化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物源殺菌劑，具體的說是一種委陵菜酸衍生物的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃瓜作為我國主要栽培蔬菜之一，具有較高的經(jīng)濟價值，但每年因為植物病害造 成的經(jīng)濟損失都難以估量。黃瓜灰霉病是黃瓜生產(chǎn)中較難防治的植物病害之一，雖然使用 化學農(nóng)藥能夠起到較好的防治作用，但是經(jīng)常使用易產(chǎn)生抗藥性，并存在對人畜的毒副作 用與殘留問題。而植物源殺菌劑具有生物活性好、對非靶標生物安全、環(huán)境相容性好等優(yōu) 點，已經(jīng)成為研究開發(fā)新農(nóng)藥的熱點。
[0003] DeTommasi等人自源于意大利的枇杷葉的氯仿提取物部分分離得到4個 新的烏蘇燒型的三砲酸類化合物：23-trans-p-coumaroyltormenticacid(l)、 23-cis-p-coumaroyltormenticacid(2)、3-〇-trans-p_cafTeoyltormenticacid(3)、 3-〇-trans-p-coumaroylrotundicacid(4)，此外還有3個一般的烏蘇燒型的三砲酸類 化合物（5-7)。進一步研究它們的抗病毒活性證明：僅3-〇-trans-p-caffeoyltormentic acid具有明顯降低鼻病毒的感染率的活性，但是它對于人類的HIV1和Sindbis病毒 的復制無明顯抑制作用（deTommasiN,deSimoneF,PizzaC,etal.Constituene ofEriobotryajaponica,astudyoftheirantixiralproperties.J.Nat. Prod.，1992, 55 (8) : 1067-1073)。在上述文獻中，式（一）所示的23-反式-對-香豆酰委 陵菜酸（23-trans-p-coumaroyltormenticacid)不具有抗病毒活性。目前也沒有對該化 合物生物活性進一步研究的報道。
[0004]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸的應(yīng)用。該化合物對 黃瓜灰霉病具有較好的抑制活性，可用于制備農(nóng)用殺菌劑。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸的應(yīng)用，其特征是， 所述式（一）所示的化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸對黃瓜灰霉病具有較好抑制活 性，可用于制備農(nóng)用殺菌劑。
[0007]
[0008] 所述的農(nóng)用殺菌劑為：以式（一）所示的化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸 為活性成分，加入農(nóng)業(yè)上常用的助劑制備成可濕性粉劑、顆粒劑或緩釋劑等。
[0009] 本發(fā)明所具有的優(yōu)點：式（一）所示化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸由枇杷 葉經(jīng)提取分離而獲得，其對黃瓜灰霉病菌具有較好抑制活性，最小抑制濃度（MIC)為4yg/ mL，可以作為具有殺菌作用的新農(nóng)藥成分或先導化合物。式（一）所示化合物作為植物源 天然產(chǎn)物，具有低毒、農(nóng)藥殘留低、環(huán)境兼容性好等優(yōu)點。
【具體實施方式】
[0010] 為闡明對本發(fā)明特征的理解，下面結(jié)合一些非限定性的實施例對本發(fā)明做進一步 闡述。
[0011] 實施例1 :
[0012] 式（一）所示的23-反式-對-香豆酰委陵菜酸（23-trans-p-coumaroyl tormenticacid)為烏蘇燒型已知化合物。
[0013] 式（一）所示的23-反式-對-香豆酰委陵菜酸的制備過程可參見文獻deTommasi N,deSimoneF,PizzaC,etal.ConstitueneofEriobotryajaponica,astudyoftheir antixiralproperties.J.Nat.Prod.，1992, 55 (8) : 1067-1073 中的記載進行。
