本發(fā)明涉及藥用植物栽培學(xué)研究領(lǐng)域，是一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法。

背景技術(shù)：

穿心蓮為爵床科穿心蓮屬的一年生草本植物。穿心蓮原產(chǎn)印度、斯里蘭卡、緬甸、印度尼西亞、泰國(guó)、越南，在五十年代引種到中國(guó)。現(xiàn)在中國(guó)境內(nèi)野生的穿心蓮因過(guò)度采集而很少見(jiàn)，栽培的穿心蓮主要在廣西、廣東、四川、福建、湖南等地有種植，其中廣西種植面積最大而且有最大的種子園，國(guó)內(nèi)幾乎所有的穿心蓮種子都由廣西提供。

穿心蓮有特殊的苦味，有“苦中之王”之稱。在傳統(tǒng)的印度阿育吠陀醫(yī)學(xué)、傳統(tǒng)的埃及希臘阿拉伯尤那尼醫(yī)學(xué)以及傳統(tǒng)的泰國(guó)、中國(guó)醫(yī)學(xué)體系中，穿心蓮被用來(lái)維持健康、治療多種感染性疾病及毒蛇咬傷，后來(lái)逐漸發(fā)現(xiàn)了更多的藥用價(jià)值，尤其是在治療癌癥和HIV方面有潛在的作用。穿心蓮最初只以干燥地上部分入藥，后包括了地下部分，即全草皆可入藥。除了黃酮類(lèi)、多酚類(lèi)外，穿心蓮的藥效成分主要包括四種內(nèi)酯類(lèi)：穿心蓮內(nèi)酯(andrographolide)、脫水穿心蓮內(nèi)酯(14-deoxy-11,12-didehydroandrographolide)、新穿心蓮內(nèi)酯(neoandrographolide)、去氧穿心蓮內(nèi)酯(14-deoxyandrographolide)，其中前兩種是比較常用的內(nèi)酯成分，常用來(lái)指示穿心蓮的藥材品質(zhì)。

在穿心蓮栽培技術(shù)方面的文獻(xiàn)中目前還沒(méi)有提到關(guān)于在收獲期實(shí)施干旱對(duì)穿心蓮內(nèi)酯類(lèi)物質(zhì)含量影響的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明提供一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，通過(guò)在收獲期施加干旱處理，顯著提高脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯的含量，提高穿心蓮的藥材品質(zhì)及藥用價(jià)值。

本發(fā)明提供的利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，在穿心蓮收獲期進(jìn)行持續(xù)7～20天的干旱處理，其中，干旱處理的條件為控制土壤含水量為飽和水含量的20～60％(w/w)。

優(yōu)選的是，在穿心蓮出苗后100～120天之間進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，其中，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的20％(w/w)。

優(yōu)選的是，土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)。

優(yōu)選的是，所述穿心蓮播種、出苗后分別移栽至盆中，所述盆為上大下小的結(jié)構(gòu)，其底部沿周向設(shè)有多個(gè)通孔，盆外圍從上至下依次設(shè)有多個(gè)透氣單元，每個(gè)透氣單元由多個(gè)條形孔沿周向均勻分布，相鄰兩個(gè)透氣單元的每個(gè)條形孔互相平行、交錯(cuò)設(shè)置，盆內(nèi)壁依次貼附設(shè)有不銹鋼絲網(wǎng)和紗布層，紗布層內(nèi)放置土壤，其中，每個(gè)條形孔的長(zhǎng)度為其所在盆的外圍一圈的總長(zhǎng)度的四分之一，每個(gè)透氣單元由三個(gè)條形孔組成；所述不銹鋼絲網(wǎng)由多個(gè)圓形網(wǎng)格交織而成，每個(gè)網(wǎng)格的直徑為1～3mm。

優(yōu)選的是，所述盆配設(shè)有盆架，所述盆架是由鋼筋彎折成的上大下小的架體，包括上層架、支撐肋和底座，上層架可供盆放入并將盆卡設(shè)，底座為一片體，其中央設(shè)有凸塊，以支撐卡設(shè)在上層架的盆，且凸塊的橫截面積小于盆底部的通孔圍成的圓的面積。

優(yōu)選的是，盆上徑為16cm，底徑為10.5cm，高為12cm。

本發(fā)明至少能達(dá)到以下有益效果：

1.本發(fā)明的利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，收獲期是影響穿心蓮藥材品質(zhì)的關(guān)鍵時(shí)期，由于此時(shí)穿心蓮的生物量積累和內(nèi)酯類(lèi)物質(zhì)的含量積累都逐漸達(dá)到頂峰并保持穩(wěn)定，然而，在收獲期施加干旱的想法獨(dú)具創(chuàng)新，并有效提高藥材品質(zhì)。

2.本發(fā)明利用收獲期干旱來(lái)調(diào)控穿心蓮藥材中的內(nèi)酯含量，增加了穿心蓮藥材中脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯含量，有效提高穿心蓮的藥材品質(zhì)，并維持生物量的降低在可接受的范圍內(nèi)。

