一種利用香蒲屑培養(yǎng)靈芝的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用真菌栽培的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種包含香蒲、荊條枝肩的靈芝 培養(yǎng)基及其用于培養(yǎng)靈芝的方法。
[0002] 靈芝（Ganodemralucidum)屬真菌門，擔(dān)子菌綱，多孔菌目，多孔菌科，靈芝屬。是 我國醫(yī)療寶庫中1種珍貴的藥用真菌，被喻為"仙草"。
[0003] 我國最早藥學(xué)文獻(xiàn)《神農(nóng)本草經(jīng)》和李時(shí)珍的《本草綱目》詳述了靈芝種類、產(chǎn)地、 藥性功效。歷代的醫(yī)藥學(xué)家都認(rèn)為，靈芝能治療多種疾病，而且是滋補(bǔ)強(qiáng)壯，扶正固本的良 藥。由于靈芝所含成分獨(dú)特，近幾年，靈芝的開發(fā)與研宄在日本、韓國、我國臺(tái)灣和歐美等地 已成為熱門的話題。有計(jì)劃、集約性地發(fā)展靈芝生產(chǎn)，開發(fā)靈芝系列產(chǎn)品，這是發(fā)展真菌事 業(yè)中的一項(xiàng)很有現(xiàn)實(shí)意義的工作。
[0004] 香蒲是國際上公認(rèn)的濕地水生植物優(yōu)勢品種，編織等雖然能夠消費(fèi)部分蒲草，但 用量有限。香蒲生長繁殖快且生物量大，在我國分布廣泛，由于具有適應(yīng)性廣、抗逆性強(qiáng)等 優(yōu)點(diǎn)，目前，香蒲在濕地的大量繁殖進(jìn)而產(chǎn)生的殘枝等廢棄物，造成了對水體的破壞，并形 成對濕地的內(nèi)源污染。
[0005] 纖維素是食藥用真菌生長所必須的營養(yǎng)物質(zhì)，也是香蒲的主要成分，所以利用香 蒲栽培菌類，擴(kuò)大香蒲的資源化開發(fā)利用技術(shù)途徑，不僅成為栽培菌類的新型基質(zhì)，為農(nóng)民 增收創(chuàng)造更多的機(jī)遇，而且，有利于濕地生態(tài)的良性發(fā)展。
[0006] 荊條（Vitexnegundovarineica)在河北太行山低山丘陵區(qū)分布極為廣泛，屬于 優(yōu)勢灌木樹種。河北太行山荊條資源豐富，分布廣泛，據(jù)調(diào)查多處于野生狀態(tài)，尚無較大 利用；就傳統(tǒng)利用方式荊編來說，荊條的總利用量也不足資源量的10%，研宄表明荊條中 有纖維素、木質(zhì)素、半纖維這些食藥用真菌生長所必須的營養(yǎng)物質(zhì)，還含有豐富的有機(jī)質(zhì)和 農(nóng)作物生長所需要的營養(yǎng)元素。但是到目前為止，荊條一直被視為農(nóng)林廢棄物并沒有得到 充分而有效的開發(fā)利用，嚴(yán)重地浪費(fèi)了資源。
[0007] 香蒲粉碎后，粉較細(xì)，作為菌類栽培基質(zhì)，影響呼吸作用，如果將荊條肩作為輔料 拌入，不僅可以補(bǔ)充碳源，還可以因其物理形狀，提高香蒲主料的透氣性，用來栽培靈芝，既 能降低成本、提高經(jīng)濟(jì)效益，又能實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是提供一種利用香蒲為主料，栽培靈芝的方法，減小香蒲對水體的 破壞。
[0009] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明所述目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案。
[0010] 這種利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，包括如下步驟：
[0011] A.液體菌種的制備和培養(yǎng)；
[0012] B.谷粒菌種的制備和培養(yǎng)；
[0013]C?栽培用培養(yǎng)基的制備；
[0014]D.無菌條件下，將步驟B制備得到的谷粒菌種接入步驟C制備得到的培養(yǎng)基，進(jìn)行 培養(yǎng)、出葫管理、米收；
[0015]創(chuàng)新點(diǎn)是在步驟A或/和步驟B或/和步驟C的培養(yǎng)基中含有香蒲肩。
[0016]所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，步驟A中靈芝的液體菌種培養(yǎng)基中作為底物誘 導(dǎo)物、提前加入香蒲肩；其優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基配方重量比為：馬鈴薯20%，香蒲肩5%， 麩皮3%，葡萄糖2%，KH2P04 0.3%，MgS04 0.15%，VB1 10mg/L，羧甲基纖維素0.3%，水 lOOOmL，pH自然。
[0017] 所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，步驟A中液體菌種的制備特征在于：
[0018] a.-級液體菌種的制備
[0019] 無菌條件下，將市售母種接入一級液體培養(yǎng)基中，26-28°C、160r/min恒溫振蕩培 養(yǎng)7d，即制得一級液體菌種；
[0020] 所述一級液體菌種培養(yǎng)基以重量比為：馬鈴薯20%，麩皮3%，葡萄糖2%，KH2P04 0. 3%,MgS04 0.15%,CMC0.3%,VBl10mg/L；
