本發(fā)明屬農(nóng)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種對(duì)環(huán)境友好的漸狹輪枝菌與蛇床子素的復(fù)配殺蟲劑。
背景技術(shù)：
：漸狹輪枝菌（lecanicilliumattenuatum）是一種蟲生真菌，作為一種活體生物農(nóng)藥，具有不同于化學(xué)殺蟲劑的全新的作用機(jī)理、對(duì)環(huán)境友好的特征，可以作為防治某些對(duì)化學(xué)殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性的害蟲的替代防治藥物，開發(fā)利用漸狹輪枝菌具有重要的經(jīng)濟(jì)意義。漸狹輪枝菌可用于防治蚜蟲、粉虱、植病線蟲等多種重要農(nóng)業(yè)害蟲，具有良好的應(yīng)用前景?？茖W(xué)研究表明，不同地理種群或不同株系的漸狹輪枝菌對(duì)害蟲的毒力存在較大的差異，即使同一株系的漸狹輪枝菌對(duì)不同種類害蟲的毒力也不相同，因此在應(yīng)用真菌進(jìn)行生物防治的過程中針對(duì)不同種類的害蟲經(jīng)常要篩選高毒力菌株。漸狹輪枝菌與其它蟲生真菌一樣，也存在擊倒害蟲時(shí)間長(zhǎng)、殺蟲速度慢、受環(huán)境影響較大等弊端，尤其當(dāng)蟲口密度較大時(shí)，不能及時(shí)地壓低蟲口，挽回?fù)p失。蛇床子素是從傘形科植物蛇床子（cnidiummonnieri）中提取得到的有效成分，其化學(xué)名稱為7-甲氧基-8-(3’-甲基-2’-丁烯基)-1-二氫苯并吡喃酮-2，屬于香豆素類化合物，以觸殺作用為主，對(duì)十字花科蔬菜蚜蟲、粉虱、茶樹茶尺蠖和植病線蟲等害蟲具有較好的防治效果。蛇床子素在農(nóng)作物害蟲防治中具有對(duì)環(huán)境友好、微毒、不易使害蟲產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，是生產(chǎn)無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品優(yōu)先選用的農(nóng)藥品種。漸狹輪枝菌與蛇床子素復(fù)配使用可在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際中顯著減少蛇床子素的用量，延緩害蟲對(duì)蛇床子素抗性產(chǎn)生的進(jìn)程，亞劑量的蛇床子素與漸狹輪枝菌混合也可有效提高真菌殺蟲劑的速效性，同時(shí)保護(hù)了生態(tài)環(huán)境。因此，篩選漸狹輪枝菌和蛇床子素的最佳的復(fù)配比例，將具有重要意義。目前國(guó)內(nèi)外尚未見漸狹輪枝菌和蛇床子素復(fù)配的殺蟲劑的相關(guān)報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種對(duì)環(huán)境友好的漸狹輪枝菌與蛇床子素的復(fù)配殺蟲劑。本發(fā)明另一目的是提供所述復(fù)配殺蟲劑的應(yīng)用。本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：本發(fā)明提供了一種漸狹輪枝菌與蛇床子素的復(fù)配殺蟲劑，由主劑和輔劑組成，按質(zhì)量百分比計(jì)主劑為20～50%，輔劑為50～80%；所述主劑為漸狹輪枝菌和蛇床子素的混合物，漸狹輪枝菌∶蛇床子素質(zhì)量比為50∶1～10。所述的漸狹輪枝菌菌株hnla1306，屬蠟蚧菌屬，分離于中國(guó)海南文昌椰林土壤中，菌株保藏號(hào)為ccmccno.9220，2014年5月8日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏。