專利名稱：一種鹿茸鹿鞭膠原多肽、其制備方法及其制成的口服制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種鹿茸鹿鞭膠原多肽、其制備方法及其制成的口服制劑。

背景技術(shù)：
鹿產(chǎn)品自古以來就是療疾養(yǎng)生的珍品，是中藥之中的上品。而鹿產(chǎn)品中尤以鹿茸，鹿鞭的營(yíng)養(yǎng)成分最高。鹿茸為鹿科的動(dòng)物梅花鹿或馬鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。《本草綱目》中記載“此物生精補(bǔ)髓，養(yǎng)血益陽，強(qiáng)筋健骨，治一切虛損，耳聾，目暗，眩暈，虛痢?！?。鹿鞭是鹿科動(dòng)物梅花鹿或馬鹿干燥帶睪丸的陰莖，其味甘、咸、性溫，歸肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)腎陽、益精血的功能，屬補(bǔ)益類中藥。
現(xiàn)代科學(xué)研究表明，鹿茸、鹿鞭中含有多種有效成分，如不飽和脂肪酸、磷脂類、蛋白質(zhì)、生物胺和多種對(duì)人體有益的微量元素，具有生精補(bǔ)髓、益腎助陽、強(qiáng)筋壯骨、延齡益壽等功效。鹿產(chǎn)品的應(yīng)用開發(fā)，在中國(guó)古代典籍中就多有記述，但傳統(tǒng)的鹿產(chǎn)品服用多需經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的煎煮，為了更好的適應(yīng)市場(chǎng)和改善藥物的適口度，人們已將現(xiàn)代中藥技術(shù)應(yīng)用于鹿產(chǎn)品中，相繼開發(fā)出鮮鹿茸凍干粉(CN1839884)、鹿茸咀嚼片(CN1270039)、鹿茸鹿鞭鞭酒等新劑型。但是這種將鹿茸和鹿鞭直接粉碎或是直接切片制得的產(chǎn)品，其中的鹿茸、鹿鞭大分子蛋白進(jìn)入體內(nèi)后大部分還沒來得及被吸收即被排出體外，嚴(yán)重影響其功效。
專利申請(qǐng)《一種制備鹿茸藥用成分的水解提取方法》(CN1425387)中介紹了利用復(fù)合的生物催化劑對(duì)鹿茸進(jìn)行水解的方法，但是其對(duì)生物催化劑(生物酶)的酶活單位、酶解條件以及所得產(chǎn)物等都沒有實(shí)質(zhì)性的說明，無法應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種易于被人體吸收利用的鹿茸鹿鞭膠原多肽產(chǎn)品，并提供一種生產(chǎn)該產(chǎn)品的方法，為其應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)提供依據(jù)。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種鹿茸鹿鞭膠原多肽、其制備方法及其制成的口服制劑。
本發(fā)明提供的一種鹿茸鹿鞭膠原多肽，它是以鹿茸，鹿鞭為原料，經(jīng)生物酶制劑處理得到鹿茸鹿鞭膠原多肽，其特征在于所述鹿茸鹿鞭膠原多肽通過凝膠過濾法進(jìn)行測(cè)定時(shí)，其數(shù)均分子量小于或等于3000Da。該種鹿茸鹿鞭膠原多肽總氮含量大于或等于12％，氨基酸總量大于80％，鈣、磷、鋅、鐵、錳等元素豐富。其中所述生物酶制劑為木瓜酶、中性蛋白酶、菠蘿酶、胰蛋白酶中的一種酶或兩種以上的酶組合鹿茸鹿鞭膠原多肽。優(yōu)選地所述生物酶制劑是胰蛋白酶或比例1∶2的木瓜酶和菠蘿酶的組合或比例為1∶1的中性蛋白酶和木瓜酶的組合。生物酶制劑的加入量為鹿茸鹿鞭材料干重(本發(fā)明中也稱為底物)的0.5～2％，，底物水料比約為1∶9，適宜反應(yīng)的溫度為40-60℃，適宜的pH值為5-8，反應(yīng)2～5小時(shí)。
