甘薯黑痣病抗性鑒定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種農(nóng)作物病蟲害抗性鑒定方法，具體的說是一種甘薯黑痣病抗性鑒 定方法，屬農(nóng)業(yè)植保領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 甘薯黑癒?。╯weetpotato mole disease)由半知菌亞門甘薯毛鏈孢 (Monilochaetes infuscans Ell.et Halst. Ex Harter)引起，在我國各甘薯產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生。 該病一般僅侵染薯皮，并不深入薯肉，對產(chǎn)量無顯著影響，長期以來未引起人們的重視。薯 塊受病后易喪失水分，在貯藏期容易干縮，影響質(zhì)量和食用價值。另外隨著甘薯鮮食產(chǎn)業(yè)的 興起，黑痣病的為害成為影響甘薯銷售價格的重要因素。目前生產(chǎn)上推廣的甘薯品種品質(zhì) 好、商品價值高，但均不抗黑痣病，且目前尚未有關(guān)于甘薯黑痣病抗性鑒定方法的報道，無 法對甘薯品種黑痣病的抗性做出科學(xué)的評價。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明提供一種甘薯黑痣病抗性鑒定方法，鑒定方法科學(xué)有效，操作簡單，試驗周 期涵蓋甘薯田間生長和冬季貯藏的甘薯黑痣病整個侵染和擴展過程，鑒定結(jié)果能夠全面反 映甘薯品種對黑痣病的抗性水平。
[0004] 本發(fā)明是以如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：一種甘薯黑痣病抗性鑒定方法，甘薯栽插期 高剪苗方法剪取待鑒定甘薯品種健壯薯苗30株，分為3個重復(fù)。栽種時薯苗用濃度為 I. 0 X IO6個/ml菌懸液蘸根，采用常規(guī)方式栽種和日常田間管理。栽種120天后收獲并于 甘薯貯藏庫內(nèi)貯藏，貯藏期間控制溫度在12-15Γ左右，相對濕度在80% -90%。150天后， 將薯塊取出，洗凈晾干，根據(jù)黑痣病病斑占薯塊的表面積劃分病害等級，計算病情指數(shù)，以 病情指數(shù)進行分級，評價品種的抗感特性；具體按如下步驟進行：
[0005] (1)病原菌分離和準備：從田間采集黑痣病發(fā)病薯塊，帶回實驗室后按組織分離 法分離黑痣病菌，并按照柯赫氏法則回接薯塊驗證；甘薯栽種前兩周，于28°C下在以蛋白 胨為氮源的查氏培養(yǎng)基平板上活化、增殖黑痣病菌；將培養(yǎng)好的黑痣病菌平板用無菌水沖 洗，獲得孢子懸浮液，并將孢子懸浮液濃度稀釋到1.0 X IO6個/ml ;
[0006] (2)參試薯苗準備：待鑒定甘薯品種于5月上旬苗床正常排種，排種后苗床撒施多 菌靈殺菌，澆水覆土，覆膜保溫。6月中旬采用高剪苗方法剪取健壯薯苗30株，薯苗長度約 30cm ；
[0007] (3)病原菌接種與薯苗、薯塊處理：栽種前，將薯苗根部放入黑痣病菌孢子懸浮液 中蘸根2min，蘸根深度約為10cm。每處理栽種10株，3次重復(fù)，共計30株。采用常規(guī)方 式栽種和日常田間管理。栽種120天后收獲并于甘薯貯藏庫內(nèi)貯藏，貯藏期間控制溫度在 12-15°C左右，相對濕度在80% -90% ;
[0008] (4)發(fā)病情況調(diào)查：貯藏150天左右后，將薯塊取出，洗凈晾干。根據(jù)受害部位占 薯塊表面積的比例對病害進行分級；
[0009] 分級標準：
[0010] 〇級：無黑痣病病斑；
[0011] 1級：零星病斑，病斑占薯塊表面積< 10%，不影響外觀與商品性；
[0012] 2級：病斑占薯塊表面積蘭10%，< 20% ;
[0013] 3級：病斑占薯塊表面積蘭20%，< 30% ;
[0014] 4級：病斑占薯塊表面積蘭30% ;
[0015] 對薯塊分級后，根據(jù)以下公式計算病情指數(shù)：
