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      微生物發(fā)酵產(chǎn)物和化學(xué)試劑構(gòu)成的除草劑組合物的制作方法

      文檔序號(hào):153481閱讀:560來(lái)源:國(guó)知局

      專(zhuān)利名稱(chēng)::微生物發(fā)酵產(chǎn)物和化學(xué)試劑構(gòu)成的除草劑組合物的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      :本發(fā)明涉及一種控制雜草生長(zhǎng)的方法。用化學(xué)除草劑處理過(guò)的雜草再用得自培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基的組分處理,其控制雜草的程度會(huì)高于單獨(dú)用同樣水平的化學(xué)除草劑。廣泛使用化學(xué)除草劑造成了一些因大量化學(xué)試劑傳入環(huán)境中而帶來(lái)的可能不利的生態(tài)效應(yīng)。另外使人擔(dān)擾的是,這些化學(xué)藥品可能危害人和動(dòng)物的健康。特別是對(duì)于那些可能接觸高劑量化學(xué)試劑的農(nóng)工,健康問(wèn)題已引起特別的關(guān)注。在對(duì)環(huán)境或健康出現(xiàn)有害影響之后,便有必要從市面上取締或者嚴(yán)格限制使用某些化學(xué)除草劑。處理化學(xué)除草劑用的容器被嚴(yán)格管理,而這些容器的正確處理方法對(duì)農(nóng)民來(lái)說(shuō)可能很不方便且費(fèi)用過(guò)高。這些容器的處理地點(diǎn)有限,非法的容器處置正在引人關(guān)注。因此,本領(lǐng)域現(xiàn)在需要既能控制寬范圍的雜草品種又能降低現(xiàn)行為此目的使用的除草化學(xué)藥品的用量的組合物和方法。一種開(kāi)發(fā)對(duì)環(huán)境基本上無(wú)害的控制雜草方法的途徑是試圖鑒定和分離出微生物產(chǎn)生的除草物質(zhì)。許多微生物都產(chǎn)生對(duì)雜草有毒的物質(zhì)。這種途徑的依據(jù)是這些天然存在的試劑對(duì)環(huán)境的不利影響要比目前用作除草劑的合成化學(xué)藥品低的多。因此,已致力于鑒定和分離由微生物產(chǎn)生的可用作除草劑的化合物。在這些研究中,所采用的策略一直是鑒定和分離出由微生物產(chǎn)生的對(duì)植物有毒的特殊物質(zhì)。為了開(kāi)發(fā)天然存在的除草劑,對(duì)培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基進(jìn)行了除草效應(yīng)試驗(yàn)。如果該培養(yǎng)基產(chǎn)生了殺傷雜草的征兆,則可在該培養(yǎng)基中鑒和分離有除草作用的的化學(xué)組分。分離和鑒定由微生物產(chǎn)生的除草化合物面臨許多問(wèn)題。鑒定、純化和分離這類(lèi)化合物的方法費(fèi)時(shí)且費(fèi)用高。培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基是很復(fù)雜的混合物,而具有除草活性的化合物可能以極低的濃度存在。如果活性化合物是不穩(wěn)定的,或如果除草作用是由多種組分的協(xié)同作用造成的,則活性在純化過(guò)程中可能喪失。甚至既使在鑒定出活性化合物后,通過(guò)工業(yè)發(fā)酵和純化或其它涉及化學(xué)合成的方法生產(chǎn)商業(yè)用量的這類(lèi)化合物,可能仍需要做相當(dāng)多的努力。也許是因?yàn)榉蛛x得自微生物的除草用化合物難度大且費(fèi)用高,只有幾種由微生物產(chǎn)生的天然產(chǎn)物已發(fā)展到了可能作為商業(yè)除草劑的試驗(yàn)階段。一個(gè)例子是bialaphos,即L-2-氨基-4-[(羥基)(甲基)膦?;鵠-丁基-L-丙氨酰-L-丙氨酸。bialaphos衍生物的合成體glufosinate(IGNITE○)也可用作除草劑。Duke,S.O.的“微生物產(chǎn)生的植物毒素用作除草劑的展望”(Putnam,A.R.和Tang,C.S.(Eds.)“TheScienceofAuelopathy”,NewYork,JohnWiley&amp;Sons,1986,p.287)介紹了從微生物植物毒素中開(kāi)發(fā)除草劑所做的工作,已對(duì)由細(xì)菌和真菌產(chǎn)生的毒素作為可能的除草劑做了試驗(yàn)。第二種用微生物產(chǎn)物控制雜草的手段是用活體微生物本身作為生物除草劑。已開(kāi)發(fā)出的作為生物除草劑的大多數(shù)活體有機(jī)體是真菌(除草劑菌素)。霉菌的植物病原體一般是高度選擇性的。只感染單一品種或窄范圍的植物。所以,除草劑菌素主要用作針對(duì)特殊種類(lèi)雜草的選擇性除草劑。例如,美國(guó)專(zhuān)利3,999,973(Templeton)敘述了用一種毛盤(pán)孢(Clletotrichummalvarum)作為除草劑菌素控制多刺黃花稔(Sidaspi-nosaL.)的方法。尚未開(kāi)發(fā)出作為廣譜除草菌素來(lái)控制多種雜草的真菌。對(duì)于活體真菌用作除草劑的討論,見(jiàn)R.Charudattan的“用病原體的天然和變異的菌株控制雜草”(M.A.Hoy和D.C.Herzog(eds.),“BiologicalControlinAgriculturalIPMSystems”,N.Y.AcademicPress,1985,pp.347-372)和G.E.Templeton的“雜草的生物控制法”(Amer.J.Alter-nativeAgr.3∶69-72(1989))。作為生物除草劑的細(xì)菌植物病原體尚未大量研制出。在以下文獻(xiàn)中介紹了對(duì)控制雜草可能有某些用途的細(xì)菌(Cherrington,C.A.和Elliott,L.F.,IncidenceofinhibitorypseudomonadsinthePacificNort-hwest,“PlantandSoil”101∶159-165(1987);Elliott,L.F.,和Kennedy,A.C.,Effectofdeleteriousrhizoba-cteriaonthegrowthofdownybrom(BromustectrmL.)AgronomyAbstractsp.181(1987);和Kremer,R.J.,Identityandpropertiesofbacteriainhabitingseedsofselectedbroadleafweedseeds,MicrobialEcology14∶29-37(1987)]。盡管用活體微生物作為生物除草劑與用化學(xué)除草劑相比具有潛在的優(yōu)點(diǎn),但也帶來(lái)許多問(wèn)題。在貯存和應(yīng)用過(guò)程中,微生物須保持存活。目標(biāo)雜草的成功感染可能受到環(huán)境條件的不利影響。盡管某些真菌已應(yīng)用于選擇性控制特定雜草,但活性微生物以前未曾用作廣譜除草劑。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)07/601,653介紹了一種用化學(xué)除草劑同細(xì)菌植物病原體結(jié)合控制雜草的方法。該專(zhuān)利申請(qǐng)的有關(guān)內(nèi)容在此援引以供參考。相應(yīng)的PCT申請(qǐng),PCT/US90/05031(申請(qǐng)日1990年9月10日,公開(kāi)日1991年3月21日)(國(guó)際公告號(hào)WO91/013161)也在此援引以供參考?;瘜W(xué)除草劑的作用促進(jìn)了細(xì)菌對(duì)雜草的感染,這使得使用比單獨(dú)用除草劑時(shí)更低水平的除草劑控制廣譜雜草品種成為可能。此外,所控制的雜草種類(lèi)可能多于僅用除草劑所控制的雜草種類(lèi)。本發(fā)明采用了一種不同的策略,它既不用繁復(fù)地分離由微生物產(chǎn)生的特殊毒素,也避免了在大田中用活體微生物作為生物除草劑所固有的一些問(wèn)題。本發(fā)明采用培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基來(lái)增強(qiáng)化學(xué)除草劑的作用,從而使得用低濃度的化學(xué)除草劑成為可能。借助于這種途徑,不需要進(jìn)行亢長(zhǎng)不經(jīng)濟(jì)的方法在條件培養(yǎng)基中分離活性除草因子。本發(fā)明采用用原始的條件培養(yǎng)基,或經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單加工(如濃縮和部分純化)處理過(guò)的條件培養(yǎng)基,從而提供了一種既能有效地控制雜草又能降低施加到環(huán)境中的傳統(tǒng)除草劑用量的經(jīng)濟(jì)而有效的方法。業(yè)已發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基(“條件培養(yǎng)基”)可與化學(xué)除草劑結(jié)合來(lái)控制雜草,其特征在于化學(xué)除草劑和條件培養(yǎng)基的結(jié)合物比單獨(dú)使用除草劑或條件培養(yǎng)基所產(chǎn)生的殺傷度更大。采用這種可有效控制雜草的方法,既不必純化條件培養(yǎng)基,也不必鑒定條件培養(yǎng)基中的植物毒素。用這種方法控制雜草,可以降低傳入環(huán)境中的化學(xué)除草劑的劑量。本發(fā)明克服了先有技術(shù)中存在的問(wèn)題和缺陷,即提供了一種既能控制多種雜草生長(zhǎng)又能降低為達(dá)到該目的而采用的化學(xué)除草劑的劑量的方法。通過(guò)使諸如除草劑之類(lèi)的化學(xué)試劑與在培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基中的發(fā)酵產(chǎn)物相結(jié)合,取得了比單獨(dú)使用同劑量化學(xué)藥品更大的雜草控制程度。因此該方法既可以控制雜草生長(zhǎng),同時(shí)又能降低因使用化學(xué)除草劑而帶來(lái)的工人接觸問(wèn)題、環(huán)境負(fù)擔(dān)問(wèn)題和容器處理問(wèn)題。此外,提供了一種比現(xiàn)行方法更為安全、廉價(jià)和有效的控制多種雜草生長(zhǎng)的一般方法。本發(fā)明包括一種控制雜草的方法,即向雜草施用一種與培養(yǎng)過(guò)微生物的條件培養(yǎng)基結(jié)合的化學(xué)除草劑,其中除草劑的作用由于條件培養(yǎng)基而增強(qiáng),條件培養(yǎng)基有效地增強(qiáng)了化學(xué)除草劑的活性?;瘜W(xué)試劑和條件培養(yǎng)基以一定劑量施用,這樣,雜草的致死或雜草生長(zhǎng)的抑制高于單獨(dú)使用相同劑量的化學(xué)除草劑或條件培養(yǎng)基的情況。本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括一種通過(guò)將化學(xué)除草劑與用某項(xiàng)技術(shù)(如濃縮、過(guò)濾或分餾)處理過(guò)的條件培養(yǎng)基一起施用而控制雜草生長(zhǎng)的方法,其中,雜草生長(zhǎng)的抑制或雜草的致死高于單獨(dú)用相同量的除草劑或處理過(guò)的條件培養(yǎng)基的情況。本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括一種控制雜草以防止或抑制雜草生長(zhǎng)的方法,該方法包括向有雜草種子的土壤施用一種除草劑和一種條件培養(yǎng)基,其中除草劑對(duì)草種的作用通過(guò)條件培養(yǎng)基得以增強(qiáng),條件培養(yǎng)基有效地提高了除草劑的活性,這樣,草種的致死或?qū)τ刹莘N發(fā)芽的雜草的生長(zhǎng)抑制高于單獨(dú)使用相同量的除草劑或條件培養(yǎng)基的情況。本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括一種含化學(xué)除草劑和條件培養(yǎng)基或處理過(guò)的培養(yǎng)基的除草劑組合物,其中所述條件培養(yǎng)基或處理過(guò)的條件培養(yǎng)基的含量應(yīng)足以提高化學(xué)除草劑的活性。本發(fā)明的其它目的和優(yōu)點(diǎn)將在下面的說(shuō)明書(shū)部分以及由說(shuō)明書(shū)體現(xiàn)的部分中得知,或可通過(guò)實(shí)施本發(fā)明而發(fā)現(xiàn)。本發(fā)明的這些目的和優(yōu)點(diǎn)將通過(guò)所附權(quán)利要求中指出的方法和組合物體現(xiàn)和得到。下面的一般性描述用以解釋和說(shuō)明本發(fā)明,而不是限制本發(fā)明。圖1顯示了條件培養(yǎng)基對(duì)以0.06磅/英畝(0.067千克/公頃)施用的sulfosate(羧甲基氨基甲基膦酸三甲基锍)的除草作用的影響。圖2顯示了條件培養(yǎng)基對(duì)以0.125磅/英畝(0.140千克/公頃)施用的sulfosate的除草作用的影響。圖3顯示了條件培養(yǎng)基對(duì)以0.25磅/英畝(0.28千克/公頃)施用的sulfosate的除草作用的影響。在本申請(qǐng)中,為說(shuō)明起見(jiàn),雜草是指在其生長(zhǎng)區(qū)域內(nèi)“任何對(duì)人的活動(dòng)或福利有防礙或干擾的植物”。