[0113] 因此可以得出結(jié)論:250ppm那他霉素和150ppm丙硫菌唑的組合應(yīng)用導(dǎo)致蜜桔上霉 菌生長的協(xié)同降低。
[0m] 實(shí)施例13
[0115] 體外（In vitro)抗真菌活性
[0116] 為了證實(shí)那他霉素與丙環(huán)唑或丙硫菌唑的組合針對Botrytis cinerea的協(xié)同抗 真菌活性，使用96孔微量滴定板進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)。測試以下的組合物：
[0117] -對照(無活性成分），
[0118] -0.63或 1.25ppm那他霉素 （DSM Food Specialties,Delft，荷蘭），
[0119] -0.50或 1.0 Oppm 丙環(huán)唑，
[0120] -〇· 13ppm 丙硫菌挫，
[0121 ] -〇 · 63ppm 那他霉素+1 · OOppm 丙環(huán)挫，
[0122] -1 · 25ppm 那他霉素+0 · 50ppm 丙環(huán)唑，
[0123] -1.25ppm那他霉素 +0· 13ppm丙硫菌挫。
[0124] 用92μ1 PCB培養(yǎng)基填充微量滴定板的每個孔后，從制備于PCB培養(yǎng)基或甲醇中的 單獨(dú)的儲備溶液中添加活性成分，這導(dǎo)致每孔IOOyl的中間體積。隨后，使用制備于PCB培養(yǎng) 基中的100μΙ Botrytis cinerea懸浮液，以2.5x IO3孢子/ml接種每個孔。因此，每個孔含 有200μ1的終體積和〈1 %的甲醇，這不影響B(tài)otrytis cinerea的生長(數(shù)據(jù)未展示）。
[0125] 將微量滴定板在25°C下孵育5和10天后，通過計(jì)算與無活性成分時觀察到的霉菌 生長相比，存在活性成分時觀察到的霉菌生長的減少，來評價(jià)個體活性成分的體外抗真菌 活性（以％計(jì)）。根據(jù)Colby方程(Colby，1967)計(jì)算活性成分組合的預(yù)期抗真菌活性(E，以％ 計(jì)）：
[0126] Ε=Χ+Υ-[(Χ · Y)/100]
[0127] 其中X和Y分別是個體活性成分X和Y的觀察到的抗真菌活性（以％計(jì)）。如果組合的 觀察到的抗真菌活性(〇，以％計(jì))超出組合的預(yù)期抗真菌活性化，以％計(jì))并且因而協(xié)同因 子0/ΕΜ.0,那么活性成分的組合應(yīng)用導(dǎo)致協(xié)同的抗真菌效應(yīng)。
[0128] 結(jié)果(見表15)證明，與單獨(dú)的那他霉素、丙環(huán)唑或丙硫菌唑相比，那他霉素+丙環(huán) P坐的組合和那他霉素+丙硫菌唑的組合均具有強(qiáng)得多的針對Botrytis cinerea的抗真菌活 性。另外，針對那他霉素+丙環(huán)唑的組合和那他霉素+丙硫菌唑的組合觀察到的抗真菌活性 比預(yù)期的抗真菌活性高50%到100%。因此，得到大于1.0的協(xié)同因子。
[0129] 因此，那他霉素和丙環(huán)唑的組合應(yīng)用以及那他霉素和丙硫菌唑的組合應(yīng)用協(xié)同地 抑制了Botrytis cinerea的生長。
[0130] 實(shí)施例14
[0131] 體外抗真菌活性
[0132] 如實(shí)施例13中所述進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不同之處在于測試以下的組合物：
[0133]-對照(無活性成分），
[0134] -2.5ppm那他霉素 （DSM Food Specialties,Delft，荷蘭），
[0135] -7 · 5或 10 · Oppm 丙環(huán)挫，
[0136] -〇.5ppm 丙硫菌挫，
[0137] -2.5口口111那他霉素+7.5。。1]1丙環(huán)挫，
[0138] -2 · 5ppm 那他霉素+10 · Oppm 丙環(huán)挫，
[0139] -2.5ppm那他霉素+0.5ppm of丙硫菌挫。
