一種快速高效誘導(dǎo)濱梅組培苗生根的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種誘導(dǎo)濱梅組培苗生根的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 在濱梅Marshall)屬薔薇科李屬，是一種海灘沙生灌木類果 樹，從紐芬蘭到北卡羅萊那州的北大西洋海岸都有分布（Clark，2000)。濱梅的果實酸甜可 口，除鮮食外，還可用于生產(chǎn)果醬、果汁、果酒、果凍、軟糖等等一系列果品的加工。濱梅適應(yīng) 性較強，能夠在多種逆境中生存并開花結(jié)果，是一種兼有重要經(jīng)濟價值和生態(tài)價值的樹木。
[0003] 濱梅的繁殖方法有種子繁殖、根蘗繁殖、扦插繁殖和組培快繁，目前報道的種子繁 殖成活率可達85% (王小敏，2012)，根蘗繁殖的成活率為93%~98% (宰學(xué)明，2014)，扦插繁 殖成活率也達到了 98. 3% (張煥仕，2013)，雖然濱梅組培苗20d的瓶內(nèi)生根率為85%~93. 7% (方逵，2006 ;付素靜，2009 ;閆道良，2006)，然而移栽成活率卻只有56%~78% (方逵，2006 ; 付素靜，2009 ;閆道良，2006)，因此亟需要開發(fā)一種快速、高效誘導(dǎo)濱梅組培苗生根的方法， 不僅使組培苗的生根率較高，且生根苗的根系較發(fā)達、移栽成活率也較高，可以培育出高質(zhì) 量的濱梅優(yōu)質(zhì)苗。為了解決上述問題，目前最為直接有效的方法是研發(fā)一種適宜濱梅組培 苗生根的培養(yǎng)基及高效的生根誘導(dǎo)物質(zhì)，另外加強生根培養(yǎng)過程中尤其是移栽后的科學(xué)管 理，加強濱梅的成活率和苗木質(zhì)量，因此，需要對生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法進行改進。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 技術(shù)問題：為了克服現(xiàn)有濱梅組培苗生根方法中存在生根分支少、根部培養(yǎng)基不 易清洗、移栽成苗率低等技術(shù)的不足，本發(fā)明根據(jù)濱梅生長特性，提供一種可有效提高濱梅 組培苗生根率和移栽成活率的生根培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法，達到提高濱梅組培苗生根率和移栽 成活率，且培養(yǎng)健壯苗木的方法，具有節(jié)本高效，縮短濱梅組培苗木培育周期等特點，為規(guī) ?；a(chǎn)提供快速生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗的方法。
[0005] 技術(shù)方案：為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案在選用濱梅健壯的無根組培 苗，經(jīng)過一系列誘導(dǎo)培養(yǎng)后生根率100%，移栽成活率達90%以上，移栽成活率比目前報道的 提尚了 12%~34%。具體步驟如下： (1)配制基本培養(yǎng)基BPM :濱梅生根專用培養(yǎng)基為BPM，其包括大量營養(yǎng)元素、微量營養(yǎng) 元素、鐵鹽和有機試劑，各種類營養(yǎng)元素組分及濃度如下： X大量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度為：硝酸銨522. 5 mg/L;七水硫酸鎂185 mg/L ;硫酸鉀247. 5 mg/L ;無水磷酸二氫鉀85 mg/L ;四水硝酸媽278 mg/L。
[0006] S微量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度為：四水硫酸錳22. 3 mg/L ;七水硫酸鋅 8. 6 mg/L ;硼酸3. 2 mg/L ;碘化鉀0· 42 mg/L ;二水鉬酸鈉0· 25 mg/L ;無水硫酸銅0· 25 mg/ L ;六水氯化鈷0· 013 mg/L。
[0007] @鐵鹽的組分和其對應(yīng)的濃度為：乙二胺四乙酸二鈉37. 3 mg/L ;七水硫酸亞鐵 27. 8 mg/L〇
[0008] S.有機試劑的組分和其對應(yīng)的濃度為：甘氨酸2· 0 mg/L ;鹽酸硫胺素 (λ 5 mg/L ; 煙酸0· 5 mg/L ;鹽酸[!比卩多醇0· 5 mg/L ;肌醇100. 0 mg/L。
[0009] 以上各類營養(yǎng)成分的組分均用少量去離子水單獨溶解，然后再混勻。
[0010] (2)配制生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基： 配制完基本培養(yǎng)基BPM后，向BPM中添加生根誘導(dǎo)劑NAA，使其濃度為0. 1~0. 5 mg/L， 然后添加 I. 〇~4. 0 g/L的活性炭、5. 5 ~6. 0 g/L瓊脂和20 g/L蔗糖，最后定容到所配的 體積，且調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值為5. 8~6. 0,加熱溶解后分裝到組培瓶內(nèi)，使每瓶培養(yǎng)基的厚度 約為I. 5cm，經(jīng)121°C、1. lKg/cm2高壓滅菌、15~20 min后冷卻備用。
