乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法
【專利摘要】一種乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法，是以丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫為原料，采用乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備得到納米脂質(zhì)體。本發(fā)明制備的脂質(zhì)體平均粒徑為58.6±3.4nm，分布系數(shù)為0.381±0.053，包封率達(dá)到了59.2%±4.7%，它具有緩釋性，24h后有76.6%的丁香酚釋放出來。
【專利說明】乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及涉及水溶性藥物納米脂質(zhì)體的制備方法，具體涉及一種乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]丁香酚具有消炎、止痛、抗氧化、抑菌等功能，是保健食品、藥品等的潛在使用對(duì)象，但它較差的水溶性限制了其在食品中的應(yīng)用。脂質(zhì)體(liposome)是由磷脂雙分子層形成的內(nèi)部包含水相的封閉囊泡。研究表明，脂質(zhì)體具有緩釋性、細(xì)胞親和性、組織相容性和靶向性等優(yōu)點(diǎn)，已成功應(yīng)用于生物醫(yī)藥、化工農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。脂質(zhì)體用于包裹營(yíng)養(yǎng)素、酶、食品添加劑、食品抗菌劑等食品運(yùn)載體系顯示出誘人前景。利用脂質(zhì)體技術(shù)將丁香酚包封起來，可以克服丁香酚上述缺點(diǎn)。乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備的脂質(zhì)體可以克服粗脂質(zhì)體粒徑大，不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，同時(shí)乙醇注入法突破了薄膜法洗膜難和小批量生產(chǎn)的障礙。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是為優(yōu)化丁香酚脂質(zhì)體的制備工藝，提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，評(píng)價(jià)丁香酚脂質(zhì)體的抗菌活性、儲(chǔ)藏穩(wěn)定性等，為丁香酚脂質(zhì)體的開發(fā)提供一種乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法。
[0004]本發(fā)明所述方法包括:
(O 丁香酚納米脂質(zhì)體的組分丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80、pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液與無(wú)水乙醇的質(zhì)量體積比為:在IOOmL pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液中:丁香酚0.38-1.16g、卵磷脂2.32-6.99g、膽固醇0.35-1.04g、吐溫-80 0.52-1.55g、無(wú)水乙醇 25-35mL ；
(2)按上述重量百分比分別稱取丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40-50°C條件下，溶于無(wú)水乙醇；
(3)將步驟(2)中所得溶液緩慢注入到pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液中，在攪拌的條件下將形成乳液；
(4)將步驟(3)中所得乳液移入圓底瓶，置于真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在50°C水浴條件下除去乙醇，用磷酸鹽緩沖溶液定溶，得到丁香酚粗脂質(zhì)體；
(5)用動(dòng)態(tài)高壓微射流處理步驟(4)得到的粗脂質(zhì)體，壓力為120MPa，處理I次，即得丁香酚納米脂質(zhì)體。
[0005]本發(fā)明的有益效果是:
(I)包封率:乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體的具有比較高的包封率，包封率達(dá)到59.2%±4.7。
[0006](2)粒徑:乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體的平均粒徑為58.6±3.4nm，分布系數(shù)為 0.381 ±0.053。
[0007](3)微觀形貌圖:乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體，其透射電鏡圖如圖2所示，脂質(zhì)體成球形，大小及分布都比較均勻。
[0008](4)乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體具有緩釋性，24h后有76.6%的丁香酚釋放出來，其釋放曲線如圖3所示。
[0009](5)儲(chǔ)藏穩(wěn)定性:分別將制備好的丁香酚納米脂質(zhì)體與丁香酚微乳(將丁香酚和吐溫-80溶于PBS溶液中，持續(xù)攪拌)置于4°C和室溫環(huán)境中，每隔一周測(cè)其粒徑分布及包封率。如圖4所示，丁香酚微乳有明顯的油狀沉淀，而丁香酚納米脂質(zhì)體則較為穩(wěn)定。而圖5所展示的平均粒徑及包封率變化也證明丁香酚納米脂質(zhì)體在儲(chǔ)藏期間較為穩(wěn)定。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0010]圖1為乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流法制備丁香酚納米脂質(zhì)體的工藝路線圖；
圖2為丁香酚納米脂質(zhì)體透射電鏡圖；
圖3為丁香酚納米脂質(zhì)體及丁香酚微乳的體外釋放曲線；
圖4為丁香酚納米脂質(zhì)體及丁香酚微乳在4°C及室溫環(huán)境中穩(wěn)定性觀察圖；
圖5為丁香酚納米脂質(zhì)體及丁香酚微乳在4°C及室溫環(huán)境中粒徑及包封率隨時(shí)間的變化。
【具體實(shí)施方式】
[0011]實(shí)施例1
