一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑、制備方法及應(yīng)用方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑、制備方法及應(yīng)用方法。目的是提供的青貯飼料具有提升青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的特點(diǎn)，提供的制備方法應(yīng)能直接應(yīng)用于筍殼青貯飼料的發(fā)酵。技術(shù)方案是：一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，液體狀乳酸菌劑為由干酪乳桿菌、植物乳桿菌及混合乳酸菌劑。一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：1)將干酪乳桿菌、植物乳桿菌及短乳桿菌的菌種分別進(jìn)行液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)；2)對(duì)擴(kuò)大培養(yǎng)得到的三種植物乳桿菌的菌懸液進(jìn)行混合獲得混合菌懸液，再通過(guò)沉降處理，即為液體狀的青貯筍殼混合乳酸菌劑；或者，繼續(xù)將青貯筍殼混合乳酸菌劑與凍干保護(hù)劑和麩皮混合并凍干處理，獲得固體粉末狀的青貯筍殼混合乳酸菌劑。
【專利說(shuō)明】一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑、制備方法及應(yīng)用方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及筍殼青貯飼料【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種直投式筍殼青貯飼料乳酸菌發(fā) 酵劑、制備方法及應(yīng)用方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 筍殼是竹筍加工后剩下的廢棄物，目前普遍采用的是地下深埋或就近廢棄在河 灘、溝邊的處理方式，這種處理不僅會(huì)造成環(huán)境污染，也是一種資源的浪費(fèi)。筍殼與鮮筍的 營(yíng)養(yǎng)成分基本相同，主要由纖維素、半纖維素、和木質(zhì)素組成，并富含19種微量元素和15 種游離氨基酸，還有一定數(shù)量蛋白質(zhì)、淀粉、蠟、脂肪、和果膠等。通過(guò)青貯（青綠飼料在封 閉狀態(tài)下發(fā)酵），利用微生物的發(fā)酵作用，調(diào)制出營(yíng)養(yǎng)豐富、消化率高的飼料，達(dá)到能長(zhǎng)期 貯存的一種簡(jiǎn)單可靠而經(jīng)濟(jì)的方法。經(jīng)青貯后的筍殼具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其中含粗蛋白 16. 2%，比稻草高出3倍，特別是粗纖維含量達(dá)到24%，而筍殼中的氨基酸含量比北方的常 用飼料要高出20%，是牛、羊、兔的理想飼料。
[0003] 青貯過(guò)程中，參與活動(dòng)和作用的微生物種類很多。理想的青貯應(yīng)是乳酸菌控制整 個(gè)發(fā)酵過(guò)程，乳酸菌生成為占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)的微生物。乳酸菌制劑的添加或直接接種乳酸菌可 以加快乳酸菌發(fā)酵進(jìn)程，改善青貯發(fā)酵品質(zhì)。如何快速的讓乳酸菌占有主導(dǎo)優(yōu)勢(shì)，如何有利 于乳酸菌盡快達(dá)到足夠的數(shù)量，加快乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)酸，是決定著青貯質(zhì)量的好壞的關(guān)鍵因 素。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，以用于提升青貯飼料發(fā)酵 品質(zhì)，生產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)豐富、口感較好、質(zhì)量穩(wěn)定的青貯飼料。
[0005] 本發(fā)明的另一目的是提供一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，該制備方法 應(yīng)能顯著縮短發(fā)酵時(shí)間、濃縮效果優(yōu)異以及在凍干時(shí)具有保護(hù)作用。