[0014] 實施例2 :抑菌活性試驗
[0015] 采用微量稀釋法，測定式（一）所示化合物對黃瓜灰霉病菌的抑菌活性（《從天然 產(chǎn)物到新農(nóng)藥創(chuàng)制-原理方法》，吳文君，2006,化學工業(yè)出版社）。
[0016] 1)菌懸液的制備
[0017] 將供試真菌接種于PDA培養(yǎng)基表面于28°C培養(yǎng)72h后，吸取2mL無菌0. 85%NaCl 溶液（含〇. 25 %吐溫-20)洗滌培養(yǎng)物，并用玻璃刮刀將菌落輕輕刮下。吸取適量菌懸液于 無菌試管中，調(diào)至0. 5麥氏比濁（相當于1.5X10sCFU/mL)，備用；
[0018] 2)樣品的配制
[0019] 分別取lmg待測樣品（式（一）化合物）和陽性對照（兩性霉素B)，溶解于100yL DMS0中，充分混勻后，吸取50yL樣品溶液到另一只離心管中，接著加入50yLDMS0,得到 濃度減半的樣品溶液。按照此方法，得到12組濃度依次減半的樣品溶液。
[0020] 3)MIC測定方法
[0021] (1)采用無菌操作，將倍比稀釋后不同濃度的樣品溶液分別加到無菌的96孔聚苯 乙烯板中，第1至第12孔各加5yL的樣品溶液，并以不加樣品孔作為空白對照，加5yL DMS0溶液孔為溶劑對照；
[0022] (2)將相當于0. 5麥氏比濁度的指示菌懸液，經(jīng)沙氏培養(yǎng)基稀釋1000倍后，取 95yL依次加入到96孔板中，使得第1至第12孔的樣品濃度依次為512、256、128、64、32、 16、8、4、2、1、0. 5和0. 25yg/mL。以上所有樣品均重復三次。輕輕震蕩混勻后，將96孔板 密封置于28°C生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h;
[0023] (3)在600nm波長下使用酶標儀測定每孔的吸光值，以在小孔內(nèi)完全抑制指示菌 生長的最低樣品濃度為該化合物的MIC。（注意：當陰性對照孔內(nèi)指示菌明顯生長實驗才有 意義；當實驗出現(xiàn)單一的跳孔時，應(yīng)記錄抑制菌株生長的最高藥物濃度；如出現(xiàn)多處跳孔， 則不應(yīng)報告結(jié)果，需重復實驗。）
[0024] 試驗結(jié)果為式（一）所不化合物對黃瓜灰霉病菌的MIC值為4yg/mL，具有較好抑 菌活性。
[0025] 上述實驗結(jié)果證明本發(fā)明所涉及的化合物具有較好抑菌活性，可用于制備農(nóng)用殺 菌劑。
[0026] 實施例3 :可濕性粉劑
[0027] 配方（重量比）：23_反式-對-香豆酰委陵菜酸粉末20%，白炭黑20%，十二烷 基硫酸鈉5%，CMC1. 0%和拉開粉3. 0%，凹凸棒土余量。
[0028] 制備方法：將上述原料混合均勻，控制加工溫度0-50°C，在氣流粉碎機或其它高 目粉碎機中，粉碎到150目以上，水分控制在6-8% (質(zhì)量百分含量），pH控制在7-7. 5。
[0029] 使用方法：600倍液噴施，將植株葉片上下噴灑均勻。
【主權(quán)項】
1. 式（一）所示的化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸在制備防治黃瓜灰霉病的農(nóng) 用殺菌劑中的應(yīng)用，2. 如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征是，所述農(nóng)用殺菌劑為可濕性粉劑、顆粒劑或緩釋 劑。
【專利摘要】本發(fā)明公開了化合物23-反式-對-香豆酰委陵菜酸的應(yīng)用。該化合物的結(jié)構(gòu)如式(一)所示，它對黃瓜灰霉病菌具有較好抑制活性，最小抑制濃度為4μg/mL，可以作為具有殺菌作用的新農(nóng)藥成分或先導化合物。式(一)所示化合物作為植物源天然產(chǎn)物，具有低毒、農(nóng)藥殘留低、環(huán)境兼容性好等優(yōu)點。
【IPC分類】A01P3/00, A01N45/00
【公開號】CN105104394
【申請?zhí)枴緾N201510613833
【發(fā)明人】牛贍光, 杜豐玉, 張淑靜, 李清和
【申請人】山東興禾作物科學技術(shù)有限公司
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年9月24日