本發(fā)明還提供了制備這種鹿茸鹿鞭膠原多肽的方法，它包括下述步驟 a)用生物酶制劑處理鹿茸、鹿鞭。所述的生物酶制劑是木瓜酶、中性蛋白酶、菠蘿酶、胰蛋白酶中的一種酶或兩種以上的酶組合； b)酶解后的產(chǎn)品經(jīng)板框過濾機(jī)過濾得到濾液； c)將濾液干燥得干粉。優(yōu)選上述干燥方法為噴霧干燥，并且優(yōu)選噴霧干燥的條件為進(jìn)口溫度140~190℃；出口溫度60~90℃，獲得的干粉即為本發(fā)明的鹿茸鹿鞭膠原多肽； 另外，本發(fā)明還提供了一種鹿茸鹿鞭膠原多肽口服制劑。其是將上述鹿茸鹿鞭膠原多肽配以輔助性成分(即中醫(yī)理論允許的藥材或可藥用輔料)制成相應(yīng)的鹿茸鹿鞭膠原多肽口服制劑，如顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液或丸劑。例如和枸杞、肉蓯蓉等補(bǔ)腎產(chǎn)品一起制成片劑或膠囊，用于制作補(bǔ)腎強(qiáng)身的保健食品。
和以往的鹿茸鹿鞭產(chǎn)品相比，本產(chǎn)品既不破壞其天然有效成分，又將不利于人體吸收的大分子分解成小分子的多肽，這就使得鹿茸鹿鞭中的有效成分都能被充分的吸收和利用。本發(fā)明采用了噴霧干燥，得到的干粉保質(zhì)期長(zhǎng)，食用方便，屬純天然綠色保健食品，可以和中醫(yī)理論指導(dǎo)下的其它藥材或可藥用輔料組合使用，制成保健品、藥品，用途廣泛。本發(fā)明制得鹿茸鹿鞭膠原多肽產(chǎn)品以及相關(guān)口服制劑營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，保健效果好。同時(shí)本發(fā)明提供的生產(chǎn)鹿茸鹿鞭膠原多肽以及相關(guān)口服產(chǎn)品生產(chǎn)周期短，要求設(shè)備及成本低，產(chǎn)率高(在60％左右)，便于實(shí)施大規(guī)模生產(chǎn)。



圖1是鹿茸鹿鞭膠原多肽制備過程的工業(yè)流程圖； 圖2是鹿茸鹿鞭膠原多肽的凝膠色譜圖(分子量測(cè)定)； 圖3是鹿茸鹿鞭膠原多肽的氨基酸及微量元素檢測(cè)結(jié)果。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明的鹿茸鹿鞭膠原多肽是以鹿茸、鹿鞭為原料，先將其洗凈，粉碎，然后采用酶解工藝，在溫和的環(huán)境中將原有的大分子鹿茸和鹿鞭蛋白水解成小分子的多肽，這個(gè)過程能在不破壞其天然成分的情況下將原料中的大分子物質(zhì)分解，變成利于吸收和利用的小分子的多肽，隨后將酶解后獲得的溶液過濾，噴霧干燥成粉，即得。還可和枸杞、肉蓯蓉等補(bǔ)腎產(chǎn)品或可藥用輔料一起制成片劑或膠囊，用于制作補(bǔ)腎強(qiáng)身的保健食品。
1、原料的選擇鹿茸鹿鞭主要來源于馬鹿或梅花鹿。藥材市場(chǎng)上馬鹿數(shù)量更多，價(jià)格要比梅花鹿便宜，而馬鹿茸和梅花鹿茸的蛋白成分基本相似，兩者功效差異不大，雖然梅花鹿的產(chǎn)率比馬鹿的稍高，但從性價(jià)比綜合考慮，本發(fā)明中采用馬鹿茸和馬鹿鞭為主要原料。
表1、馬鹿與梅花鹿茸的水解后的產(chǎn)率 表2、馬鹿與梅花鹿鞭的水解后的產(chǎn)率 2、酶的選擇 各種蛋白酶的使用條件 生物酶制劑具有底物專一性，即不同的酶只對(duì)特異的肽鍵起作用，如胰蛋白酶只對(duì)精氨酸和賴氨酸肽鏈具有水解作用。由于鹿茸鹿鞭膠原結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，發(fā)明人通過大量實(shí)驗(yàn)，對(duì)各種酶及其組合進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)木瓜酶、中性蛋白酶、菠蘿酶、胰蛋白酶中的一種酶或兩種以上的酶組合能使原料中不同的蛋白肽鏈得到最大程度的水解，其中木瓜酶、菠蘿酶的酶活力應(yīng)在40萬單位以上，中性蛋白酶、胰蛋白酶的酶活力應(yīng)在4萬單位以上。為了提高產(chǎn)率，得到高度水解的產(chǎn)物，發(fā)明人還通過多因素試驗(yàn)確定了本發(fā)明中使用生物酶的酶解條件以及篩選獲得的生物酶制劑的用量。