稱取48.5g卵磷脂、6.6g膽固醇、12.2g吐溫-80和8.2g 丁香酚，完全溶解于0.32L無(wú)水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到I L pH7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩沖溶液中，形成乳液，然后將其轉(zhuǎn)移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉(zhuǎn)除去無(wú)水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質(zhì)體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質(zhì)體。將粗脂質(zhì)體加入到動(dòng)態(tài)高壓微射流(DHPM)中，于120MPa條件下微流化處理I次，即制備得到丁香酚納米脂質(zhì)體。制得的納米脂質(zhì)體為較透明乳白色溶液。制得的丁香酚納米脂質(zhì)體的包封率為60.1%，平均粒徑為60.4nm，分布系數(shù)為0..332，在體外釋放試驗(yàn)中，經(jīng)24h釋放后有78%的丁香酚釋放出來。
[0012]實(shí)施例2
稱取47.9g卵磷脂、6.1g膽固醇、12.2g吐溫-80和8.0g 丁香酚，完全溶解于0.28L無(wú)水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到IL pH 7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩沖溶液中，形成乳液，然后將其轉(zhuǎn)移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉(zhuǎn)除去無(wú)水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質(zhì)體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質(zhì)體。將粗脂質(zhì)體加入到動(dòng)態(tài)高壓微射流(DHPM)中，于120MPa條件下微流化處理I次，即制備得到丁香酚納米脂質(zhì)體。制得的納米脂質(zhì)體為較透明乳白色溶液。制得的丁香酚納米脂質(zhì)體的包封率為58.6%，平均粒徑為58.4nm，分布系數(shù)為0..312，在體外釋放試驗(yàn)中，經(jīng)24h釋放后有77.1%的丁香酚釋放出來。
[0013]實(shí)施例3
稱取42.5g卵磷脂、5.7g膽固醇、10.5g吐溫-80和7.1g 丁香酚，完全溶解于0.31L無(wú)水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到IL pH 7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩沖溶液中，形成乳液，然后將其轉(zhuǎn)移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉(zhuǎn)除去無(wú)水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質(zhì)體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質(zhì)體。將粗脂質(zhì)體加入到動(dòng)態(tài)高壓微射流(DHPM)中，于120MPa條件下微流化處理I次，即制備得到丁香酚納米脂質(zhì)體。制得的納米脂質(zhì)體為較透明乳白色溶液。制得的丁香酚納米脂質(zhì)體的包封率為58.9%，平均粒徑為60.1nm，分布系數(shù)為0..331，在體外釋放試驗(yàn)中，經(jīng)24h釋放后有73.2%的丁香酚釋放出來。
[0014]實(shí)施例4
稱取55.8g卵磷脂、7.4g膽固醇、13.8g吐溫-80和9.3g 丁香酚，完全溶解于0.31L無(wú)水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到IL pH 7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩沖溶液中，形成乳液，然后將其轉(zhuǎn)移到到圓底瓶中，在50°C水浴條件下真空旋轉(zhuǎn)除去無(wú)水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質(zhì)體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質(zhì)體。將粗脂質(zhì)體加入到動(dòng)態(tài)高壓微射流(DHPM)中，于120MPa條件下微流化處理I次，即制備得到丁香酚納米脂質(zhì)體。制得的納米脂質(zhì)體為較透明乳白色溶液。制得的丁香酚納米脂質(zhì)體的包封率為61.2%，平均粒徑為58.3nm，分布系數(shù)為0..323，在體外釋放試驗(yàn)中，經(jīng)24h釋放后有75.6%的丁香酚釋放出來。
【權(quán)利要求】
1.一種乙醇注入-動(dòng)態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法，其特征是: (O 丁香酚納米脂質(zhì)體的組分丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80、pH=7.4濃度為.0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液與無(wú)水乙醇的質(zhì)量體積比為:在IOOmL pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液中:丁香酚0.38-1.16g、卵磷脂2.32-6.99g、膽固醇0.35-1.04g、吐溫-80 0.52-1.55g、無(wú)水乙醇 25-35mL ； (2)按上述重量百分比分別稱取丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40-50°C條件下，溶于無(wú)水乙醇； (3)將步驟(2)中所得溶液緩慢注入到pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液中，在攪拌的條件下將形成乳液； (4)將步驟(3)中所得乳液移入圓底瓶，置于真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在50°C水浴條件下除去乙醇，用磷酸鹽緩沖溶液定溶，得到丁香酚粗脂質(zhì)體； (5)用動(dòng)態(tài)高壓微射流處理步驟(4)得到的粗脂質(zhì)體，壓力為120MPa，處理I次，即得丁香酚納米脂質(zhì)體。
【文檔編號(hào)】A23P1/04GK104012991SQ201410219656
【公開日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2014年5月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月23日
【發(fā)明者】劉偉, 彭盛峰, 鄒立強(qiáng), 劉成梅 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)