一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及食用菌栽培領(lǐng)域，尤其是一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛹蟲草是以蠶蛹為宿主的真菌，與冬蟲夏草同科同屬，化學(xué)成分基本一致，其抗腫 瘤成分蟲草素含量高于冬蟲夏草，且是衛(wèi)生部批準的新資源食品，具有抗腫瘤、抗病毒、抗 菌、抗炎癥、延緩衰老、提高免疫力等多種功效，適用人群廣泛。
[0003] 利用蟲草培養(yǎng)基生產(chǎn)蟲草替代品，例如人工生產(chǎn)出的替代品蟲草菌絲體其成分和 藥效也與天然蟲草相似，蟲草菌絲體中含有多種活性成分，如蟲草多糖、膽留醇、真菌甾醇、 麥角留醇、腺嘌呤核苷、腺嘌呤、尿嘧啶、蛋白質(zhì)、多種氨基酸、硬脂酸、軟脂酸、D-甘露醇、維 生素、有機酸和微量元素，既可有效保護蟲草這一珍貴資源，又不受氣候、地理環(huán)境和蟲草 寄生條件嚴格的限制，適合于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。
[0004] 然而，現(xiàn)階段研宄較多的蛹蟲草的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，所培養(yǎng)出的終產(chǎn)物是蛹 蟲草子實體，且配方比較復(fù)雜，制備繁瑣，且其培養(yǎng)蟲草子實體的周期長，成本高，無法滿足 人們的需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基。
[0006] 本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基的制備方法。
[0007] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0008] -種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，由蔗糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、 硫酸鎂和水組成，其中，各組分的配比為：蔗糖15-30g/L，蠶蛹提取液5-30(蠶蛹提取液對 應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨5-30g/L，磷酸二氫鉀I. 2-1. 5g/L，磷酸二氫鈉0. 8-1. 2g/ L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0009] 優(yōu)選的，上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基，各組分的配比為：蔗糖20g/L，蠶蛹提取液20 (蠶 蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨10g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/L，磷酸二氫鈉 lg/L， 硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0010] 優(yōu)選的，上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基，各組分的配比為：蔗糖20g/L，蠶蛹提取液10 (蠶 蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨20g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/L，磷酸二氫鈉 lg/L， 硫酸鎂lg/L。
[0011] 優(yōu)選的，上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基，所述蠶蛹提取液是由下述方法制備得到的：在蠶 蛹粉中加入水中，所述蠶蛹粉與水的重量體積比按g/L計為5-50 :1，文火（慢火，一般為 150-170°C)煮8-60min，冷卻、沉淀后用紗布（8-16層）過濾，取濾液即得蠶蛹提取液。
[0012] 優(yōu)選的，上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基，所述蠶蛹提取液的制備方法中文火（慢火）煮 30min，紗布為16層紗布。
[0013] 優(yōu)選的，上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基，所述蠶蛹粉是繅絲后的蠶蛹干燥粉碎后獲得的。
[0014] 上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基的制備方法，具體制備步驟如下：
[0015] (1)按組方量取蔗糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、硫酸鎂和水 為原料；
[0016] (2)將蔗糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉和硫酸鎂加入蠶蛹提取液中攪拌溶 解，再加入水，即得。
[0017] 優(yōu)選的，上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基的制備方法，所述步驟（2)所得培養(yǎng)基于121°C， I. IMpa 滅菌 20_30min，冷卻。
[0018] 本發(fā)明的有益效果是：
[0019] 上述蛹蟲草液體培養(yǎng)基，通過同時添加特定用量的蠶蛹提取液和蛋白胨，并與其 他組分協(xié)同作用，所培養(yǎng)的終產(chǎn)物蛹蟲草菌絲體的產(chǎn)量顯著升高，該液體培養(yǎng)基成分簡單， 將繅絲后的蠶蛹廢物再利用，變廢為寶，大大節(jié)省資源、降低了成本，容易獲得和推廣，其制 備方法簡單，使用方便，適合規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)的需要。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進一步的說明。
[0021] 實施例1培養(yǎng)基的配制
[0022] I、制備香蛹提取液（香蛹粉和水的比例為5_50g/L):
[0023] (1)將繅絲后的干蠶蛹加入粉碎機中粉碎，獲取蠶蛹粉；
[0024] (2)按比例稱取蠶蛹粉5-50g，加水至1000ml，文火煮30min，冷卻、沉淀后用16層 紗布過濾，將濾液倒入容器內(nèi)，補水至1000ml，攪勻，分裝100mL每瓶備用。
[0025] 按照以上方法制備3種蠶蛹提取液，其對應(yīng)蠶蛹粉的比例分別為10g/L、20g/L、 30g/L〇
[0026] II培養(yǎng)基的配制：
[0027] 液體培養(yǎng)基中含有蔗糖15_30g/L，磷酸二氫鉀1.2-1.5g/L;磷酸二氫鈉 0. 8-1. 2g/L，硫酸鎂lg/L，蠶蛹提取液0-50 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L ;蛋白胨 0-50g/L〇
[0028] 按表1中比例稱取以上各成分，加入到蠶蛹提取液中或水中獲得所需培養(yǎng)基，具 體獲得以下五種培養(yǎng)基各3瓶，每瓶100mL。滅菌，將配置好的液體培養(yǎng)基121 °C、I. IMpa滅 菌20min，冷卻后備用。
[0029] 表1各種培養(yǎng)基成分表
[0030]
[0031] 實施例2菌絲體培養(yǎng)
[0032] 在超凈臺中接種蟲草菌體（菌種為Cordyceps militaris (L) Link)，液體菌種， 密度控制在3-5個菌球/mL，按體積比1:100接種，在溫度22°C條件下避光靜置培養(yǎng)24h， 22°C、170rpm繼續(xù)避光培養(yǎng)72h。每種培養(yǎng)基做三個重復(fù)。
[0033] 實施例3菌絲體稱重
[0034] 收集菌液，8000r/min離心10min，除去上清液，將沉淀（菌絲體）60°C烘干至恒重， 冷卻稱重，各種培養(yǎng)基獲得菌絲體重量如表2。
[0035] 表2各培養(yǎng)基菌絲體產(chǎn)量（單位g)
[0036]