[0011] (3)生根誘導(dǎo)培養(yǎng)： 選取生長健壯的濱梅無根組培苗，將其修剪成3~5 cm長，然后接種到生根培養(yǎng)基中，接 種深度為I cm左右，每瓶接種2~4株為宜，然后在溫度為23~27°C，光照時間為每日12~15 h，光強2500~3000 Ix的條件下培養(yǎng)，一般7 d即開始生根，14 d瓶內(nèi)生根率即可達100%， 20 d后即可進行煉苗移栽。
[0012] (4)煉苗移栽： 生根誘導(dǎo)獲得的濱梅生根苗置于室內(nèi)散射光處，煉苗2 d，然后松開培養(yǎng)瓶蓋，使組培 苗于室內(nèi)空氣接觸，3 d后將煉好的濱梅生根苗從培養(yǎng)瓶中取出，挑選葉數(shù)為3~6個，生根 數(shù)達3條以上，根系長達2. 0 cm的生根苗，用水沖洗根部殘留的培養(yǎng)基，移栽入蛭石：泥炭 土：珍珠巖=1: 1: 2的混合基質(zhì)中，移栽時應(yīng)將組培苗的根系完全埋入基質(zhì)中；澆足水后， 保持溫度20~25°C，濕度60~80%，放置于陰涼處，每周澆1次透水，20 d后濱梅組培苗的移 栽成活率可達90%以上。 本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明所述的濱梅生根培養(yǎng)基通過改良MS基本培養(yǎng)基及成分、調(diào) 整培養(yǎng)條件等配套措施，使得移栽成活率可達到90 %以上，從接種到移栽成活僅需45 d，不 僅提高了誘導(dǎo)生根效率，而且培育的種苗整齊健壯，具有節(jié)本高效，縮短濱梅組培苗木培育 周期等特點，為規(guī)?；a(chǎn)提供快速生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗的方法。
【附圖說明】
[0013] 圖1培養(yǎng)基中不添加活性炭的濱梅組培苗(底部有愈傷塊） 圖2培養(yǎng)基中添加活性炭的濱梅生根組培苗 圖3生根培養(yǎng)基NAA濃度分別為0.1 mg/L、0. 3 mg/L和0. 5 mg/L的濱梅生根組培苗
【具體實施方式】
[0014] 下面將結(jié)合具體實施例，詳細說明本發(fā)明的【具體實施方式】，但實施例僅是示例性 的，對本發(fā)明不構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該理解的是在不偏離本發(fā)明精神和范 圍的情況下，可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，而這些修改和替換均 落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
[0015] 實施例1:基本培養(yǎng)基對濱梅組培苗生根的影響 剪取濱梅無根組培苗3~5 cm，將其接種到基本培養(yǎng)基+0.3 mg/L NAA+3.0 g/L活性炭 +5.6 g/L瓊脂+20 g/L蔗糖，且pH值為5.8。每瓶接種4株，每處理20株，重復(fù)3次，每7 天觀察1次，20 d后統(tǒng)計結(jié)果。從表1可以看出，3種基本培養(yǎng)基對濱梅組培苗生根的影響 較顯著，以1/2WPM為基本培養(yǎng)基的效果最差，無論是生根數(shù)、根長還是生根率都較低，而且 植株長勢也不好，而以BPM為基本培養(yǎng)基的生根效果最好，不僅生根數(shù)多，生根率達100%， 在后期的移栽試驗中也驗證了其較高的移栽成活率，因此，誘導(dǎo)濱梅組培苗生根選用BPM 為最佳基本培養(yǎng)基。
[0016] 表1不同基本培養(yǎng)基對濱梅組培苗生根的影響
實施例2 : NAA濃度對濱梅組培苗生根的影響 剪取濱梅無根組培苗3~5 cm，將其接種到BPM+0~0. 7 mg/L NAA+3. 0 g/L活性炭+5. 6 g/L瓊脂+20 g/L蔗糖，且pH值為5. 8。每瓶接種4株，每處理20株，重復(fù)3次，每7天 觀察1次，20 d后統(tǒng)計結(jié)果。由表2可知，當不添加 NAA時生根率也可達到85. 0%，但是平 均根長卻較低，而且植株地上部分的長勢一般，不利于后期的連苗移栽；當添加 NAA的濃度 大于等于0.1時生根率和平均根長均顯著提高，但是當添加 NAA的濃度為0.7 mg/L時，除 平均根長略有下降(但是差異不顯著)，其他指標無顯著差異，但是地上部植株卻出現(xiàn)了大 量的玻璃化，而玻璃化的苗是不能用于后期的煉苗移栽的，因此NAA的添加了不宜超過0. 7 mg/L，比較適宜的NAA濃度范圍應(yīng)該是0. 1~0. 5 mg/L。
[0017] 表2不同NAA濃度對濱梅組培苗生根的影響
