用于治療和控制植物病害的方法和組合物的制作方法
【專利說(shuō)明】用于治療和控制植物病害的方法和組合物
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求于2012年10月19日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/716, 245和于2013 年3月14日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/785,535的權(quán)益,二者通過(guò)引用完全結(jié)合于此。
[0003] 關(guān)于聯(lián)邦政府資助的研宄的聲明
[0004] 依照下述,美國(guó)政府享有本發(fā)明的某些權(quán)利:動(dòng)植物衛(wèi)生檢驗(yàn)局(APHIS)關(guān)于 德克薩斯皮爾斯疾病研宄與教育項(xiàng)目(Texas Pierce' s Disease Research&Education Program)的合作協(xié)議獎(jiǎng),協(xié)議號(hào)為11-8500-0955-CA,授予AgriLife研宄;和Otsuka制藥 有限公司(Otsuka Pharmaceutical Co.,LTD),協(xié)議號(hào)為 406039,授予 AgriLife 研宄。
[0005] 序列表的并入
[0006] 命名為"TAMC019W0_ST25. txt"的文件中所包含的序列表以電子形式提交并且通 過(guò)引用結(jié)合在本文中,該文件在Microsoft Windows操作系統(tǒng)中測(cè)量為907kb,并且是在 2013年10月17日生成的。 發(fā)明領(lǐng)域
[0007] 本發(fā)明涉及植物病理學(xué)領(lǐng)域。更具體地,本發(fā)明涉及用于分離噬菌體和用于治療 由苛養(yǎng)木桿菌(Xylella fastidiosa)和地毯草黃單胞菌(Xanthomonas axonopodis)引起 的植物病害的方法和組合物,包括作為細(xì)菌病毒的噬菌體的應(yīng)用。
[0008] 發(fā)明背景
[0009] 在植物中,細(xì)菌可能引起多種病害,包括葡萄藤的皮爾斯?。≒ierce' s Disease) 和柑橘屬植物的柑橘潰瘍(Citrus Canker)。細(xì)菌感染植物組織,并且可能引起萎蔫、生長(zhǎng) 差、損害果實(shí),甚至是植物死亡。感染可能通過(guò)風(fēng)、雨、被污染的設(shè)備或媒介昆蟲(chóng)傳播而發(fā) 生,其迅速地傳播到其他植物上,并且導(dǎo)致對(duì)所述植物的有害的作用和大量的農(nóng)作物損失。 這些病害的有效治療需要一種治療植物消除細(xì)菌的方法。
[0010] 發(fā)明概述
[0011] 在一方面,本發(fā)明提供繁殖其宿主范圍包括苛養(yǎng)木桿菌(X. fastidiosain)的有 毒菌體(bacteriophage或phage)的方法,所述方法包括用所述·菌體感染黃單胞菌屬 (Xanthomonas)細(xì)菌的培養(yǎng)物,允許所述噬菌體繁殖,并且從所述培養(yǎng)物中分離噬菌體顆 粒。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述黃單胞菌屬細(xì)菌包括物種菌株EC-12。在另一個(gè)實(shí)施方案 中,所述噬菌體通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面特征而感染細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述細(xì)胞表面特 征是IV型菌毛。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述菌體包括來(lái)自由podophage、siphophage和 myophage組成的組的有尾噬菌體。在其他實(shí)施方案中,所述噬菌體是從環(huán)境、污水處理廠或 流出物、植物或其表面或從環(huán)境土壤中分離的。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中,利用替代宿主 (surrogate host)來(lái)富集有毒菌體。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述菌體對(duì)苛養(yǎng)木桿菌有 毒。在其他實(shí)施方案中,利用瓊脂覆蓋(agar overlaying)來(lái)生長(zhǎng)所述·菌體。
