一種解決馬鈴薯品種作為雜交母本不育的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及馬鈴薯育種技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是一種解決馬鈴薯品種作為雜交母本不育的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]馬鈴薯原產(chǎn)南美洲安第斯山，我國馬鈴薯種質(zhì)資源有限，但其中仍有部分馬鈴薯資源不能正常開花、結(jié)實:如全國推廣種植面積最大的馬鈴薯品種克新I號，結(jié)薯集中，大薯率高，豐產(chǎn)性和穩(wěn)產(chǎn)性優(yōu)良，但花粉不育，雌蕊敗育，不能天然結(jié)實和作為雜交親本即柱頭授粉后不能正常生長發(fā)育產(chǎn)生種子。所以上述優(yōu)良馬鈴薯資源不能作為雜交親本，限制了馬鈴薯雜交育種的遺傳基礎(chǔ)。
[0003]馬鈴薯現(xiàn)蕾至開花期，為地下塊莖形成和生長的盛期，葉片合成生產(chǎn)的養(yǎng)分源源不斷供應(yīng)地下部生長，而生殖器官得到的養(yǎng)分相對較少，就有可能造成某些馬鈴薯資源的生殖器官生長發(fā)育不良甚至引起敗育。
[0004]CN103477876A公開了一種馬鈴薯與番茄嫁接的技術(shù)，解決了增加開花量和延長花期的問題，并可使原先能結(jié)實的馬鈴薯結(jié)實量增多。目前對于授粉后不能形成種子的馬鈴薯品種(如克新I號)育種難題，尚未見到文獻公開。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種解決馬鈴薯品種作為雜交母本不育的方法，可以克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，解決了長期以來馬鈴薯品種作為雜交母本不育的問題。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案的培育步驟如下:
a.砧木的培育與選擇
采取在溫室育苗，將酸漿種子用45°C的溫水浸種，或用0.01%的高錳酸鉀液浸泡lOmin，防止種子攜帶病毒病菌；然后用清水浸12h，撈出，均勻平鋪在濕毛巾上，將毛巾卷成卷狀，放入30°C人工氣候箱催芽；待40%-50%的種子露白后既可播種；
上述處理后的撒播于基質(zhì)為草炭土的苗盤中，覆土 3mm-5mm。上覆蓋一層的遮陽網(wǎng)，每天用噴霧器噴水，保持基質(zhì)濕度，白天保持20°C -25°C，夜間10°C -15°C ;
出苗后進行間苗，間距為5cmX5cm，間除過密、并生、傷殘弱苗；在2_3葉期，將幼苗裝入1cmX 1cm營養(yǎng)缽或花盆，加強水肥管理；苗期保持土壤濕潤狀態(tài)，期間追施復(fù)合肥一次；當(dāng)酸漿幼苗長至6-7成熟片葉時，作為砧木準(zhǔn)備嫁接；
b.接穗的培育與選擇
選用馬鈴薯品種(克新I號)的脫毒苗后代原種(該級別種薯生命力強，幼苗直徑粗細程度與站木直徑相近)，播種于苗盤中，基質(zhì)為草炭土，覆土厚度為2cm-3cm，當(dāng)幼苗剛剛破土，出土約lcm-2cm時，作為接穗準(zhǔn)備嫁接；
c.嫁接嫁接前先用75%的酒精擦拭刀片和手，進行消毒，每完成一組嫁接后，均要用酒精消毒刀片和手，待酒精完全揮發(fā)干后，方能進行下一步操作；
(1)砧木的準(zhǔn)備
去除酸漿的頂芽，保留下面5-6片葉片，從頂部第一片完全葉與第二片完全葉之間的莖節(jié)間采用腹接法，用雙面刀片從砧木頂端一側(cè)斜向下30°，切至莖的1/3-1/2處，刀口深度約 1.0—1.5cm ；
(2)接穗的準(zhǔn)備
用刀片將馬鈴薯幼苗從基部切下，摘去全部葉片，然后用刀片將接穗削成一長一短斜面的不對稱楔形，楔面大小與砧木切口大小一致，保持楔面干凈整潔；
(3)嫁接
將接穗插入砧木切口，使二者切口對齊，然后用兩只銀針上下刺穿砧木與接穗固定；
d.嫁接后管理
