一種微小種子的培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種種子的培養(yǎng)方法，具體涉及一種微小種子的培養(yǎng)方法，屬于植物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，微小種子(如擬南芥種子)的培養(yǎng)方式主要采用泥炭和蛭石的混合營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)與營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)兩種方式，其中，液體培養(yǎng)是常見的栽培方式。但是液體培養(yǎng)的方法存在嚴(yán)重的不足，其最大的特點(diǎn)是不能直接液體培養(yǎng)，需要在固體培養(yǎng)基上或土壤基質(zhì)中培養(yǎng)一定的時(shí)間，然后轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基中。這直接增加了微小種子的液體培養(yǎng)難度，同時(shí)在幼苗的轉(zhuǎn)移過(guò)程中造成嚴(yán)重的傷害。如果能直接在種子萌發(fā)2-3天內(nèi)移入液體培養(yǎng)裝置中，就克服了傳統(tǒng)技術(shù)的缺陷，提高工作效率和成苗率，尤其是微小種子，如擬南芥、芝麻等種子。
[0003]因此，為解決上述技術(shù)問題，確有必要提供一種創(chuàng)新的微小種子的培養(yǎng)方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的所述缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的在于提供一種操作方便，出苗率高，且幼苗健壯的微小種子的培養(yǎng)方法。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述第一目的，本發(fā)明米取的技術(shù)方案為:一種微小種子的培養(yǎng)方法，其包括如下步驟:
I )，微小種子用NaClO消毒，再用蒸餾水種子沖洗3-5遍，放入冰箱冷藏2天；
2)，先用標(biāo)簽紙將培養(yǎng)管頂部的洞口堵住，將培養(yǎng)管倒置在桌面上，用移液器將已經(jīng)加熱溶解的0.8%的瓊脂加入到培養(yǎng)管上，靜置片刻待其凝固；
3)，在培養(yǎng)皿中加入已經(jīng)加熱溶解的0.48%的瓊脂至0.4 cm高，靜置片刻待其凝固；
4)，將已經(jīng)凝固了的培養(yǎng)管頂部的標(biāo)簽紙撕去，在每個(gè)培養(yǎng)管的頂部用鑷子點(diǎn)上2-3粒種子；
5)，將帶有種子的培養(yǎng)管插入到含有瓊脂的培養(yǎng)皿中，緊密排列，用封口膜將培養(yǎng)皿密封好，放入正常的光周期下于溫室中培養(yǎng)3天，等待種子發(fā)芽；
6)，將發(fā)芽的培養(yǎng)管插入具有孔的支撐板上，放入裝有培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中。
[0006]本發(fā)明的微小種子的培養(yǎng)方法進(jìn)一步為:所述微小種子為擬南芥種子。
[0007]本發(fā)明的微小種子的培養(yǎng)方法進(jìn)一步為:所述步驟I)中，NaClO的濃度為5%，消毒時(shí)間 5-10 min。
[0008]本發(fā)明的微小種子的培養(yǎng)方法進(jìn)一步為:所述步驟5)中，所述溫室的室溫為23°C, 16小時(shí)光照，8小時(shí)黑暗。
[0009]本發(fā)明的微小種子的培養(yǎng)方法還為:所述步驟6)中，所述培養(yǎng)液包含KNO3 (濃度為:5mM)，KH2PO4 (濃度為:ImM)，MgSO4 (濃度為:ImM)，Ca (NO3) 2.4H20 (濃度為:1.5 mM)，NH4Cl (濃度為:lmM)，F(xiàn)e-EDTA (濃度為:50μΜ)，H3BO3 (濃度為:50μΜ)，MnSO4.5Η20(濃度為:ΙΟμΜ)，CuSO4.5Η20 (濃度為:0.32μΜ)，ZnSO4.7Η20 (濃度為:0.77μΜ)，Na2MoO4.2Η20 (濃度為:0.58μΜ)，NH4VO3 (濃度為:0.25μΜ)。
[0010]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果:本發(fā)明的微小種子的培養(yǎng)方法具有操作方便，出苗率高，且幼苗健壯等諸多優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說(shuō)明】
[0011]圖1為擬南芥種子萌發(fā)后，采用正常培養(yǎng)液(CK)和采用缺鎂培養(yǎng)液(MD)進(jìn)行培養(yǎng)，葉片鮮重對(duì)比圖。
[0012]圖2為擬南芥種子萌發(fā)后，采用正常培養(yǎng)液(CK)和采用缺鎂培養(yǎng)液(MD)進(jìn)行培養(yǎng)，根鮮重對(duì)比圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]本發(fā)明為一種微小種子的培養(yǎng)方法，其包括如下步驟:
1)，微小種子用NaC1消毒，再用蒸餾水種子沖洗3-5遍，放入冰箱冷藏2天；其中，所述微小種子為擬南芥種子；NaC10的濃度為5%，消毒時(shí)間5-10 min ；
2)，先用標(biāo)簽紙將培養(yǎng)管頂部的洞口堵住，將培養(yǎng)管倒置在桌面上，用移液槍將已經(jīng)加熱溶解的0.48%的瓊脂加入到培養(yǎng)管上，靜置片刻待其凝固；
3)，在培養(yǎng)皿中加入已經(jīng)加熱溶解的0.48 %的瓊脂至0.4 cm高，靜置片刻待其凝固；
4)，將已經(jīng)凝固了的培養(yǎng)管頂部的標(biāo)簽紙撕去，在每個(gè)培養(yǎng)管的頂部用鑷子點(diǎn)上2-3粒種子；