[0006] 本發(fā)明的第三個(gè)目的是采用人工接種乳酸菌的方法，將乳酸菌制劑采用直投式直 接應(yīng)用于筍殼青貯飼料的發(fā)酵。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0008] 一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，為液體狀乳酸菌劑，或固體粉末狀乳酸菌劑；其特 征在于：
[0009] 所述液體狀乳酸菌劑為由干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌分別通過(guò)擴(kuò)大培 養(yǎng)以及沉降濃縮處理后混合組成的混合乳酸菌劑；
[0010] 所述固體粉末狀乳酸菌劑包括液體狀乳酸菌劑、凍干保護(hù)劑以及麩皮；液體狀乳 酸菌劑、凍干保護(hù)劑以及麩皮的重量比例為100 : 16?24 : 80?150;
[0011] 所述干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌采用中國(guó)微生物菌種保藏管理委員 會(huì)普通微生物中心保藏菌種；其中干酪乳桿菌的名稱為L(zhǎng)actobacillus Casei，編號(hào)是 1. 0029 ;所述植物乳桿菌的名稱為L(zhǎng)actobacillus plantarum，編號(hào)是1. 0556 ;所述短乳桿 菌的名稱為 Lactobacillus brevis，編號(hào)是 1. 0558。
[0012] 所述的混合乳酸菌劑由干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌菌體數(shù)以1:1:1比 例混合而成。
[0013] 所述凍干保護(hù)劑中的組分及相互重量比例為：脫脂奶粉、麥芽糊精、山梨醇、海藻 糖=11 ?13 : 4 ?6 : 4 ?6 : 1〇〇
[0014] 所述的麩皮經(jīng)過(guò)研磨機(jī)粉碎，于115?121 °C高溫滅菌20?25min，用量為液體狀 乳酸菌劑重量的0. 8?1. 5倍。
[0015] -種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：
[0016] 1)將干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌的菌種分別接種在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行 液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)；
[0017] 2)對(duì)擴(kuò)大培養(yǎng)得到的三種植物乳桿菌的菌懸液進(jìn)行混合獲得混合菌懸液，再通過(guò) 沉降劑沉降處理，即為液體狀的青貯筍殼混合乳酸菌劑；或者，
[0018] 繼續(xù)將青貯筍殼混合乳酸菌劑與凍干保護(hù)劑和麩皮混合并凍干處理，獲得固體粉 末狀的青貯筍殼混合乳酸菌劑。
[0019] 所述液體培養(yǎng)基的組分及含量為：蛋白胨8?12g，牛肉膏8?12g，酵母粉4? 6g，K 2HP041?3g，梓檬酸二按1?3g，乙酸鈉4?6g，葡萄糖15?25g，吐溫70?90mL，硫 酸鎂0. 58?0. 62g，硫酸錳0. 25?0. 32g，瓊脂15?20g、蒸餾水適量；
[0020] 所述的液體培養(yǎng)基的制備方法如下：
[0021] 將液體培養(yǎng)基全部組分混合加熱使之完全溶解，調(diào)pH至6. 2?6. 4,分裝于三角瓶 中，115?121°C滅菌15?20min，備用。
[0022] 所述的液體種子擴(kuò)大培養(yǎng)是接種在液體培養(yǎng)基中，30?35°C下培養(yǎng)24?48小 時(shí)。
[0023] 所述沉降劑中的組分及相互重量比例為：殼聚糖：吐溫-80 : 0-環(huán)狀糊精= 1. 5 ?1. 8 : 1 : 2 ?2. 2 ;
[0024] 所述的沉降濃縮處理是在混合菌懸液中按加入具有菌體保護(hù)與加速沉降作用的 沉降劑后混合均勻，沉降劑與混合菌懸液的重量比例為10 : 100?170 ;接著以4000轉(zhuǎn)/ min的轉(zhuǎn)速通過(guò)冷凍離心機(jī)冷凍離心處理20min后，倒去菌液上層，收集離心沉積于底部的 菌泥（此時(shí)菌泥中的菌數(shù)密度已高達(dá)l〇 nCFU/ml)，備用。
[0025] 所述的凍干處理步驟如下：?