[0012] 在另一方面,本發(fā)明提供獲得用于皮爾斯病的候選生物控制劑的方法,所述方法 包括使苛養(yǎng)木桿菌和黃單胞菌屬細(xì)菌與包含有毒噬菌體群體的樣品接觸,并且從所述群體 分離至少第一種能夠裂解所述苛養(yǎng)木桿菌和黃單胞菌屬細(xì)菌的噬菌體。在一個(gè)實(shí)施方案 中,所述噬菌體通過(guò)與細(xì)胞表面特征結(jié)合而感染細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述細(xì)胞表 面特征是IV型菌毛。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述細(xì)胞表面特征是細(xì)菌宿主的發(fā)病機(jī)制/ 毒力所需要的。其他實(shí)施方案包括使苛養(yǎng)木桿菌和黃單胞菌屬中的至少一種的菌苔與樣 品接觸,使苛養(yǎng)木桿菌和黃單胞菌屬同時(shí)與樣品接觸,和使苛養(yǎng)木桿菌和黃單胞菌屬先后 與樣品接觸。在其他實(shí)施方案中,所述噬菌體是從環(huán)境、污水處理廠或流出物、植物或其表 面或從環(huán)境土壤中分離的。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所用的噬菌體是對(duì)苛養(yǎng)木桿菌(Xylella fastidiosa)有毒的。所述方法還包括在使宿主細(xì)菌與有毒噬菌體接觸后,檢測(cè)裂解的細(xì)菌 宿主細(xì)胞或噬菌斑的形成。在具體的實(shí)施方案中,所述方法包括其上已經(jīng)引入了噬菌體樣 品的平板瓊脂覆蓋物或細(xì)菌宿主細(xì)胞的平板。
[0013] 在其他實(shí)施方案中,使用含有苛養(yǎng)木桿菌和黃單胞菌屬的軟瓊脂覆蓋物來(lái)制備噬 菌體,并且在其他實(shí)施方案中,通過(guò)收集一種或多種包含表現(xiàn)出融合裂解的苛養(yǎng)木桿菌菌 株或黃單胞菌屬菌株(如EC-12)的覆蓋平板,然后浸離并通過(guò)離心來(lái)澄清,來(lái)制備高滴度 的噬菌體平板裂解物。濾器除菌后,可以保存得到的裂解物,例如,在4°C保存。隨后,純化 高滴度噬菌體裂解物,例如,通過(guò)等密度CsCl離心進(jìn)行,并且將提取的噬菌體溶液進(jìn)行透 析。得到的CsCl-純化的噬菌體典型地展現(xiàn)出約lX10 nPFU/ml的滴度。
[0014] 在一些實(shí)施方案中,植物組織濾出液(PTFs)中的噬菌體比率約為ImlPTF :20ml替 代宿主(所選的宿主的活性生長(zhǎng)培養(yǎng)物),對(duì)于苛養(yǎng)木桿菌菌株Temecula生長(zhǎng)4天或?qū)τ?黃單胞菌屬菌株EC-12生長(zhǎng)4小時(shí)。
[0015] 本發(fā)明的另一方面提供預(yù)防或減少植物中與苛養(yǎng)木桿菌相關(guān)的癥狀或病害的方 法,所述方法包括使植物與其宿主范圍包括苛養(yǎng)木桿菌的噬菌體接觸,其中所述與苛養(yǎng)木 桿菌相關(guān)的癥狀或病害包括典型的皮爾斯病(PD)癥狀,其中葉片沿著邊緣表現(xiàn)出黃色或 紅色的現(xiàn)象,最終葉片邊緣壞死。在一個(gè)實(shí)施方案中,可以將噬菌體顆粒引入到植物中。 在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述植物選自由下述組成的組:葡萄藤植物,柑橘屬植物,杏樹(shù)屬 (almond),咖啡樹(shù),苜蓿(alfalfa),夾竹桃(oleander),櫟屬樹(shù)(oak),香楓(sweetgum), 紫荊屬(redbud),榆樹(shù)(elm),桃樹(shù),杏樹(shù)(apricot),李屬(plum),黑莓,桑樹(shù)(mulberry) 和梓柳(Chitalpa tashkentensis)。