3.本發(fā)明對(duì)栽培穿心蓮的盆進(jìn)行改造，在盆的底部設(shè)有多個(gè)通孔，筒體外圍設(shè)有由多個(gè)條形孔組成的多個(gè)透氣單元，能夠使土壤內(nèi)的水分盡快散失，達(dá)到預(yù)期的土壤含水量，即為土壤飽和含水量的20％或40％，確保土壤內(nèi)部的含水量最大程度上保持平均；在盆內(nèi)貼附裝設(shè)網(wǎng)盆、再貼附多層紗布，然后盛放土壤，相當(dāng)于將土壤包裹，減少土壤因水分散失而帶走的部分損失，從而造成土壤內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流失，同時(shí)，確保土壤重量保持一定值，精確控制加水量等來(lái)維持土壤含水量為飽和含水量的20％或40％；此外，用盆架將盆 支撐使之處于懸空狀態(tài)，有助于促進(jìn)盆底部的空氣流通，使穿心蓮生長(zhǎng)在土壤中的部分處于相同的空氣氛圍內(nèi)，利于土壤含水量的均勻化。

本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過(guò)下面的說(shuō)明體現(xiàn)，部分還將通過(guò)對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的盆和盆架的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2為本發(fā)明的盆的底部結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說(shuō)明書(shū)文字能夠據(jù)以實(shí)施。

應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術(shù)語(yǔ)并不配出一個(gè)或多個(gè)其它元件或其組合的存在或添加。需要說(shuō)明的是，下述實(shí)施方案中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法，所述試劑和材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑獲得；在本發(fā)明的描述中，術(shù)語(yǔ)“橫向”、“縱向”、“軸向”、“徑向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“頂”、“底”、“內(nèi)”、“外”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系，僅是為了便于描述本發(fā)明和簡(jiǎn)化描述，并不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作，因此不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。

穿心蓮的最適收獲期為現(xiàn)蕾期至始花期，即出苗后100～120天左右，此時(shí)穿心蓮的生物量積累和內(nèi)酯類(lèi)物質(zhì)的含量積累都逐漸達(dá)到頂峰并保持穩(wěn)定。以下所有實(shí)施例中，對(duì)土壤含水量的控制均無(wú)外界水分的影響，例如雨水等。

<實(shí)施例1>

本發(fā)明的一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的20％(w/w)。

<實(shí)施例2>

本發(fā)明的一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)；然后進(jìn)行干旱處理，即每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的40％(w/w)。

<實(shí)施例3>

本發(fā)明的一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的60％(w/w)。

<實(shí)施例4>

本發(fā)明的一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，如圖1、2所示，在穿心蓮播種、出苗后分別移栽至盆1中，所述盆1為上大下小的結(jié)構(gòu)，其底部沿周向設(shè)有多個(gè)通孔14，盆1外圍從上至下依次設(shè)有多個(gè)透氣單元，每個(gè)透氣單元由多個(gè)條形孔11沿周向均勻分布，相鄰兩個(gè)透氣單元的每個(gè)條形孔11互相平行、交錯(cuò)設(shè)置，盆1內(nèi)壁依次貼附設(shè)有不銹鋼絲網(wǎng)12和紗布層13，紗布層13內(nèi)放置土壤3，其中，每個(gè)條形孔11的長(zhǎng)度為其所在盆1的外圍一圈的總長(zhǎng)度的四分之一，每個(gè)透氣單元由三個(gè)條形孔11組成；所述不銹鋼絲網(wǎng)12由多個(gè)圓形網(wǎng)格交織而成，每個(gè)網(wǎng)格的直徑為1mm。

所述盆1配設(shè)有盆架2，所述盆架2是由鋼筋彎折成的上大下小的架體，包括上層架21、支撐肋22和底座23，上層架21可供盆1放入并將盆1卡設(shè)，底座23為一片體，其中央設(shè)有凸塊231，以支撐卡設(shè)在上層架21的盆1，且凸塊231的橫截面積小于盆1底部的通孔14圍成的圓的面積。

所述盆1上徑為16cm，底徑為10.5cm，高為12cm。

在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的20％(w/w)。

<實(shí)施例5>

本發(fā)明的一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)7天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的20％(w/w)。

<實(shí)施例6>

本發(fā)明的一種利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)20天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的60％(w/w)。

<對(duì)比試驗(yàn)>

當(dāng)土壤含水量低于其飽和含水量的20％時(shí)，土壤處于極度嚴(yán)重干旱狀態(tài)，穿心蓮生長(zhǎng)緩慢，葉子狹小，甚至死亡。

<對(duì)比例1>

在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的80％(w/w)。

<對(duì)比例2>

在穿心蓮出苗后100天后進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，所用土壤中包括壤土、泥炭土、有機(jī)肥，其重量比為3:1:1，且土壤中含有機(jī)碳為4.24mg g^-1，總氮含量為2.01mg g^-1，pH值為6.56，土壤飽和含水量為28.15％(w/w)，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，使得土壤含水量維持在飽和水含量的100％(w/w)。

