本發(fā)明屬于農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種基于申嗪霉素的殺菌組合物及含有該組合物的殺菌劑。

背景技術(shù)：

申嗪霉素(phenazino-1-carboxylicacid)是由熒光假單胞菌經(jīng)生物培養(yǎng)分泌的一種抗菌素，同時(shí)具有廣譜抑制植物病原菌并促進(jìn)植物生長(zhǎng)作用的雙重功能，該生物殺菌劑具有廣譜、高效的特點(diǎn)，能有效防治水稻、小麥、蔬菜等作物上的枯萎病、蔓枯病、疫病、紋枯病、稻曲病、稻瘟病、霜霉病、條銹病、菌核病、赤霉病、炭疽病、灰霉病、黑星病、葉斑病、青枯病、潰瘍病、姜瘟及土傳病害土壤處理，對(duì)多種植物病原菌具有很好的抑制作用。申嗪霉素已在上海、江蘇、浙江、湖北、海南、河南、甘肅等地開(kāi)展了大面積的推廣試驗(yàn)，對(duì)水稻紋枯病、蘋(píng)果斑點(diǎn)落葉病、西瓜枯萎病、甜瓜蔓枯病等表現(xiàn)出良好的田間防效。

蠟狀芽孢桿菌是一種抗病型增產(chǎn)菌，蠟狀芽孢桿菌已經(jīng)被廣泛使用于農(nóng)業(yè)上，是一種極其優(yōu)秀的生物農(nóng)藥，具有抗菌及促進(jìn)植物生長(zhǎng)的作用，廣泛用于果樹(shù)、禾谷類(lèi)、瓜菜類(lèi)等的重要病害防治。蠟狀芽孢桿菌本來(lái)就由自然界中分離所得，并且通過(guò)了安全試驗(yàn)、毒性試驗(yàn)等，安全可靠性高，對(duì)環(huán)境不會(huì)造成污染。

隨著農(nóng)藥的大量使用，農(nóng)藥公害問(wèn)題和人們對(duì)生存環(huán)境的關(guān)注日益突出。針對(duì)目前農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的影響，人們開(kāi)始更多地著眼于更為低毒環(huán)保、無(wú)污染的生物源農(nóng)藥，開(kāi)發(fā)生物源農(nóng)藥的新品種以及復(fù)配制劑。與申嗪霉素配成復(fù)合制劑，既提高了防治效果，又增加了產(chǎn)量，不僅能推遲抗性產(chǎn)生，還能提高藥效及增加產(chǎn)量，降低使用量，減少農(nóng)民的施藥成本。

然而，目前，申嗪霉素和蠟狀芽孢桿菌的復(fù)配殺菌組合物的研究未見(jiàn)諸報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種具有增效作用、安全環(huán)保，并能降低毒性、減少污染、降低農(nóng)民施藥成本，經(jīng)濟(jì)實(shí)用的基于申嗪霉素的殺菌組合物及含有該組合物的殺菌劑。為了達(dá)到發(fā)明目的，發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量、廣泛的復(fù)配篩選試驗(yàn)，意外發(fā)現(xiàn)申嗪霉素和蠟狀芽孢桿菌的適當(dāng)比例組合具有突出的增效作用，其組合在低于單劑用量的情況下，能表現(xiàn)出優(yōu)于單劑的良好效果。

本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：

一種基于申嗪霉素的殺菌組合物，該殺菌組合物的活性成分為10％申嗪霉素及100億個(gè)/克蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為1:100～100:1。

作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為1:50～30:1。

作為優(yōu)選的技術(shù)方案，每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10⁶～10¹¹個(gè)/克。

一種殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為5～90％的基于申嗪霉素的殺菌組合物。

作為優(yōu)選的技術(shù)方案，所述的殺菌劑中含有重量百分比為10～60％的基于申嗪霉素的殺菌組合物。

所述的殺菌劑的劑型為懸浮劑、可濕性粉劑、水分散粒劑、懸乳劑、種衣劑、微乳劑、顆粒劑或水乳劑。

所述的殺菌劑用于防治農(nóng)作物的枯萎病、蔓枯病、疫病、紋枯病、稻曲病、稻瘟病、霜霉病、條銹病、菌核病、赤霉病、炭疽病、灰霉病、黑星病、葉斑病、青枯病、潰瘍病及姜瘟。