[0026] 1)混合預(yù)冷：將121°C高溫高壓滅菌后的麩皮與所述的菌泥于無(wú)菌操作室里面進(jìn) 行混合；接著添加凍干保護(hù)劑，混合均勻后放置于一 18°C的超低溫冰箱中冷凍4?6個(gè)小 時(shí)備用；
[0027] 2)干燥：將步驟1)預(yù)冷后的菌塊取出，于溫度一 84°C下在冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥 24?48個(gè)小時(shí)，干燥為粉狀或者微粒狀；
[0028] 要求固體粉末狀乳酸菌劑無(wú)結(jié)塊，無(wú)硬粒，流動(dòng)性好，顏色為淡黃色或者乳黃色， 無(wú)雜質(zhì)或者無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。
[0029] 上述筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的應(yīng)用方法，分別為以下兩種：
[0030] 1)將液體狀乳酸菌劑噴灑至鮮筍殼中，噴灑量以鮮筍殼重量的9?15%，與鮮筍 殼充分?jǐn)嚢杌旌?，裝入聚乙烯青貯袋中，每袋25kg;用真空包裝機(jī)脫氣密封，青貯90d后開(kāi) 袋；
[0031] 2)A、將加工后廢棄的筍殼及木質(zhì)化無(wú)法食用的筍頭烘干至含水量為70%? 80%，切成大小為2?3cm的物料，投入器皿或發(fā)酵池中，再按物料重量的80 %?120 %比 例加入飲用水；
[0032] B、按干燥后筍殼重量的0. 1 %?0. 3%比例，將固體粉末狀乳酸菌劑接種于A步驟 的物料中，充分?jǐn)嚢?、混合?br> [0033] C、將步驟B混均的物料裝入青貯發(fā)酵袋中，每袋25kg，真空封口，放置于陰涼干燥 處，發(fā)酵90d ;即得到黃亮色、有光澤、散發(fā)酸香味、質(zhì)地松軟的筍殼青貯飼料。
[0034] 檢測(cè)表明：將本發(fā)明所述乳酸菌制劑加入筍殼青貯后，可顯著降低筍殼中CP(粗 蛋白）、WSC(可溶性碳水化合物），降低NDF(中性洗滌纖維）和ADF(酸性洗滌纖維）的 含量（見(jiàn)表1) ;pH明顯下降至3. 2 ;顯著增加了乳酸的含量，干物質(zhì)中乳酸含量為58. 7g/ kg;NH3-N/TN比值也顯著下降，下降了 43. 2% ;干物質(zhì)中丁酸的含量下降至0. 31g/kg(見(jiàn) 表2);筍殼呈亮黃色，散發(fā)酸香味，質(zhì)地松軟，無(wú)粘手現(xiàn)象（見(jiàn)表3)。筍殼經(jīng)乳酸菌劑青貯 后其細(xì)胞壁成分被降解，筍殼表面都出現(xiàn)了鋸齒蝕痕，表面結(jié)構(gòu)已被破壞，存在很多的裂縫 和孔洞，未經(jīng)乳酸菌劑青貯的筍殼的表面結(jié)構(gòu)緊密規(guī)整，結(jié)構(gòu)致密（見(jiàn)圖1、圖2)。
[0035] 本發(fā)明的有益效果：一是增加了青貯料中乳酸菌的數(shù)量，可達(dá)到制作良好青貯 料的要求。添加乳酸菌劑使青貯飼料發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌急劇增殖，促進(jìn)乳酸發(fā)酵，發(fā)酵劑 的發(fā)酵性能好，抑制其他細(xì)菌的活動(dòng)，pH值迅速下降，經(jīng)測(cè)定該乳酸菌劑活菌數(shù)達(dá)10 1°? 10nCFU/ml。二是通過(guò)人工添加乳酸菌劑直接青貯筍殼，不但能極大的縮短青貯時(shí)間，同時(shí) 也能有效的改善青貯筍殼的感官品質(zhì)，同時(shí)能增加營(yíng)養(yǎng)，這與我們之前所得到的結(jié)果是一 致的。用高效液相色譜，氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)添加乳酸菌劑與自然發(fā)酵筍殼中的有機(jī)酸、氨 基酸和香氣成分進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，選用的乳酸菌劑人工接種青貯筍殼中的乳酸菌含 量、有機(jī)酸等明顯優(yōu)于自然青貯的筍殼。三是顯著縮短發(fā)酵時(shí)間（較常規(guī)發(fā)酵縮短三分之 一時(shí)間）、沉降濃縮方法能有效降低乳酸菌菌體的損傷比率（與常規(guī)的單純離心濃縮方法 比較，菌體損傷比率降低20%以上）。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0036] 圖1是自然青貯筍殼結(jié)構(gòu)掃描電鏡圖（放5000倍）；圖中可見(jiàn)：筍殼的表面結(jié)構(gòu) 緊密規(guī)整，結(jié)構(gòu)致密。