[0037] 由表2可知，當培養(yǎng)基中同時添加蛋白胨和蠶蛹提取物時，在相同的培養(yǎng)條件下 菌絲體的產(chǎn)量顯著高于單獨添加蛋白胨或蠶蛹提取物的培養(yǎng)基。其中③號培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌 絲體重量與①、②、④培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲體重量相比P值小于〇. 01，差異極其顯著。⑤號培 養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲體重量與①、②、④培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲體重量相比P值均小于〇. 05,差異顯 著。
[0038] 實施例4
[0039] -種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，按照實施例1的方法配制，其各組分含量如下：蔗糖20g/ L，蠶蛹提取液20 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨10g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/ L，磷酸二氫鈉 lg/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0040] 實施例5
[0041] 一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，按照實施例1的方法配制，其各組分含量如下：蔗糖20g/ L，蠶蛹提取液10 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨20g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/ L，磷酸二氫鈉 lg/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0042] 實施例6
[0043] 一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，按照實施例1的方法配制，其各組分含量如下：蔗糖25g/ L，蠶蛹提取液20 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨20g/L，磷酸二氫鉀I. 2g/ L，磷酸二氫鈉 I. 2g/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0044] 實施例7
[0045] 一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，按照實施例1的方法配制，其各組分含量如下：蔗糖30g/ L，蠶蛹提取液5 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨5g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/L， 磷酸二氫鈉 I. 2g/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0046] 實施例8
[0047] 一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，按照實施例1的方法配制，其各組分含量如下：蔗糖15g/ L，蠶蛹提取液30 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨30g/L，磷酸二氫鉀I. 2g/ L，磷酸二氫鈉0. 8g/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0048] 實施例9
[0049] 一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，按照實施例1的方法配制，其各組分含量如下：蔗糖25g/ L，蠶蛹提取液20 (蠶蛹提取液對應(yīng)的蠶蛹粉的重量）g/L，蛋白胨10g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/ L，磷酸二氫鈉 lg/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。
[0050] 上述參照實施例對該一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基及其制備方法進行的詳細描述，是說 明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個實施例，因此在不脫離本發(fā)明總 體構(gòu)思下的變化和修改，應(yīng)屬本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基，其特征在于：由蔗糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷 酸二氫鈉、硫酸鎂和水組成，其中，各組分的配比為：蔗糖15-30g/L，蠶蛹提取液5-30g/L， 蛋白胨5-30g/L，磷酸二氫鉀I. 2-1. 5g/L，磷酸二氫鈉0. 8-1. 2g/L，硫酸鎂lg/L，其余為水。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基，其特征在于：各組分的配比為：蔗糖 20g/L，蠶蛹提取液20g/L，蛋白胨10g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/L，磷酸二氫鈉lg/L，硫酸鎂Ig/ L，其余為水。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基，其特征在于：各組分的配比為：蔗糖 20g/L，蠶蛹提取液10g/L，蛋白胨20g/L，磷酸二氫鉀I. 5g/L，磷酸二氫鈉lg/L，硫酸鎂Ig/ L04. 根據(jù)權(quán)利要求1-3之一所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基，其特征在于：所述蠶蛹提取液是 由下述方法制備得到的：在蠶蛹粉中加入水中，所述蠶蛹粉與水的重量體積比按g/L計為 5-50 :1，文火煮8-60min，冷卻、沉淀后用紗布過濾，取濾液即得蠶蛹提取液。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基，其特征在于：所述蠶蛹提取液的制備方 法中文火煮30min，紗布為16層紗布。6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基，其特征在于：所述蠶蛹粉是繅絲后的蠶 蛹干燥粉碎后獲得的。7. 權(quán)利要求1-3之一所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：具體制備步 驟如下： (1) 按組方量取蔗糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、硫酸鎂和水為原 料； (2) 將蔗糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉和硫酸鎂加入蠶蛹提取液中攪拌溶解，再 加入水，即得。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的蛹蟲草液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述步驟（2) 所得培養(yǎng)基于121°C，I.IMpa滅菌20-30min，冷卻。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種蛹蟲草液體培養(yǎng)基及其制備方法，所述液體培養(yǎng)基由蔗糖、蠶蛹提取液、蛋白胨、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、硫酸鎂和水組成，其中，各組分的配比為：蔗糖15-30g/L，蠶蛹提取液5-30g/L，蛋白胨5-30g/L，磷酸二氫鉀1.2-1.5g/L，磷酸二氫鈉0.8-1.2g/L，硫酸鎂1g/L，其余為水，通過混合方式制備而得；所述液體培養(yǎng)基成分簡單，容易實現(xiàn)，使其終產(chǎn)物蛹蟲草菌絲體的產(chǎn)量顯著升高。
【IPC分類】C12R1/645, C12N1/14
【公開號】CN104928190
【申請?zhí)枴緾N201510315005
【發(fā)明人】張耀洲, 蓋其靜, 李洪杰
【申請人】天津耀宇生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年6月11日