一種改進(jìn)的白僵蠶高效培養(yǎng)方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種改進(jìn)的僵蠶高效培養(yǎng)方法，該方法包括以下步驟：飼養(yǎng)家蠶，在四齡眠蠶蛻皮后的0-2h內(nèi)，往家蠶體表噴灑白僵菌孢子懸液，5-6天后家蠶發(fā)病死亡，揀出死蠶進(jìn)一步僵化，最后曬干或烘干后獲得僵蠶；所述的家蠶品種是皓月、泰圓、航7。本發(fā)明篩選出對(duì)白僵菌耐受性較差的家蠶品種作為僵蠶生產(chǎn)專(zhuān)用品種，從而提高了家蠶的感染率；選擇5齡起蠶的極早期作為體表接種白僵菌的最佳時(shí)期，提高了家蠶感染率和白僵蠶收率。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種改進(jìn)的白僵奮局效培養(yǎng)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥生產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種改進(jìn)的白僵蠶高效培養(yǎng)方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 白僵蠶（Bombyx Batryticatus)為傳統(tǒng)中藥，《中國(guó)藥典》記載僵蠶具有息風(fēng)止痙、 祛風(fēng)止痛、化痰散結(jié)的功效，主治肝風(fēng)夾痰，驚癇抽搐，小兒急驚，破傷風(fēng)，中風(fēng)口剔，風(fēng)熱頭 痛，目赤咽痛，風(fēng)疹瘙癢，發(fā)頤痄腮?，F(xiàn)代藥理試驗(yàn)也證實(shí)僵蠶水提物或醇提物在抗驚厥、抗 凝、抑菌、抗癌、降糖降脂等方面有顯著的效果。隨著僵蠶藥理成分和功能研究的深入以及 相關(guān)新產(chǎn)品的不斷研發(fā)，僵蠶在藥食用領(lǐng)域的應(yīng)用將越來(lái)越廣泛，僵蠶的生產(chǎn)和加工具有 廣闊的市場(chǎng)前景。
[0003] 當(dāng)前，僵蠶的生產(chǎn)步驟是：家蠶飼養(yǎng)至5齡起蠶（即第四次蛻皮之后至五齡蠶食桑 之前），體表噴灑白僵菌孢子懸液，5-6天后家蠶發(fā)病死亡，然后揀出死蠶進(jìn)一步僵化，最后 曬干或烘干后獲得僵蠶。該方法中，所用到的家蠶品種都是絲繭生產(chǎn)上的實(shí)用品種，但不一 定是僵蠶生產(chǎn)的適宜品種。 申請(qǐng)人:在之前的研究中，也試圖發(fā)現(xiàn)一些適于僵蠶生產(chǎn)的專(zhuān)用 品種，不過(guò)更多的是從僵蠶產(chǎn)量來(lái)考慮（未從感染率考慮），篩選到幾個(gè)僵蠶產(chǎn)量較高的品 種；此外，由于缺乏細(xì)致研究，人們通常從蠶的發(fā)育整齊度考慮，選擇在起蠶12_24h接種。 然而，這可能錯(cuò)過(guò)僵蠶生產(chǎn)最佳的接種時(shí)期，造成家蠶感染率低、僵蠶收率低。
[0004] 而且，由于白僵菌孢子粉保存方法的制約，隨著時(shí)間的增加，活孢子數(shù)及孢子活力 都會(huì)顯著降低，因此，在實(shí)際生產(chǎn)中往往存在接種后家蠶發(fā)病率低、發(fā)病時(shí)期長(zhǎng)等情況，造 成家蠶在熟蠶上蔟前仍不能如期發(fā)病死亡，給僵蠶生產(chǎn)造成極大經(jīng)濟(jì)損失。因此，我們意識(shí) 至IJ，如何確保絕大多數(shù)家蠶發(fā)病和集中僵化死亡，是僵蠶生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有的僵蠶生產(chǎn)方法存在感染率低的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種改進(jìn) 的僵蠶高效培養(yǎng)方法，該方法優(yōu)選得到了若干種以前未知的易感染白僵病的蠶種，此外也 對(duì)現(xiàn)有的接種時(shí)期進(jìn)行了更細(xì)致的研究，摸索到了感染率較高的接種時(shí)期；本發(fā)明的方法 可操作性強(qiáng)，家蠶僵化率高，獲得的僵蠶品質(zhì)優(yōu)良。
[0006] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0007] -種改進(jìn)的僵蠶高效培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
[0008] 飼養(yǎng)家蠶，在四齡眠蠶蛻皮后的0_2h內(nèi)，往家蠶體表噴灑白僵菌孢子懸液，5-6天 后家蠶發(fā)病死亡，揀出死蠶進(jìn)一步僵化，最后曬干或烘干后獲得僵蠶；
[0009] 所述的家蠶品種是皓月、泰圓、航7 ;
[0010] 所述白僵菌孢子懸液的濃度是（1 X 102)-(1 X 106)個(gè)/mL。
[0011] 本發(fā)明提供的白僵蠶高效人工生產(chǎn)方法，與傳統(tǒng)方法相比，主要在兩方面進(jìn)行了 改進(jìn)：
[0012] 1、篩選出對(duì)白僵菌耐受性較差的家蠶品種作為僵蠶生產(chǎn)專(zhuān)用品種，從而提高了家 蠶的感染率；