在另一個(gè)實(shí)施方案中,菌體通過(guò)注射、昆蟲(chóng)媒介 (insect vector)引入到植物中或通過(guò)注射經(jīng)由根系統(tǒng)引入到植物中。在其他實(shí)施方案中, 注射包括針頭或無(wú)針頭系統(tǒng)、充氣空氣(pneumatic air)或壓力注射系統(tǒng)。在其他實(shí)施方 案中,注射是手工進(jìn)行的,或者一次,或者多于一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述昆蟲(chóng)媒介是 玻璃翅葉蝴(glassy winged sharpshooter)。在另一個(gè)實(shí)施方案中,要引入到植物中的· 菌體為1至l〇12PFU/ml (噬菌斑形成單位/ml)、IO4至10 11PFUAil和IO7至10 wPFUAil。在 另一個(gè)實(shí)施方案中,所述噬菌體顆粒通過(guò)下述方法獲得:所述方法包括用所述噬菌體感染 黃單胞菌屬細(xì)菌的培養(yǎng)物,允許所述噬菌體繁殖,并且從所述培養(yǎng)物分離噬菌體顆粒。在另 一個(gè)實(shí)施方案中,所述方法包括使植物群體與所述噬菌體顆粒接觸,以預(yù)防或減少與苛養(yǎng) 木桿菌相關(guān)的癥狀。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述噬菌體包括選自下述Xfas 100噬菌體類型 或Xfas300 菌體類型的菌株中的至少一種菌體(bacteriophage或phage)。
[0016] 在另一方面,本發(fā)明提供一種配制遞送至植物的植物病害生物控制組合物,所述 組合物包含至少一種稀釋劑、輔藥或表面活性劑,和至少一種來(lái)自下述XfaslOO噬菌體類 型或Xfas300 B莖菌體類型的菌體。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述組合物進(jìn)一步定義為配制用 于通過(guò)注射、噴灑(spraying)、薄霧(misting)或粉末(dusting)引入到植物中。在另一個(gè) 實(shí)施方案中,所述組合物進(jìn)一步被定義為配制用于局部施用至植物。
[0017] 在另一方面,本發(fā)明提供獲得用于柑橘屬潰瘍的候選生物控制劑的方法,所述方 法包括使地毯草黃單胞菌柑橘致病變種(Xanthomonas axonopodis pv. citri)細(xì)菌與包含 有毒噬菌體群體的樣品接觸,并且從所述群體分離至少第一種能夠裂解所述地毯草黃單胞 菌(Xanthomonas axonopodis)細(xì)菌的菌體。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述菌體通過(guò)結(jié)合細(xì) 胞表面特征而感染細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述細(xì)胞表面特征是IV型菌毛。在另一個(gè)實(shí) 施方案中,所述細(xì)胞表面特征是細(xì)菌宿主的發(fā)病機(jī)制/毒力所需要的。其他實(shí)施方案包括 使黃單胞菌屬的菌苔與樣品接觸。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所用的噬菌體對(duì)地毯草黃單胞菌 有毒。
[0018] 本發(fā)明的另一方面提供預(yù)防或減少植物中與地毯草黃單胞菌相關(guān)的病害的方 法,所述方法包括使植物與其宿主范圍包括地毯草黃單胞菌的噬菌體接觸。在一個(gè)實(shí) 施方案中,可以將噬菌體顆粒引入到植物中。在一些實(shí)施方案中,所述植物是選自由柑 橘屬(Citrus)物種、金桔屬(Fortunella)物種、枳屬(Poncirus)物種、酸橙(lime)、 梓檬(lemon)、橙子(orange)、葡萄柚(grapefruit)、柚子(pomelo)和用作站木的枸橘 (trifoliate orange)的雜交體組成的組柑橘屬植物。在另一個(gè)實(shí)施方案中,菌體通過(guò) 注射、昆蟲(chóng)媒介引入到植物中或通過(guò)注射經(jīng)由根系統(tǒng)引入到植物中。