除草劑(這里亦稱(chēng)作化學(xué)除草劑)是指“用于控制、抑制或殺死植物、或嚴(yán)重破壞其正常生長(zhǎng)過(guò)程的化學(xué)藥品”(HerbicideHandbookoftheWeedSocityofAmerica,F(xiàn)ifthEdition(1983),xxi-xxiv)。這里所用的培養(yǎng)基是指為支持微生物生長(zhǎng)和生存而制備的組合物?!皸l件培養(yǎng)基”是指任何已培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基。培養(yǎng)過(guò)微生物的培養(yǎng)基有時(shí)稱(chēng)作“廢培養(yǎng)基”或“廢肉湯”。本文中使用了術(shù)語(yǔ)“條件培養(yǎng)基”,這是因?yàn)槠錆撛诘囊饬x類(lèi)似于其它上下文中使用的這一術(shù)語(yǔ),例如真核細(xì)胞的組織培養(yǎng),其中強(qiáng)調(diào)了培養(yǎng)的生物學(xué)特性由于培養(yǎng)基中細(xì)胞的生長(zhǎng)而改變了。這里所用的術(shù)語(yǔ)“處理過(guò)的條件培養(yǎng)基”是指用改變其組成的處理方式處理?xiàng)l件培養(yǎng)基而得到的物質(zhì),該處理產(chǎn)物是一種由微生物與培養(yǎng)基相互作用而得到的組分或這類(lèi)組分的衍生物的相當(dāng)復(fù)雜的混合物。這類(lèi)處理方式可包括(但不限于)濃縮、干燥、凍干、過(guò)濾、超濾、透析、離心除沉淀、巴氏滅菌、冷凍、沸騰、調(diào)節(jié)pH和加入防腐劑、穩(wěn)定劑、殺微生物試劑之類(lèi)的化學(xué)試劑。該定義還包括利用包括(但不限于)濃縮、萃取、分餾和沉淀法進(jìn)行的部分純化。術(shù)語(yǔ)“處理過(guò)的條件培養(yǎng)基”不包括由條件培養(yǎng)基分離出的高度純化的化合物。處理之后,所得的處理過(guò)的條件培養(yǎng)基保持條件培養(yǎng)基的類(lèi)型,一般性術(shù)語(yǔ)“條件培養(yǎng)基”包括處理過(guò)的條件培養(yǎng)基。為了實(shí)施本發(fā)明,將化學(xué)除草劑和條件培養(yǎng)基(可以是處理過(guò)的條件培養(yǎng)基)局部地施加到雜草或含草種的土壤上?;瘜W(xué)試劑和條件培養(yǎng)基以公知的方法施用,如噴霧法或土壤浸漬。所述除草劑的應(yīng)用可以在出苗前、出苗后或作為非選擇性接觸的除草劑。在下述實(shí)施方案中,施藥是在出苗后。對(duì)于出苗前施藥,在草種發(fā)芽之前或在生長(zhǎng)植物破土前的發(fā)芽早期,將除草劑和條件培養(yǎng)基施加到草種或雜草處。本發(fā)明可用于控制農(nóng)業(yè)環(huán)境中的雜草,也可用于非農(nóng)業(yè)場(chǎng)合。舉例來(lái)說(shuō),本發(fā)明可用于控制草地中的雜草,和作為接觸式生物除草劑用于路邊草木管理?;瘜W(xué)除草劑和條件培養(yǎng)基一般是同時(shí)施用的,而且通常是以一種單一混合物的形式施用。但是,化學(xué)除草劑和條件培養(yǎng)基也可從分別的容器中施用,而且可以相繼施用。實(shí)施本發(fā)明的組合物可以配制成多種形式,包括流動(dòng)劑、干性流動(dòng)劑、水分散性顆粒或乳油。雖然以下各實(shí)施方案只用了一種除草劑和一種條件培養(yǎng)基,但培養(yǎng)過(guò)不同種類(lèi)或病原(Pathovars)的微生物的培養(yǎng)基混合物也可用于實(shí)施本發(fā)明。本發(fā)明也可通過(guò)使用不同化學(xué)試劑的混合與條件培養(yǎng)基結(jié)合得以實(shí)施。此外,本發(fā)明可與另外一種生物除草劑結(jié)合而實(shí)施,即一種微生物的條件培養(yǎng)基可與一種不同的有生物除草劑作用的微生物一起使用。可以使用不同的化學(xué)除草劑來(lái)實(shí)施本發(fā)明。下面敘述的實(shí)施方案使用了sulfosate、glyphosate(草甘膦)、glufosinate和對(duì)草快作為化學(xué)試劑??捎糜趯?shí)施本發(fā)明的另外一些化學(xué)除草劑列于表2??捎糜趯?shí)施本發(fā)明的其它除草劑的例子在以下文獻(xiàn)中作了說(shuō)明(HerbicideHandbookoftheWeedSocietyofAmerica,SixthEd.(1989),F(xiàn)armChemicalsHandbook”,Willoughby,Ohio∶MeisterPublishingCo.,(1990),和H.J.Lorenzini和L.E.Jeffrey的“WeedsoftheUnitedStatesandTheirControl,N.Y.∶VanNostrand1987,Table1.9)。盡管已知化學(xué)除草劑可用于實(shí)施本發(fā)明,但應(yīng)該理解,不符合除草劑常規(guī)定義的化學(xué)藥品也可使用。例如,目前不單獨(dú)用作除草劑的植物激素類(lèi)似物當(dāng)與條件培養(yǎng)基或處理過(guò)的條件培養(yǎng)基一起施用時(shí)也可以有效地控制雜草的生長(zhǎng)。這樣的化學(xué)試劑的實(shí)例包括植物激素,如吲哚基乙酸衍生物,還包括輔酶因子、克生化合物,以及氨基酸、核酸堿基和纖維素的類(lèi)似物??捎糜谡{(diào)節(jié)其培養(yǎng)基的微生物有細(xì)菌和真菌。本發(fā)明可利用天然存在的微生物實(shí)施,這些微生物可從公共保藏處容易地得到,或利用本領(lǐng)域公知技術(shù)從土壤、植物、空氣、水、昆蟲(chóng)等中分離。不用說(shuō),也可以改良微生物,以產(chǎn)生更有效的條件培養(yǎng)基??墒褂靡阎夹g(shù)分離或選擇天然或誘導(dǎo)的突變體,以得到產(chǎn)生更有效的條件培養(yǎng)基的細(xì)菌。這也可通過(guò)用遺傳工程和重組DNA的已知技術(shù)進(jìn)行。例如,可采用遺傳工程的方法,將產(chǎn)生已知植物毒素的基因插入到通過(guò)產(chǎn)生其它可能未知的毒素而調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的微生物中??捎酶鞣N各樣的細(xì)菌實(shí)施本發(fā)明。已發(fā)現(xiàn)一種煙草丁香假單胞菌(Pseudomonassyringaepv.tabaci)能有效地用于此目的。也可使用其它已知能產(chǎn)生植物毒素的品種。可用于實(shí)施本發(fā)明的植物病原性細(xì)菌的一些實(shí)例列于表3A。其它植物病原性細(xì)菌可選自幾種原核生物,包括(但不限于)假單胞菌屬(Pseudomonas)、黃桿菌屬(Xanthomonas)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)、歐氏植病桿菌屬(Erwinia)、棒狀桿菌屬(Corynebaterium)、鏈霉菌屬(Streptomyces)和諾卡氏菌屬(Nocardia)(見(jiàn)N.W.Schaad,“Howphytopatyogenicbacteriaareclassified”,inM.S.MountandG.H.Lacyleds.)PhytopathogenicProkaryotes,Vol.l,N.Y.,AcademicPress,1982,pp.19-29)。應(yīng)該理解,通常不會(huì)對(duì)植物造成傷害的細(xì)菌也可能產(chǎn)生出可增強(qiáng)化學(xué)除草劑作用的條件培養(yǎng)基。例如參見(jiàn)表3B??蓪?shí)施本發(fā)明的一些真菌列于表4。植物病原性真菌(表4A)和一般不是植物病原性的真菌(表4B)都可使用??墒褂枚喔魇礁鳂拥囊后w培養(yǎng)基。適于生長(zhǎng)各種微生物的培養(yǎng)基組合物是本領(lǐng)域公知的,工業(yè)規(guī)模培養(yǎng)微生物的方法和液體培養(yǎng)基也是公知的(參見(jiàn),例如Demain和N.A.Solomon(Eds.)的“ManualofIndustrialMicrobiologyandBiotechnology”,Washington,D.C.AmercanSocietyforMicrobiology,1986)。一般來(lái)說(shuō),任何支持微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基都可通過(guò)培養(yǎng)微生物而成為條件培養(yǎng)基。雖然用液體培養(yǎng)基實(shí)施本發(fā)明特別方便,但原則上也可使用粉狀固體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基的提取物。可使用一種特定的微生物調(diào)節(jié)各種不同的培養(yǎng)基組合物,所有這些培養(yǎng)基組合物都會(huì)有效地增強(qiáng)除草劑的活性。一種特定的培養(yǎng)基是否比其它培養(yǎng)基優(yōu)越,可通過(guò)在溫室或大田條件下進(jìn)行試驗(yàn)而容易地確定。其它參數(shù)諸如除草劑用量、溫度、培養(yǎng)時(shí)間、通氣程度等等,其優(yōu)選也可通過(guò)本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員的簡(jiǎn)單的比較試驗(yàn)而確定。在某些情況下,可采用本領(lǐng)域已知的有關(guān)具體微生物的信息改進(jìn)培養(yǎng)基組合物以增加條件培養(yǎng)基的效力。例如,在下面實(shí)施例1的實(shí)施方案中,培養(yǎng)基中補(bǔ)充了鋅,據(jù)報(bào)道鋅可提高煙草丁香假單胞菌(Pseudomonassyringaepv.tabaci)的毒素生產(chǎn)率。(見(jiàn)Durbin,R.D.和Uchytil,T.F.的“TheroleofZincinRegulatingTabtoxinProduction”,Experientia41∶136-37(1985))。但是,隨后的實(shí)驗(yàn)又表明,在培養(yǎng)基中加入鋅對(duì)于用作產(chǎn)生增強(qiáng)除草劑作用的條件培養(yǎng)基的來(lái)說(shuō)并不是必要的。所以,應(yīng)該理解,本發(fā)明可以在培養(yǎng)基中存在或沒(méi)有毒素增強(qiáng)量的鋅的條件下實(shí)施。在某些情況下,也可以改進(jìn)生長(zhǎng)條件以進(jìn)一步提高條件培養(yǎng)基的效力。例如,美國(guó)專(zhuān)利4,273,571(Berg)中公開(kāi)了在有氧條件下除草化合物的生產(chǎn)。一般來(lái)說(shuō),生產(chǎn)條件培養(yǎng)基的最佳條件將依據(jù)不同的有機(jī)物和培養(yǎng)基而變化。這些條件可通過(guò)溫室或田間條件下的常規(guī)比較試驗(yàn)而確定。在培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)微生物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)之后,活體微生物必須被殺死或從培養(yǎng)基中除去。這些微生物可通過(guò)公知的方法(例如沉淀法和超濾法)除去。另外,也可通過(guò)諸如加熱、輻射或使用殺細(xì)菌或殺真菌化學(xué)試劑之類(lèi)的公知方法殺死這些有機(jī)體。雖然某些化學(xué)除草劑對(duì)特定的微生物無(wú)毒,但也可以使用其它除草劑來(lái)殺死培養(yǎng)基中的微生物。例如美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)07/601,653公開(kāi)了除草劑對(duì)草快在一小時(shí)內(nèi)可有效地殺死煙草丁香假單胞菌(Pseudomonassyringaepv.tabaci)。因此,利用除草劑和微生物的特定組合,提供了一種通過(guò)在施藥制備中混合除草劑與培養(yǎng)基而消除活體細(xì)菌的方便方法。在細(xì)菌被殺死之后,可利用沉淀、過(guò)濾或其它方法從條件培養(yǎng)基中除去死細(xì)菌。但是,本發(fā)明也可不從條件培養(yǎng)基中除去死細(xì)菌而實(shí)施。除了除去微生物之外,也可以用其它方式處理?xiàng)l件培養(yǎng)基以便使用方便或提高其效力。這類(lèi)處理方式包括(但不限于)濃縮、干燥、凍干、過(guò)濾、超濾、透析、離心除沉淀、巴氏滅菌、冰凍、沸騰、調(diào)節(jié)pH、以及加入化學(xué)藥品(如防腐劑、穩(wěn)定劑和殺死微生物的試劑)。這樣的處理還包括利用包括(但不限于)濃縮、萃取、分餾和沉淀的部分純化。條件培養(yǎng)基中的組分可通過(guò)各種機(jī)理來(lái)提高化學(xué)除草劑的作用。微生物可產(chǎn)生已知的或未知的植物毒素,此外,培養(yǎng)基中的毒素混合體可協(xié)同作用,而且培養(yǎng)基中的有效組分不一定是毒素。培養(yǎng)基中的化合物(而不是植物毒素)可以與除草劑有協(xié)同作用,而且還可以與培養(yǎng)基中的其它組分有協(xié)同作用。例如,美國(guó)專(zhuān)利4,762,547(Iwasaki等人)介紹了通過(guò)酯酶組合提高除草作用的方法。他們提出這些酯酶破壞了植物的蠟狀表層,促進(jìn)了除草劑對(duì)植物的滲透作用。