[0013] 2、選擇5齡起蠶的極早期作為體表接種白僵菌的最佳時(shí)期，提高了家蠶感染率和 白僵蠶收率。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0014] 圖1是18個(gè)品種家蠶的LD5(I及在第7天時(shí)的死亡率圖。
[0015] 圖2是起蠶不同時(shí)期接種白僵菌后的死亡率圖。

【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限 于此。
[0017] 本發(fā)明中所用的家蠶品種都由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所廣東 省蠶桑種質(zhì)資源庫(kù)收集、保藏和提供。
[0018] 實(shí)施例1
[0019] 一種僵蠶培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
[0020] (1)用含0· 2%吐溫-80的無(wú)菌水配制濃度分別為1X106、1X105、1X104、1X10 3、 1 X 102個(gè)/mL的白僵菌孢子懸浮液；
[0021] (2)飼養(yǎng)18個(gè)品種的家蠶，在四齡眠蠶蛻皮后的兩小時(shí)，將家蠶在白僵菌孢子懸 浮液中浸泡10S后撈出，放入昆蟲(chóng)飼養(yǎng)盒飼養(yǎng)，每個(gè)處理組30頭蠶，設(shè)3個(gè)重復(fù)。每天調(diào)查 死亡情況，連續(xù)調(diào)查7天，計(jì)算LD 5(i。
[0022] 18個(gè)品種家蠶的LD5(I及在第7天時(shí)的死亡率見(jiàn)圖1。
[0023] 由圖1可以看出：不同品種對(duì)白僵菌耐受性存在較大差異?？?、限9對(duì)白僵菌抗 性最強(qiáng)，皓月、泰圓、航7等品種則較為敏感。在接種菌液濃度為1 X 103個(gè)/mL時(shí)，抗8死亡 率為35. 42±2. 33%，皓月則全部死亡，這兩個(gè)品種的半數(shù)致死濃度（LD5Q)也相差30多倍。 因此，皓月、泰圓、航7用于僵蠶生產(chǎn)較為合適。
[0024] 實(shí)施例2
[0025] 一種僵蠶培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
[0026] (1)用含0. 2%吐溫-80的無(wú)菌水配制濃度為1 X 103個(gè)/mL的白僵菌孢子懸浮液；
[0027] (2)飼養(yǎng)家蠶（皓月），分別在四齡眠蠶蛻皮后的2h、7h、12h，將家蠶在白僵菌孢子 懸浮液中浸泡l〇s后撈出，放入昆蟲(chóng)飼養(yǎng)盒飼養(yǎng)，每個(gè)處理組30頭蠶，設(shè)3個(gè)重復(fù)。每天調(diào) 查死亡情況，連續(xù)調(diào)查7天，計(jì)算LD 5(i。
[0028] 起蠶不同時(shí)期接種白僵菌后的死亡率比較見(jiàn)圖2。
[0029] 由圖2看出，起蠶2h接種白僵菌，接種后96h即可達(dá)到85%以上的僵化死亡率，發(fā) 病時(shí)間快，死亡時(shí)間極為整齊，有利于僵蠶的生產(chǎn)和收獲，能夠極大提高僵蠶生產(chǎn)的效率。 這是由于起蠶早期階段家蠶體壁較嫩薄，多褶皺，白僵菌容易粘附和穿透體壁，家蠶容易發(fā) 病。此后（2h后），家蠶表皮開(kāi)始著色與硬化，7h后轉(zhuǎn)為正常體色，12h體壁已完全硬化，由 圖2可以看出，7h和12h接種的，接種后96h死亡率僅為10 %左右，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于起蠶2h接種的 死亡率，也就是說(shuō)發(fā)病時(shí)間大大地延遲了，不利于僵蠶的高效生產(chǎn)。因此，選擇在起蠶〇-2h 內(nèi)接種白僵菌是合適的。
[0030] 本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的 任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的 置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1. 一種改進(jìn)的僵蠶高效培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟： 飼養(yǎng)家蠶，在四齡眠蠶蛻皮后的〇-2h內(nèi)，往家蠶體表噴灑白僵菌孢子懸液，5-6天后家 蠶發(fā)病死亡，揀出死蠶進(jìn)一步僵化，最后曬干或烘干后獲得僵蠶； 所述的家蠶品種是皓月、泰圓、航7。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的改進(jìn)的僵蠶高效培養(yǎng)方法，其特征在于：所述白僵菌孢子懸 液的濃度是（1Χ1〇2)-(1Χ1〇 6)個(gè)/mL。
【文檔編號(hào)】A01K67/04GK104145889SQ201410421851
【公開(kāi)日】2014年11月19日 申請(qǐng)日期:2014年8月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月25日
【發(fā)明者】邢東旭, 楊瓊, 廖森泰, 羅國(guó)慶, 肖陽(yáng), 李麗, 李慶榮, 葉明強(qiáng), 劉新濤 申請(qǐng)人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所