一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，所述步驟接種的密度，播種密度可以產(chǎn)生“群體效應(yīng)”，從而使種子的發(fā)芽增快，所述無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂以及配比可以提供種子生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)種子的萌發(fā)，所述萌發(fā)的同時(shí)添加激素，可以使成苗數(shù)量增加，所述萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為2?4%，可以對(duì)蝴蝶蘭種子發(fā)芽、原球莖形成以及葉片生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。采用此種組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)出來(lái)的蝴蝶蘭具有發(fā)芽率高以及生長(zhǎng)優(yōu)良的優(yōu)點(diǎn)，市場(chǎng)潛力巨大，前景廣闊。
【專利說(shuō)明】
-種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于花弁栽培領(lǐng)域，更具體地說(shuō)，本發(fā)明設(shè)及一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蝴蝶蘭，蘭科蝴蝶蘭屬，是單莖性熱帶附生蘭，分布于亞洲、大洋洲熱帶和亞熱帶 地區(qū)，多生長(zhǎng)在陰濕多霧高溫森林中的樹干和濕石上，因其花形別致，花色艷麗，開花期長(zhǎng)， 成為當(dāng)今國(guó)際、國(guó)內(nèi)花弁市場(chǎng)上最受歡迎的花弁之一，素有"蘭花皇后"之美稱。通過(guò)無(wú)菌播 種與組織培養(yǎng)，獲得大量?jī)?yōu)良植株，可W保持優(yōu)良品質(zhì)特征，是進(jìn)行大規(guī)模商品生產(chǎn)和新品 種選育的關(guān)鍵。目前蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法存在著發(fā)芽緩慢W及成苗數(shù)量不高的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的問(wèn)題是提供一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法。
[0004] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為： 一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟： (1) 采種 首先選取授粉后95-105天的的蝴蝶蘭果芙，所選取的果芙為外部光滑飽滿，顏色由綠 轉(zhuǎn)黃； (2) 接種 先用稀釋的洗潔精溶液擦洗葫果表面，然后沖洗，再用8--12%NaC10浸泡10-20min，然 后在超凈工作臺(tái)上，用75%酒精消毒l-3min，并用0.05-0.15%升隸消毒3min，用無(wú)菌水沖洗 2-4遍，取出葫果放在無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，切開葫果將種子移入有無(wú)菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖 動(dòng)使之分散均勻； (3) 萌發(fā) 采用種子無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基對(duì)種子進(jìn)行萌發(fā)，接種后10-20天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母 瓶培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗； (4) 煉苗與移栽 當(dāng)小苗出現(xiàn)3-5片葉、2-4條根時(shí)即可出瓶移栽； 巧)移栽介質(zhì)的選擇 移栽的介質(zhì)為水苔、挪慷、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、挪慷、磚塊和木炭的 比例為 0.5:0.5:0.3:1-1:1:0.5:2; (6)溫度管理 在播種期、育苗期的溫度控制在20-24 Γ，幼苗期的溫度控制在16-18 Γ。
[0005] 優(yōu)選的，所述步驟(2)中接種的密度為200-300粒/m2。
[0006] 優(yōu)選的，所述步驟(3)中無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括膜蛋白腺、香蕉汁、活性炭和 瓊脂。
[0007] 優(yōu)選的，所述膜蛋白腺、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為l-3g^、50-150g/l、 0.5-1.5g/l、8-10g/l。
[0008] 優(yōu)選的，所述步驟(3)中萌發(fā)的同時(shí)添加激素，所述激素的組成為細(xì)胞分裂素 BA與 NAA，所述 BA 與 NAA 的配比為4-6mg/l 和0.04-0.06mg/l。
[0009] 優(yōu)選的，所述步驟(3)中萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為薦糖，所 述薦糖的濃度為2-4%。
[0010] 有益效果:本發(fā)明提供了一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，所述步驟接種的密度，播種 密度可W產(chǎn)生"群體效應(yīng)"，從而使種子的發(fā)芽增快，所述無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括膜蛋 白腺、香蕉汁、活性炭和瓊脂W及配比可W提供種子生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)種子的萌發(fā)， 所述萌發(fā)的同時(shí)添加激素，可W使成苗數(shù)量增加，所述萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有 機(jī)添加物為薦糖，所述薦糖的濃度為2-4%，可W對(duì)蝴蝶蘭種子發(fā)芽、原球莖形成W及葉片生 長(zhǎng)具有促進(jìn)作用。采用此種組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)出來(lái)的蝴蝶蘭具有發(fā)芽率高W及生長(zhǎng)優(yōu)良的 優(yōu)點(diǎn)，市場(chǎng)潛力巨大，前景廣闊。