所述的殺菌劑用于土傳病害的土壤處理。

本發(fā)明中，所述的蠟狀芽孢桿菌菌體細(xì)胞桿狀，末端方，成短或長(zhǎng)鏈，1.0～1.2×3.0～5.0微米。產(chǎn)芽孢，芽孢圓形或柱形，中生或近中生，1.0～1.5微米，孢囊無(wú)明顯膨大。革蘭氏陽(yáng)性，無(wú)莢膜，運(yùn)動(dòng)。菌落大，表面粗糙，扁平，不規(guī)則。菌落形態(tài)：在普通瓊脂平板培養(yǎng)基上，37℃，培養(yǎng)24h，可形成圓形或近似圓形、質(zhì)地軟、無(wú)色素、稍有光澤的白色菌落(似蠟燭樣顏色)直徑5-7mm.在m.s.p培養(yǎng)基上生長(zhǎng)更旺盛，菌落直徑達(dá)8-10mm，質(zhì)地更軟，挑起來(lái)呈絲狀，培養(yǎng)時(shí)間稍長(zhǎng)，菌落表面呈毛玻璃狀，并產(chǎn)生紅色色素。在蛋白胨酶母膏平板上菌落為灰 白色，不透明，表面較粗糙，似毛玻璃狀或融蠟狀，菌落較大。蠟狀芽孢桿菌細(xì)菌對(duì)外界有害因子抵抗力強(qiáng)，分布廣，是典型的菌體細(xì)胞。

本發(fā)明中，所述的蠟狀芽孢桿菌拮抗植物病原菌的重要作用機(jī)理之一是營(yíng)養(yǎng)和空間位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)，競(jìng)爭(zhēng)作用主要包括營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)和空間位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)，蠟狀芽孢桿菌可以在植物根際、體表及體內(nèi)及土壤中快速、大量繁衍和定殖，有效地排斥、阻止和干擾植物病原微生物在植物上的定殖與侵染，從而達(dá)到抑菌和防病的效果；蠟狀芽孢桿菌還能產(chǎn)生抑菌物質(zhì)，包括細(xì)菌素、酶類(lèi)及蛋白類(lèi)抑菌物質(zhì)、脂肽類(lèi)抗生素、多肽類(lèi)、及其它種類(lèi)的抗菌物質(zhì)；另外，蠟狀芽孢桿菌還可促進(jìn)多種植物種子、幼苗和根系的生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)植物的抗性，從而間接地減少病害的發(fā)生。而所述的申嗪霉素對(duì)真菌細(xì)胞毒害的作用機(jī)理主要是：利用吩嗪-1-羧酸其氧化還原能力，在真菌細(xì)胞內(nèi)積累活氧，抑制線粒體中呼吸轉(zhuǎn)遞鏈的氧化磷酸化用，從而抑制菌絲的正常生長(zhǎng)。上述兩種物質(zhì)作用相互促進(jìn)，從而達(dá)到互相增效的作用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下特點(diǎn)：

(1)殺菌范圍廣，對(duì)水稻、小麥、柑橘、棉花、黃瓜、香蕉、西瓜、苷蔗、辣椒等防治效果好；

(2)兩種活性組分之間具有優(yōu)異的協(xié)同效果，增產(chǎn)效果好，抗菌效果提高，能有效延緩病菌抗藥性，增加持效期，擴(kuò)大殺菌譜及降低用藥成本，是病害綜合防治的重要手段；

(3)在非常低的劑量下具有很好的效果，而且兩種活性組分之間無(wú)交互抗性；

(4)使用復(fù)合制劑，用量均比單一使用時(shí)降低，穩(wěn)定性增加，劑型先進(jìn)、環(huán)保，安全性高；

(5)可以與其它具有除草、殺蟲(chóng)或殺菌性能的化合物混合使用，也可以與殺線蟲(chóng)劑、防護(hù)劑、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、植物營(yíng)養(yǎng)素或土壤調(diào)節(jié)劑混合使用，使用范圍廣，成本低，具有很好的應(yīng)用前景。

具體實(shí)施方式

為確定申嗪霉素和蠟狀芽孢桿菌兩種有效成分復(fù)配的增效作用，發(fā)明人首先使用這兩種成分進(jìn)行了室內(nèi)生測(cè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)方法以及結(jié)果如下：

根據(jù)產(chǎn)品有效成分的特性和市場(chǎng)的需求，將生測(cè)的對(duì)象定為水稻紋枯病菌(thanatephoruscucumeris)。水稻紋枯病又稱云紋病，苗期至穗期都可發(fā)病，是世 界上水稻產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的重要病害之一。我國(guó)各稻區(qū)自70年代以來(lái)發(fā)病呈上升趨勢(shì)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前全國(guó)發(fā)病面積達(dá)2億畝以上(占總面積的2/5)，與稻瘟病、白葉枯病構(gòu)成水稻的三大病害。紋枯病可使植株莖稈、葉鞘干枯至腐爛，引起結(jié)實(shí)率下降，千粒重降低，甚至植株倒伏而絕產(chǎn)。近年由于水稻連作面積不斷擴(kuò)大及種植密度的加大，使該病害的發(fā)生僅次于稻瘟病，造成的損失也逐年增加，現(xiàn)在市場(chǎng)上常用的藥劑是井岡霉素，但井岡霉素的持效期短，再加上多年的使用使井岡霉素的效果下降。因此，市場(chǎng)上急需對(duì)水稻紋枯病特效、持效期長(zhǎng)的藥劑。