本專利中的漸狹輪枝菌hnla1306是從眾多同類菌株中篩選出來(lái)、專門用于防治粉虱類害蟲的漸狹輪枝菌優(yōu)勢(shì)種菌株，具有毒力強(qiáng)、殺蟲速度快、對(duì)環(huán)境友好等特點(diǎn)，并獲得了國(guó)家授權(quán)的發(fā)明專利（zl201410255857.8）。為了更好地實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，所述漸狹輪枝菌與蛇床子素的質(zhì)量比優(yōu)選為50∶4～8。作為一種優(yōu)選，所述漸狹輪枝菌為漸狹輪枝菌分生孢子粉。所述輔劑為穩(wěn)定劑、助劑和填料，按質(zhì)量百分比計(jì)，穩(wěn)定劑占復(fù)配殺蟲劑1~10%，助劑占復(fù)配殺蟲劑1~20%，填料占復(fù)配殺蟲劑20~88%。所述穩(wěn)定劑為葡萄糖（粉末）和淀粉中一種或兩種的混合物；所述助劑為洗衣粉、十二烷基磺酸鈉、木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉拉、拉開粉bx、濕潤(rùn)劑t-1004中的一種或兩種以上混合物；所述填料為白炭黑、滑石粉、陶土、硅藻土、高嶺土或粘土。本發(fā)明所述復(fù)配殺蟲劑可以加工成可濕性粉劑。本發(fā)明同時(shí)提供所述復(fù)配殺蟲劑在防治蚜蟲和植病線蟲中的應(yīng)用。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：本發(fā)明使用的菌株是從中國(guó)海南文昌椰林土壤中分離獲得，為中國(guó)本土的菌株，并非從國(guó)外引進(jìn)，能很好地適應(yīng)本地的自然環(huán)境。本發(fā)明適應(yīng)了有機(jī)食品生產(chǎn)的需求，對(duì)環(huán)境無(wú)污染、無(wú)殘留，有利于延緩害蟲抗藥性產(chǎn)生。本發(fā)明復(fù)配殺蟲劑具有顯著的增效作用，對(duì)害蟲的防治效果優(yōu)于單一種藥劑的防治效果，對(duì)蚜蟲和植病線蟲有很好的防治效果。具體實(shí)施方式發(fā)明人通過大量的室內(nèi)篩選試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)漸狹輪枝菌和蛇床子素的混配對(duì)蚜蟲和植病線蟲具有協(xié)同增效作用。為了更好的理解發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容作詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限如此，不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。以下實(shí)施例中所述百分比均為質(zhì)量百分比。所述的漸狹輪枝菌菌株為hnla1306，菌株保藏號(hào)為ccmccno.9220，2014年5月8日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏。實(shí)施例1：針對(duì)蚜蟲的漸狹輪枝菌和蛇床子素混配比例篩選試驗(yàn)對(duì)象為棉蚜（aphisgossypii）四齡成蟲，試驗(yàn)藥劑為漸狹輪枝菌、蛇床子素及漸狹輪枝菌和蛇床子素的混配制劑。漸狹輪枝菌為100億孢子/克的純孢粉，蛇床子素為含量98%的原藥。試驗(yàn)方法參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則》殺蟲劑ny/t1154.9-2008，試驗(yàn)采用噴霧處理法。將系列濃度的漸狹輪枝菌孢子懸浮液、蛇床子素及漸狹輪枝菌和蛇床子素的混配制劑用小型噴霧器噴在帶有棉蚜四齡成蟲的黃瓜葉片上，對(duì)照為無(wú)菌水，自然晾干。每處理為3片葉，每葉100頭若蟲，3次重復(fù)。將植物置于透明的保鮮袋中，再放入25±1℃的光照培養(yǎng)箱中（l∶d=16∶8），第7天記錄死亡的蟲數(shù)。