【具體實(shí)施方式】 [00川實(shí)施例1: 一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟： (1) 采種 首先選取授粉后95天的的蝴蝶蘭果芙，所選取的果芙為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn)黃； (2) 接種 先用稀釋的洗潔精溶液擦洗葫果表面，然后沖洗，再用8%NaC10浸泡lOmin，然后在超凈 工作臺(tái)上，用75%酒精消毒Imin，并用0.05%升隸消毒3min，用無(wú)菌水沖洗2遍，取出葫果放在 無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，切開葫果將種子移入有無(wú)菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動(dòng)使之分散均勻，接種 的密度為200粒/m2; (3) 萌發(fā) 采用種子無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基對(duì)種子進(jìn)行萌發(fā)，接種后10天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶培 養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗，所述無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成W及配比為 膜蛋白腺、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為1邑八、50邑八、0.5邑/1、8邑八，所述萌發(fā)的同時(shí) 添加激素，所述激素的組成為細(xì)胞分裂素 BA與NAA，所述BA與NAA的配比為4mg/l和0.04mg/ 1，所述萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為薦糖，所述薦糖的濃度為2%; (4) 煉苗與移栽 當(dāng)小苗出現(xiàn)3片葉、2條根時(shí)即可出瓶移栽； 巧)移栽介質(zhì)的選擇 移栽的介質(zhì)為水苔、挪慷、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、挪慷、磚塊和木炭的 比例為 0.5:0.5:0.3:1; (6)溫度管理 在播種期、育苗期的溫度控制在20 Γ，幼苗期的溫度控制在16 Γ。
[0012]實(shí)施例2: 一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟： (1)采種 首先選取授粉后100天的的蝴蝶蘭果芙，所選取的果芙為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn) 黃； (2) 接種 先用稀釋的洗潔精溶液擦洗葫果表面，然后沖洗，再用10%NaC10浸泡15min，然后在超 凈工作臺(tái)上，用75%酒精消毒2min，并用0.10%升隸消毒3min，用無(wú)菌水沖洗3遍，取出葫果放 在無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，切開葫果將種子移入有無(wú)菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動(dòng)使之分散均勻，接 種的密度為250粒/m2; (3) 萌發(fā) 采用種子無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基對(duì)種子進(jìn)行萌發(fā)，接種后15天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶培 養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗，所述無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成W及配比為 膜蛋白腺、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為2邑八、100邑/1、1.0邑/1、9邑/1，所述萌發(fā)的同 時(shí)添加激素，所述激素的組成為細(xì)胞分裂素 BA與NAA，所述BA與NAA的配比為5mg/l和 0.05mg/l，所述萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為薦糖，所述薦糖的濃度為 3%； (4) 煉苗與移栽 當(dāng)小苗出現(xiàn)4片葉、3條根時(shí)即可出瓶移栽； 巧)移栽介質(zhì)的選擇 移栽的介質(zhì)為水苔、挪慷、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、挪慷、磚塊和木炭的 比例為0.75:0.75:0.4:1.5; (6)溫度管理 在播種期、育苗期的溫度控制在22 Γ，幼苗期的溫度控制在18 Γ。
[001引實(shí)施例3: 一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，包括如下步驟： (1) 采種 首先選取授粉后105天的的蝴蝶蘭果芙，所選取的果芙為外部光滑飽滿，顏色由綠轉(zhuǎn) 黃； (2) 接種 先用稀釋的洗潔精溶液擦洗葫果表面，然后沖洗，再用12%NaC10浸泡20min，然后在超 凈工作臺(tái)上，用75%酒精消毒3min，并用0.15%升隸消毒3min，用無(wú)菌水沖洗4遍，取出葫果放 在無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，切開葫果將種子移入有無(wú)菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動(dòng)使之分散均勻，接 種的密度為300粒/m2; (3) 萌發(fā) 采用種子無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基對(duì)種子進(jìn)行萌發(fā)，接種后1020天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母瓶 