在一些實(shí)施方案中,注 射包括針頭或無(wú)針頭系統(tǒng)、充氣空氣或壓力注射系統(tǒng)。在其他實(shí)施方案中,注射是手工進(jìn)行 的,或者一次,或者多于一次。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述昆蟲(chóng)媒介是玻璃翅葉蟬。在另一 個(gè)實(shí)施方案中,要引入到植物中的噬菌體為1至l〇 12PFU/ml (噬菌斑形成單位/ml)、IO4至 10nPFU/ml和IO7至10 wPFUAil的濃度。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述方法包括使植物群體與 所述噬菌體顆粒接觸,以預(yù)防或減少所述群體中與地毯草黃單胞菌及其致病變型相關(guān)的癥 狀。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述噬菌體包括選自下述XfaslOO噬菌體類型或Xfas300噬菌 體類型的菌株中的至少一種噬菌體。
[0019] 在另一方面,本發(fā)明提供對(duì)地毯草黃單胞菌Xfas303噬菌體有毒的分離的噬菌 體,其中所述噬菌體的代表性樣品已經(jīng)保藏,保藏號(hào)為ATCC登記號(hào)PTA-13099。在另一方 面,本發(fā)明提供對(duì)地毯草黃單胞菌和/或苛養(yǎng)木桿菌有毒的分離的噬菌體,如選自由下述 組成的組的一種噬菌體:Xfasl01,Xfasl02,Xfasl03,Xfasl04,Xfasl05,Xfasl06,Xfasl07, Xfasl08, Xfasl09, XfasllO, Xfas301,Xfas302, Xfas304, Xfas305 和 Xfas306,其中所述 噬菌體 Xfasl03、Xfasl06、Xfas302、Xfas303、Xfas304 和 Xfas306 的代表性的樣品已經(jīng)保 藏,保藏號(hào)為 ATCC 登記號(hào) PTA-13095, PTA-13096, PTA-13097, PTA-13098, PTA-13099 和 PTA-13100。
[0020] 在特定的實(shí)施方案中,本發(fā)明提供預(yù)防或減少植物中與苛養(yǎng)木桿菌或地毯草黃單 胞菌柑橘致病變種(Xanthomonas axoxonopodis pv. Citri)相關(guān)的癥狀或病害或由苛養(yǎng)木 桿菌或地毯草黃單胞菌柑橘致病變種(Xanthomonas axoxonopodis pv. Citri)引起的癥狀 或病害的方法,所述方法包括使所述植物與有毒噬菌體接觸的步驟,所述噬菌體在其宿主 范圍內(nèi)包括苛養(yǎng)木桿菌和/或地毯草黃單胞菌柑橘致病變種,進(jìn)一步地,其中所述噬菌體 是選自由XfaslOO噬菌體類型和Xfas300噬菌體類型組成的組的至少一種噬菌體,其中所 述XfaslOO型噬菌體具有選自由下述組成的組的至少一個(gè)特征:(a)所述噬菌體能夠裂解 所述苛養(yǎng)木桿菌和/或黃單胞菌屬細(xì)菌;(b)所述噬菌體通過(guò)結(jié)合IV型菌毛感染細(xì)胞;(c) 所述噬菌體屬于一組這樣的有尾噬菌體,所述噬菌體展現(xiàn)出長(zhǎng)的非收縮性的尾部,具有直 徑在55-77mm范圍內(nèi)的衣殼,典型是管狀病毒科(Siphoviridae)的形態(tài);(d)所述菌體 的基因組大小為約55500bp至56200bp ;和(e)所述噬菌體預(yù)防或減少一種植物或多種植 物中與皮爾斯病相關(guān)的癥狀;并且其中所述Xfas300型噬菌體具有選自由下述組成的組的 至少一種特征:(a)所述噬菌體能夠裂解所述苛養(yǎng)木桿菌和/或黃單胞菌屬細(xì)菌;(b)所述 噬菌體通過(guò)結(jié)合IV型菌毛感染細(xì)胞;(c)所述噬菌體屬于一組這樣的有尾噬菌體,所述噬 菌體展現(xiàn)出短的非收縮性的尾部,具有直徑在58-68mm范圍內(nèi)的衣殼,典型是短尾病毒科 (Podoviridae)的形態(tài);(d)卩莖菌體的基因組大小為約43300bp至44600bp ;和(e)所述菌 體具有預(yù)防或減少一種植物或多種植物中與皮爾斯病相關(guān)的癥狀的活性。在特定的實(shí)施方 案中,向植物中引入單一類型的有毒噬菌體。