在干旱處理后，將實(shí)施例1～6及對(duì)比例1和2的穿心蓮取地上和地下部分的全草，在烘箱中60℃烘干，稱重得到總生物量，先將內(nèi)酯成分進(jìn)行提取，然后用高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定全草中的穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量。

內(nèi)酯成分的提取過(guò)程為：取穿心蓮藥材粉末1.0g，精確稱量，置于100mL具塞磨口錐形瓶中，加入甲醇20mL、超聲提取60min、過(guò)濾、棄去濾渣，濾液蒸干用色譜甲醇溶解后轉(zhuǎn)溶至10mL量瓶中定容，過(guò)0.45μm的微孔濾膜，即得。

HPLC測(cè)定時(shí)的色譜條件為：采用迪馬ODS C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱，流動(dòng)相包括A相的甲醇-乙腈(4:1)和B相的0.2％的磷酸水，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm，進(jìn)樣量為10μL，流速為0.8mL min^-1，柱溫為25℃。在此條件下，樣品中對(duì)照品與其他組分能夠達(dá)到基線分離，與相鄰的色譜峰分離度大于1.5，其理論塔板數(shù)不小于5000。測(cè)得的內(nèi)酯含量用兩種方法表示：以毫克/克干重為單位和以毫克/株為單位。

表1列出了收獲期施加干旱處理對(duì)穿心蓮藥材中內(nèi)酯類(lèi)成分含量(以毫克/克干重為單位表示)的影響。

表1

表2收獲期施加干旱處理對(duì)穿心蓮藥材中內(nèi)酯類(lèi)成分含量(以毫克/株為單位表示)

表2

表3列出了收獲期施加干旱處理對(duì)穿心蓮藥材總生物量(總干重)的影響。

表3

由表1、2、3可知，本發(fā)明的利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，得到的穿心蓮全草中穿心蓮內(nèi)酯含量沒(méi)有顯著差距，但脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯的含量均對(duì)比例有顯著增加，特別是實(shí)施例1與對(duì)比例1、2比較得出：以毫克/克干重計(jì)算，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量比對(duì)比例1增加了53％左右，總內(nèi)酯的含量比對(duì)比例1增加了44％左右；以毫克/株計(jì)算，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量比對(duì)比例1了111％左右，總內(nèi)酯的含量比對(duì)比例1增加了99％左右；以毫克/克干重計(jì)算，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量比對(duì)比例2增加了75％左右，總內(nèi)酯的含量比對(duì)比例1增加了54％左右；以毫克/株計(jì)算，脫水穿心蓮內(nèi)酯含量比對(duì)比例1增加了119％左右，總內(nèi)酯的含量比對(duì)比例1增加了95％左右；而總生物量(或總干重)比對(duì)比例1減少了27％左右，總生物量(或總干重)比對(duì)比例2減少了23％左右，此減少量均少于50％，故穿心蓮總生物量的降低在可接受的范圍內(nèi)。

通過(guò)實(shí)施例1、5、6可得，在穿心蓮出苗后100～120天之間進(jìn)行持續(xù)7～20天的干旱處理，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，控制土壤含水量為飽和水含量的20～60％(w/w)之間，可使脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯的含量顯著增加，提升穿心蓮藥材的品質(zhì)。

通過(guò)實(shí)施例1、2、3與對(duì)比例1、2可得，在穿心蓮出苗后100～120天之間進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，使得土壤含水量維持在飽和水含量的20％(w/w)時(shí)，脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯的含量的增值最大。

實(shí)施例4中將穿心蓮移栽至經(jīng)過(guò)特別處理的盆中，能夠使土壤內(nèi)的水分盡快散失，有效干旱，并精確控制加水量等以達(dá)到預(yù)期的土壤含水量，用盆架支撐使之處于懸空狀態(tài)， 有助于促進(jìn)盆底部的空氣流通，使穿心蓮生長(zhǎng)在土壤中的部分處于相同的空氣氛圍內(nèi)，利于土壤含水量的均勻化，同時(shí)從表1、2中數(shù)據(jù)可知，實(shí)施例4中的脫水穿心蓮內(nèi)酯和/或總內(nèi)酯的含量高于實(shí)施例1中的脫水穿心蓮內(nèi)酯和/或總內(nèi)酯的含量。

因此，本發(fā)明在穿心蓮收獲期，即出苗后100～120天之間進(jìn)行持續(xù)7～20天的干旱處理，每天同一時(shí)間對(duì)土壤的含水量進(jìn)行取樣測(cè)定并調(diào)節(jié)，控制土壤含水量為飽和水含量的20～60％(w/w)之間，可使脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯的含量顯著增加，提升穿心蓮藥材的品質(zhì)；尤其是在穿心蓮出苗后100～120天之間進(jìn)行持續(xù)17天的干旱處理，使得土壤含水量維持在飽和水含量的20％(w/w)時(shí)，脫水穿心蓮內(nèi)酯和總內(nèi)酯的含量的增值最大。

本發(fā)明提供的利用收獲期干旱提高穿心蓮藥材中內(nèi)酯含量的方法，操作簡(jiǎn)單、實(shí)用可行，有利于在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中推廣。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)。