培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗，所述無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成W及配比 為膜蛋白腺、香蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為3肖/1、150肖/1、1.5肖八、10肖八，所述萌發(fā)的 同時(shí)添加激素，所述激素的組成為細(xì)胞分裂素 BA與NAA，所述BA與NAA的配比為6mg/l和 0.06mg/l，所述萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為薦糖，所述薦糖的濃度為 4%； (4) 煉苗與移栽 當(dāng)小苗出現(xiàn)5片葉、4條根時(shí)即可出瓶移栽； 巧)移栽介質(zhì)的選擇 移栽的介質(zhì)為水苔、挪慷、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、挪慷、磚塊和木炭的 比例為 1:1:0.5:2; (6)溫度管理 在播種期、育苗期的溫度控制在24 Γ，幼苗期的溫度控制在18 Γ。
[0014] 經(jīng)過(guò)^上方法后，分別取出樣品，測(cè)量結(jié)果如下:_
根據(jù)上述表格數(shù)據(jù)可W得出，當(dāng)實(shí)施例2參數(shù)時(shí)組織培養(yǎng)后的蝴蝶蘭比現(xiàn)有技術(shù)組織 培養(yǎng)后的蝴蝶蘭的種子萌發(fā)率高，且發(fā)芽時(shí)間短，葉片生長(zhǎng)比現(xiàn)有技術(shù)組織培養(yǎng)的快，此時(shí) 更有利于蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)。
[0015] 本發(fā)明提供了一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，所述步驟接種的密度，播種密度可W 產(chǎn)生"群體效應(yīng)"，從而使種子的發(fā)芽增快，所述無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括膜蛋白腺、香蕉 汁、活性炭和瓊脂W及配比可W提供種子生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)種子的萌發(fā)，所述萌發(fā)的 同時(shí)添加激素，可W使成苗數(shù)量增加，所述萌發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為 薦糖，所述薦糖的濃度為2-4%，可W對(duì)蝴蝶蘭種子發(fā)芽、原球莖形成W及葉片生長(zhǎng)具有促進(jìn) 作用。采用此種組織培養(yǎng)方法培養(yǎng)出來(lái)的蝴蝶蘭具有發(fā)芽率高W及生長(zhǎng)優(yōu)良的優(yōu)點(diǎn)，市場(chǎng) 潛力巨大，前景廣闊。
[0016] W上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā) 明說(shuō)明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng) 域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 米種 首先選取授粉后95-105天的的蝴蝶蘭果莢，所選取的果莢為外部光滑飽滿，顏色由綠 轉(zhuǎn)黃； (2) 接種 先用稀釋的洗潔精溶液擦洗蒴果表面，然后沖洗，再用8-12%NaC10浸泡10-20min，然 后在超凈工作臺(tái)上，用75%酒精消毒l-3min，并用0.05-0.15%升汞消毒3min，用無(wú)菌水沖洗 2-4遍，取出蒴果放在無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，切開蒴果將種子移入有無(wú)菌水的培養(yǎng)瓶中，輕輕搖 動(dòng)使之分散均勻； (3) 萌發(fā) 采用種子無(wú)菌萌發(fā)培養(yǎng)基對(duì)種子進(jìn)行萌發(fā)，接種后10-20天，胚萌發(fā)，20天后轉(zhuǎn)入半母 瓶培養(yǎng)，分初代、繼代和生根培養(yǎng)3階段形成帶根小苗； (4) 煉苗與移栽 當(dāng)小苗出現(xiàn)3-5片葉、2-4條根時(shí)即可出瓶移栽； (5) 移栽介質(zhì)的選擇 移栽的介質(zhì)為水苔、挪糖、磚塊和木炭的混合體為基質(zhì)，所述水苔、挪糖、磚塊和木炭的 比例為0.5:0.5:0.3:1-1:1:0.5:2; (6) 溫度管理 在播種期、育苗期的溫度控制在20-24 °C，幼苗期的溫度控制在16-18 °C。2. 按照權(quán)利要求1所述的一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟(2)中接 種的密度為200-300粒/m2。3. 按照權(quán)利要求1所述的一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟(3)中無(wú) 菌萌發(fā)培養(yǎng)基的組成包括胰蛋白胨、香蕉汁、活性炭和瓊脂。4. 按照權(quán)利要求3所述的一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:所述胰蛋白胨、香 蕉汁、活性炭和瓊脂的含量分別為l_3g/l、50-150g/l、0.5-1.5g/l、8-10g/l。5. 按照權(quán)利要求1所述的一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟(3)中萌 發(fā)的同時(shí)添加激素，所述激素的組成為細(xì)胞分裂素 BA與NAA，所述BA與NAA的配比為4-6mg/l 和0·04-0·06mg/l。6. 按照權(quán)利要求1所述的一種蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟(3)中萌 發(fā)的同時(shí)添加有機(jī)添加物，所述有機(jī)添加物為蔗糖，所述蔗糖的濃度為2-4%。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK105918134SQ201610416142
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年6月15日
【發(fā)明人】岳朝雷
【申請(qǐng)人】安徽菲揚(yáng)農(nóng)業(yè)科技有限公司