在其他實(shí)施方案中,向植物中引入2、3、4、5、6 或更多種有毒噬菌體分離株或類型的組合,同時(shí)引入或先后引入。在特定的實(shí)施方案中,所 述噬菌體包含這樣的基因組,所述基因組具有選自由SEQ ID NO :11-24組成的組的DNA序 列,或與其至少90%、95%、98%或99%相同的DNA序列。因此,在特定的實(shí)施方案中,要引 入到植物中的噬菌體選自由下述組成的組:Xfasl01,Xfasl02,Xfasl03,Xfasl04,Xfasl05, Xfasl06, Xfasl07, XfasllO, Xfas301,Xfas302, Xfas303, Xfas304, Xfas305 和 Xfas306。還 包括配置用于遞送到植物中且包含所述XfaslOO和/或Xfas300型噬菌體的植物病害生物 控制組合物。所述生物控制組合物可以進(jìn)一步包含載體。在一些實(shí)施方案中,所述載體可 以包含稀釋劑、表面活性劑和/或緩沖劑。
[0021] 附圖簡(jiǎn)述
[0022] 為了更完整地理解本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn),現(xiàn)在結(jié)合附圖參考本發(fā)明的詳細(xì)描述, 在附圖中:
[0023] 圖1 :顯示噬菌體Xfas302、Xfas303、Xfas304和Xfas305的TEM圖像,所述噬菌體 具有短尾病毒科特有的形態(tài)和大小。
[0024] 圖2 :顯示噬菌體Xfasl01、Xfasl02、Xfasl03和XfasHM的TEM圖像,所述噬菌體 具有管狀病毒科特有的形態(tài)和大小。
[0025] 圖3 :顯示分離自廢水的能夠在XF15和EC-12上形成噬菌斑的苛養(yǎng)木桿菌的短尾 病毒科和管狀病毒科噬菌體。
[0026] 圖4 :顯示管狀病毒科Xfas 103和Xfas 106的基因組圖譜。
[0027] 圖5 :顯示短尾病毒科Xfas302、Xfas303、Xfas304和Xfas306的基因組圖譜。
[0028] 圖6 :顯示用菌株XF54接種后8周并且不用噬菌體攻擊的表現(xiàn)出皮爾斯病癥狀的 葡萄藤植物。
[0029] 圖7 :顯示葡萄藤噬菌體治療和預(yù)防性攻擊研宄的總結(jié)。
[0030] 圖8 :顯示在噬菌體接種后8周(上圖)和12周(下圖)在接種的葡萄藤中個(gè) 體噬菌體的移動(dòng)和存留。左圖:在根組織中存在的噬菌體。中間圖:在葡萄藤的防疫線 (cordon) 1存在的噬菌體。右圖:在葡萄藤的防疫線2存在的噬菌體。
[0031] 圖9 :顯示3周后在用噬菌體混合物(cocktail)攻擊的接種的葡萄藤中XF15的 水平。在噬菌體混合物攻擊后9周(細(xì)菌接種后12周)收集樣品。左圖:在根組織中存在 的噬菌體。中間圖:在葡萄藤的防疫線1存在的噬菌體。右圖:在葡萄藤的防疫線2存在的 噬菌體。灰色柱顯示在XF15接種的葡萄樹(shù)中的XF15水平。黑色柱顯示在病原體接種后第 3周用噬菌體混合物攻擊的XF15接種的葡萄樹(shù)中的XF15水平。箭頭顯示具有接種點(diǎn)的節(jié) 段。每個(gè)柱表示3棵葡萄樹(shù)的根和2個(gè)防疫線的平均CFU/gpt (克植物組織)。
[0032] 圖10 :顯示在初始用XF15接種并且3周后用噬菌體混合物攻擊的葡萄藤中混合 噬菌體的水平。在噬菌體混合物攻擊后5、7和9周(初始細(xì)菌接種后8、10和12周)收集 樣品。左圖:在根組織中存在的噬菌體。中間圖:在葡萄藤的防疫線1存在的噬菌體。右 圖:在葡萄藤的防疫線2存在的噬菌體。黑色柱顯示在混合物接種的植物中的噬菌體水平。 灰色柱顯示在病原體接種后第3周用噬菌體混合物攻擊的XF15接種的葡萄樹(shù)中的噬菌體 水平。箭頭表示具有接種點(diǎn)的節(jié)段。每個(gè)柱表示由3棵葡萄樹(shù)的根和2個(gè)防疫線決定的混 合物中4種噬菌體的平均CFU/gpt (克植物組織)。
[0033] 圖11 :顯示在初始用噬菌體混合物接種并且3周后用XF15攻擊的葡萄藤中的噬 菌體水平。在XF15攻擊后5、7和9周(初始噬菌體接種后8、10和12周)收集樣品。左 圖:在根組織中存在的噬菌體。中間圖:在葡萄藤的防疫線1存在的噬菌體。右圖:在葡萄 藤的防疫線2存在的噬菌體。黑色柱顯示在混合物接種的葡萄樹(shù)中的噬菌體水平?;疑?顯示在噬菌體接種后第3周用XF15攻擊的混合物接種的葡萄樹(shù)中的噬菌體水平。箭頭表 示具有接種點(diǎn)的節(jié)段。每個(gè)柱表示由3棵葡萄樹(shù)的根和2個(gè)防疫線決定的混合物中4種噬 菌體的平均CFU/gpt (克植物組織)。