[0021] b.二級液體菌種的制備
[0022] 無菌條件下，將一級液體菌種以10%的接種量接入二級液體培養(yǎng)基中，26_28°C、 160r/min恒溫振蕩培養(yǎng)7d，即制得二級液體菌種；
[0023] 所述二級液體菌種培養(yǎng)基配方重量比為：馬鈴薯20%，香蒲肩5%，麩皮3%，葡萄 糖2%，KH2P04 0.3%，MgS04 0.15%，CMC0.3%，VB1 10mg/L。
[0024] 所述的利用香蒲培養(yǎng)靈芝的方法，步驟B中靈芝的谷粒菌種培養(yǎng)基中也作為底 物誘導(dǎo)物、提前加入香蒲肩；其優(yōu)化的谷粒菌種培養(yǎng)基配方重量比為：麥粒79%，香蒲肩 10%，荊條枝肩10%，生石灰1%。
[0025] 所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，步驟B中谷粒菌種的制備特征在于：
[0026]將步驟A得到的二級液體菌種接入谷粒菌種培養(yǎng)基，接種量為10%，26_28°C培養(yǎng) 至滿，得到谷粒菌種。
[0027]所述的利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，步驟C中香蒲肩作為栽培靈芝的主料，栽培 培養(yǎng)基配方重量比為：香蒲肩50%、荊條枝肩30%、麩皮10%、棉籽皮9%，生石灰1%;制 備方法是將香蒲、荊條枝粉碎成木肩狀，配以棉籽皮、麩皮和生石灰，料水比為1 : 1.4。
[0028] 所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，步驟C中香蒲培養(yǎng)基的制備特征在于：
[0029]香蒲事先粉碎為木肩狀；稱取培養(yǎng)基的各組成成分，加水混合均勻后，堆悶 30min，裝入容器內(nèi)，滅菌，冷卻后備用。
[0030] 所述利用香蒲肩培養(yǎng)基栽培靈芝的方法，步驟D中谷粒菌種的接種量為5-10%。
[0031] 所述利用香蒲肩培養(yǎng)基栽培靈芝的方法，液體培養(yǎng)基中所用香蒲肩，事先粉碎并 過80目篩。
[0032] 所述利用香蒲肩培養(yǎng)基栽培靈芝的方法，步驟C中培養(yǎng)基的滅菌條件為KKTC常 壓滅菌36h。
[0033] 本發(fā)明創(chuàng)新點(diǎn)在于香蒲肩為主要原料作為栽培靈芝培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中提前 加入香蒲作為底物誘導(dǎo)物，采用了靈芝PDA母種-液體菌種-谷粒菌種-香蒲出菇袋工藝， 可以縮短生產(chǎn)周期近三分之一。技術(shù)進(jìn)步效果在于：
[0034] 1、對于食用菌而言，為其提供生長所需碳源；
[0035]2、香蒲目前尚未得到開發(fā)利用，資源豐富，用于食用菌生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)效益高；
[0036] 3、從生態(tài)的角度來看，減少了對水體的破壞，為食用菌栽培提供了一種價(jià)格低廉 的栽培原料，不僅避免了濕地的內(nèi)源污染，而且大幅降低了栽培成本，解決了栽培食用菌資 源的緊迫性，具有可觀的經(jīng)濟(jì)效益，應(yīng)用前景廣闊。
【具體實(shí)施方式】
[0037] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明所述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0038]實(shí)施例：利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，靈芝菌種為市場采購。
[0039]A.液體菌種的制備
[0040] 一級液體菌種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯20%，麩皮3%，葡萄糖2%，KH2P04 0.3%， MgS04 0. 15%，VBl10mg/L，CMC0. 3%，pH自然；二級液體菌種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯20%， 香蒲 5%，麩皮 3%，葡萄糖 2%，KH2P04 0.3%，MgS04 0? 15%，VB1 10mg/L，CMC0.3%，pH 自然；其中香蒲粉碎過80目篩得粉狀，與馬鈴薯、麩皮共煮沸30min，過濾去渣得浸提液。
[0041] 一級液體菌種制備時(shí)使用500mL錐形瓶，裝液量為200mL，121°C高壓滅菌30min 后，無菌條件下接入市售的PDA斜面菌種，每瓶接種量為4塊0. 5cmX0. 5cm菌種塊。接種 后在28°C、160r/min的條件下，恒溫振蕩培養(yǎng)7d。
[0042] 二級液體菌種裝液量規(guī)格、滅菌條件及培養(yǎng)條件同上，接種量為10%。
[0043] 將優(yōu)化得到的二級液體菌種和常規(guī)PDA菌種分別接到添加香蒲的試管中，對比其 發(fā)菌速度。對比結(jié)果如表1所示。
[0044] 表1靈芝液體菌種與PDA菌種的發(fā)菌速度對比
