基于紫外分光光度計(jì)技術(shù)測(cè)定谷子種子活力的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及種子活力的測(cè)定方法領(lǐng)域，具體為一種基于紫外分光光度計(jì)技術(shù)測(cè)定 谷子種子活力的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 谷子去皮后稱為小米，其籽粒富含多種維生素、礦物質(zhì)、脂肪和膳食纖維，可以預(yù) 防和治療高血脂、高血糖，軟化血管等疾病，是醫(yī)食同源的健康食糧。小米碳水化合物的含 量遠(yuǎn)低于大宗作物，成為糖尿病患者的首選食療對(duì)象，小米中富含礦物質(zhì)元素，其中鈣和鐵 元素的高含量成為婦女產(chǎn)后恢復(fù)的理想食物，也是兒童和病人的營(yíng)養(yǎng)食物。
[0003] 種子活力是種子發(fā)芽率、幼苗生長(zhǎng)潛勢(shì)、植株抗逆能力和生產(chǎn)潛力的總和。它能直 接反應(yīng)植株性狀的優(yōu)劣，是評(píng)價(jià)種子質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)，對(duì)農(nóng)業(yè)等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展意義 重大。高活力的種子具有完全成熟、顆粒飽滿和耐貯性好等特點(diǎn)，在種植過程中，可以表現(xiàn) 出抗逆性強(qiáng)，萌發(fā)快速一致，長(zhǎng)勢(shì)整齊，能發(fā)育成品質(zhì)優(yōu)良的幼苗和植株;低活力的種子雖 然在較為合適的條件下也能夠發(fā)芽，但其發(fā)芽速度較緩慢，如果在不良環(huán)境脅迫加劇就不 一定能夠出苗或成苗?？梢?，種子活力是比發(fā)芽率更為敏感的指標(biāo)，更適宜反應(yīng)種子質(zhì)量的 優(yōu)劣。
[0004] 目前，種子活力的測(cè)定方法是科學(xué)研究較活躍的領(lǐng)域之一。我國(guó)目前對(duì)種子活力 測(cè)定方法的研究還不夠深入，仍在探尋相關(guān)作物的效果滿意，簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)方法。當(dāng)前， 關(guān)于種子活力測(cè)定方法主要包括幼苗生長(zhǎng)測(cè)定法、電導(dǎo)率測(cè)定法、加速老化試驗(yàn)測(cè)定法、抗 冷試驗(yàn)測(cè)定法、TTC定量法。以上種子活力測(cè)定方法主要借助人力操作，步驟繁雜，工作量 大，周期長(zhǎng)，對(duì)種子造成損傷，導(dǎo)致測(cè)試過的種子不能再用于生產(chǎn)。近年來發(fā)展起來的近紅 外光譜技術(shù)、激光散斑技術(shù)、紅外熱成像技術(shù)和PCR檢測(cè)技術(shù)等新方法具備簡(jiǎn)便、不需預(yù)處 理、無污染、無破壞和成本低等優(yōu)點(diǎn)，但是由于檢測(cè)指標(biāo)單一，也不能很好的反映種子活力。
[0005] 谷子種子屬小粒種子范疇，平均籽粒大小長(zhǎng)0.3cm、寬0.2cm、高0.1cm，種胚很難被 完整切開，TTC定量法檢測(cè)受到限制;標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗(yàn)對(duì)谷子種子的生活力進(jìn)行評(píng)價(jià)，一般需 要5-7天才可以得到結(jié)果，耗時(shí)較長(zhǎng)；電導(dǎo)率法受室溫、水溫、種子質(zhì)量、水質(zhì)等因素的影響 較大，誤差較大。目前，針對(duì)谷子種子活力的鑒定方法，鮮見報(bào)道。因此，找一種準(zhǔn)確、迅速地 測(cè)定谷子種子活力的方法，已經(jīng)成為亟待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明提供了一種基于紫外分光光度計(jì)及技術(shù) 為谷子育種、谷子種子儲(chǔ)藏和作物田間生產(chǎn)提供一種快速的、準(zhǔn)確的谷子種子活力檢測(cè)方 法。