下面通過實(shí)施例詳細(xì)地說明本發(fā)明，但是本發(fā)明不應(yīng)該被解釋為僅限于此。
實(shí)施例1 將鹿茸、鹿鞭按質(zhì)量比1∶1洗凈，粉碎(過80目篩)，按1∶9的水料比將碎末放于水中，加入中性蛋白酶和木瓜酶(中性蛋白酶∶木瓜酶的比例為1∶1)，加入量為物料干重的1％，然后加熱到50℃，調(diào)節(jié)pH到7，恒溫4小時(shí)，將溫度迅速升至100℃煮沸15分鐘，冷卻至30℃，然后經(jīng)板框過濾機(jī)濾出，對(duì)濾液進(jìn)行噴霧干燥，得黃色粉末，測(cè)定產(chǎn)物的分子量分布、氨基酸總量及其他理化指標(biāo)，結(jié)果見表3。
實(shí)施例2 將鹿茸、鹿鞭按質(zhì)量比4∶1洗凈，粉碎(過80目篩)，按1∶9的水料比將碎末放于水中，加入木瓜酶和菠蘿酶(比例1∶2)，酶的添加量為物料干重的1％，然后加熱到50℃，調(diào)節(jié)pH到6.5，恒溫3小時(shí)，將溫度迅速升至100℃煮沸15分鐘，冷卻至30℃，然后經(jīng)板框過濾機(jī)濾出，對(duì)濾液進(jìn)行噴霧干燥，得黃色粉末，測(cè)定產(chǎn)物的分子量分布、氨基酸總量及其他理化指標(biāo)，結(jié)果見表3。
實(shí)施例3 將鹿茸、鹿鞭按質(zhì)量比1∶4洗凈，粉碎(過80目篩)，按1∶9的水料比將碎末放于水中，加入胰蛋白酶，酶的加入量為物料干重的2％，然后加熱到40℃，調(diào)節(jié)pH到8.0，恒溫5小時(shí)，將溫度迅速升至100℃煮沸10分鐘，冷卻至30℃，然后經(jīng)板框過濾機(jī)濾出，對(duì)濾液進(jìn)行噴霧干燥，得黃色粉末，測(cè)定產(chǎn)物的分子量分布、氨基酸總量及其他理化指標(biāo)，結(jié)果見表3。
表3、產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果
數(shù)據(jù)分析及說明 1、從分子量上可以看出，分子量的分布較窄，分子量大約在2600左右，這主要是由于采用的生物酶制劑對(duì)底物作用較徹底，使得活性成分集中在分子量較小的部分，易于人體吸收。
2、從氨基酸的檢測(cè)中可以看出，各種氨基酸的總和可達(dá)80％，即本發(fā)明的方法得到的多肽純度較高，這是因?yàn)樵谒膺^程中，可被水解的蛋白均分解成可溶于水的多肽，而另外一些不能被水解的雜質(zhì)及不溶性非蛋白成分則被濾出，使蛋白成分得到純化。
3、由各元素的成分的測(cè)定可知，在本產(chǎn)品中，產(chǎn)品的鈣、磷、錳的成分顯著，這主要是鹿茸的主要成分，說明在本發(fā)明中，對(duì)人體有益的微量元素得以保存。而且本產(chǎn)品中的鐵，錳，鋅的含量較高，鐵是血紅蛋白的必不可少的成分，而錳和鋅含量是腎和精液中的所含的元素，因此可以看出本產(chǎn)品可以補(bǔ)腎、補(bǔ)血，并在微量元素的補(bǔ)充方面有著很大的作用。