美國(guó)專(zhuān)利4,436,547(Sampson)敘述了包括碳水化合物、脂肪酸和維生素在內(nèi)的各種增加生長(zhǎng)的添加劑可以增加除草劑的作用。多種條件培養(yǎng)基混合物(其中各培養(yǎng)基通過(guò)不同微生物而調(diào)節(jié))可能是有利的。在不同的條件培養(yǎng)基通過(guò)涉及不同發(fā)酵產(chǎn)物的不同的作用機(jī)理促進(jìn)除草劑作用的情況下,這類(lèi)混合物可能特別有效。在使用這類(lèi)混合物時(shí),使用濃縮了的處理過(guò)的培養(yǎng)基可能是有利的。本發(fā)明的組合物也可含有助劑,如表面活性劑和懸浮劑。可使用的助劑的例子有鋪展劑,如ORTHO-77、ATTAGEL-40和X-77,以及有機(jī)硅氧烷,如SILWETTL-77、SILWETT-07607、X2-5309(DowCorning)和X2-5395(DowCorning)。可用作助劑的作物油有SureCropAgir,CropSurf和CIDE-KICK。其它可使用的助劑有SOY-DEX、AGRI-DEX、TRIONAG-98、STEROX或反演乳劑。在實(shí)施這種寬范圍的控制雜草的方法中,應(yīng)該理解化學(xué)試劑和條件培養(yǎng)基的每種特定組合對(duì)控制特定的雜草品種不一定有效。這與寬范圍的化學(xué)除草劑的行為一致,一般來(lái)說(shuō),寬范圍的化學(xué)除草劑也很少(如果有的話(huà))能對(duì)控制所有類(lèi)型的雜草都有效果。除草劑和條件培養(yǎng)基或處理過(guò)的條件培養(yǎng)基的特定組合是否對(duì)特定的應(yīng)用有效,可容易地由本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員確定,而不用通過(guò)在溫室或田間進(jìn)行試驗(yàn)。實(shí)施例2-4說(shuō)明了用以測(cè)定給定的條件培養(yǎng)基和除草劑組合體的效力及最適參數(shù)(如除草劑的施用率)而進(jìn)行的試驗(yàn)類(lèi)型。某些原則可指導(dǎo)參數(shù)的最優(yōu)化。首先,當(dāng)除草劑以單獨(dú)使用時(shí)對(duì)雜草能產(chǎn)生弱的或臨界效應(yīng)的水平施藥時(shí),條件培養(yǎng)基的作用最為明顯。在特定劑量的除草劑已產(chǎn)生高的雜草控制程度時(shí),可能看不出加入條件培養(yǎng)基產(chǎn)生的額外作用。當(dāng)雜草對(duì)所用除草劑劑量表現(xiàn)出部分響應(yīng)時(shí),控制較為明顯。下面的實(shí)施例2-5說(shuō)明了對(duì)于施用三種除草劑(sulfosate,草甘膦和glufosinate)的優(yōu)選水平。實(shí)施例2-3顯示了一種除草劑sulfosate的濃度變化的影響。其次,本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員將會(huì)意識(shí)到,盡管化學(xué)藥品的施用率可有利地低于通常的田間施用率(下面的實(shí)施例2中的施用率為推薦的sulfo-sate田間施用率的1/8),但某些除草劑可能會(huì)因?yàn)楹刻投鴽](méi)有作用。但是,在特定的應(yīng)用中,可以進(jìn)一步降低含量。本發(fā)明的實(shí)施使進(jìn)一步降低所用化學(xué)除草劑的劑量成為可能,所采取的手段是使用戶(hù)選擇更有效的出苗后施藥的除草劑代替?zhèn)鹘y(tǒng)的預(yù)防性的出苗前施用的除草劑。根據(jù)需要選擇性地施用與條件培養(yǎng)基結(jié)合使用的出苗后化學(xué)除草劑,提供了另一種防止出苗前施用除草劑的方法。這種方法過(guò)去一般尚未認(rèn)可,因?yàn)榇蠖鄶?shù)出苗后用除草劑成本高且范圍有限。條件培養(yǎng)基的組分被認(rèn)為是天然存在的物質(zhì),所以,可以預(yù)料它們是可以生物降解的,不會(huì)產(chǎn)生長(zhǎng)期的破壞作用。本發(fā)明的實(shí)施還有降低與處理盛化學(xué)除草劑容器有關(guān)的成本的優(yōu)點(diǎn)。這種成本的降低可由所用化學(xué)除草劑總量的降低而實(shí)現(xiàn)。以下實(shí)施例用以說(shuō)明優(yōu)選方案,而不是限制本發(fā)明,本發(fā)明的真正的范圍由所附的權(quán)利要求書(shū)限定。實(shí)施例1介紹了條件培養(yǎng)基的制備。實(shí)施例1用一種煙草丁香假單胞菌(Pseudomonassyringaepv.tabaci,一種細(xì)菌)的病原體制備條件培養(yǎng)基。所用的煙草丁香假單胞菌(Pseudomonassyringaepv.tabaci)的菌株是由馬里蘭大學(xué)植物系(CollegePark,Movryland)的ArvydasGrybauskas博士從馬里蘭的一種煙草植株中分離出的。該菌株已保藏于美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,(12301ParklawnDrive,Rockville,Maryland20852)(ATCC#55090)。定期使用煙草植株(NicotianiatabacumL.)證實(shí)該菌株的毒性。將所述細(xì)菌培養(yǎng)在補(bǔ)充了鋅的改進(jìn)的King′sB培養(yǎng)基(表1)的液體培養(yǎng)物中。將這些細(xì)胞在28℃下培養(yǎng)在180-190r.p.m.的旋轉(zhuǎn)搖床(NewBrunswickG10gyroshaber)中的2升Erlenmeyer燒瓶中約48-64小時(shí),直至細(xì)胞的濃度達(dá)到約109CFU/ml。培養(yǎng)完后,用帶有GSA轉(zhuǎn)頭的SorvalRC5C離心機(jī)在8000r.p.m.下將培養(yǎng)基于10℃離心8分鐘,以除去這些細(xì)胞。剩下懸浮在上清液中的細(xì)胞。通過(guò)0.2μm的微過(guò)濾器而除去。實(shí)施例2說(shuō)明了條件培養(yǎng)基與化學(xué)除草劑sulfosate結(jié)合的效果。實(shí)施例2在溫室條件下,測(cè)定低含量的除草劑sulfosate(TOUCHDOWN)與用實(shí)例1中介紹的煙草丁香假單胞菌(PseudomonasSyringaepv.tabaci)調(diào)節(jié)的培養(yǎng)基結(jié)合對(duì)植株的作用。Sulfosate(羧甲基氨基甲基膦酸三甲基锍,見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利4,315,765)得自美國(guó)有限公司農(nóng)業(yè)產(chǎn)品部(ICI.Americas,Inc.,AgriculturalProductsDivisibn,Wilming-ton,Delaware)。Sulfsate的施藥量為0.06磅/英畝(0.067kg/ha),它是推薦的最低田間施藥率的1/8。以磅/英畝(kg/ha)表示的施藥率是指每英畝(公頃)活性成分的磅數(shù)(千克)。上述除草劑的除草效果用九種不同的雜草進(jìn)行評(píng)估。試驗(yàn)的寬葉雜草是朝顏花(Ipomeapurpurea和I.hederacea的混合雜草)、絨毛葉(Abutilontheophrasti)、蒼耳屬植物(Xanthiumstrumarium)、紅根藜(Amatanthusretroflexus)和曼陀羅(Daturastramonium)。試驗(yàn)的草類(lèi)是稗子(Echinochloacrusgalli)、黃狐尾(Setariaglauca)、石茅高梁(Sorghumhalepense)和秋黍(Panicumdichotomiflorum)。選擇這些雜草是因?yàn)樗鼈冊(cè)诔膳抛魑镏杏薪?jīng)濟(jì)重要性并且代表了植物族譜。也對(duì)兩種主要作物-谷物和大豆進(jìn)行了除草效果試驗(yàn)。這兩種植物當(dāng)出現(xiàn)在種植其它作用的田間時(shí)都可能成為雜草。在普通溫室條件下,將籽草培育在溫室內(nèi)的4-英寸(10.2cm)的盆中。比較四種處理情況單獨(dú)用水,單獨(dú)用sulfosate,單獨(dú)用條件培養(yǎng)基,或sulfosate加條件培養(yǎng)基。sulfosate的施藥率為0.06磅/英畝(0.067kg/ha),它是推薦的田間最低施藥率的1/8。為使處理方式標(biāo)準(zhǔn)化,所有溶液都使用ModelSB8SprayBooth(manufaxturdbyDeVriesManufacturing,Hollandale,Minnesota,購(gòu)于R&amp;DSprayers,Inc(Opelousas,Louisiana)]噴灑在雜草上。該裝置能高重復(fù)性噴灑試驗(yàn)溶液。將噴霧器校定在噴霧25加侖/英畝(234升/公傾),噴嘴壓力為23-25磅/平方英寸(1.6-1.7巴)。噴嘴移動(dòng)速率為3.0英里/小時(shí)(4.83km/hr)。所有溶液(包括水的對(duì)照處理)都含有0.25%(V/V)ORTHOX-77作為助劑。X-77是由ChevronChemical公司出售的一種鋪展劑。根據(jù)廠商說(shuō)明,X-77中的活性劑是烷芳基聚氧氯乙二醇,游離脂肪酸和異丙醇。試驗(yàn)設(shè)計(jì)為隨機(jī)的完整方塊,每次處理至少重復(fù)兩次,每次重復(fù)兩種植物。根據(jù)文獻(xiàn)“ResearchMethodsinWeedScience”,3rdEdition,SouthernWeedScienreSociety,1986,p7)介紹的方法,每周殺傷情況以0-100定級(jí),0為無(wú)殺傷,100為株植死亡。這類(lèi)定級(jí)評(píng)估法廣泛用于評(píng)估除草劑對(duì)雜草的作用。結(jié)果在表5A中給出,并圖示于圖1中。在圖1中各縮略語(yǔ)意義如下MG=朝顏花;VL=絨毛葉;CBUR=蒼耳屬植物;JW=曼陀羅;BG=稗子;YF=黃狐尾;FP=秋黍;JG=石茅高梁;SOY=大豆;CURN=谷和物。實(shí)心豎條表示單獨(dú)用Sulfosate的效果,交叉陰影豎條表示Sulfo-sate加條件培養(yǎng)基的效果,對(duì)角線陰影豎條表示單獨(dú)用條件培養(yǎng)基的效果。當(dāng)無(wú)這樣的豎條時(shí),表示單獨(dú)用條件培養(yǎng)基不產(chǎn)生可測(cè)的植物殺傷。圖1中單獨(dú)用Sulfosate處理的殺傷度%指標(biāo)是七次試驗(yàn)的平均值Sulfosate加條件培養(yǎng)基的組合體的殺傷度%是四次試驗(yàn)的平均值(這四次試驗(yàn)包括了處理之后的幾個(gè)不同的天數(shù))。單獨(dú)用水基本上不產(chǎn)生植物殺傷(未示出數(shù)據(jù))。單獨(dú)用條件培養(yǎng)基也不造成或只造成輕微的殺傷(表5中未示出數(shù)據(jù))??梢钥闯觯c單獨(dú)用除草劑相比,對(duì)于所有草類(lèi),也包括朝顏花、藜、大豆和谷物,加入條件培養(yǎng)基基本上提高了殺傷度%指標(biāo)。對(duì)于蒼耳屬植物和曼陀羅,同樣可見(jiàn)殺傷度有些提高。對(duì)于絨毛葉沒(méi)什么效果。所以,與單獨(dú)用Sulfosate相比,加入條件培養(yǎng)基對(duì)于幾乎所有被試驗(yàn)的雜草都提高了殺傷度。實(shí)施例3示出了條件培養(yǎng)基與高劑量的Sulfoste(0.125和0.25磅/英畝)(0.14和0.28kg/ha)結(jié)合的效果。實(shí)施例3測(cè)定條件培養(yǎng)基對(duì)于施藥率為0.125和0.25磅/英畝(0.14和0.28kg/ha)的Sulfosate的影響。按照例1介紹的方法制備條件培養(yǎng)基。按照例2介紹的方法進(jìn)行試驗(yàn)并評(píng)估植物殺傷度。表5B和圖2示出了條件培養(yǎng)基對(duì)施藥率為0.125磅/英畝(0.14kg/ha)(它是推薦的最低田間施藥率的1/4)的sulfosate的影響。圖2中的符號(hào)與圖1相同。條件培養(yǎng)基提高了所有試驗(yàn)植物的殺傷指標(biāo)。對(duì)于那些單獨(dú)用Sulfosate產(chǎn)生殺傷度%為30%或以下的植物,提高程度為最大。在圖2中,單獨(dú)用Sulfosate的值是五次試驗(yàn)的平均值,用Sulfosate加條件培養(yǎng)基的值是四次試驗(yàn)的平均值。表5c和圖3示出了條件培養(yǎng)基對(duì)施藥率為0.25磅/英畝(0.28kg/ha)(推薦的最低田間施藥率的一半)的sulfosate的影響。圖3中的符號(hào)與圖1相同。對(duì)于某些植物(最值得注意的是稗子,黃狐尾和秋黍),條件培養(yǎng)基提高了殺傷度。對(duì)于其它植物,單獨(dú)用sulfosate已產(chǎn)生了高殺傷度,在此情況下,加入條件培養(yǎng)基只產(chǎn)生少許提高或無(wú)提高。在圖3中,單獨(dú)用sulfosate的值是兩次試驗(yàn)的平均值,用sulfosate加條件培養(yǎng)基的值是由一次試驗(yàn)得到的。這些結(jié)果表明向化學(xué)除草劑中加入條件培養(yǎng)基在一定的除草劑濃度范圍內(nèi)可提高對(duì)雜草的殺傷度。與單獨(dú)用除草劑的效果相比,當(dāng)除草劑含量選在可產(chǎn)生可測(cè)的但單獨(dú)使用時(shí)殺傷度很低時(shí),殺傷度的提高為最大。