[0007] 本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的： 基于紫外分光光度計(jì)技術(shù)測(cè)定谷子種子活力的方法，包括以下步驟： 1、材料與方法： 1.1、 試驗(yàn)材料:供試谷子種子為2012、2013、2014、2015年所繁殖的谷子種子，品種為豫 谷18; 1.2、 發(fā)芽率的測(cè)定： 取不同年份的谷子種子各100粒，用雙氧水浸泡30min，用蒸餾水沖洗3次，放于干凈的 培養(yǎng)皿中，并在培養(yǎng)皿中鋪上三層濾紙，用蒸餾水將濾紙濕潤(rùn)至飽和；然后，將種子置于28 °(：的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng);光照時(shí)間周期為16h(光），8h(暗）；并分別于3d、5d和7d后測(cè)定其發(fā) 芽勢(shì)與發(fā)芽率，試驗(yàn)重復(fù)3次； 1.3、 紫外吸光值的測(cè)定： 取不同年份的谷子種子各〇. 5g，用蒸餾水沖洗2次，再用超純水沖洗1次，用濾紙吸干浮 水后，放于刻度試管中并加入25ml的蒸餾水;然后，將刻度試管放于28°C的培養(yǎng)箱中，分別 在他、811、1211、2411、4811后測(cè)定其種子浸出液在22〇11111、26〇11111、300腦處的紫外吸光值，試驗(yàn) 重復(fù)3次； 2、 結(jié)果與分析： 2.1、 發(fā)芽率的測(cè)定結(jié)果： 結(jié)果表明，谷子種子的發(fā)芽勢(shì)與發(fā)芽率隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，貯存年份越短，發(fā) 芽勢(shì)與發(fā)芽率越高;反之，貯存時(shí)間越長(zhǎng)，發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率越低，貯存年份與發(fā)芽率之間表 現(xiàn)出較強(qiáng)的規(guī)律性； 2.2、 谷子種子浸出液紫外吸光值的測(cè)定結(jié)果： 用紫外分光光度計(jì)所測(cè)得的各年份谷子種子在浸泡他、811、1211、2411、4811后浸出液的紫 外吸光值； 3、 結(jié)論： 在28°C條件下，谷子種子經(jīng)過8h浸泡后，在220nm處種子浸出液的紫外吸光值能夠在較 大程度上反映谷子種子的活力。
[0008] 所述的紫外吸光值測(cè)定所用儀器為上海產(chǎn)UV-5600型紫外分光光度計(jì)。
[0009] 積極有益效果:本發(fā)明根據(jù)種子在貯存過程中，由于細(xì)胞膜的完整性受到破壞，氨 基酸外滲的原理，采用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)技術(shù)，測(cè)定種子浸出液的吸光值，貯存年份越長(zhǎng) 則外滲有機(jī)物電解質(zhì)越多，因而吸光值越高。本發(fā)明能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)谷子種子活力的快速檢測(cè)， 找到樣本浸泡時(shí)間，篩選樣本測(cè)定波長(zhǎng)，確定種子活力標(biāo)準(zhǔn)，檢測(cè)準(zhǔn)確性高，耗時(shí)短，活力強(qiáng) 的谷子種子吸光值小;而活力弱的谷子種子氨基酸外流作用強(qiáng)，吸光值高，評(píng)價(jià)方法簡(jiǎn)單可 與巨〇
【附圖說明】
[0010] 圖1為不同年份不同浸泡時(shí)間谷子種子紫外吸光值柱狀圖。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明： 1、材料與方法： 1.1試驗(yàn)材料:供試谷子種子為2012、2013、2014、2015年所繁殖的谷子種子，品種為豫 谷18。
[0012] 1.2、發(fā)芽率的測(cè)定： 取各年份的谷子種子各100粒，用雙氧水浸泡30min，用蒸餾水沖洗3次，放于干凈的培 養(yǎng)皿中，并在培養(yǎng)皿中鋪上三層濾紙，用蒸餾水將濾紙濕潤(rùn)至飽和;然后，將種子置于28°C 的光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);光照時(shí)間周期為16h(光），8h(暗）；并分別于3d、5d和7d后測(cè)定其 發(fā)芽勢(shì)與發(fā)芽率;試驗(yàn)重復(fù)3次； 1.3、紫外吸光值的測(cè)定： 取不同年份的谷子種子各〇. 5g，用蒸餾水沖洗2次，再用超純水沖洗1次，用濾紙吸干浮 水后，放于刻度試管中并加入25ml的蒸餾水;然后，將刻度試管放于28°C的培養(yǎng)箱中，分別 在他、811、1211、2411、4811后測(cè)定其種子浸出液在22〇11111、26〇11111、300腦處的紫外吸光值，試驗(yàn) 重復(fù)3次； 2、結(jié)果與分析： 2.1、 發(fā)芽率的測(cè)定結(jié)果： 結(jié)果表明，谷子種子的發(fā)芽勢(shì)與發(fā)芽率隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，貯存年份越短，發(fā) 芽勢(shì)與發(fā)芽率越高