將嫁接后的小苗放入小拱棚，用50%多菌靈800倍液對砧木和接穗及周圍環(huán)境進行消毒，蓋嚴薄膜，再在上面覆蓋雙層遮陽網(wǎng)，每天向棚內(nèi)噴水，保持棚內(nèi)濕度在90%以上，白天溫度保持在25-30°C，夜間15-18°C ；
嫁接后3-4天，及時清除感染病苗，發(fā)病較輕的去除有病葉片，用50%多菌靈800倍液噴施防治，每隔5—7天I次，連噴3-4次；一周后，當(dāng)接穗開始生長時，逐步去除遮陽網(wǎng)，并逐步放風(fēng)，此時濕度維持在50-70%，白天保持25-28°C，夜間14_15°C ;—個月后，當(dāng)接穗馬鈴薯長出2~3片葉時，移出小拱棚，常規(guī)管理，注意去除酸漿砧木上的萌蘗；
e.雜交授粉
(1)選擇嫁接苗花蕾肥大，開花前1-2天的花蕾，撥開花瓣后，去除雄蕊；
(2)授粉，套袋，掛牌:采集父本的花粉涂抹在去雄后的花朵柱頭上，并套袋掛標(biāo)簽，注明雜交日期，父本母本品種名稱，第二天重復(fù)授粉；
(3)雜交果成熟，收獲實生種子。
[0007]進一步，所述的馬鈴薯品種母本為克新I號，父本為冀張薯8號。
[0008]酸漿又名紅姑娘，茄科酸漿屬，與馬鈴薯是同科異屬植物，原產(chǎn)我國、野生資源豐富，為多年生宿根草本植物，其根系發(fā)達，能為地上部植株生長提供充足的養(yǎng)分。
[0009]為利用上述馬鈴薯品種(克新I號)的優(yōu)良性狀，本發(fā)明利用馬鈴薯(克新I號)幼苗為接穗，酸漿為砧木，通過切斷馬鈴薯地下部塊莖養(yǎng)分供應(yīng)，且酸漿龐大的根系為地上部提供更充足的養(yǎng)分，使得馬鈴薯(克新I號)的生殖器官獲得足夠的養(yǎng)分供應(yīng)，以此促進生殖器官的正常生長發(fā)育并達到授粉后正常結(jié)實的目的。
[0010]嫁接雜交是指通過嫁接的方法來獲得遺傳性和嫁接雜種的過程，又稱嫁接誘變。目前人們對“嫁接雜交”的認識逐漸深入，嫁接雜交的概念最先由達爾文提出，我國關(guān)于嫁接雜交的事實也有很多記載。嫁接引起性狀變異的學(xué)說主要有2個:(1) “橫向基因轉(zhuǎn)移”學(xué)說，即砧木和接穗間發(fā)生了基因和物質(zhì)的交流，砧木或接穗由于吸收對方的遺傳物質(zhì)而發(fā)生了變異。而國外關(guān)于部分蛋白質(zhì)(包括調(diào)控開花的“成花蛋白”)和小RNA可在嫁接植株的韌皮部運輸已有報道。(2) “表觀遺傳”學(xué)說，即嫁接植株為彼此提供了的特殊環(huán)境，使砧木或接穗在自身基因序列沒有發(fā)生改變的情況下，其基因表達情況發(fā)生了可遺傳改變。來自德國Max Planck研宄所的科學(xué)家最新研宄結(jié)果表明嫁接植物可以交換各自的遺傳基因，并能夠創(chuàng)造新物種，這一研宄結(jié)果已發(fā)表在Nature和Science上，他們提出嫁接技術(shù)已突破其傳統(tǒng)無性繁殖的意義，將在培養(yǎng)異源多倍體植株雜種方面開辟一個新的方法。
[0011]本發(fā)明的優(yōu)點是從眾多的砧木材料中經(jīng)過多次試驗，最終確定選擇酸漿作為砧木，是由于酸漿的根系較常用的砧木(如番茄)的根系更為龐大，可為馬鈴薯(克新I號)地上部提供更充足的養(yǎng)分，使得馬鈴薯(克新I號)的生殖器官獲得足夠的養(yǎng)分供應(yīng)。從而使馬鈴薯(克新I號)能夠在授粉后正常結(jié)實。解決了馬鈴薯(克新I號)長期以來不能正常結(jié)實的難題。
【附圖說明】
[0012]圖1為嫁接初期圖片；
圖2為嫁接連接部位圖片；
圖3為嫁接地上部位(馬鈴薯和酸漿葉片)圖片；
圖4收獲得雜交果種子圖片。
[0013]【具體實施方式】:
本發(fā)明所采用的原材料、輔助材料均為市場上能公開銷售的材料。
[0014]a.砧木的培育與選擇
一般在溫室育苗，酸漿種子用45°C的溫水浸種，或用0.01%的高錳酸鉀液浸泡lOmin，防止種子攜帶病毒等病菌；然后用清水浸12h，撈出，均勻平