實施例3 :活性炭濃度對濱梅組培苗生根的影響 剪取濱梅無根組培苗3~5 cm，將其接種到ΒΡΜ+0. 3 mg/L NAA+0~4. 0 g/L活性炭+5. 6 g/L瓊脂+20 g/L蔗糖，且pH值為5. 8。每瓶接種4株，每處理20株，重復(fù)3次，每7天 觀察1次，20 d后統(tǒng)計結(jié)果。由表3可知，當不添加活性炭時，濱梅組培苗的生根率很低， 只有70. 0%，底部容易長愈傷塊不利于地上部的生長，因此造成植株長勢較差；而當活性炭 的添加量為I. 〇 g/L時，雖然生根率和生根數(shù)有所提高，但是植株的長勢仍舊不是很好；當 活性炭的添加量為2. 0~4.0 g/L時，3個處理均7 d即開始有根萌出，14 d生根率即達到 了 100%，20 d的生根數(shù)、根長和生根率均較高，且無顯著差異，植株長勢也較好，后期的移栽 成活率達90%以上；而當活性炭的添加量為5. 0 g/L時，各項指標均有所下降，植株生長液 受到輕微抑制，這可能是高濃度的活性炭吸收了培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，間接地降低了各有 效成分的含量，從而抑制了植株的生長。因此，濱梅組培苗的生根培養(yǎng)中添加一定量的活性 炭，有利于濱梅組培苗生根與培育壯苗，適宜的添加量為2. 0~4. 0 g/L。
[0018] 表3不同活性炭濃度對濱梅組培苗生根的影響

【主權(quán)項】
1. 本發(fā)明公開了一種濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基（BPM)及其培養(yǎng)方法，其特征在 于，包括BPM+NAA+活性炭+5. 5~6.Og/L瓊脂+20g/L蔗糖，且pH值為5. 8~6. 0,培養(yǎng)室 的培養(yǎng)條件為保持溫度為23~27°C，光照時間為每日12~15h，光強2500~3000lx。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基，其特征在于，所述的 BPM基本培養(yǎng)基包括大量營養(yǎng)元素、微量營養(yǎng)元素、鐵鹽和有機試劑。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基BPM，其特征在于，所 述的大量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度為：硝酸銨522. 5mg/L;七水硫酸鎂185mg/L; 硫酸鉀247. 5mg/L;無水磷酸二氫鉀85mg/L;四水硝酸鈣278mg/L。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基BPM，其特征在于，所 述的微量營養(yǎng)元素的組分和其對應(yīng)的濃度為：四水硫酸錳22. 3mg/L;七水硫酸鋅8. 6mg/ L;硼酸3. 2mg/L;碘化鉀0? 42mg/L;二水鉬酸鈉0? 25mg/L;無水硫酸銅0? 25mg/L;六水 氯化鈷 0.013mg/L。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基BPM，其特征在于，所 述的鐵鹽的組分和其對應(yīng)的濃度為：乙二胺四乙酸二鈉37. 3mg/L;七水硫酸亞鐵27. 8 mg/L〇6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基BPM，其特征在于，而 所述的有機試劑的組分和其對應(yīng)的濃度為：甘氨酸2.0mg/L;鹽酸硫胺素0.5mg/L;煙酸 0? 5mg/L;鹽酸P比唆醇 0? 5mg/L;肌醇 100. 0mg/L。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種濱梅組培苗生根誘導(dǎo)劑NAA的濃度為0. 1~0. 5mg/L， 添加活性炭的濃度為I. 〇~4. 0g/L。
【專利摘要】本發(fā)明公開了濱梅組培苗專用生根基本培養(yǎng)基（BPM）及其培養(yǎng)方法，其特征在于，通過改良MS基本培養(yǎng)基成分、添加生根誘導(dǎo)劑（NAA、活性炭）以及調(diào)整培養(yǎng)條件等配套措施，14d時瓶內(nèi)生根率即可達100%，使得移栽成活率可達到90％以上，比目前報道的提高了12%~34%。從接種到移栽成活僅需45d，不僅提高了濱梅組培苗的誘導(dǎo)生根效率，而且培育的種苗整齊健壯，具有節(jié)本高效，縮短濱梅組培苗木培育周期等特點，為規(guī)?；a(chǎn)提供快速生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種苗的方法。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號】CN104920226
【申請?zhí)枴緾N201510412313
【發(fā)明人】王小敏, 朱泓, 吳文龍, 李維林, 胡慧敏
【申請人】江蘇省中國科學(xué)院植物研究所
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年7月15日