5)，將帶有種子的培養(yǎng)管插入到含有瓊脂的培養(yǎng)皿中排列緊密，用封口膜將培養(yǎng)皿密封好，放入正常的光周期下于溫室中培養(yǎng)3天，等待種子出芽；其中，所述溫室的室溫為23°C，其能提供16小時(shí)光照，8小時(shí)黑暗。
[0014]6)，將出芽了的培養(yǎng)管插入具有孔的支撐板上，放入裝有培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中；所述培養(yǎng)液包含KNO3 (濃度為:5mM)，ΚΗ2Ρ04(濃度為MgSO4 (濃度為
Ca (NO3) 2.4Η20 (濃度為:1.5 mM)，NH4Cl (濃度為:ImM)，F(xiàn)e-EDTA (濃度為:50μΜ)，H3BO3 (濃度為:50μΜ)，MnSO4.5Η20(濃度為:10μΜ)，CuSO4.5Η20 (濃度為:0.32μΜ)，ZnSO4.7Η20 (濃度為:0.77μΜ)，Na2MoO4.2Η20(濃度為:0.58μΜ)，NH4VO3 (濃度為:0.25μΜ)。
[0015]其中，步驟6中，在擬南芥種子萌發(fā)后，在PH: 5.8，光照:16小時(shí)光照，8小時(shí)黑暗，光強(qiáng):4000Lux，濕度:60%的條件下，采用上述培養(yǎng)液(CK)和采用缺鎂培養(yǎng)液(MD)進(jìn)行培養(yǎng)，葉片鮮重對(duì)比、根鮮重對(duì)比如附圖1和附圖2所示。
[0016]以上的【具體實(shí)施方式】?jī)H為本創(chuàng)作的較佳實(shí)施例，并不用以限制本創(chuàng)作，凡在本創(chuàng)作的精神及原則之內(nèi)所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本創(chuàng)作的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種微小種子的培養(yǎng)方法，其特征在于:包括如下步驟: I )，微小種子用NaC1消毒，再用蒸餾水種子沖洗3-5遍，放入冰箱冷藏2天； 2)，先用標(biāo)簽紙將培養(yǎng)管頂部的洞口堵住，將培養(yǎng)管倒置在桌面上，用移液器將已經(jīng)加熱溶解的0.8%的瓊脂加入到培養(yǎng)管上，靜置片刻待其凝固； 3)，在培養(yǎng)皿中加入已經(jīng)加熱溶解的0.48%的瓊脂至0.4 cm高，靜置片刻待其凝固； 4)，將已經(jīng)凝固了的培養(yǎng)管頂部的標(biāo)簽紙撕去，在每個(gè)培養(yǎng)管的頂部用鑷子點(diǎn)上2-3粒種子； 5)，將帶有種子的培養(yǎng)管插入到含有瓊脂的培養(yǎng)皿中，緊密排列，用封口膜將培養(yǎng)皿密封好，放入正常的光周期下于溫室中培養(yǎng)3天，等待種子發(fā)芽； 6 )，將發(fā)芽的培養(yǎng)管插入具有孔的支撐板上，放入裝有培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中。
2.如權(quán)利要求1所述微小種子的培養(yǎng)方法，其特征在于:所述微小種子為擬南芥種子。
3.如權(quán)利要求1所述微小種子的培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟I)中，NaClO的濃度為5%，消毒時(shí)間5-10 min0
4.如權(quán)利要求1所述微小種子的培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟5)中，所述溫室的室溫為23°C，16小時(shí)光照，8小時(shí)黑暗。
5.如權(quán)利要求1所述微小種子的培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟6)中，所述培養(yǎng)液包含 KNO3 (濃度為:5mM)，KH2PO4 (濃度為:ImM)，MgSO4 (濃度為:ImM)，Ca (NO3) 2.4H20 (濃度為:1.5 mM)，NH4Cl (濃度為:lmM)，F(xiàn)e-EDTA (濃度為:50μΜ)，H3BO3 (濃度為:50μΜ)，MnSO4.5Η20(濃度為:10μΜ)，CuSO4.5Η20 (濃度為:0.32μΜ)，ZnSO4.7Η20 (濃度為:0.77μΜ)，Na2MoO4.2H2O (濃度為:0.58μΜ)，NH4VO3 (濃度為:0.25μΜ)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種微小種子的培養(yǎng)方法，包括如下步驟：微小種子用NaClO消毒，再用蒸餾水沖洗，放入冰箱冷藏2天；用標(biāo)簽紙將培養(yǎng)管頂部的洞口堵住，將培養(yǎng)管倒置在桌面上，用移液器將已經(jīng)加熱溶解的0.48%的瓊脂加入到培養(yǎng)管中，靜置片刻待其凝固；在培養(yǎng)皿中加入已經(jīng)加熱溶解的0.48%的瓊脂至0.4cm高，靜置片刻待其凝固；將已經(jīng)凝固了的培養(yǎng)管頂部的標(biāo)簽紙揭去，在每個(gè)培養(yǎng)管的頂部用鑷子點(diǎn)上微小種子；將帶有種子的培養(yǎng)管插入到裝有瓊脂的培養(yǎng)皿中，用封口膜將培養(yǎng)皿密封好，放入溫室中發(fā)芽3天，種子發(fā)芽后；將發(fā)芽的培養(yǎng)管插入支撐板上，放入裝有培養(yǎng)液的培養(yǎng)盒中。發(fā)明具有操作方便，出苗率高，且幼苗健壯等諸多優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】A01H4-00
【公開號(hào)】CN104542304
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510047183
【發(fā)明人】郭萬(wàn)里, 盛翊佳, 丁亞文, 傅媛燁
【申請(qǐng)人】浙江理工大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2015年1月30日