一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法，屬于農(nóng)業(yè)繁殖方法領(lǐng)域。該方法包括木薯組培苗繼代培養(yǎng)和木薯試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)，木薯組培苗繼代培養(yǎng)是將無(wú)菌木薯組培苗分切成單芽莖段，轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基A中進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，木薯試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)是將增殖繼代培養(yǎng)后的木薯組培苗單芽莖段，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27±1℃，光照強(qiáng)度為500～1000lx，光照時(shí)間為12h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為45～60d，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基B為MS+0.01～0.02mg/LNAA+60～80g/L蔗糖+1.5～2.0g/L活性炭的半固體培養(yǎng)基，pH值為5.8。本發(fā)明解決了誘導(dǎo)木薯試管薯的效率不高，試管薯誘導(dǎo)時(shí)間亦較長(zhǎng)等問(wèn)題，以便提高木薯試管薯誘導(dǎo)效率，為木薯科研提高技術(shù)服務(wù)。
【專利說(shuō)明】一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)繁殖方法領(lǐng)域，具體為木薯的繁殖方法領(lǐng)域，尤其涉及一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法。

【背景技術(shù)】
[0002]木薯(Manihot esculenta Crantz)又名樹(shù)薯，樹(shù)番薯，木番薯，是大戟科(Euphorbiaceae)木薯屬(Manihot)植物,是三大薯類(lèi)作物之一,全球第六大糧食作物,熱區(qū)第三大糧食作物，可食用、飼用和工業(yè)用，在我國(guó)具有巨大的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)空間。
[0003]木薯是收獲地下塊根為主，木薯塊根發(fā)生發(fā)育及淀粉積累規(guī)律研究具有重要意義，在組培條件下誘導(dǎo)試管薯有助于探索木薯塊根發(fā)生發(fā)育及淀粉積累規(guī)律。國(guó)內(nèi)外雖然也有對(duì)木薯試管薯誘導(dǎo)進(jìn)行探索的，如，Medina等(2007)研究結(jié)果表明，MS基本培養(yǎng)基添加0.lmg/L NAA,0.lmg/L BA及50g/L蔗糖的半固體培養(yǎng)基(pH = 5.8)可有效誘導(dǎo)木薯試管薯；Fan等(2011)研究結(jié)果表明，MS基本培養(yǎng)基添加0.5mg/L NAA,0.5mg/L BA及60g/L蔗糖的半固體培養(yǎng)基(PH= 5.8)可有效誘導(dǎo)木薯試管薯。但是本課題組通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)證明，上述配方誘導(dǎo)木薯試管薯的效率不高，試管薯誘導(dǎo)時(shí)間亦較長(zhǎng)。因此，完全有必要對(duì)木薯試管薯高效誘導(dǎo)技術(shù)方法進(jìn)行深入研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于:針對(duì)上述存在的問(wèn)題，提供一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法，解決誘導(dǎo)木薯試管薯誘導(dǎo)效率低，誘導(dǎo)周期長(zhǎng)等問(wèn)題，以便提高木薯試管薯誘導(dǎo)效率。
[0005]本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
[0006]一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法，其步驟包括木薯組培苗繼代培養(yǎng)和木薯試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述木薯組培苗增殖繼代培養(yǎng)是將無(wú)菌木薯組培苗分切成單芽莖段，轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基A中進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，所述木薯試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)是將增殖繼代培養(yǎng)后的木薯組培苗單芽莖段，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27±1°C，光照強(qiáng)度為500?1000 lx，光照時(shí)間為12h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為45?60d，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基B為MS+0.01?0.02mg/L NAA+60?80g/L蔗糖+1.5?2.0g/L活性炭的半固體培養(yǎng)基，pH值為5.8。