[0034] 圖12 :顯示噬菌體Xfas303在地毯草黃單胞菌柑橘致病變種菌株上的斑點(diǎn)滴定結(jié) 果。
[0035] 序列表簡(jiǎn)述
[0036] SEQ ID NO :1_設(shè)計(jì)用于苛養(yǎng)木桿菌gyrB的苛養(yǎng)木桿菌-特異性寡核苷酸正向引 物。
[0037] SEQ ID NO :2_設(shè)計(jì)用于苛養(yǎng)木桿菌gyrB的苛養(yǎng)木桿菌-特異性寡核苷酸反向引 物。
[0038] SEQ ID NO :3_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA引發(fā)酶基因的噬菌體Xfas304-特異性寡核苷 酸正向引物。
[0039] SEQ ID NO :4_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA引發(fā)酶基因的噬菌體Xfas304-特異性寡核苷 酸反向引物。
[0040] SEQ ID NO :5_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA引發(fā)酶基因的噬菌體Xfas303-特異性寡核苷 酸正向引物。
[0041] SEQ ID NO :6_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA引發(fā)酶基因的噬菌體Xfas303-特異性寡核苷 酸反向引物。
[0042] SEQ ID NO :7_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA解旋酶基因的噬菌體Xfasl03-特異性寡核苷 酸正向引物。
[0043] SEQ ID NO :8_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA解旋酶基因的噬菌體Xfasl03-特異性寡核苷 酸反向引物。
[0044] SEQ ID NO :9_設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA解旋酶基因的噬菌體Xfasl06-特異性寡核苷 酸正向引物。
[0045] SEQ ID NO :10-設(shè)計(jì)用于噬菌體DNA解旋酶基因的噬菌體Xfasl06-特異性寡核 苷酸反向引物。
[0046] SEQ ID NO :11_噬菌體XfaslOl的基因組序列。
[0047] SEQ ID NO :12_噬菌體Xfasl02的基因組序列。
[0048] SEQ ID NO :13_噬菌體Xfasl03的基因組序列。
[0049] SEQ ID NO :14_噬菌體Xfas 104的基因組序列。
[0050] SEQ ID NO :15-噬菌體Xfasl05的基因組序列。
[0051] SEQ ID NO :16-噬菌體Xfas 106的基因組序列。
[0052] SEQ ID NO :17_噬菌體Xfasl07的基因組序列。
[0053] SEQ ID NO :18_噬菌體XfasllO的基因組序列。
[0054] SEQ ID NO :19_噬菌體Xfas301的基因組序列。
[0055] SEQ ID NO :20_噬菌體Xfas302的基因組序列。
[0056] SEQ ID NO :21_噬菌體Xfas303的基因組序列。
[0057] SEQ ID NO :22_噬菌體Xfas304的基因組序列。
[0058] SEQ ID NO :23_噬菌體Xfas305的基因組序列。
[0059] SEQ ID NO :24_噬菌體Xfas306的基因組序列。
[0060] 發(fā)明詳述
[0061] 提供下述定義和方法以更好地定義本發(fā)明,并指導(dǎo)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員實(shí)施本發(fā) 明。除非另外注釋,術(shù)語(yǔ)應(yīng)該按照相關(guān)領(lǐng)域普通技術(shù)