多，小而密實(shí)，菌絲干重達(dá)到13.7g/L，同時(shí)富含鐵、鋅、硒、碘、鎂等多種微量元素。
[0042]實(shí)施例3
[0043]一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其原料配方的組成為:豆柏酶解液350mL,葡萄糖30g,亞硒酸鈉2.5g,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素B^mg,水1000mL0
[0044]按上述配方，將豆柏與等量的水混合后煮沸，蒸煮30min后，過濾后得到的豆柏酶解液350mL,與葡萄糖30g,亞硒酸鈉2.5g,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BfSmg和水1000mL混合。
[0045]應(yīng)用上述液體培養(yǎng)基對(duì)黑木耳進(jìn)行培養(yǎng)的方法，步驟如下:
[0046]I)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶80mL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0047]2)滅菌，將步驟I)所得密封三角瓶在120°C下，滅菌lOmin，獲得滅菌培養(yǎng)基；
[0048]3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0049]4)培養(yǎng):將步驟3)所得接種培養(yǎng)基置于170rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
[0050]本實(shí)施例3生產(chǎn)的黑木耳，菌絲球數(shù)量多，小而密實(shí)，菌絲干重達(dá)到10.8g/L，同時(shí)富含鐵、鋅、硒、碘、鎂等多種微量元素。
[0051]實(shí)施例4
[0052]一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其原料配方的組成為:豆柏酶解液350mL,葡萄糖30g,亞硒酸鈉2.5g,碘酸鉀3.5g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素B^Smg,水1000mL0
[0053]按上述配方，將豆柏與等量的水混合后煮沸，蒸煮30min后，過濾后得到的豆柏酶解液350mL,與葡萄糖30g,亞硒酸鈉2.5g,碘酸鉀3.5g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素B^Smg和水1000mL混合。
[0054]應(yīng)用上述液體培養(yǎng)基對(duì)黑木耳進(jìn)行培養(yǎng)的方法，步驟如下:
[0055]I)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶IOOmL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0056]2)滅菌，將步驟I)所得密封三角瓶在120°C下，滅菌lOmin，獲得滅菌培養(yǎng)基；
[0057]3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0058]4)培養(yǎng):將步驟3)所得接種培養(yǎng)基置于200rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
[0059]本實(shí)施例4生產(chǎn)方法生產(chǎn)的黑木耳，菌絲球數(shù)量多，小而密實(shí)，菌絲干重達(dá)到12.8g/L，同時(shí)富含鐵、鋅、硒、碘、鎂等多種微量元素。
[0060]實(shí)施例5
[0061]一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其原料配方的組成為:豆柏酶解液350mL,葡萄糖40g,亞硒酸鈉2.5g,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素B1SOmg,水1000mL0
[0062]按上述配方，將豆柏與等量的水混合后煮沸，蒸煮30min后，過濾后得到的豆柏酶解液350mL,與葡萄糖40g,亞硒酸鈉2.5g,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BJOmg和水1000mL混合。
[0063]應(yīng)用上述液體培養(yǎng)基對(duì)黑木耳進(jìn)行培養(yǎng)的方法，步驟如下:
[0064]I)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶IOOmL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0065]2)滅菌，將步驟I)所得密封三角瓶在120°C下，滅菌lOmin，獲得滅菌培養(yǎng)基；
[0066]3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0067]4)培養(yǎng):將步驟3)所得接種培養(yǎng)基置于200rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
[0068]本實(shí)施例5生產(chǎn)的黑木耳，菌絲球數(shù)量多，小而密實(shí)，菌絲干重達(dá)到14.2g/L,同時(shí)富含鐵、鋅、硒、碘、鎂等多種微量元素。
[0069]實(shí)施例6