實(shí)施例4示出了條件培養(yǎng)基與另一種除草劑甘膦結(jié)合的效果。實(shí)施例4低濃度的草甘膦(ROUNDUP)與條件培養(yǎng)基結(jié)合對(duì)植物的影響。草甘膦以?xún)煞N施藥率,即0.06磅/英畝(0.067kg/ha)和0.125磅/英畝(0.14kg/ha)進(jìn)行試驗(yàn)。草甘膦在田間的推薦施藥率為0.5-4.0磅/英畝(0.56-4.48kg/ha)。按實(shí)例1介紹的方法制備由Pseudomonassyringaepv.tabaci得到的條件培養(yǎng)基。按實(shí)例2介紹的方法進(jìn)行試驗(yàn)和評(píng)估值物殺傷度。表6示出了結(jié)果。在上述兩個(gè)施藥率下,條件培養(yǎng)基提高了所有試驗(yàn)植物的殺傷度%。在較低施藥率(0.06磅/英畝)(0.067kg/ha)下,效果特別顯著。實(shí)施例5示出了條件培養(yǎng)基與另一種除草劑glufosinate結(jié)合的作用。實(shí)施例5測(cè)定條件培養(yǎng)基對(duì)于施藥率為0.06和0.125磅/英畝(0.067和0.14kg/ha)的glufosinate(IGNITE)作用的影響。推薦的最低工ufosinate田間施藥率為0.5磅/英畝(0.56kg/ha)。按實(shí)例1的介紹的方法制備條件培養(yǎng)基,并按實(shí)例2介紹的方法進(jìn)行試驗(yàn)。所選濃度的glufosinate在寬葉草中產(chǎn)生很高的殺傷度,對(duì)于表7所列的那些植物,測(cè)不出條件培養(yǎng)基的額外效果。條件培養(yǎng)基提高了glufosinate對(duì)草類(lèi)的作用。實(shí)施例6示出了條件培養(yǎng)基與其它一些除草劑結(jié)合的效果。實(shí)施例6按實(shí)例1介紹的方法制備由Pseudomonassyrinagepv.tabaci制得的條件培養(yǎng)基。按實(shí)例2介紹的方法進(jìn)行試驗(yàn)和評(píng)估植物殺傷度。在初步的試驗(yàn)中,條件培養(yǎng)基提高了對(duì)草快(施藥率為0.015-0.125磅/英畝)對(duì)草類(lèi)的作用,但對(duì)寬葉草或作物(大豆和谷物)的殺傷未產(chǎn)生一致性提高。在試驗(yàn)條件下,用Pseudomonassyrinagepv.tabaci制得的條件培養(yǎng)基對(duì)敵草平(0.06和0.125磅/英畝)的除草作用沒(méi)有提高。以下實(shí)施例7-28示出了用其它種類(lèi)的微生物條件化的培養(yǎng)基和使用另外的除草劑的效果。用例1介紹的方法用不同的微生物條件化King′sB培養(yǎng)基。在這些試驗(yàn)中,培養(yǎng)基補(bǔ)充了鋅,盡管隨后的試驗(yàn)提出鋅或許對(duì)產(chǎn)生提高除草劑效力的條件培養(yǎng)基是不必要的。為測(cè)定單獨(dú)用除草劑的效果,將除草劑溶于水中。為測(cè)定除草劑和條件培養(yǎng)基的結(jié)合效果,將除草劑溶于未稀釋的條件培養(yǎng)基中。在不同的試驗(yàn)中使用不同的培養(yǎng)基。被測(cè)除草劑分成三大類(lèi)非選擇性的廣譜除草劑包括草甘膦,sulfosate和imazapyr(ARSENAL,AmericanCyanamid)。草類(lèi)的選擇性除草劑有fluazifop(FUSILADE2000,ICIAmericas,Inc)和sethoxydim(POAST,BASF公司)。寬葉雜草的選擇性除草劑有chlorimuron(CLASSIC,E.I.DuPontDeNemoursandCo.),敵草平(BANVEL,SandozCropProtectionCorp.),苯達(dá)松(BASAGRAN,BASF公司),fomesafen(REFLEX,ICIAmericas有限公司)和imazethapyr(PURSUIT,AmericanCyanamid)。這些除草劑的田間推薦施藥率為flazifop-0.063磅/英畝(0.07kg/ha);Sethoxydim-0.1磅/英畝(0.12kg/ha);imazapyr-0.5磅/英畝(0.55kg/ha);imazethapyr-0.03磅/英畝(0.3g/ha);苯達(dá)松-0.75磅/英畝(0.84kg/ha);敵草平-0.1磅/英畝(0.12kg/ha);chlorimuron-0.5oz/英畝(8g/ha);fomesafen-0.125磅/英畝(0.14kg/ha)。表中除非另外注明,X-77*(0.25%)作為助劑加入。在少數(shù)試驗(yàn)中,助劑是作物油濃縮物(“C.O.C”;CropSurfSprayO.L,UniversalCooperatives,Inc.,7801MetroParkway,Minneapolis,MN55440)。按實(shí)例1和2介紹的一般方法進(jìn)行試驗(yàn)。將單獨(dú)用除草劑對(duì)一批雜草的作用效果與除草劑加條件培養(yǎng)基的效果進(jìn)行比較。被測(cè)的寬葉草有朝顏花、絨毛葉、蒼耳屬植物、莧屬植物、曼陀羅、芥子(BrassicaRaber)、藜(Chenopodiumalbum)和西紅柿(Lycopersiconesculentum)。雖然西紅柿不是雜草,但它被看作是寬葉草反應(yīng)的代表,有時(shí)用于篩選除草劑。所用的草類(lèi)包括稗子、黃狐尾、秋黍、石茅高梁和大馬唐(Digitan′asanguinalis)。所有這些雜草不是在每次試驗(yàn)中都測(cè)試,在每次試驗(yàn)中所用的具體雜草示于下面的表中。另外,測(cè)定了某些培養(yǎng)基對(duì)不同的其它雜草的作用。在處理后13-18天之間評(píng)定植物殺傷百分比。從除草劑與條件培養(yǎng)基結(jié)合使用得到殺傷百分比減去單獨(dú)用除草劑得到的殺傷百分比建立了表8-27。例如,正數(shù)表示條件培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的提高。在表8-27中,用以下符號(hào)代表結(jié)果+=提高1-10%的殺傷度++=提高11-20%的殺傷度+++=提高21-30%的殺傷度++++=提高31-40%的殺傷度+++++=提高41%或以上的殺傷度因此,如果單獨(dú)用除草劑產(chǎn)生30%的殺傷度,而除草劑加條件培養(yǎng)基的組合體產(chǎn)生65%的殺傷度,則提高35%的殺傷度表示為“++++”。類(lèi)似地,加入條件培養(yǎng)基后降低的殺傷度由負(fù)號(hào)表示(-=降低了1-10%殺傷度;--=降低了11-20%殺傷度,等等)?!?”表示單獨(dú)用除草劑得到的殺傷度與除草劑加條件培養(yǎng)基進(jìn)行比較無(wú)差別)。星號(hào)(*)表示單獨(dú)用除草劑產(chǎn)生的殺傷度超過(guò)90%,從而預(yù)計(jì)加入條件培養(yǎng)基可能不會(huì)對(duì)殺傷度產(chǎn)生進(jìn)一步的大的提高?!癗A”表示所用的選擇性除草劑對(duì)被測(cè)的雜草無(wú)活性?!癗T”表示未試驗(yàn)組合體。在表7-27中,在標(biāo)明“其它雜草”一列中的“Y”表示條件培養(yǎng)基提高了除草劑對(duì)表中未列出的其它雜草的效果,以下加以討論。按照美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)07/601,653和PCT專(zhuān)利申請(qǐng)PCT/US90/05301的方法,在實(shí)例7-28中所用的所有產(chǎn)生條件培養(yǎng)基的細(xì)菌都首先發(fā)現(xiàn)當(dāng)作為活體細(xì)菌與除草劑結(jié)合時(shí)具有增強(qiáng)除草劑的作用。盡管根據(jù)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)07/601,653和PCT專(zhuān)利申請(qǐng)PCT/US90/0531所述方法,活體細(xì)菌與除草劑結(jié)合的活性的先前試驗(yàn)對(duì)于本發(fā)明是不需要的,但這于選擇可用于實(shí)施本發(fā)明的細(xì)菌來(lái)說(shuō)可能是有用的。實(shí)例7-10示出了用Psudomonassyringae的其它病原體(pathovar)調(diào)節(jié)的培養(yǎng)基的效果。被測(cè)的病原體是Pseudomonsasyringaepv.coronafaciens(ATCC#19607)、Pseudomonassyringaepv.phaseolicola(ATCC#19304)、Pseudomonassyringae.pv.pisi(ATCC#11043)和Pseudomonassyringaepv.tagetis(ATCC#43128)。實(shí)施例7表8示出了用Pseudomonssyringaepv.coronafaciens條件化的培養(yǎng)基對(duì)幾種除草劑作用的影響,其中的一些除草劑以多于一種的濃度進(jìn)行試驗(yàn)。條件培養(yǎng)基有效地增強(qiáng)了glufosinate和sulfosate對(duì)寬葉雜草和草類(lèi)的除草作用。條件培養(yǎng)基提高了草類(lèi)選擇性除草劑(fluazifopand,sethoxydim)對(duì)草類(lèi)的作用,適當(dāng)提高了寬葉除草劑對(duì)一些寬葉雜草的效果。在其它試驗(yàn)中,用Pseudomonsasyringaepv.coronafaciens條件化的培養(yǎng)基提高了以下除草劑的活性作用。當(dāng)進(jìn)行一種以上的試驗(yàn)時(shí),結(jié)果用逗號(hào)分開(kāi)1.Fluazifop(0.006磅/英畝)(0.007kg/ha);大馬唐(+++);寬葉迅號(hào)草(++++);巨狐尾(++++);綠狐尾(+++++);稗子(++++);黃狐尾(++++);石茅高梁(+++++);和紅粟草(+)。2.Sethoxydim(0.015磅/英畝)(0.017kg/ha);大馬唐(++,+++);寬葉迅號(hào)草(+,++);巨狐尾(++,++);綠狐尾(+,+);匍匐冰草(++,0);稗子(+++,+);黃狐尾(++,++);石茅高梁(-,+++);高羊茅草(+);和紅粟草(0)。實(shí)施例8表9示出了用Pseudomonassyringaepv.phaseolicola(ATCC#19304)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑活性作用的影響。實(shí)施例9表10示出了用Pseudomonsasyringaepv.pisi(ATCC#1043)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例10表11示出了用Pseudomonassyringalpv.tagetis(ATCC#43128)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例11-20示出了用不同的Pseudomonas條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例11表12示出了用Pseudomonsviridiflava(ATCC#13223)條件化的培養(yǎng)基的對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例12表13示出了用Pseudomonasaureofaeiens(ATCC#43051)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。在本試驗(yàn)中,X-77○的濃度為0.5%。實(shí)施例13表14示出了用Pseudomonasauricularis(ATCC#27319)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。還測(cè)定了用Pseudomonsauricularis條件化的培養(yǎng)基對(duì)其它雜草的影響。結(jié)果如下1.Sethoxydim(0.15磅/英畝;(0.16kg/ha)1%C.O.C.)大馬唐(++++);寬葉迅號(hào)草(+);巨狐尾(+);綠狐尾(+);紅粟草(+);以及高羊茅草(+)。2.Fluazifop(0.009磅/英畝)(0.010kg/ha)寬葉迅號(hào)草(+++++);巨狐尾(++);綠狐尾(+);匍匐冰草(+);紅粟草(+);和高羊茅草(-)。3.Sulfosate(0.13磅/英畝)(0.146kg/ha)匍匐冰草(+);purplenutsedge(+);加拿大薊(0);旋花屬植物(+);狗牙草(+++++);和根莖石茅高梁(+++)。4.Glufosinate(0.09磅/英畝)(0.101kg/ha)匍匐冰草(++);purplenutsedge(++);加拿大薊(+++++);旋花屬植物(+++++);狗牙草(++++);和根莖石茅高梁(++++)。5.Imazapyr(0.004磅/英畝)(0.0045kg/ha)匍匐冰草(++);purplenutsedge(0);加拿大薊(0);旋花屬植物(+);狗牙草(+)和根莖石茅高粱(-)。實(shí)施例14表15示出了用pseudomonasavenae(ATCC#19860)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例15表16示出了用Pseudomonascaryophylli(ATCC#25418)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。