[0140] 另外，使用Fusarium proliferatum接種。根據(jù)實(shí)施例13中所述方法測定個體活性 成分和組合的活性成分的抗真菌活性（以％計(jì)）。
[0141] 結(jié)果(見表16)揭示了那他霉素+丙環(huán)唑的活性成分組合和那他霉素+丙硫菌唑的 活性成分組合比個體的那他霉素、丙環(huán)唑或丙硫菌唑更有效地抑制Fusarium proliferatum的生長。活性成分組合那他霉素+丙環(huán)唑和活性成分組合那他霉素+丙硫菌唑 的觀察到的抗真菌活性比預(yù)期的抗真菌活性超出50%到100%，這導(dǎo)致大于1.0的協(xié)同因 子。
[0142] 因此，那他霉素和丙環(huán)唑的組合應(yīng)用以及那他霉素和丙硫菌唑的組合應(yīng)用顯示抵 抗Fusarium proliferatum的強(qiáng)烈協(xié)同抗真菌活性。
[0143] 表1.用包含500ppm那他霉素、1000 ppm丙環(huán)唑或二者兼有的組合物處理后，在20°C 下孵育的香蕉上長有霉菌的創(chuàng)口數(shù)。
[0145] 表2.用包含500ppm那他霉素、150ppm丙環(huán)唑或二者兼有的組合物處理后，在20°C 下孵育的香蕉上長有霉菌的創(chuàng)口數(shù)（％ )。
[0147] 表3.在20 °C孵育后，包含500ppm那他霉素、150ppm丙環(huán)唑或二者兼有的組合物在 香蕉上的抗真菌活性（％)。
[0149] 表4.用包含250ppm那他霉素、1000 ppm丙環(huán)唑任一或二者兼有的組合物處理后，在 20 °C下孵育的香蕉上長有霉菌的創(chuàng)口數(shù)。
[0151] 表5.在20 °C下孵育后，包含250ppm那他霉素、500ppm丙環(huán)唑任一或二者兼有的組 合物在香蕉上的抗真菌活性（％ )。

[0154] 表6.在20°C下孵育后，包含250ppm那他霉素、50ppm丙環(huán)唑任一或二者兼有的組合 物在香蕉上的抗真菌活性（％)。
[0156] 表7.用包含50ppm那他霉素、250ppm丙環(huán)唑任一或二者兼有的組合物處理后，在20 °(：下孵育的香蕉上長有霉菌的創(chuàng)口數(shù)。
[0158] 表8.在20°C下孵育后，包含50ppm那他霉素、250ppm丙環(huán)唑或二者兼有的組合物在 香蕉上的抗真菌活性（％)。

[0161] 表9.用包含500ppm那他霉素、250ppm丙硫菌唑任一或二者兼有的組合物處理后， 在20°C下孵育的香蕉上長有霉菌的創(chuàng)口數(shù)。
L0163」表10.用包含250ppm那他霉素、IOOppm內(nèi)硫菌唑任一或二者兼有的組合物處理后， 在20°C下孵育的香蕉上長有霉菌的創(chuàng)口數(shù)。

[0170] 表13.在20°C下孵育后，包含500ppm那他霉素、600ppm丙硫菌唑任一或二者兼有的 組合物在蜜桔上的抗真菌活性（％ )。
[0172] 表14.在20°C下孵育后，包含250ppm那他霉素、150ppm丙硫菌唑任一或二者兼有的 組合物在蜜桔上的抗真菌活性（％ )。

[0175] 表15 .在25 °C下孵育后，與丙環(huán)唑或丙硫菌唑組合的那他霉素針對Botry t i s cinerea的體外抗真菌活性（％ )。
L0177J 表16 .在25 uC卜孵育后，與內(nèi)壞唑或內(nèi)硫菌唑組合的那他霉素針對Fusar ium proliferatum的體外抗真菌活性（％ ) 〇
[0179] 參考文獻(xiàn)
[0180] Buchenauer H(1987),DMI fungicide:Side effects on the plant and problems of resistance.Pages 259-290in :Modern Selective Fungicides，2nd Edn.H.Lyrjed.Gustav Fisher VerlagjJenajGermany.