[0070]一種適合黑木耳快速生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其原料配方的組成為:豆柏酶解液250mL,葡萄糖30g,亞硒酸鈉Ig,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BfOmg,水1000mL0[0071]按上述配方，將豆柏與等量的水混合后煮沸，蒸煮30min后，過濾后得到的豆柏酶解液250mL,與葡萄糖30g,亞硒酸鈉Ig,碘酸鉀2g,硫酸鋅3g,硫酸鎂1.5g,維生素BfOmg和水1000mL混合。
[0072]應(yīng)用上述液體培養(yǎng)基對(duì)黑木耳進(jìn)行培養(yǎng)的方法，步驟如下:
[0073]I)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶IOOmL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封；
[0074]2)滅菌，將步驟I)所得密封三角瓶在120°C下，滅菌lOmin，獲得滅菌培養(yǎng)基；
[0075]3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶I塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基；
[0076]4)培養(yǎng):將步驟3)所得接種培養(yǎng)基置于200rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在25°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。[0077]本實(shí)施例6生產(chǎn)的黑木耳，菌絲球數(shù)量多，小而密實(shí)，菌絲干重達(dá)到8.3g/L，同時(shí)富含鐵、鋅、硒、碘、鎂等多種微量元素。
[0078]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種黑木耳液體培養(yǎng)基，其特征在于，具有以下配比:每IL水中溶解豆柏酶解液250-400ml、葡萄糖15_45g、亞硒酸鈉l_3g、碘酸鉀1.5-3.5g、硫酸鋅l_4g、硫酸鎂l_2g和維生素BpO^Omg ;所述豆柏酶解液是將豆柏與等質(zhì)量的水混合，調(diào)解pH值為8-10，隨后添加4000-6000U/g的堿性蛋白酶，在55-70°C下水解2_3h后煮沸水解液，蒸煮20_30min后，用2-4層紗布過濾，得到豆柏酶解液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的優(yōu)選的一種黑木耳液體培養(yǎng)基，其特征在于，具有以下配比:每IL水中溶解豆柏酶解液350mL、葡萄糖40g、亞硒酸鈉2.5g、碘酸鉀2g、硫酸鋅3g、硫酸鎂1.5g和維生素BJOmg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟: (1)分裝:將上述配制的液態(tài)培養(yǎng)基50-100mL，分裝至250mL的三角瓶中密封； (2)滅菌:將步驟(1)密封的三角瓶滅菌，獲得滅菌培養(yǎng)基； (3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟(2)得到的冷卻后的滅菌培養(yǎng)基中，獲得接種培養(yǎng)基； (4)培養(yǎng):將步驟(3)得到的接種培養(yǎng)基在搖床中震蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)后獲得二級(jí)菌種。
4.根據(jù)權(quán)利要求 3所述的一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于所述步驟(2)中所述滅菌的溫度為115-120°C，滅菌時(shí)間為10-15min。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于所述步驟(3)中所述滅菌培養(yǎng)基的接種量為每個(gè)三角瓶中接入1-2塊0.5-1.0cm2的菌塊。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于所述步驟(4)中所述接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度為23-28°C，培養(yǎng)時(shí)間4天，搖床震蕩速度150-200rpm。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種黑木耳液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟: (1)分裝:將配制好的液態(tài)培養(yǎng)基按每瓶50-100mL的裝量裝入250mL三角瓶中，塞上八層紗布，綁上牛皮紙密封； (2)滅菌，將步驟(1)所得密封三角瓶在115-120°C下，滅菌10-15min，獲得滅菌培養(yǎng)基; (3)接種:將提純活化后的一級(jí)木耳母種，接入到步驟(2)所得的滅菌培養(yǎng)基中，接種量為每瓶1-2塊0.5-1.0cm2的菌塊，獲得接種培養(yǎng)基； (4)培養(yǎng):將步驟(3)所得接種培養(yǎng)基置于150-200rpm的搖床中震蕩培養(yǎng)，在23-28°C下培養(yǎng)4天，獲得二級(jí)菌種。
【文檔編號(hào)】A01G1/04GK103922851SQ201410174040
【公開日】2014年7月16日 申請(qǐng)日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】郭文賓 申請(qǐng)人:天津市五林中地農(nóng)業(yè)科技有限公司