還測(cè)定了這種條件培養(yǎng)基對(duì)其它一些雜草的影響。結(jié)果如下1.Glufosinate(0.09磅/英畝)(0.101kg/ha)匍匐冰草(0);purplenutsedge(-);加拿大薊(0);旋花屬植物(+++++);狗牙草(+++);和根莖石茅高粱(++++)。2.Sulfosate(0.13磅/英畝)(0.146kg/ha)匍匐冰草(+++);purpleutsedge(+);旋花屬植物(++);狗牙草(+++++);和根莖石茅高粱(++)。3.Imazapyr(0.004磅/英畝)(0.0045kg/ha)匍匐冰草(+);purplenutsedge(0);加拿大薊(0);旋花屬植物(++);狗牙草(-);和根莖石茅高粱(++)。4.Fluazifop(0.006磅/英畝)(0.0067kg/ha)寬葉迅號(hào)草(+++);巨狐尾(+++);綠狐尾(+++);匍匐冰草(0);和紅粟草(++)。5.Sethoxydim(0.15磅/英畝),(0.168kg/ha)1%C.O.C.,2次試驗(yàn))寬葉迅號(hào)草(++,+);巨狐尾(+++,++);綠狐尾(+,++);匍匐冰草(0,+);和紅粟草(+,0)。實(shí)施例16表17示出了Pseudomonascichorii(ATCC#19857)對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例17表18示出了用Pseudomonasfluorescene(ATCC#13525)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例18表19示出了用Pseudomonasmarginalis(ATCC#10844)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例19表20示出了用Pseudomonasphenazlnium(ATCC#33666)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。還測(cè)定了條件培養(yǎng)基對(duì)其它雜草的影響,結(jié)果如下1.Glufosinate(0.09磅/英畝)(0.101kg/ha)匍匐冰草(0);purplenutsedge(-);旋花屬植物(+++++);狗牙草(+++);和根莖石茅高梁(++++)。2.Sulfosate(0.13磅/英畝)(0.146kg/ha)匍匐冰草(+);purplenutsedge(-));旋花屬植物(+);狗牙草(+++);和根莖石茅高粱(0)。3.Imazapyr(0.004磅/英畝)(0.0045kg/ha);匍匐冰草(++);purplenutsedge(0);旋花屬植物(+++);狗牙草(-);和根莖石茅高粱(++)。4.Fluazifop(0.009磅/英畝)(0.010kg/ha);寬葉迅號(hào)草(++++);巨狐尾(+);綠狐尾(+);匍匐冰草(-);和紅粟草(+)。5.Sethoxydim(0.15磅/英畝)(0.168kg/ha)寬葉迅號(hào)草(++);巨狐尾(+);綠狐尾(+);匍匐冰草(+);和紅粟草(-)。實(shí)施例20表21示出了用Pseudomonaspyrocinia(ATCC#15958)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例21-26示出了用其它類(lèi)型的細(xì)菌條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例21表22示出了用Azospirillumbrasilense條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。比較兩種不同的分離體-ATCC#29710和ATCC#29145”??偟膩?lái)說(shuō),用這兩種分離體得到的結(jié)果類(lèi)似。還測(cè)定了這些菌株對(duì)其它雜草影響。表22A示出條件培養(yǎng)基提高了fluazifop和sethoxydim對(duì)各種草的影響。示出了兩種用Sethoxydim的分離試驗(yàn)。表28示出了對(duì)某些其它雜草條件培養(yǎng)基對(duì)草甘膦、sulfosate和imazapyr作用的影響。實(shí)施例22表23示出了用Bacillussubtilis(ATCC#14593)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例23表24示出了用Corynebacteriumherxulis(ATCC#13868)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。還測(cè)定了用這種細(xì)菌條件化的培養(yǎng)基對(duì)其它雜草的影響。結(jié)果如下1.Glufosinate(0.10磅/英畝)(0.112kg/ha)稗子(+++);匍匐冰草(+++++);乳漿大戟(+++++);yellownutsedge(0);加拿大薊(+++);曼陀羅(0*);旋花屬植物(+++);朝顏花(0*);黃狐尾(++++);狗牙草(+++++);和石茅高粱籽苗(+++++)。2.Sulfosate(0.20磅/英畝)(0.224kg/ha)稗子(++++);匍匐冰草(++++);乳漿大戟(+++++);yellownutsedge(+);加拿大薊(+++);曼陀羅(-*);旋花屬植物(++);朝顏花(++);黃狐尾(++);狗牙草(+++);和石茅高粱籽苗(++++)。3.Imazapyr(0.05磅/英畝)(0.056kg/ha)稗子(++);匍匐冰草(+);乳漿大戟(0);yellownutsedge(0);加拿大薊(++);曼陀羅(0*);旋花屬植物(0*);朝顏花(-);黃狐尾(+);狗牙草(+);和石茅高粱籽苗(+++)。實(shí)施例24表25示出了用Flavinomonsasoryzihabitans(ATCC#11766)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例25表26示未了用Xanthomonsascampestrispv.phaseoli(ATCC#11766)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。實(shí)施例26表27示出了用Xanthomonsascampestrispv.translucens(ATCC#10731)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。也測(cè)定了其它雜草。實(shí)施例27表28歸納了用例7-26有機(jī)物條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑作用的影響。就多數(shù)試驗(yàn)的組合體而言,條件培養(yǎng)基加除草劑比單獨(dú)用除草劑對(duì)一半以上的被測(cè)雜草物種造成更高的殺傷度(表28中由“Y”表示)。對(duì)于一半以上的雜草物種,全部被試驗(yàn)的條件培養(yǎng)基增強(qiáng)了草甘膦和Sethoxydim的作用。對(duì)于一半以上的被測(cè)雜草,幾乎只有一種條件培養(yǎng)基增強(qiáng)了sulfosate的作用,幾乎只有兩種條件培養(yǎng)基增強(qiáng)了fluazifop的作用??梢岳斫猓褪?,表28中注為“N”的組合體,條件培養(yǎng)基也增強(qiáng)了除草劑對(duì)某些雜草的作用,正如參考相應(yīng)的實(shí)施例所見(jiàn)到的一樣。例如,這些實(shí)施例表明,除草劑與條件培養(yǎng)基一起比單用同樣用量的除草劑造成的雜草致死率更大,雜草生長(zhǎng)的抑制率更大。本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員可以看出,在不背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)或范圍情況下,在實(shí)施本發(fā)明中可做出多種改進(jìn)或變化。從研究本說(shuō)明書(shū)和實(shí)施這里公開(kāi)的發(fā)明之后,本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員可以發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的其它實(shí)施方案。所以,本發(fā)明旨在包括這些改進(jìn)和變化,并在所附權(quán)利要求書(shū)中加以限定。表1用鋅改進(jìn)的King′sB培養(yǎng)基(每升)蛋白間質(zhì)胨3號(hào)(Difco*)20g甘油15mlK2HPO4·3H2O1.5gMgSO4·7H2O1.5gZnSO4·7H2O(選加成分)0.0075gpH7.2[King,E.O.Ward,M.K.,andRaney,D.E.TwoSimpleMediaforDemonstrationofPyocyaninandFluorescin.J.Lab.Clin.Med.44∶301-307(1954)]*DifcoLaboratories,Inc.,Detroit,Michigan48232.表2能與條件培養(yǎng)基一起使用的除草劑實(shí)例雜草鎖(Alachlor)阿特拉律(Atrazine)苯達(dá)松(Bentazon)Bialaphos丁草鎖(Butachlor)異丁草丹(Butylate)chlorimuronethylchlorsulfuronCinmethylin丙腈津(Cyanazine)環(huán)己丹(Cycloate)敵草平(Dicamba)2,4-D(2,4-二氯苯氧基乙酸)丙草丹(EPTC)乙烯利(Ethephon)(Ethephon)FenoxapropFluazifop-butylFomesafenGlufosinate草甘膦(Glyphosate)Haloxyfop2,4-滴苯丙酸甲酯(Hoelon)ImazapyrImazeethapyr利谷隆(Linuron)Mefluidide甲氧毒草案(Metolachlor)草克凈(Metribuzin)Metsulfuron環(huán)草丹(Molinate)達(dá)草滅(Norflurazon)黃草消(Oryzalin)乙氧氟甲草醚(Oxyfluorfen)對(duì)草快(Paragquat)pendimethalin草滴混劑(Picloram)撲草安(Propachlor)敵稗(Propanil)PyridateSethoxydim田保劑(Simazine)硫代磷酸S,S,S-三丁酯(Sulfometuron)Sulfosate氟樂(lè)靈(Trifluralin)表3能用于條件培養(yǎng)基的細(xì)菌實(shí)例A.植物病原性細(xì)菌ClavibactermichiqanenseC.michiqanensesubsp.michiqanenseC.michiqanensesubsp.nebraskenseCurtobacteriumflaccumfaciensErwiniaamylovoraE.carotovoraE.crysanthemiE.herbicolaE.stewartiiE.tracheophilaPseudomonasandropoqonisP.avenaeP.caryophilliP.cattleyaeP.cichoriiP.corruqataP.floridaP.qladioliP.qlumaeP.marqinalisP.pastinacaeP.plantariiP.pseudoalcaliqenesP.rubrilineansP.setariaeP.solanacearumPseudomonassyrinqaeP.syrinqaepv.acerisP.syrinqaepv.anthirrhiniP.syrinqaepv.apiiP.syrinqaepv.apataP.syrinqaepv.atrofaciensP.syrinqaepv.atropurpureaP.syrinqaepv.cannabinaP.syrinqaepv.ciccaroneiP.syrinqaepv.coronafaciensP.syrinqaepv.delphiniiP.syrinqaepv.dysoxyliP.syrinqaepv.eribotryaeP.syrinqaepv.qarcaeP.syrinqaepv.qlycineaP.syrinqaepv.helianthiP.syrinqaepv.iaponicaP.syrinqaepv.lachrymansP.syrinqaepv.lapsaP.syrinqaepv.maculicolaP.syrinqaepv.melleaP.syrinqaepv.moriP.syrinqaepv.morsprunorumP.syrinqaepv.papulansP.syrinqaepv.persicaeP.syrinqaepv.passifloraeP.syrinqaepv.phaseolicolaP.syrinqaepv.pisiP.syrinqaepv.primulaeP.syrinqaepv.ribicolaP.syrinqaepv.savastanoiP.syrinqaepv.sesamiP.syrinqaepv.striafaciensP.syrinqaepv.syrinqaeP.syrinqaepv.tabaciP.syrinqaepv.taqetisP.syrinqaepv.theaeP.syrinqaepv.tomatoP.syrinqaepv.ulmiP.syrinqaepv.viburniP.syrinqaepv.zizaniaeP.viridiflavaP.woodsiiStreptomycesipomeaXanthomonasalbilineansx.campestrisx.campestrispv.arrhenatherix.campestrispv.cerealisx.campestrispv.qraminisx.campestrispv.phleix.campestrispv.poaex.campestrispv.phaseolix.campestrispv.translucensXylellafastidiosaB.