用dps數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各藥劑的lc50，以此來(lái)評(píng)價(jià)供試藥劑的活性?；靹┑墓捕鞠禂?shù)（ctc值）按下列公式計(jì)算：ati=s/m×100式中：ati為混劑實(shí)測(cè)毒力指數(shù)；s為標(biāo)準(zhǔn)殺蟲劑的lc50，單位為mg/l；m為混劑的lc50，單位為mg/l。tti=tia×pa+tib×pb式中：tti為混劑理論毒力指數(shù)；tia為a藥劑毒力指數(shù)；pa為a藥劑在混劑中的百分含量，單位為百分率；tib為b藥劑毒力指數(shù)；pb為b藥劑在混劑中的百分含量，單位為百分率。ctc=ati/tti×100式中：ctc為共毒系數(shù)；ati為混劑實(shí)測(cè)毒力指數(shù)；tti為混劑理論毒力指數(shù)。ctc≥120表現(xiàn)為增效作用；ctc≤80表現(xiàn)為拮抗作用；80<ctc<120表現(xiàn)為相加作用。表1：各單劑及其混劑對(duì)棉蚜四齡成蟲7天的毒力測(cè)定結(jié)果藥劑名稱lc50(mg/l)atitti共毒系數(shù)ctc漸狹輪枝菌(a)15.50100.00--蛇床子素(b)8.73177.55--a∶b=20∶110.16152.56103.69147.13a∶b=10∶17.14217.09107.05202.79a∶b=1∶19.03171.65138.78123.69a∶b=1∶108.24188.11170.50110.33a∶b=1∶208.21188.79173.86108.59結(jié)果如表1所示，室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，漸狹輪枝菌和蛇床子素對(duì)棉蚜四齡成蟲7天的lc50分別為15.50mg/l和8.73mg/l。漸狹輪枝菌∶蛇床子素質(zhì)量比為20∶1至1∶1時(shí)（即漸狹輪枝菌分生孢子個(gè)數(shù)與蛇床子素克數(shù)比為2000～100億∶1時(shí))，共毒系數(shù)（ctc）均大于120，說明各配比均具有增效作用，尤其是漸狹輪枝菌∶蛇床子素質(zhì)量比為10∶1時(shí)（即漸狹輪枝菌分生孢子個(gè)數(shù)與蛇床子素克數(shù)比為1000億∶1時(shí)），共毒系數(shù)（ctc）大于200，增效作用顯著。實(shí)施例2：針對(duì)植病線蟲的漸狹輪枝菌和蛇床子素混配比例篩選試驗(yàn)對(duì)象為南方根結(jié)線蟲（meloidogyneincongnita）二齡幼蟲，試驗(yàn)藥劑為漸狹輪枝菌、蛇床子素及漸狹輪枝菌和蛇床子素的混配制劑。漸狹輪枝菌為100億孢子/克的純孢粉，蛇床子素為含量98%的原藥。試驗(yàn)方法參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則》殺線蟲劑ny/t1833.1-2009，試驗(yàn)采用浸蟲法。用移液器分別吸取3ml的系列濃度的漸狹輪枝菌孢子懸浮液、蛇床子素及漸狹輪枝菌和蛇床子素的混配制劑加入試管中，然后吸取等量線蟲懸浮液（≧100頭線蟲/ml）加入試管內(nèi)，使藥液與線蟲懸浮液充分混勻。用移液器吸取一定體積的上述混合液于多孔生化測(cè)試板的小孔內(nèi)，加蓋，于25℃恒溫培養(yǎng)24h。根據(jù)試驗(yàn)要求和藥劑特點(diǎn)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。每處理4次重復(fù)，并設(shè)不含藥劑的處理作為對(duì)照。從各處理中取1ml混合液在解剖鏡下觀測(cè)線蟲死亡情況，每重復(fù)觀測(cè)線蟲數(shù)應(yīng)不少于100頭，記錄調(diào)查的總蟲數(shù)和死亡線蟲數(shù)。