[0016]
[0017] (5)抗病性評價：根據(jù)病情指數(shù)對甘薯品種的黑痣病抗性進行評價；
[0018] 抗性評價標準：
[0019] 高抗病情指數(shù)彡10% ;
[0020] 抗病10%<病情指數(shù)彡20% ;
[0021] 中抗20% <病情指數(shù)彡30% ;
[0022] 感病30%<病情指數(shù)< 40% ;
[0023] 高感病情指數(shù)>40%。
[0024] 本發(fā)明的優(yōu)點是：該鑒定方法科學(xué)，結(jié)果準確，過程簡單易于操作。用以蛋白胨為 氮源的查氏培養(yǎng)基平板上活化、增值黑痣病菌，極大地縮短了黑痣病菌的增值時間。菌懸液 蘸根法接種黑痣病菌，可以避免病圃田間鑒定由于病菌分布不均勻引起的誤差。試驗周期 涵蓋甘薯田間生長和冬季貯藏的甘薯黑痣病整個侵染和擴展過程，鑒定結(jié)果能夠全面反映 甘薯品種對黑痣病的抗性水平。
【具體實施方式】
[0025] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明方法作進一步說明。
[0026] 實施例
[0027] (1)病原菌分離和準備：從田間采集黑痣病發(fā)病薯塊，帶回實驗室后按組織分離 法分離黑痣病菌，并按照柯赫氏法則回接薯塊驗證；甘薯栽種前兩周，于28°C下在以蛋白 胨為氮源的查氏培養(yǎng)基平板上活化、增殖黑痣病菌；將培養(yǎng)好的黑痣病菌平板用無菌水沖 洗，獲得孢子懸浮液，并將孢子懸浮液濃度稀釋到I. 〇 X IO6個/ml左右；
[0028] (2)參試品種與薯苗準備：選取勝利百號、金山57號、新種花、栗子香、商薯19號、 商薯7號、徐薯22號、徐薯18號、煙薯25號、濟徐23號等10個甘薯參試品種。參試甘薯 品種于5月上旬苗床正常排種，排種后苗床撒施多菌靈殺菌，澆水覆土，覆膜保溫。6月中旬 采用高剪苗方法剪取健壯薯苗30株，薯苗長度約30cm ;
[0029] (3)病原菌接種與薯苗、薯塊處理：栽種前，將薯苗根部放入黑痣病菌孢子懸浮液 中蘸根2min，蘸根深度約為10cm。每處理栽種10株，3次重復(fù)，共計30株。采用常規(guī)方 式栽種和日常田間管理。栽種120天后收獲并于甘薯貯藏庫內(nèi)貯藏，貯藏期間控制溫度在 12-15°C左右，相對濕度在80% -90% ;
[0030] (4)發(fā)病情況調(diào)查藏150天左右后，將薯塊取出，洗凈晾干。根據(jù)受害部位占 薯塊表面積的比例對病害進行分級；
[0031] 分級標準：
[0032] 0級：無黑痣病病斑；
[0033] 1級：零星病斑，病斑占薯塊表面積< 10 %，不影響外觀與商品性；
[0034] 2級：病斑占薯塊表面積蘭10%，< 20% ;
[0035] 3級：病斑占薯塊表面積蘭20%，< 30% ;
[0036] 4級：病斑占薯塊表面積蘭30% ;
[0037] 對薯塊分級后，根據(jù)以下公式計算病情指數(shù)：
[0038]
[0039] (5)抗病性評價：根據(jù)病情指數(shù)對甘薯品種的黑痣病抗性進行評價；
[0040] 抗性評價標準：
[0041] 高抗病情指數(shù)彡10% ;
[0042] 抗病10%<病情指數(shù)彡20% ;
[0043] 中抗20% <病情指數(shù)彡30% ;
[0044] 感病30%<病情指數(shù)< 40% ;
[0045] 高感病情指數(shù)> 40 %。
[0046] 甘薯品種黑痣病抗性鑒定結(jié)果如表1所示。
[0047] 表1甘薯品種黑痣病抗性鑒定結(jié)果
[0048] Table 2 Resistance identification of sweetpotato against sweetpotato mole disease

[0050] 結(jié)論：