本發(fā)明方法上還有著以下幾點(diǎn)優(yōu)點(diǎn) 1、本產(chǎn)品的制備是將鹿茸與鹿鞭同時(shí)進(jìn)行處理，將兩種原料同時(shí)處理，這樣既節(jié)省了操作工序，又能將產(chǎn)品中的有益成分完全提取。其中鹿茸的主要成分為蛋白質(zhì)和骨質(zhì)，其中的蛋白質(zhì)占總量的50％以上，骨質(zhì)主要由一部分的骨質(zhì)膠原和鈣、磷、錳等。鹿鞭的主要成份為蛋白質(zhì)及脂類，其中蛋白質(zhì)類成分占80％，而本產(chǎn)品最后得到的蛋白質(zhì)含量80％左右，基本將原料中的全部蛋白質(zhì)提取出來。而且鈣、磷、錳的含量很高，證明原料中的大部分微量元素在水解過程中得到保留，最大程度地保證了其功效成分的利用。
2、本產(chǎn)品在生產(chǎn)中，適易反應(yīng)的溫度為40-60℃，適宜的pH值為5-8，在這個(gè)環(huán)境中，酶活力最大，而最后產(chǎn)品的pH值接近中性也符合應(yīng)用要求，因此無須使用大量酸堿進(jìn)行pH值的調(diào)節(jié)，避免了雜質(zhì)的引入。生產(chǎn)該產(chǎn)品所需的設(shè)備也為常用的食品加工設(shè)備，工藝簡(jiǎn)單，工藝可控性強(qiáng)，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
3、本產(chǎn)品得到的溶液采用噴霧干燥的方法，這極大地簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝，使得本產(chǎn)品利于操作，產(chǎn)品便與攜帶，便于儲(chǔ)藏。
本發(fā)明中所用的％單位，除另有說明外，均為質(zhì)量百分比。
工業(yè)實(shí)用性 本產(chǎn)品主要是鹿茸、鹿鞭的多肽提取物，有著鹿茸、鹿鞭的主要功效成分，而且分子量小，易溶解，易吸收。因此，主要應(yīng)用于保健品或藥品中，可直接與可藥用輔料制成口服制劑，也可在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下配以補(bǔ)腎功效枸杞、肉蓯蓉的提取物，制成膠囊或片劑，獲得功效顯著的保健食品。
此外，為了更好地理解和說明本發(fā)明，下文中給出了本發(fā)明中采用的有關(guān)測(cè)試方法，盡管這些測(cè)試方法為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟知。
1.分子量及其分布的測(cè)定 照多糖的分子量與分子量分布測(cè)定法(中國(guó)藥典2005版二部附錄VH分子排阻色譜法)測(cè)定。
具體測(cè)定方法如下 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用Waters Ultrohydrogel 1000，500，250串聯(lián)的凝膠色譜柱，取磷酸氫二鈉323.11g，磷酸二氫鉀140.8g和疊氮鈉16g，加水至2000ml做儲(chǔ)備液。取儲(chǔ)備液50ml加水至2000ml為流動(dòng)相，流速為每分鐘0.8ml；運(yùn)行時(shí)間50分鐘；柱溫為30℃；采用示差折光檢測(cè)器，理論板數(shù)按葡聚糖峰計(jì)算，應(yīng)不小于1500。
樣品測(cè)定稱取已知數(shù)均分子量(1010~332800)的葡聚糖對(duì)照品，分別加流動(dòng)相支撐每1ml含6mg的溶液；另取供試樣品0.6g，至100ml容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，作為供試溶液，振搖，分別取100μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。數(shù)據(jù)采用專用GPC軟件處理。