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【主權(quán)項(xiàng)】
1. 包含多烯抗真菌化合物和至少一種來自三唑殺真菌劑家族的抗真菌化合物的組合 物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述至少一種來自三唑殺真菌劑家族的抗真菌 化合物選自由吲唑磺菌胺、氧環(huán)唑、聯(lián)苯三唑醇、糠菌唑、環(huán)丙唑醇、芐氯三唑醇、苯醚甲環(huán) 唑、烯唑醇、高效烯唑醇、氟環(huán)唑、乙環(huán)唑啉、腈苯唑、三氟苯唑、氟喹唑、氟硅唑、粉唑醇、呋 菌唑、順式呋菌唑、己唑醇、環(huán)菌唑、亞胺唑、種菌唑、葉菌唑、腈菌唑、戊菌唑、丙環(huán)唑、丙硫 菌唑、喹唑、硅氟唑、戊唑醇、四氟醚唑、丁三唑、滅菌唑、烯效唑和烯效唑-P組成的組。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組合物，其中所述多烯抗真菌化合物是那他霉素。4. 根據(jù)權(quán)利要求1到3中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物還包含至少一種選自下 組的額外的化合物，所述組由粘著劑、載劑、著色劑、保護(hù)性膠體、粘合劑、除草劑、肥料、增 稠劑、掩蔽劑、觸變劑、表面活性劑、其他抗微生物化合物、洗滌劑、防腐劑、鋪展劑、填充劑、 噴霧油、流動添加劑、礦物質(zhì)、溶劑、分散劑、乳化劑、濕潤劑、穩(wěn)定劑、消泡劑、緩沖劑、UV-吸 收劑和抗氧化劑組成。5. 根據(jù)權(quán)利要求1到4中任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述多烯抗真菌化合物的量在從 0.005g/l到約100g/l的范圍內(nèi)，所述至少一種來自三唑殺真菌劑家族的抗真菌化合物的量 在從約0. 〇〇〇lg/l到約2000g/l的范圍內(nèi)。6. 包含多烯抗真菌化合物和至少一種來自三唑殺真菌劑家族的抗真菌化合物的試劑 盒。7. 通過用多烯抗真菌化合物和至少一種來自三唑殺真菌劑的抗真菌化合物處理產(chǎn)品 來保護(hù)產(chǎn)品抵抗真菌的方法。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中用根據(jù)權(quán)利要求1到5中任一項(xiàng)所述的組合物或根 據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒來處理所述產(chǎn)品。9. 根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其中所述產(chǎn)品選自由食品、飼料產(chǎn)品、藥物產(chǎn)品、化 妝品產(chǎn)品和農(nóng)產(chǎn)品組成的組。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述產(chǎn)品是農(nóng)產(chǎn)品。11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述產(chǎn)品在收獲后被處理。12. 包含多烯抗真菌化合物和至少一種來自三唑殺真菌劑家族的抗真菌化合物的產(chǎn) 品。13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的產(chǎn)品，其中所述產(chǎn)品選自由食品、飼料產(chǎn)品、藥物產(chǎn)品、化妝 品產(chǎn)品和農(nóng)產(chǎn)品組成的組。14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的產(chǎn)品，其中所述產(chǎn)品是農(nóng)產(chǎn)品。15. 多烯抗真菌化合物和至少一種來自三唑殺真菌劑家族的抗真菌化合物用于保護(hù)產(chǎn) 品抵抗真菌的用途。
【專利摘要】本發(fā)明涉及新穎的抗真菌組合物，及其在處理農(nóng)產(chǎn)品中的用途。
【IPC分類】A01N55/10, A01N43/653, A01N43/90, A01P3/00, A01N3/00
【公開號】CN105707091
【申請?zhí)枴緾N201610178517
【發(fā)明人】雅各布斯·斯塔克, 安格里克·里克·德
【申請人】帝斯曼知識產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司
【公開日】2016年6月29日
【申請日】2012年3月1日
【公告號】CN103429076A, CN103429076B, EP2680691A1, EP2680691B1, US8946121, US20130324403, US20150141248, WO2012117051A1