[0037] 圖2是添加本發(fā)明乳酸菌劑的青貯筍殼筍殼結(jié)構(gòu)掃描電鏡圖（放大5000倍）。
[0038] 圖中可見(jiàn)：筍殼經(jīng)乳酸菌劑青貯后其細(xì)胞壁成分被降解，筍殼表面都出現(xiàn)了鋸齒 蝕痕，表面結(jié)構(gòu)已被破壞，存在很多的裂縫和孔洞；所以飼料的適口性顯著增加。

【具體實(shí)施方式】
[0039] 本發(fā)明提供制備方法，在篩選具有良好的生長(zhǎng)特性和發(fā)酵特性基礎(chǔ)上，通過(guò)離心 法以及離心前添加具有菌體保護(hù)的功能物質(zhì)，達(dá)到有效減少離心過(guò)程菌體損傷和提高離心 效率以及凍干保護(hù)，從而整體提升青貯飼料乳酸菌制劑的品質(zhì)，為快速青貯筍殼又能增加 營(yíng)養(yǎng)的一種筍殼青貯飼料發(fā)酵制劑的制備方法。又采用人工直投式接種乳酸菌的方法，獲 得了滿意的應(yīng)用效果。
[0040] 以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的具體描述，但應(yīng)該理解本發(fā)明并不受這些內(nèi) 容所限制。
[0041] 本發(fā)明采用的原材料如下：
[0042] 干酪乳桿菌（Lactobacillus Casei)、植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)和 短乳桿菌（Lactobacillus brevis)菌株：均引自中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微 生物中心CGMCC，編號(hào)分別為1. 0029、1. 0556和1. 0558
[0043] 殼聚糖：濰坊海之源生物制品有限公司；
[0044] 吐溫-80 :淄博海杰化工有限公司生產(chǎn)，瑞灃牌司盤吐溫-80 ;
[0045] 0 _環(huán)狀糊精：孟州市華興生物化工有限責(zé)任公司；
[0046] 麩皮：浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研宄所提供；
[0047] 高速冷凍離心機(jī)：VELOCITY 18R，意大利Dynamica生命動(dòng)力有限公司；
[0048] 超低溫冰箱：MDF-192,日本三洋電機(jī)株式會(huì)社；
[0049] 冷凍干燥機(jī)：北京博醫(yī)康儀器有限公司；
[0050] 氣相色譜儀：GC-14A (GAS Chromatogram)，日本島津（Shimadza)公司；
[0051] 手持式色差儀：CR-400,日本柯尼卡美能達(dá)公司；
[0052] 數(shù)顯電熱培養(yǎng)箱：HPX-9162-MBE，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；
[0053] 凱式定氮儀，UDK127型嘉盛（香港）科技有限公司；
[0054] 掃描電子顯微鏡：TM3000,日本HITACH公司；
[0055] 真空封口機(jī)：DZQ400/500,溫州市兄弟包裝食品機(jī)械有限公司。
[0056] 實(shí)施例1 : 一種青貯飼料乳酸菌制劑，采用的菌種包括植物乳桿菌、干酪乳桿菌和 短乳桿菌；將該三種乳酸菌分別接種在液體培養(yǎng)基，于35°C活化培養(yǎng)20小時(shí)，擴(kuò)大培養(yǎng)48 小時(shí)；接著添加沉降劑，然后將擴(kuò)大培養(yǎng)得到的三種植物乳桿菌的菌懸液進(jìn)行混合，成為混 合菌懸液，再添加沉降劑進(jìn)行沉降處理，即為液體狀的青貯筍殼乳酸菌劑；沉降劑與混合 菌懸液的重量比例為10 : 100;沉降劑中的組分及相互重量比例為：殼聚糖：吐溫-80 : 0-環(huán)狀糊精=1.5 : 1 : 2。
[0057] 所述液體培養(yǎng)基的組分及含量為：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母粉5g/L， K 2HP042g/L，檸檬酸二銨 2g/L，乙酸鈉 5g/L，葡萄糖 20g/L，吐溫 801mL，MgS04. 7H20 0? 58g/ L，MnS044H20 0. 25g/L，瓊脂18g/L，蒸餾水1000mL。干酪乳桿菌、植物乳桿菌和短乳桿菌菌 懸液是按1:1:1的比例進(jìn)行混合，各菌種的菌數(shù)密度均達(dá)到彡l〇 9CFU/ml。