2.常規(guī)理化指標(biāo)的測(cè)定 氨基酸成分檢測(cè)方法按GB/T5009.124-2003食品中氨基酸的操作.； 水分的測(cè)定按GB/T5009.3-2003食品中水分的操作； 灰分測(cè)定按GB/T5009.4-2003食品中灰分的操作； 蛋白質(zhì)測(cè)定按GB/T5009.5-2003食品中蛋白質(zhì)的操作； 微量元素的測(cè)定按B/T5009.14-2003、GB/T5009.13-2003、GB/T5009.90-2003測(cè)定(原子吸收法)。
3.蛋白回收率＝濾液總蛋白/原料總蛋白×100％。
權(quán)利要求
1、一種鹿茸鹿鞭膠原多肽，它是以鹿茸，鹿鞭為原料，經(jīng)生物酶制劑處理得到鹿茸鹿鞭膠原多肽，其特征在于所述鹿茸鹿鞭膠原多肽通過凝膠過濾法進(jìn)行測(cè)定時(shí)，其數(shù)均分子量小于或等于3000Da。
2、權(quán)利要求1所述的鹿茸鹿鞭膠原多肽，其特征在于，其中所述生物酶制劑為木瓜酶、中性蛋白酶、菠蘿酶、胰蛋白酶中的一種酶或兩種以上的酶的組合。
3、權(quán)利要求2所述的鹿茸鹿鞭膠原多肽，其特征在于其中所述生物酶制劑為胰蛋白酶或比例為1∶2的木瓜酶和菠蘿酶的組合或比例為1∶1的中性蛋白酶和木瓜酶的組合。
4、權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述鹿茸鹿鞭膠原多肽的制備方法，其特征在于，該方法包括下列步驟
a)用生物酶制劑處理鹿茸、鹿鞭；
b)酶解后的產(chǎn)品鹿茸鹿鞭膠原多肽經(jīng)板框過濾機(jī)過濾得到濾液；
c)噴霧干燥濾液得干粉，即為鹿茸鹿鞭膠原多肽。
5、權(quán)利要求4所述的方法，其中步驟a)所述的生物酶制劑為木瓜酶、中性蛋白酶、菠蘿酶、胰蛋白酶中的一種酶或兩種以上的酶組合；優(yōu)選為比例為1∶2的木瓜酶、菠蘿酶組合或比例為1∶1的中性蛋白酶和木瓜酶的組合；生物酶制劑的添加量為底物量0.5～2％，酶解條件是pH5～8，溫度為40～60℃，底物水料比為1∶9。
6、權(quán)利要求4所述的方法，鹿茸、鹿鞭可分別進(jìn)行生物酶制劑處理，也可兩者同時(shí)進(jìn)行。
7、權(quán)利要求4所述的方法，其中步驟a)中的鹿茸、鹿鞭來源于馬鹿或梅花鹿。
8、一種鹿茸鹿鞭膠原多肽口服制劑，其以權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的鹿茸鹿鞭膠原多肽為主要原料，配以輔助性成分即中醫(yī)理論允許的藥材或可藥用輔料，制成相應(yīng)的鹿茸鹿鞭膠原多肽口服制劑。
9、如權(quán)利要求8的鹿茸鹿鞭膠原多肽口服制劑，其中該口服制劑是顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液或丸劑。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種鹿茸鹿鞭膠原多肽、其制備方法及其制成的口服制劑。采用現(xiàn)代生物酶解技術(shù)，對(duì)傳統(tǒng)的中藥材鹿茸、鹿鞭進(jìn)行水解、提純，得到的一種小分子多肽制劑。該多肽制劑在利于人體吸收的同時(shí)又不會(huì)破壞鹿茸、鹿鞭中的天然營(yíng)養(yǎng)成分，有著良好的補(bǔ)腎健體、強(qiáng)筋壯骨功效，是一種天然的保健產(chǎn)品。而且，本發(fā)明方法可控性強(qiáng)，適用于大規(guī)模生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A23L1/305GK101301023SQ20081011622
公開日2008年11月12日 申請(qǐng)日期2008年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月7日
發(fā)明者董彥博, 蔣國(guó)昌 申請(qǐng)人:北京華達(dá)杰瑞生物技術(shù)有限公司