室內(nèi)生測(cè)的試驗(yàn)方法:預(yù)防及治療測(cè)定藥劑對(duì)水稻紋枯病菌作用。由于有效成分中含有大量的活菌，所以室內(nèi)實(shí)驗(yàn)不能用簡(jiǎn)單的平板生測(cè)，必須進(jìn)行大量的盆栽實(shí)驗(yàn)，參照以前試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，從各藥劑對(duì)病菌生長(zhǎng)抑制率達(dá)10～100％范圍內(nèi)設(shè)計(jì)5個(gè)濃度，先將96％申嗪霉素原藥配制成10％懸浮劑，蠟狀芽孢桿菌配成100億個(gè)/克懸浮劑，在盆栽水稻的每根莖上接一個(gè)3mm菌塊，然后將藥液按不同稀釋濃度噴灑到接好紋枯病的盆栽水稻上，統(tǒng)計(jì)發(fā)病率。

混配制劑的聯(lián)合毒力采用孫云沛的共毒系數(shù)方法表示：

混配制劑的理論毒力指數(shù)tti＝σ(某藥的毒力指數(shù)ati×在混劑中該藥有效成分的百分率)。

ctc大于120時(shí)為增效作用，小于80時(shí)為拮抗作用，80～120時(shí)為加和作用。

表1申嗪霉素、蠟狀芽孢桿菌及其不同配比對(duì)水稻紋枯病的測(cè)定結(jié)果

分析上述數(shù)據(jù)，可以明顯看出申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌不同比例復(fù)配時(shí)，對(duì)水稻紋枯病都有不同比例的增效作用，配方的共毒系數(shù)(ctc)均大于120，有理想的增效作用，其中配比五的共毒系數(shù)最大，達(dá)到了162，因此，申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的復(fù)配可成為防治水稻紋枯病的理想藥劑。

通過(guò)盆栽生測(cè)實(shí)驗(yàn)確定申嗪霉素和蠟狀芽孢桿菌兩種有效成分復(fù)配能夠有很好的增效作用。

以下通過(guò)具體實(shí)例用以進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明絕非僅僅限于以下這些實(shí)施例。配方中百分比均為重量百分比，所使用的原藥及助劑均為其他廠家購(gòu)買(mǎi)。

實(shí)施例1：

2％申嗪霉素·10億蠟狀芽孢桿菌懸浮劑

其中，消泡劑可以選用市售的有機(jī)硅油。

實(shí)施例2：

1％申嗪霉素·50億蠟狀芽孢桿菌懸浮劑

其中，消泡劑可以選用市售的有機(jī)硅油。

實(shí)施例3：

6％申嗪霉素·30億蠟狀芽孢桿菌水分散粒劑

實(shí)施例4：

1％申嗪霉素·100億蠟狀芽孢桿菌水分散粒粉劑

實(shí)施例5：

30％申嗪霉素·1億蠟狀芽孢桿菌水分散粒劑

選擇以上實(shí)例進(jìn)行防治水稻紋枯病的田間試驗(yàn)，確定配方防治水稻紋枯病的效果，同時(shí)通過(guò)與申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌單劑的效果對(duì)比，驗(yàn)證復(fù)配后的增效效果，具體試驗(yàn)方法及數(shù)據(jù)如下：

試驗(yàn)一：2％申嗪霉素.10億蠟狀芽孢桿菌懸浮劑以及其它制劑做田間防治水稻 紋枯病的藥效試驗(yàn)。試驗(yàn)地點(diǎn)為福建寧化縣，時(shí)間為2013年6月18日，試驗(yàn)共五個(gè)處理，每個(gè)處理三個(gè)重復(fù)，小區(qū)隨機(jī)排列，采用背負(fù)式手支噴霧器，施藥時(shí)田間有2-3cm水，施藥當(dāng)天天晴無(wú)風(fēng)，所有小區(qū)的種植習(xí)慣均與當(dāng)?shù)胤N植習(xí)慣相同，記錄施藥當(dāng)天和其后一周的天氣資料，具體如下：

表2試驗(yàn)期間天氣情況記錄

調(diào)查方法為：每個(gè)小區(qū)對(duì)角線定兩點(diǎn)，每點(diǎn)直線前進(jìn)定25叢，施藥后第7天、14天、21天定點(diǎn)調(diào)查，調(diào)查各小區(qū)病指，計(jì)算防效，并進(jìn)行鄧肯氏新復(fù)極差分析。