[0058] 實(shí)施例2 :-種青貯飼料乳酸菌制劑，采用的菌種包括植物乳桿菌、干酪乳桿菌和 短乳桿菌；將該三種乳酸菌分別接種在液體培養(yǎng)基，于35°C活化18小時(shí)，培養(yǎng)48小時(shí)，然 后將擴(kuò)大培養(yǎng)得到的三種植物乳桿菌的菌懸液進(jìn)行混合，成為混合菌懸液；在混合菌懸液 中添加菌體保護(hù)用的沉降劑進(jìn)行沉降處理，即為液體狀的青貯筍殼乳酸菌劑；沉降劑與混 合菌懸液的重量比例為10 : 150,沉降劑的組分與相互重量比例為：殼聚糖：吐溫-80 : 0-環(huán)狀糊精=1.8 : 1 : 2. 2。
[0059] 液體狀的青貯筍殼乳酸菌劑以4000轉(zhuǎn)/min的轉(zhuǎn)速冷凍離心20min后，倒去菌液 上層，收集離心沉積于底部的菌泥，在菌泥中添加麩皮，以及由12份脫脂奶粉、5份麥芽糊 精、5份山梨醇、1份海藻糖組成的凍干保護(hù)劑，一 18°C的超低溫冰箱中冷凍6個(gè)小時(shí)后于溫 度一 84°C冷凍干燥48個(gè)小時(shí)，即為固體粉末狀的青貯筍殼乳酸菌劑；液體狀青貯筍殼乳酸 菌劑、凍干保護(hù)劑以及麩皮的重量比例為100 : 20 : 110。
[0060] 所述液體培養(yǎng)基的組分及含量為：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母粉5g/L， K 2HP042g/L，檸檬酸二銨 2g/L，乙酸鈉 5g/L，葡萄糖 20g/L，吐溫 80 lmL，MgS04. 7H20 0? 58g/ L，MnS044H20 0. 25g/L，瓊脂18g/L，蒸餾水1000mL。干酪乳桿菌、植物乳桿菌和短乳桿菌菌 懸液是按1:1:1的比例進(jìn)行混合，各菌種的菌數(shù)密度均達(dá)到彡l〇 9CFU/ml。
[0061] 實(shí)施例3 :本發(fā)明所述的乳酸菌劑在筍殼青貯中的應(yīng)用方法，包括下述步驟：
[0062] A、將加工后廢棄的筍殼和木質(zhì)化無(wú)法食用的筍頭烘干至含水量為70 %?80%， 切成2?3cm大小，投入盛有適量?jī)羲钠髅蠡虬l(fā)酵池中，再加入與物料（筍殼和筍頭）等 量的飲用水；
[0063] B、按干燥后筍殼重量的0. 1 %?0. 3%比例，將本發(fā)明所述乳酸菌制劑噴灑接種 于A步驟的筍殼中攪拌、混合；
[0064] C、將步驟B混均的筍殼裝入青貯發(fā)酵袋中，每袋25kg，真空封口，放置于陰涼干燥 處，發(fā)酵90d，即得到黃亮色、有光澤、散發(fā)酸香味、質(zhì)地松軟的筍殼青貯飼料。
[0065] 2)A、將加工后廢棄的筍殼及木質(zhì)化無(wú)法食用的筍頭烘干至含水量為70%? 80%，切成大小為2?3cm的物料，投入器皿或發(fā)酵池中，再按物料重量的80 %?120 %比 例加入飲用水；
[0066] B、按干燥后筍殼重量的0. 1 %?0. 3%比例，將固體粉末狀乳酸菌劑接種于A步驟 的物料中，充分?jǐn)嚢?、混合?br> [0067] C、將步驟B混均的物料裝入青貯發(fā)酵袋中，每袋25kg，真空封口，放置于陰涼干燥 處，發(fā)酵90d ;即得到黃亮色、有光澤、散發(fā)酸香味、質(zhì)地松軟的筍殼青貯飼料。
[0068] 表 1
[0069]

【權(quán)利要求】
1. 一種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，為液體狀乳酸菌劑，或固體粉末狀乳酸菌劑；其特 征在于： 所述液體狀乳酸菌劑為由干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌分別通過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)以 及沉降濃縮處理后混合組成的混合乳酸菌劑； 所述固體粉末狀乳酸菌劑包括液體狀乳酸菌劑、凍干保護(hù)劑以及麩皮；液體狀乳酸菌 劑、凍干保護(hù)劑以及麩皮的重量比例為1〇〇 : 16?24 : 80?150; 所述干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌采用中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通 微生物中心保藏菌種；其中干酪乳桿菌的名稱為L(zhǎng)actobacillus Casei，編號(hào)是1. 0029 ;所 述植物乳桿菌的名稱為L(zhǎng)actobacillus plantarum，編號(hào)是1. 0556 ;所述短乳桿菌的名稱 為 Lactobacillus brevis，編號(hào)是 1.0558。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，其特征在于：所述的混合乳酸菌 劑由干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌菌體數(shù)以1:1:1比例混合而成。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，其特征在于：所述凍干保護(hù)劑中 的組分及相互重量比例為：脫脂奶粉、麥芽糊精、山梨醇、海藻糖=11?13 : 4?6 : 4? 6:1。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑，其特征在于：所述的麩皮經(jīng) 過(guò)研磨機(jī)粉碎，于120?123°C高溫滅菌20?25min，用量為液體狀乳酸菌劑重量的0. 8? 1.5 倍。