死亡的線蟲僵直，用發(fā)絲針觸碰仍不能彎曲運(yùn)動(dòng)。用dps數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算各藥劑的lc50，以此來(lái)評(píng)價(jià)供試藥劑的活性。混劑的共毒系數(shù)（ctc值）按下列公式計(jì)算：ati=s/m×100式中：ati為混劑實(shí)測(cè)毒力指數(shù)；s為標(biāo)準(zhǔn)殺線蟲劑的lc50，單位為mg/l；m為混劑的lc50，單位為mg/l。tti=tia×pa+tib×pb式中：tti為混劑理論毒力指數(shù)；tia為a藥劑毒力指數(shù)；pa為a藥劑在混劑中的百分含量，單位為百分率；tib為b藥劑毒力指數(shù)；pb為b藥劑在混劑中的百分含量，單位為百分率。ctc=ati/tti×100式中：ctc為共毒系數(shù)；ati為混劑實(shí)測(cè)毒力指數(shù)；tti為混劑理論毒力指數(shù)。ctc≥120表現(xiàn)為增效作用；ctc≤80表現(xiàn)為拮抗作用；80<ctc<120表現(xiàn)為相加作用。表2：各單劑及其混劑對(duì)南方根結(jié)線蟲二齡幼蟲第5天的毒力測(cè)定結(jié)果藥劑名稱lc50(mg/l)atitti共毒系數(shù)ctc漸狹輪枝菌(a)16.10100.00--蛇床子素(b)20.7377.67--a∶b=20∶111.96134.6298.94136.06a∶b=10∶18.12198.2897.97202.38a∶b=1∶112.33130.5888.84146.99a∶b=1∶1014.54110.7379.70138.93a∶b=1∶2015.87101.4578.73128.85結(jié)果如表2所示，室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明，漸狹輪枝菌和蛇床子素對(duì)煙南方根結(jié)線蟲二齡幼蟲第5天的lc50分別為16.10mg/l和20.73mg/l。漸狹輪枝菌∶蛇床子素質(zhì)量比為20∶1至1∶20時(shí)（即漸狹輪枝菌分生孢子個(gè)數(shù)與蛇床子素克數(shù)比為3000～150億∶1～20時(shí))，共毒系數(shù)（ctc）均大于120，說明各配比均具有增效作用，尤其是漸狹輪枝菌∶蛇床子素質(zhì)量比為10∶1時(shí)（即漸狹輪枝菌分生孢子個(gè)數(shù)與蛇床子素克數(shù)比為1500億∶1時(shí)），共毒系數(shù)（ctc）大于200，增效作用顯著。實(shí)施例3：30%漸狹輪枝菌蛇床子素可濕性粉劑及其對(duì)溫室黃瓜上棉蚜的防效漸狹輪枝菌純孢粉（100億孢子/克）27.27%，蛇床子素（98%原藥級(jí)）2.73%，淀粉2%，濕潤(rùn)劑t-10042%、洗衣粉2%、高嶺土補(bǔ)至100%，制得30%漸狹輪枝菌蛇床子素可濕性粉劑。混配制劑加水3000倍稀釋，噴霧防治溫室黃瓜上棉蚜（aphisgossypii），當(dāng)溫室室內(nèi)溫度為25℃，相對(duì)濕度85%時(shí)，7天的害蟲累計(jì)死亡率達(dá)到95.6%。實(shí)施例4：20%漸狹輪枝菌蛇床子素可濕性粉劑及其對(duì)番茄上南方根結(jié)線蟲的防效漸狹輪枝菌純孢粉（100億孢子/克）18.18%，蛇床子素（98%原藥級(jí)）1.82%，淀粉2%，濕潤(rùn)劑t-10042%、洗衣粉2%、白炭黑補(bǔ)至100%，制得20%漸狹輪枝菌蛇床子素可濕性粉劑。混配制劑加水2000倍稀釋，澆灌處理番茄根部土壤，根據(jù)根部癥狀評(píng)定病情指數(shù)，計(jì)算防治效果。試驗(yàn)結(jié)果顯示，45天后20%漸狹輪枝菌蛇床子素可濕性粉劑對(duì)番茄上南方根結(jié)線蟲（meloidogyneincongnita）的防效達(dá)到69.3%。當(dāng)前第1頁(yè)12