病情指數(shù)的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：

0級(jí)全株無(wú)病

1級(jí)第四葉片及其以下葉鞘、葉片發(fā)病(以劍葉為第一葉片)

3級(jí)第三葉片及其以下葉鞘、葉片發(fā)病

5級(jí)第二葉片及其以下葉鞘、葉片發(fā)病

7級(jí)劍葉葉片及其以下葉鞘、葉片發(fā)病

9級(jí)全株發(fā)病，提早枯死

防治效果計(jì)算公式：

表3不同藥劑對(duì)水稻紋枯病的防效

注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值，

從上述數(shù)據(jù)可以看出，申嗪霉素和蠟狀芽孢桿菌復(fù)配制劑在藥后防效均與單劑 均有極顯著的差異，面在藥后21天，防效達(dá)到92.40％，遠(yuǎn)高于申嗪霉素單劑及蠟狀芽孢桿菌單劑，有很好的增效作用。

通過(guò)上述國(guó)田間藥效試驗(yàn)，確定實(shí)施例3對(duì)水稻紋枯病防治最為理想，因此，在水稻收割時(shí)測(cè)算小區(qū)實(shí)粒數(shù)、千粒重、實(shí)際產(chǎn)量，計(jì)算空秕率和增產(chǎn)效果，也用鄧肯氏新復(fù)極差法檢驗(yàn)稻谷產(chǎn)量差異性的顯著性，觀察實(shí)施例3是否對(duì)水稻產(chǎn)量有增產(chǎn)作用。

表4不同藥劑對(duì)水稻產(chǎn)量的影響

注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值。

從上述數(shù)據(jù)可以看出，使用實(shí)施例3配方結(jié)水稻有顯著的增產(chǎn)作用，空秕率明顯低于其它兩個(gè)藥劑，千粒重也有明顯的增加，田間藥效實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，使用實(shí)施例3的地塊，水稻個(gè)體強(qiáng)壯，子粒飽滿，因此，實(shí)施例3具有明顯的增產(chǎn)及提高水稻品質(zhì)的作用。

從田間試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以明顯看出，復(fù)配制劑的防效和增產(chǎn)作用均大于申嗪霉素和蠟狀芽孢桿菌單劑，而且復(fù)配后的持效期在30天左右，也大于單劑的持效期，兩種有效成分復(fù)配可以增加持效期，提高藥效，有很高的經(jīng)濟(jì)效益。

實(shí)施例6：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為1:100。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10⁷個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為5％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為可濕性粉劑，用于防治農(nóng)作物的枯萎病、蔓枯病、疫病、紋枯病、稻曲病、稻瘟病、霜霉病、條銹病、菌核病、赤霉病、炭疽病、灰霉病、黑星病、葉斑病、青枯病、潰瘍病及姜瘟。

實(shí)施例7：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為100:1。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10¹⁰個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為90％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為種衣劑。

其余同實(shí)施例6。

實(shí)施例8：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為1:30。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10⁹個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為60％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為微乳劑。

其余同實(shí)施例6。

實(shí)施例9：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為50:1。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10⁸個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為10％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為顆粒劑。

其余同實(shí)施例6。

實(shí)施例10：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為1:1。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10⁹個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為50％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為顆粒劑。

其余同實(shí)施例6。

實(shí)施例11：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為65:1。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10⁸個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為75％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為水乳劑，用于土傳病害的土壤處理。

實(shí)施例12：

本實(shí)施例基于申嗪霉素的殺菌組合物的活性成分為申嗪霉素及蠟狀芽孢桿菌，并且所述的申嗪霉素與蠟狀芽孢桿菌的重量之比為1:55。

每克殺菌組合物中蠟狀芽孢桿菌的含量為10¹⁰個(gè)。

含有本實(shí)施例殺菌組合物的殺菌劑，該殺菌劑中含有重量百分比為8％的本實(shí)施例殺菌組合物。

殺菌劑的劑型為懸乳劑，用于土傳病害的土壤處理。

上述的對(duì)實(shí)施例的描述是為便于該技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能理解和使用發(fā)明。熟悉本領(lǐng)域技術(shù)的人員顯然可以容易地對(duì)這些實(shí)施例做出各種修改，并把在此說(shuō)明的一般原理應(yīng)用到其他實(shí)施例中而不必經(jīng)過(guò)創(chuàng)造性的勞動(dòng)。因此，本發(fā)明不限于上述實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的揭示，不脫離本發(fā)明范疇所做出的改進(jìn)和修改都應(yīng)該在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。