5. -種筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，按以下步驟進(jìn)行： 1) 將干酪乳桿菌、植物乳桿菌以及短乳桿菌的菌種分別接種在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行液體 種子擴(kuò)大培養(yǎng)； 2) 對(duì)擴(kuò)大培養(yǎng)得到的三種植物乳桿菌的菌懸液進(jìn)行混合獲得混合菌懸液，再通過(guò)沉降 劑沉降處理，即為液體狀的青貯筍殼混合乳酸菌劑；或者， 繼續(xù)將青貯筍殼混合乳酸菌劑與凍干保護(hù)劑和麩皮混合并凍干處理，獲得固體粉末狀 的青貯筍殼混合乳酸菌劑。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，其特征在于：所述液 體培養(yǎng)基的組分及含量為：蛋白胨8?12g，牛肉膏8?12g，酵母粉4?6g，K2HP041?3g，檸 檬酸二按1?3g，乙酸鈉4?6g，葡萄糖15?25g，吐溫70?90mL，硫酸鎂0. 58?0. 62g， 硫酸錳0. 25?0. 32g，瓊脂15?20g、蒸餾水適量； 所述的液體培養(yǎng)基的制備方法如下： 將液體培養(yǎng)基全部組分混合加熱使之完全溶解，調(diào)pH至6. 2?6. 4,分裝于三角瓶中， 115?121°C滅菌15?20min，備用。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，其特征在于：所述沉 降劑中的組分及相互重量比例為：殼聚糖：吐溫-80 : 0-環(huán)狀糊精=1.5?1.8 : 1 : 2 ?2.2。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，其特征在于：所述的 沉降濃縮處理是在混合菌懸液中按加入具有菌體保護(hù)與加速沉降作用的沉降劑后混合均 勻，沉降劑與混合菌懸液的重量比例為10 : 100?170 ;接著通過(guò)冷凍離心機(jī)冷凍離心處 理后，倒去菌液上層，收集離心沉積于底部的菌泥，備用。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的制備方法，其特征在于：所述的 凍干處理步驟如下： 1) 混合預(yù)冷：將滅菌后的麩皮與所述的菌泥于無(wú)菌操作室里面進(jìn)行混合；接著添加凍 干保護(hù)劑，混合均勻后放置于一 18°C的超低溫冰箱中冷凍4?6個(gè)小時(shí)備用； 2) 干燥：將步驟1)預(yù)冷后的菌塊取出，于溫度一 84°C下在冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥 24?48個(gè)小時(shí)，干燥為粉狀或者微粒狀。
10. 權(quán)利要求1所述的筍殼青貯飼料乳酸菌制劑的應(yīng)用方法，分別為以下兩種： 1) 將液體狀乳酸菌劑噴灑至鮮筍殼中，噴灑量為鮮筍殼重量的9?15% ;液體狀乳酸 菌劑與鮮筍殼充分?jǐn)嚢杌旌虾螅b入聚乙烯青貯袋中，每袋25kg ;用真空包裝機(jī)脫氣密封， 青貯90d后開(kāi)袋； 2. A、將加工后廢棄的筍殼及木質(zhì)化無(wú)法食用的筍頭烘干至含水量為70%?80%，切 成大小為2?3cm的物料，投入器皿或發(fā)酵池中，再按物料重量的80 %?120 %比例加入飲 用水； B、 按干燥后筍殼重量的0. 1%?0. 3%比例，將固體粉末狀乳酸菌劑接種于A步驟的物 料中，充分?jǐn)嚢?、混合? C、 將步驟B混均的物料裝入青貯發(fā)酵袋中，每袋25kg，真空封口，放置于陰涼干燥處， 發(fā)酵90d ;即得到黃亮色、有光澤、散發(fā)酸香味、質(zhì)地松軟的筍殼青貯飼料。
【文檔編號(hào)】A23K3/02GK104450575SQ201410750553
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月9日
【發(fā)明者】劉大群, 陳文烜, 華穎 申請(qǐng)人:浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院