[0007]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述培養(yǎng)基A為MS+0.01?0.02mg/L ΒΑ+0.01?0.02mg/L NAA+30g/L蔗糖的半固體培養(yǎng)基，pH值為5.8。
[0008]進(jìn)一步地，所述增殖繼代培養(yǎng)是在培養(yǎng)溫度為27± 1°C，光照強(qiáng)度為1500?2000lx，光照時(shí)間為12h/d的條件下培養(yǎng)，其培養(yǎng)周期為40d。
[0009]綜上所述，本發(fā)明的有益效果是:與現(xiàn)有技術(shù)對(duì)比，采用本發(fā)明的木薯試管薯高效誘導(dǎo)技術(shù)方法，可明顯提高試管薯誘導(dǎo)率，縮短試管薯誘導(dǎo)，在45d的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，試管薯誘導(dǎo)效率可高達(dá)95%以上。另外，本方案是在組培條件下進(jìn)行，不受季節(jié)限制，可實(shí)現(xiàn)周年結(jié)薯，可為木薯科研提高技術(shù)服務(wù)。

【具體實(shí)施方式】
[0010]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的上述
【發(fā)明內(nèi)容】
作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于下述實(shí)施例。
[0011]實(shí)施例1
[0012]將無(wú)菌木薯組培苗分切成單芽莖段，轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基A中進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為27土1°C，光照強(qiáng)度為1500 lx，光照時(shí)間為12h/d的條件下培養(yǎng)，其培養(yǎng)周期為40d，其中培養(yǎng)基A為MS+0.0 lmg/L ΒΑ+0.0 lmg/L NAA+30g/L蔗糖的半固體培養(yǎng)基，pH值為
5.8 ;再將增殖繼代培養(yǎng)后的木薯組培苗的單芽莖段，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27± 1°C，光照強(qiáng)度為5001x，光照時(shí)間為12h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為45d，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基B為MS+0.0 lmg/L NAA+60g/L蔗糖+1.5g/L活性炭的半固體培養(yǎng)基，pH = 5.8。
[0013]實(shí)施例2
[0014]將無(wú)菌木薯組培苗分切成單芽莖段，轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基A中進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為27土1°C，光照強(qiáng)度為1500 lx，光照時(shí)間為12h/d的條件下培養(yǎng)，其培養(yǎng)周期為40d，其中培養(yǎng)基A為MS+0.0 lmg/L ΒΑ+0.0 lmg/L NAA+30g/L蔗糖的半固體培養(yǎng)基，pH值為
5.8 ;再將增殖繼代培養(yǎng)后的木薯組培苗單芽莖段，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27±1°C，光照強(qiáng)度為500 lx，光照時(shí)間為12h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為45d，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基B為MS+0.0 lmg/L NAA+70g/L蔗糖+1.5g/L活性炭的半固體培養(yǎng)基，pH = 5.8。
[0015]實(shí)施例3
[0016]將菌木薯組培苗分切成單芽莖段，轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基A中進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，在培養(yǎng)溫度為27± 1°C，光照強(qiáng)度為1500 Ix,光照時(shí)間為12h/d的條件下培養(yǎng)，其培養(yǎng)周期為40d，其中培養(yǎng)基A為MS+0.0 lmg/L ΒΑ+0.0 lmg/L NAA+30g/L蔗糖的半固體培養(yǎng)基，pH值為5.8 ;再將增殖繼代培養(yǎng)后的木薯組培苗單芽莖段，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27± I°C，光照強(qiáng)度為500?1000 lx，光照時(shí)間為12h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為45d，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基B為MS+0.0 lmg/L NAA+80g/L蔗糖+1.5g/L活性炭的半固體培養(yǎng)基，pH = 5.8。
[0017]實(shí)施例4
[0018]與實(shí)施例1?3不同之處:誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中生長(zhǎng)素NAA的濃度為0.02mg/L。
[0019]實(shí)施例5