[0051] 從表1看出：通過田間病菌接種與薯塊貯藏，按照病斑占薯皮表面積劃分病害等 級，參試的10個品種間病情指數(shù)呈現(xiàn)顯著性差異。其中：濟徐23號對黑痣病菌的抗感級別 為"高抗";煙薯25號、徐薯18號、徐薯22號、商薯7號和商薯19號等5個品種抗感級別為 "抗病";新種花和勝利百號為"中抗";栗子香和金山57號為"感病"。
【主權(quán)項】
1. 一種甘馨黑捷病抗性鑒定方法，其特征是：甘馨栽插期高剪苗方法剪取待鑒定甘馨 品種健壯馨苗30株，分為3個重復(fù)，每重復(fù)10株；栽種時馨苗用濃度為1. 0X1〇6個/ml菌 懸液薩根，采用常規(guī)方式栽種和日常田間管理；栽種120天后收獲并于甘馨膽藏庫內(nèi)膽藏， 膽藏期間控制溫度在12-15°C左右，相對濕度在80% -90% ;150天后，將馨塊取出，洗凈驚 干，根據(jù)黑捷病病斑占馨塊的表面積劃分病害等級，計算病情指數(shù)，W病情指數(shù)進行分級， 評價品種的抗感特性；具體按如下步驟進行： (1) 病原菌分離和準備：從田間采集黑捷病發(fā)病馨塊，帶回實驗室后按組織分離法分 離黑捷病菌，并按照柯赫氏法則回接馨塊驗證；甘馨栽種前兩周，于28°C下在W蛋白腺為 氮源的查氏培養(yǎng)基平板上活化、增殖黑捷病菌；將培養(yǎng)好的黑捷病菌平板用無菌水沖洗，獲 得抱子懸浮液，并將抱子懸浮液濃度稀釋到1. 0X1〇6個/ml; (2) 參試馨苗準備：待鑒定甘馨品種于5月上旬苗床正常排種，排種后苗床撒施多菌 靈殺菌，誘水覆±，覆膜保溫。6月中旬采用高剪苗方法剪取健壯馨苗30株，馨苗長度約 30cm； (3) 病原菌接種與馨苗、馨塊處理：栽種前，將馨苗根部放入黑捷病菌抱子懸浮液中薩 根2min，薩根深度約為10cm。每處理栽種10株，3次重復(fù)，共計30株；采用常規(guī)方式栽種 和日常田間管理；栽種120天后收獲并于甘馨膽藏庫內(nèi)膽藏，膽藏期間控制溫度在12-15°C 左右，相對濕度在80% -90% ; (4) 發(fā)病情況調(diào)查：膽藏150天后，將馨塊取出，洗凈驚干；根據(jù)受害部位占馨塊表面積 的比例對病害進行分級； 分級標準： 0級：無黑捷病病斑； 1級：零星病斑，病斑占馨塊表面積< 10%，不影響外觀與商品性； 2級：病斑占馨塊表面積含10%，< 20% ; 3級：病斑占馨塊表面積^ 20%，< 30% ; 4級：病斑占馨塊表面積^ 30% ; 對馨塊分級后，根據(jù)W下公式計算病情指數(shù)：(5) 抗病性評價：根據(jù)病情指數(shù)對甘馨品種的黑捷病抗性進行評價； 抗性評價標準為： 高抗病情指數(shù)《10% ; 抗病10%<病情指數(shù)《20% ; 中抗20%<病情指數(shù)《30% ; 感病30%<病情指數(shù)《40% ; 高感病情指數(shù)> 40%。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種甘薯黑痣病抗性鑒定方法，屬于農(nóng)作物病蟲害抗性鑒定方法。6月中旬苗床采用高剪苗方法剪取待鑒定甘薯品種健壯薯苗30株，分為3個重復(fù)，每重復(fù)10株。薯苗栽種時用濃度為1.0×106個/ml菌懸液蘸根，采用常規(guī)方式栽種和日常田間管理。栽種120天后收獲并于甘薯貯藏庫內(nèi)貯藏，貯藏期間控制溫度在12-15℃左右，相對濕度在80％-90％。150天后，將薯塊取出，洗凈晾干，根據(jù)黑痣病病斑占薯塊的表面積劃分病害等級，計算病情指數(shù)，以病情指數(shù)進行分級，評價品種的抗感特性。該鑒定方法科學(xué)有效，操作簡單，試驗周期涵蓋甘薯田間生長和冬季貯藏的甘薯黑痣病整個侵染和擴展周期，鑒定結(jié)果能夠全面反映甘薯品種對黑痣病的抗性水平。
【IPC分類】A01G7/00
【公開號】CN104996182
【申請?zhí)枴緾N201510406695
【發(fā)明人】趙永強, 謝逸萍, 楊冬靜, 孫厚俊, 張成玲, 徐振
【申請人】江蘇徐州甘薯研究中心
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年7月10日