非植物病原性細(xì)菌BacilluscereusBradyrhizobiumjaponicumPseudomonasatlanticaP.cannaeP.chlororaphisP.fluorescensP.lindberqiiP.putidaStreptomycesatratusS.flavoqriseusS.fradiaeS.qalilaeusS.hydroscopicusS.hydroscopicussubsp.limoneusS.toyocaensisS.tubercidusS.viridochromoqenes表4能用于條件培養(yǎng)基的細(xì)菌實(shí)例A.植物病原性真菌AlternariaalternataA.tenuisA.maliA.porriA.solaniA.zinniaeCeratocystisadiposumC.coerulescensC.faqacearumC.fimbriataC.majorC.moniliformisC.paradoxaC.ulmiCercosporaraasparaqiC.beticolaC.kikuchiiC.nicotianaeC.zeae-maydisCladosporiumphleiFomesannosusFusariumjavanicumF.martiiF.oxysporumF.solaniFusicoccumamyqdaliNectriaqalliqenaPestalotiacryptomeriarcolaPhomabetaeP.exiquaP.linqamPolyporustumulosusP.hispidusPyrenophoratritici-repentisPyriculariaoryzaeRhizoctonialequminicolaR.solaniSclerotiniasclerotiorumSeptorianodorumStemphylliumbotryosumS.radicinumStereumsubpileatumB.非植物病原性真菌AsperqilluscandidusA.clavatusA.fumiqatusA.niqerA.wentiiA.ustusA.variecolorBeauveriabassianaByssochlamysfulvaB.niveaChaetomiumaureumC.trilateralePenecilliumbrevi-compactumP.crysoqenumP.fellutanumP.notatumP.oxalicumP.purpuroqenumP.rubrumP.spinulosumP.urticaeP.viniferumP.viridicatumPhytophthoracrytoqea表5條件培養(yǎng)基對(duì)Sulfosate除草作用的影響Exp.#DAT1朝顏花%絨毛草%蒼耳屬植物%藜%曼陀羅%A.Sulfosate0.06lbs/acre(0.067kg/ha)單獨(dú)用Sulfosate11A90.05.00.00.0-11B930.025.040.045.032.512A1037.520.030.032.540.013A1235.025.062.584.070.015B1557.520.057.599.070.016A1717.532.565.052.535.019A717.515.032.532.532.5平均28.020.541.049.546.5Sulfosate加條件培養(yǎng)基11A952.532.547.590.0-11B932.520.040.097.535.013A1250.020.062.5100.035.015B1560.012.560.0100.070.0平均49.021.552.597.055.0B.Sulfosate0.125lbs/acre(0.14kg/ha)單獨(dú)用Sulfosate11A962.545.055.0100.0-11B945.045.037.595.042.513A1242.560.067.5100.075.015B1560.035.067.5100.072.516A1715.017.570.082.547.519A720.020.032.567.557.5平均41.037.055.091.059.01DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%表5續(xù)條件培養(yǎng)基對(duì)Sulfosate除草作用的影響Exp.#DAT1稗子%黃狐尾%秋黍%石茅高粱%大豆%谷物%A.Sulfosate0.06lbs/acre(0.067kg/ha)單獨(dú)用Sulfosate11A90.00.00.00.00.022.511B90.020.00.00.010.00.012A100.07.55.00.010.05.013A125.055.050.00.07.510.015B1510.067.512.52.57.540.016A175.00.00.05.00.030.019A70.040.00.00.017.510.0平均3.027.09.51.07.517.0Sulfosate加條件培養(yǎng)基11A935.070.017.557.522.557.511B932.560.055.032.525.040.013A1240.080.060.052.525.022.515B1565.090.020.037.522.552.5平均43.075.038.045.024.043.0B.Sulfosate0.125lbs/acre(0.14kg/ha)單獨(dú)用Sulfosate11A952.580.017.575.027.555.011B917.560.047.50.032.55.013A1222.572.545.017.522.515.015B1525.072.520.017.512.550.016A170.010.00.015.012.515.019A75.070.030.017.517.510.0平均20.561.026.524.021.025.01DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%表5續(xù)條件培養(yǎng)基對(duì)Sulfosate除草作用的影響Exp.#DAT1朝顏花%絨毛草%蒼耳屬植物%藜%曼陀羅%Sulfosate加條件培養(yǎng)基11A967.546.055.0100.060.011B945.037.545.0100.035.013A1255.060.072.5100.096.515B1567.537.567.5100.080.0平均59.045.560.0100.068.0C.Sulfosate0.25lbs/acre(0.28kg/ha)單獨(dú)用Sulfosate15B1575.050.096.5100.087.516A1740.055.090.0100.082.5平均57.552.593.5100.085.0Sulfosate加條件培養(yǎng)基15B1570.055.082.5100.090.01DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%表5續(xù)條件培養(yǎng)基對(duì)Sulfosate除草作用的影響Exp.#DAT1稗子%黃狐尾%秋黍%石茅高梁%大豆%谷物%Sulfosate加條件培養(yǎng)基11A970.042.532.587.525.070.011B952.572.577.545.040.065.013A1255.085.065.070.055.067.515B1591.598.057.550.037.591.5平均67.574.558.063.039.573.5C.Sulfosate0.25lbs/acre(0.28kg/ha)單獨(dú)用Sulfosate15B1555.095.057.550.037.572.516A1720.040.020.010.025.082.5平均37.567.539.030.031.577.5Sulfosate加條件培養(yǎng)基15B1595.0100.077.537.547.599.01DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%表6條件培養(yǎng)基對(duì)草甘膦除草作用的影響Exp.#DAT1朝顏花%絨毛草%蒼耳屬植物%藜%曼陀羅%A.草甘膦0.06lbs/acre(0.067kg/ha)單獨(dú)用草甘膦13A1215.012.560.086.570.014A95.00.015.017.512.5平均10.06.537.552.041.5草甘膦加條件培養(yǎng)基13A1250.037.565.0100.077.514A915.00.030.060.045.0平均32.519.047.580.061.5B.草甘膦0.125lbs/acre(0.14kg/ha)單獨(dú)用草甘膦13A1255.545.560.089.075.014A932.520.060.094.075.0平均44.033.060.091.575.0草甘膦加條件培養(yǎng)基13A1255.057.570.089.077.514A942.532.567.5100.080.0平均49.045.069.094.579.01DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%表6續(xù)條件培養(yǎng)基對(duì)Sulfosate除草作用的影響Exp.#DAT1稗子%黃狐尾%秋黍%石茅高粱%大豆%谷物%A.草甘膦0.06lbs/acre(0.067kg/ha)單獨(dú)用草甘膦13A127.535.030.00.00.020.014A90.00.00.00.010.017.5平均4.017.515.00.05.019.0草甘膦加條件培養(yǎng)基13A1247.577.565.070.025.072.514A90.025.00.00.012.50.0平均24.051.532.535.019.036.5B.G草甘膦0.125lbs/acre(0.14kg/ha)單獨(dú)用草甘膦13A1210.075.062.540.027.535.014A95.020.010.05.030.027.5平均7.547.536.522.529.031.5草甘膦加條件培養(yǎng)基13A1272.580.075.082.545.065.014A950.075.045.052.522.540.0Average61.577.560.067.534.052.51DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%表7條件培養(yǎng)基對(duì)Glufosinate(IGNITE)除草作用的影響GlufosinateExp.#DAT1朝顏花%絨毛草%蒼耳屬植物%藜%曼陀羅%17A/.12531199.099.099.082.599.020A/.12531499.0100.0100.090.0100.0平均99.099.599.586.099.520A/.0641490.0100.0100.0100.0100.0草甘膦加條件培養(yǎng)基17A/.12531199.0100.0100.097.599.020A/.125314100.0100.0100.0100.0平均99.5100.0100.099.099.520A/.0641498.0100.0100.0100.0100.01DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%3施藥率0.125lbs/acre(0.14kg/ha)4施藥率0.06lbs/acre(0.067kg/ha)表7續(xù)條件培養(yǎng)基對(duì)Glufosinate除草作用的影響Exp.#DAT1稗子%黃狐尾%秋黍%石茅高梁%大豆%谷物%17A/.12531167.570.050.062.585.070.020A/.12531492.087.585.072.5100.077.5平均80.079.067.567.592.574.020A/.0641427.530.067.550.0100.052.5草甘膦加條件培養(yǎng)基17A/.125311100.090.062.592.592.597.520A/.125314100.097.598.077.592.599.0平均100.094.080.585.092.598.520A/.0641495.080.087.562.570.091.51DAT=處理后的天數(shù)2%=殺傷度%3施藥率0.125lbs/acre(0.14kg/ha)4施藥率0.06lbs/acre(0.067kg/ha)表8續(xù)用Pseudomonassyringaepv.coronafaciens條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高粱秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate1+++++++++++++++NTNTGlufosinate2-*++NT-YGlufosinate3+++++++++++++++*NTNTSulfosate4+++++++++++++NT++++NTSulfosate4+++++++++++++++NTNTSulfosate5+++++++++++++*NTYFluazifop6+++-+++NTYFluazifop7+++++++++++NTNTFluazifop80+++-NT+NTSethoxydim9++++++NT0YBentazon10NT0(NA)0(NA)NTNTNTBentazon11NT0(NA)0(NA)NTNTNTChlorimuron120(NA)0(NA)0(NA)NT+NTFomesafen13NT0(NA)0(NA)NTNTNT10.04lb/A(0.045kg/ha)glufosinate20.