[0020]與實(shí)施例1?4不同之處在于:誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中活性炭為2.0g/L，其他條件不變。其他實(shí)施例中活性炭還可以選擇1.6g/L或1.8g/L等數(shù)值。
[0021]實(shí)施例6
[0022]與實(shí)施例1?5不同之處在于:誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為60d，其他條件不變。其他實(shí)施例中誘導(dǎo)培養(yǎng)周期還可以為50d。
[0023]實(shí)施例7
[0024]與實(shí)施例1?6不同之處:培養(yǎng)基A中細(xì)胞分裂素BA的濃度為0.02mg/L。
[0025]實(shí)施例8
[0026]與實(shí)施例1?7不同之處:培養(yǎng)基A中生長(zhǎng)素NAA的濃度為0.02mg/L。
[0027]實(shí)施例9
[0028]與實(shí)施例1?8不同之處在于:誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)的光照強(qiáng)度為1000 Ix,其他條件不變。其他實(shí)施例還可以選擇800 Ix等數(shù)值。
[0029]實(shí)施例10
[0030]與實(shí)施例1?9不同之處在于:增值繼代培養(yǎng)中光照強(qiáng)度為2000 lx，其他條件不變。其他實(shí)施例還可以選擇1800 Ix等數(shù)值。
[0031]為了更好的說(shuō)明本發(fā)明木薯試管薯誘導(dǎo)方法的效果，作以下試驗(yàn):
[0032]一、不同蔗糖濃度對(duì)木薯試管薯的誘導(dǎo)影響
[0033]1、實(shí)驗(yàn)組處理:取270個(gè)處理好的無(wú)菌木薯組培苗的單芽莖段，隨機(jī)分成3組，以實(shí)施例1?3的方法分別誘導(dǎo)隨機(jī)分成的3組，依次為實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)3個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)重復(fù)設(shè)有30個(gè)單芽莖段。
[0034]2、對(duì)照組:每一對(duì)照組設(shè)3個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)重復(fù)設(shè)有30個(gè)單芽莖段。
[0035]對(duì)照組1:與實(shí)施例1不同之處在于，誘導(dǎo)培養(yǎng)基B的蔗糖濃度為50g/L。
[0036]對(duì)照組2:與實(shí)施例1不同之處在于，誘導(dǎo)培養(yǎng)基B的蔗糖濃度為90g/L。
[0037]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表1:
[0038]表I不同蔗糖濃度對(duì)木薯試管薯誘導(dǎo)效率的影響
[0039]

【權(quán)利要求】
1.一種木薯試管薯的誘導(dǎo)方法，其步驟包括木薯組培苗增殖繼代培養(yǎng)和木薯試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)，所述木薯組培苗增殖繼代培養(yǎng)是將無(wú)菌木薯組培苗分切成單芽莖段，轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基A中進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)，其特征在于: 所述木薯試管薯誘導(dǎo)培養(yǎng)是將增殖繼代培養(yǎng)后的木薯組培苗單芽莖段，轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)培養(yǎng)基B中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為27± 1°C，光照強(qiáng)度為500?1000 Ix,光照時(shí)間為12h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)周期為45?60d，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基B為MS+0.01?0.02mg/L NAA+60?80g/L蔗糖+1.5?2.0g/L活性炭的半固體培養(yǎng)基，pH值為5.8。
2.如權(quán)利要求1所述的一種木薯試管薯高效誘導(dǎo)方法，其特征在于:所述培養(yǎng)基A為MS+0.01 ?0.02mg/L ΒΑ+0.01 ?0.02mg/L NAA+30g/L 蔗糖的半固體培養(yǎng)基，pH 值為 5.8。
3.如權(quán)利要求1所述的一種木薯試管薯高效誘導(dǎo)方法，其特征在于:所述增殖繼代培養(yǎng)是在培養(yǎng)溫度為27± 1°C，光照強(qiáng)度為1500?2000 Ix,光照時(shí)間為12h/d的條件下培養(yǎng)，其培養(yǎng)周期為40d。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104160958SQ201410355367
【公開(kāi)日】2014年11月26日 申請(qǐng)日期:2014年7月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月24日
【發(fā)明者】嚴(yán)華兵, 曾文丹, 周慧文, 謝向譽(yù), 陸柳英, 張雅媛, 賴大欣 申請(qǐng)人:廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所