[0045]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，包括如下步驟： A. 液體菌種的制備和培養(yǎng)； B. 谷粒菌種的制備和培養(yǎng)； C. 栽培用培養(yǎng)基的制備； D. 無菌條件下，將步驟B制備得到的谷粒菌種接入步驟C制備得到的培養(yǎng)基，進(jìn)行培 養(yǎng)、出葫管理、米收； 其特征在于：在步驟A或/和步驟B或/和步驟C的培養(yǎng)基中含有香蒲肩。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括：步驟A中靈芝 的液體菌種培養(yǎng)基中作為底物誘導(dǎo)物、提前加入香蒲肩；其優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基配方重量 比為：馬鈴薯20%，香蒲肩5%，麩皮3%，葡萄糖2%，KH2P04 0. 3%，MgS04 0. 15%，VB1 10mg/L，羧甲基纖維素0? 3 %，水1000mL，pH自然。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，所述步驟A中液體菌種的制備特 征在于： a. -級液體菌種的制備 無菌條件下，將市售母種接入一級液體培養(yǎng)基中，26-28°C、160r/min恒溫振蕩培養(yǎng) 7d，即制得一級液體菌種； 所述一級液體菌種培養(yǎng)基以重量比為：馬鈴薯20%，麩皮3%，葡萄糖2%，KH2P04 0. 3%, MgS04 0. 15%, CMC 0. 3%, VB110mg/L ； b. 二級液體菌種的制備 無菌條件下，將一級液體菌種以10 %的接種量接入二級液體培養(yǎng)基中，26-28°C、160r/ min恒溫振蕩培養(yǎng)7d，即制得二級液體菌種； 所述二級液體菌種培養(yǎng)基配方重量比為：馬鈴薯20 %，香蒲肩5 %，麩皮3 %，葡萄糖 2%,KH2P04 0. 3%,MgS04 0.15%, CMC 0.3%, VBl 10mg/L〇
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用香蒲培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括：步驟B中靈芝的谷 粒菌種培養(yǎng)基中也作為底物誘導(dǎo)物、提前加入香蒲肩；其優(yōu)化的谷粒菌種培養(yǎng)基配方重量 比為：麥粒79%，香蒲肩10%，荊條枝肩10%，生石灰1%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，所述步驟B中谷粒菌種的制備特 征在于： 將步驟A得到的二級液體菌種接入谷粒菌種培養(yǎng)基，接種量為10 %，26-28°C培養(yǎng)至 滿，得到谷粒菌種。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，其特征包括：步驟C中香蒲肩 作為栽培靈芝的主料，栽培培養(yǎng)基配方重量比為：香蒲肩50%、荊條枝肩30%、麩皮10%、 棉籽皮9%，生石灰1 %;制備方法是將香蒲、荊條枝粉碎成木肩狀，配以棉籽皮、麩皮和生石 灰，料水比為1 : 1.4。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述利用香蒲肩培養(yǎng)靈芝的方法，所述步驟C中香蒲培養(yǎng)基的制備 特征在于： 香蒲事先粉碎為木肩狀；稱取培養(yǎng)基的各組成成分，加水混合均勻后，堆悶30min，裝 入容器內(nèi)，滅菌，冷卻后備用。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用香蒲肩培養(yǎng)基栽培靈芝的方法，其特征在于，步驟D中谷粒 菌種的接種量為5-10%。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述利用香蒲肩培養(yǎng)基栽培靈芝的方法，其特征在于，液體培養(yǎng)基 中所用香蒲肩，事先粉碎并過80目篩。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述利用香蒲肩培養(yǎng)基栽培靈芝的方法，其特征在于，步驟C中培 養(yǎng)基的滅菌條件為l〇〇°C常壓滅菌36h。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種利用香蒲屑培養(yǎng)靈芝的方法，包括如下步驟：A.液體菌種的制備和培養(yǎng)；B.谷粒菌種的制備和培養(yǎng)；C.栽培用培養(yǎng)基的制備；D.無菌條件下，將步驟B制備得到的谷粒菌種接入步驟C制備得到的培養(yǎng)基，進(jìn)行培養(yǎng)、出菇管理、采收；創(chuàng)新點(diǎn)是在步驟A或/和步驟B或/和步驟C的培養(yǎng)基中含有香蒲屑。本發(fā)明利用了濕地香蒲廢棄物，減少對水體的生態(tài)破壞，降低了栽培成本，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益，具有廣闊的應(yīng)用前景。
【IPC分類】C05G3-00, A01G1-04
【公開號】CN104871828
【申請?zhí)枴緾N201510321155
【發(fā)明人】王謙, 齊悅歌, 劉敏
【申請人】河北大學(xué)
【公開日】2015年9月2日
【申請日】2015年6月12日