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate30.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate40.06lb/A(0.067kg/ha)sulfosate50.125lb/A(0.14kg/ha)sulfosate60.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop70.004lb/A(0.0045kg/ha)fluazifop80.01lb/A(0.011kg/ha)fluazifop90.012lb/A(0.013kg/ha)sethoxydim100.03lb/A(0.034kg/ha)bentazon,1%C.O.C.110.06lb/A(0.067kg/ha)bentazon;1%C.O.C.121.0g/A(2.5g/ha)chlorimuron130.0007lb/A(0.00078kg/ha)fomesafen10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.17lb/A(0.19kg/ha)sulfosate30.01lb/A(0.011kg/ha)fluazifop40.012lb/A(0.013kg/ha)sethoxydim,1%C.O.C.51.0g/A(2.5g/ha)chlorimuron10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.17lb/A(0.19kg/ha)sulfosate30.01lb/A(0.011kg/ha)fluazifop*40.12lb/A(0.13kg/ha)sethoxydim,1%C.O.C.,*table9has0.012lb/A51.0g/A(2.5g/ha)chlorimuron10.04lb/A(0.04kg/ha)glufosinate20.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate30.06lb/A(0.067kg/ha)sulfosate40.125lb/A(0.14kg/ha)sulfosate50.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop,1%C.O.C.10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.17lb/A(0.19kg/ha)sulfosate30.01lb/A(0.011kg/ha)fluazifop40.12lb/A(0.13kg/ha)sethoxydim,1%C.O.C.51.0g/A(2.5g/ha)chlorimuron10.009lb/A(0.010kg/ha)fluazifop20.015lb/A(0.017kg/ha)sethoxydim30.03lb/A(0.034kg/ha)bentazon40.06lb/A(0.067kg/ha)bentazon50.0007lb/A(0.00078kg/ha)fomesafen10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.13lb/A(0.146kg/ha)sulfosate30.004lb/A(0.0045kg/ha)imazapyr40.009lb/A(0.010kg/ha)fluazifop表16續(xù)用Pseudomonascaryophylli條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高梁秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate1NT+++++++++++++++NTNTGlufosinate2NT+++++-*NTYSulfosate3NT+++++++++++++++NTNTSulfosate4NT++++++++++++NTYFluazifop5++-;+++++-;+++++--YSethoxydim6++;+++;++++,0NT+++++;-YBentazon7NT0(NA)0(NA)NTNTNTBentazon8NT0(NA)0(NA)NTNTNTFomesafen9NT0(NA)0(NA)NTNTNT10.04lb/A(0.04kg/ha)glufosinate20.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate30.06lb/A(0.067kg/ha)sulfosate40.125lb/A(0.14kg/ha)sulfosate50.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop60.015lb/A(0.017kg/ha)sethoxydim,1%C.O.C.70.03lb/A(0.034kg/ha)bentazon80.06lb/A(0.067kg/ha)bentazon90.0007lb/A(0.00078kg/ha)fomesafen10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.13lb/A(0.146kg/ha)sulfosate30.004lb/A(0.0045kg/ha)imazapyr40.009lb/A(0.010kg/ha)fluazlfop50.01oz/A(0.7g/ha)chlorimuron60.015lb/A(0.017kg/ha)dicamba表18續(xù)用Pseudomonasfluorescens條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響稗子黃狐尾石茅高梁秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate1++++++NT+++++NTNTGlufosinate2++++++++++NT+++++NTNTGlufosinate3++++++++++NT+*NTNTGlufosinate4+++++++++NT0NTNTSulfosate5-++NT+++NTNTSulfosate6++++++++++NT++++NTNTSulfosate7--+NT++NTNTSulfosate8+++NT-NTNTFluazifop9---NT+NTNTFluazifop10+++++NT+NTNT10.04lb/A(0.04kg/ha)glufosinate20.06lb/A(0.067kg/ha)glufosinate30.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate40.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate50.06lb/A(0.067kg/ha)sulfosate60.06lb/A(0.067kg/ha)sulfosate70.125lb/A(0.14kg/ha)sulfosate80.125lb/A(0.14kg/ha)sulfosate90.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop100.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop表19續(xù)用Pseudomonasmarginalis條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高梁秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate1NT+++++++++++++++NTNTGlufosinate2NT++++++*NTYSulfosate3NT++++++++++++++NTNTSulfosate4NT++++++++++++NTYFluazifop5NT------NTNTFluazifop6+++++++++NT-YSethoxydim7+++NT+++YBentazon8NT0(NA)0(NA)NTNTNTBentazon9NT0(NA)0(NA)NTNTNTFomesafen10NT0(NA)0(NA)NTNTNT10.04lb/A(0.04kg/ha)glufosinate20.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate30.06lb/A(0.067kg/ha)sulfosate40.125lb/A(0.14kg/ha)sulfosate50.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop60.009lb/A(0.010kg/ha)fluazifop70.15lb/A(0.168kg/ha)sethoxydim,1%C.O.C.80.03lb/A(0.034kg/ha)bentazon90.06lb/A(0.067kg/ha)bentazon100.0007lb/A(0.00078kg/ha)fomesafen10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.13lb/A(0.146kg/ha)sulfosate30.004lb/A(0.0045kg/ha)imazapyr40.009lb/A(0.010kg/ha)fluazifop10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.13lb/A(0.146kg/ha)sulfosate30.004lb/A(0.0045kg/ha)imazapyr40.009lb/A(0.010kg/ha)fluazifop50.01oz/A(0.7g/ha)chlorimuron60.015lb/A(0.0171kg/ha)dicamba表22續(xù)用兩種菌株Azospirillumbrasilense(ATCC29710和29145)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高粱秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate1000NT+++YGlufosinate2+00NT+YSulfosate30+++++NT+++++YSulfosate4++++NT+++++YImazapyr50--NT-YImazapyr60--NT-YFluazifop7++++++NT+++++YFluazifop8++++++NT+YBentazon90(NA)0(NA)0(NA)NT0(NA)NTBentazon100(NA)0(NA)0(NA)NT0(NA)NT10.06lb/A(0.067kg/ha)glufosinate,ATCC2971020.06lb/A(0.067kg/ha)glufosinate,ATCC2914530.10lb/A(0.112kg/ha)sulfosate,ATCC2971040.10lb/A(0.112kg/ha)sulfosate,ATCC2914550.003lb/A(0.0034kg/ha)imazapyr,ATCC2971060.003lb/A(0.0034kg/ha)imazapyr,ATCC2914570.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop,ATCC2971080.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop,ATCC2914590.05lb/A(0.056kg/ha)bentazon,ATCC29710100.05lb/A(0.056kg/ha)bentazon,ATCC29145表22A用兩種菌株Azospirillumbrasilense(ATCC29710和29145)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高梁秋黍大馬唐Fluazifop10++++++++++Fluazifop2+++++++++++++++Sethoxydim3++++++++++Sethoxydim4+++++++++++++Sethoxydim5+++++++++++++Sethoxydim6+++++++++++++寬葉迅號(hào)草巨狐尾綠草葡萄冰草高羊茅草Fluazifop1+++++0NTFluazifop2+++++++++0NTSethoxydim3+++++NTSethoxydim4+++-++++NTSethoxydim5+++++++Sethoxydim6+++++10.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop,ATCC2971020.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop,ATCC2914530.015lb/A(0.017kg/ha)sethoxydim,ATCC29710,1%C.O.C.40.015lb/A(0.017kg/ha)sethoxydim,ATCC29145,1%C.O.C.50.015lb/A(0.017kg/ha)sethoxydim,ATCC29710,1%C.O.C.60.015lb/A(0.017kg/ha)sethoxydim,ATCC29145,1%C.O.C.表22B用兩種菌株Azospirillumbrasilense(ATCC29710和29145)條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響寬葉草朝顏花乳漿大戟黃Nutsedge加拿大薊曼陀羅旋花尾植物Glufosinate10*+++++-++-----*+++Glufosinate20*+++++-++++0*+++Sulfosate3+++++++-*+Sulfosate4+++++0++-*+Imazapyr50*-0+0*0*Imazapyr6-00+-*0*草類(lèi)稗子黃狐尾匍匐冰草狗牙草石茅高梁(籽苗)Glufosinate1+++++++++++++++++++Glufosinate2+++++++++++++++++++++Sulfosate3+++++++++++++++Sulfosate4++++++++++++Imazapyr5+++++++Imazapyr60++++10.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate,ATCC2971020.10lb/A(0.112kg/ha)glufosinate,ATCC2914530.20lb/A(0.224kg/ha)sulfosate,ATCC2971040.20lb/A(0.224kg/ha)sulfosate,ATCC2914550.005lb/A(0.0056kg/ha)imazapyr,ATCC2971060.005lb/A(0.0056kg/ha)imazapyr,ATCC2914510.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.17lb/A(0.19kg/ha)sulfosate30.01lb/A(0.011kg/ha)fluazifop40.12lb/A(0.13kg/ha)sethoxydim,1%C.O.C.51.0g/A(2.5g/ha)chlorimuron10.06lb/A(0.067kg/ha)glufosinate20.10lb/A(0.112kg/ha)sulfosate30.003lb/A(0.0034kg/ha)imazapyr40.006lb/A(0.0067kg/ha)fluazifop50.05lb/A(0.056kg/ha)bentazon10.09lb/A(0.101kg/ha)glufosinate20.17lb/A(0.19kg/ha)sulfosate30.01lb/A(0.011kg/ha)fluazifop40.012lb/A(0.013kg/ha)sethoxydim51.0g/A(2.5g/ha)chlorimuron表26續(xù)用Xanthomonascampestrisphaseoli條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高梁秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate10+++NTNTNTGlufosinate2NT+++NTNTYSulfosate3++++++NTNTYImazapyr4++-++++NTNTNTImazapyr5NT++-NTNTYFluazifop6+++++++NTNTNTBentazon7000NTNTNTImazethapyr8NT++NTNTNT10.04lb/A(0.04kg/ha)glufosinate20.13lb/A(0.146kg/ha)glufosinate30.08lb/A(0.09kg/ha)sulfosate40.004lb/A(0.0045kg/ha)imazapyr50.005lb/A(0.0056kg/ha)imazapyr60.004lb/A(0.0045kg/ha)fluazifop70.05lb/A(0.056kg/ha)bentazon80.30lb/A(0.336kg/ha)imazethapyr表27續(xù)用Xanthomonascampestrispv.translucens條件化的培養(yǎng)基對(duì)除草劑除草作用的影響草類(lèi)稗子黃狐尾石茅高粱秋黍大馬唐其他雜草Glufosinate1++++NTNTNTGlufosinate2NT++++++NTNTYSulfosate3++++++++++++NTNTYImazapyr4NT++-NTNTYImazapyr5+--NTNTNTFluazifop6+++++++++++++NTNTNTBentazon7000NTNTNTImazethapyr8NT++NTNTNT10.04lb/A(0.04kg/ha)glufosinate20.13lb/A(0.146kg/ha)glufosinate30.08lb/A(0.09kg/ha)sulfosate40.005lb/A(0.0056kg/ha)imazapyr50.004lb/A(0.0045kg/ha)imazapyr60.004lb/A(0.0045kg/ha)fluazifop70.05lb/A(0.056kg/ha)bentazon80.30lb/A(0.336kg/ha)imazethapyr權(quán)利要求1.一種控制雜草的方法,該方法包括向所述雜草施用抑制雜草生長(zhǎng)或殺死雜草有效量的以下成分一種化學(xué)試劑,以及一種通過(guò)培養(yǎng)微生物而條件化的培養(yǎng)基,在所述條件培養(yǎng)基的存在下,所述化學(xué)試劑能有效地抑制或殺死至少一種雜草,且所述條件培養(yǎng)基能有效地提高所述化學(xué)試劑的活性,所述化學(xué)試劑和所述條件培養(yǎng)基以某一劑量施用,使得其中殺死所述雜草或抑制所述雜草的生長(zhǎng)的效果高于單獨(dú)用同樣劑量的化學(xué)試劑或所述條件培養(yǎng)基所取得的效果。2.權(quán)利要求1的方法,其中所述的化學(xué)試劑是一種除草劑。3.權(quán)利要求1的方法,其中所述的通過(guò)培養(yǎng)微生物而條件化的培養(yǎng)基經(jīng)進(jìn)一步處理制成處理過(guò)的條件培養(yǎng)基。4.權(quán)利要求1的方法,其中所述化學(xué)試劑和所述條件培養(yǎng)基同時(shí)施用給雜草。5.權(quán)利要求1的方法,其中所述微生物是細(xì)菌。6.權(quán)利要求1的方法,其中所述微生物是真菌。7.權(quán)利要求5的方法,其中所述細(xì)菌是選自假單胞菌屬(Pseudomonas)。8.權(quán)利要求7的方法,其中所述細(xì)菌選自Pseudomonasaureofaciens,Pseudomonsaauricularis,Psudomonasavenae,Pesudomonascaryophylli,Pseudomonascichorii,Pseudomonasfluorescens,Pseudomonasmarginalis,PseudomonasPhenazinium,和Pseudomonasviridiflava。9.權(quán)利要求7的方法,其中所述細(xì)菌是丁香假單胞菌(Pseudomonassyringae)種的細(xì)菌。10.權(quán)利要求9的方法,其中所述細(xì)菌是Pseudomonassyringaepv.tabci。11.權(quán)利要求7的方法,其中所述細(xì)菌是選自Pseudomonassyringgalpv.coronafaciens,Pseudomonassyringaepv.phaseolicola,Pseudomonassyringaepv.pisi,andPseudomonassyringaepv.tagetic。12.權(quán)利要求5的方法,其中所述細(xì)菌是選自Azospirillumbrasilense,Bacillussubtilis,Corynebacteriumherculis,F(xiàn)lavinomonasoryzihabitans,Xanthomonascampestrispv.phaseoli,和Xathomonascampestrispv.translucens。13.權(quán)利要求2的方法,其中所述除草劑是Sulfosate。14.權(quán)利要求2的方法,其中所述除草劑是glufodinate。15.權(quán)利要求2的方法,其中所述除草劑是草甘膦(glyphosate)。16.權(quán)利要求2的方法,其中所述除草劑選自fluazifop,sethoxydrm,imazapyr,chlorimuron,dicamba,bentazon,fomesafen和imazethapyr。17.權(quán)利要求1的方法,其中所述微生物經(jīng)遺傳修飾。18.權(quán)利要求17的方法,其中所述經(jīng)遺傳修飾的微生物含有重組體DNA。19.一種含有化學(xué)除草劑和培養(yǎng)基的除草組合物,其中所述培養(yǎng)基已通過(guò)培養(yǎng)微生物而條件化,所述微生物使得培養(yǎng)基能有效地增強(qiáng)所述化學(xué)除草劑的活性;所述培養(yǎng)基在所述組合物中的存在量應(yīng)足以提高所述化學(xué)除草劑對(duì)至少一種雜草的除草活性。20.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述組合物含有所述除草劑。21.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述條件培養(yǎng)基是通過(guò)培養(yǎng)選自假單胞菌屬(Pseudomonas)的細(xì)菌而制備。22.按照權(quán)利要求21所述的組合物,其中所述細(xì)菌選自Pseudomonasaureofaciens,Pseudomonasauriculars,Pseudomonasavenae,Pseudomonascaryophylli,Pseudomonascichorii,Pseudomonsafluorescens,Pseudomonasmarginalis,Pawusomonasphenazzinium,和Pseudomonasviridiflava。23.按照權(quán)利要求21所述的組合物,其中所述的細(xì)菌是丁香假單胞菌(Pseudomonassyringae)種的細(xì)菌。24.按照權(quán)利要求23所述的組合物,其中所述的細(xì)菌是Pseudomonassyringaepv.tabaci。25.按照權(quán)利要求23所述的組合物,其中所述的細(xì)菌是Pseudomonassyringaepv.coronfaciens,Pseudomonassyringaepv.phaseolicold,Pseudomonassyringaepv.pisi,和Pseudomonassyringaepv.tagetis。26.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述的除草劑是sulfosate。27.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述的除草劑是草甘膦(glyphosate)。28.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述的除草劑是glufosinate。29.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述除草劑選自fluazifop,sethoxydim,imazapyr,chlorimuron,dicamba,bentazon,fomesafen,和imazethapyr。30.按照權(quán)利要求19所述的組合物,其中所述通過(guò)培養(yǎng)微生物而條件化的培養(yǎng)基經(jīng)進(jìn)一步處理制成處理過(guò)的條件培養(yǎng)基。31.一種控制雜草的方法,該方法包括向所述雜草的種子施用防止或抑制雜草生長(zhǎng)有效量的以下成分;一種化學(xué)試劑,和一種已通過(guò)培養(yǎng)其中微生物而條件化的培養(yǎng)基,所述化學(xué)試劑在所述條件培養(yǎng)基的存在下能有效地殺死或抑制至少一種所述雜草草種長(zhǎng)成的雜草,以及所述條件培養(yǎng)基能有效地提高所述化學(xué)試劑的活性,所述化學(xué)試劑和條件培養(yǎng)基以一定的劑量施用,使得殺死草種或抑制由所述草種生長(zhǎng)成的雜草的效果高于單獨(dú)用同樣劑量的所述化學(xué)試劑或所述條件培養(yǎng)基產(chǎn)生的效果。全文摘要提供了一種控制雜草生長(zhǎng)的方法,即向雜草施用一種除草劑或其它化學(xué)試劑和一種培養(yǎng)過(guò)微生物(如細(xì)菌或真菌)的培養(yǎng)基。除草劑與所述條件培養(yǎng)基結(jié)合產(chǎn)生的降草活性要比單獨(dú)用除草劑的除草活性高。這使得使用比單用除草劑時(shí)所需劑量低的水平控制多種雜草成為可能。培養(yǎng)基可進(jìn)一步處理使之濃縮或部分純化,但不需要鑒定和純化培養(yǎng)基中作用于提高化學(xué)試劑作用的特殊試劑。文檔編號(hào)A01N57/18GK1062265SQ91111519公開(kāi)日1992年7月1日申請(qǐng)日期1991年11月15日優(yōu)先權(quán)日1990年11月16日發(fā)明者P·S·卡爾森,K·赫斯特,S·J·科斯特卡申請(qǐng)人:谷物遺傳學(xué)國(guó)際公司
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