專利名稱：透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是涉及一種生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法。
背景技術(shù)：
在實(shí)際生產(chǎn)或?qū)嶒?yàn)室中保存的透明質(zhì)酸菌種經(jīng)常會(huì)發(fā)生退化現(xiàn)象，因此，需要不斷進(jìn)行 復(fù)壯，以得到性能優(yōu)良的菌種，常規(guī)的復(fù)壯方法是利用常規(guī)或加富培養(yǎng)基平板，進(jìn)行劃線分 離方法，利用淘汰該當(dāng)將菌種進(jìn)行分離，從中選擇性能良好的菌種而得到復(fù)壯，但是這種方 法較保守，成功率<5%，復(fù)壯成功率非常低，而且復(fù)壯得到的菌種不夠好，容易退化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明就是提供一種利用常見的植物通過特殊的處理方法得到復(fù)壯劑按最優(yōu)比例加入到 選擇平板中，然后把退化的菌種用接種環(huán)接到平板中進(jìn)行劃線分離，并在生物培養(yǎng)箱中培養(yǎng) ，使菌種的復(fù)壯率由<5%提高到了 <80%以上的透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法。
本發(fā)明的解決方案是這樣的先制備浸提液，再用浸提液進(jìn)行透明質(zhì)酸菌種的復(fù)壯，所 述的浸提液的制備是
(1) 、用新鮮紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)水的容 量(毫升)以l: 1.8-2.2混合；
(2) 、將上述混合物加熱，加熱的時(shí)間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50%—
70%;
(3) 、在無(wú)菌操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量百分比濾出50-150克浸提液，放入2。C-6。C 的冰箱內(nèi)保存。
將上述浸提液按傳統(tǒng)的復(fù)壯方法進(jìn)行操作，就可得到性能優(yōu)良的透明質(zhì)酸菌種。 本發(fā)明有優(yōu)點(diǎn)是復(fù)壯劑原料易得，制作和使用過程簡(jiǎn)單，提高了菌種的復(fù)壯率。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明先制備浸提液，再用浸提液進(jìn)行透明質(zhì)酸菌種的復(fù)壯，所述的浸提液的制備是
(1) 、用新鮮紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)水的容
量(毫升)以l: 1.8-2.2混合；
(2) 、將上述混合物加熱，加熱的時(shí)間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50%—
70%;(3)、在無(wú)菌操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量百分比濾出50-150克浸提液，放入2。C-6。C 的冰箱內(nèi)保存。
其中新鮮紅薯或者土豆或者玉米是切碎為2-5mm細(xì)小塊狀物。 實(shí)施例l:
按原料重量(克)水的容量(毫升)以l: 1.8-2混合；將上述混合物加熱，加熱的時(shí)
間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50%—60%，在無(wú)菌操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量 百分比濾出50-130克浸提液。 實(shí)施例2:
用新鮮紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)水的容量(毫升
)以l: 2-2.2混合，加熱的時(shí)間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50%—60%，在無(wú)菌 操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量百分比濾出50-120克浸提液。
得到上述浸提液后，進(jìn)行透明質(zhì)酸菌種的復(fù)壯，其方法為
首先在配制的透明質(zhì)酸固體培養(yǎng)基時(shí)加入浸提液，121° C高溫滅菌30分鐘，倒好需要的 復(fù)壯平板，再把退化的透明質(zhì)酸菌種斜面或甘油管取出活化30分鐘，然后用接種環(huán)挑出退化 菌種在復(fù)壯平板上劃線，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)0 — 40小時(shí)，直到菌種在平板上出現(xiàn)肥厚且粘性高 的單菌落，再用接種環(huán)挑出進(jìn)行傳代，最后得到性能優(yōu)良的透明質(zhì)酸菌種，傳代穩(wěn)定后可用 甘油管對(duì)復(fù)壯好的菌種進(jìn)行保存。
權(quán)利要求
權(quán)利要求1一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法，先制備浸提液，再用浸提液進(jìn)行透明質(zhì)酸菌種的復(fù)壯，其特征在于所述的浸提液的制備是(1)、用新鮮紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)水的容量(毫升)以1∶1.82.2混合；(2)、將上述混合物加熱，加熱的時(shí)間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50％—70％；(3)、在無(wú)菌操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量百分比濾出50150克浸提液，放入2℃6℃的冰箱內(nèi)保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法，其特征在于新鮮紅 薯或者土豆或者玉米是切碎為2-5mm細(xì)小塊狀物。
3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法，其特征在于用新鮮 紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)水的容量(毫升)以l: 1.8-2混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求l所述的透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法，其特征在于用新鮮 紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)水的容量(毫升)以l: 2-2. 2混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求l所述的透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法，其特征在于將上述 混合物加熱，加熱的時(shí)間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50%—60%。
6.根據(jù)權(quán)利要求l所述的透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法，其特征在于在無(wú)菌 操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量百分比濾出50-130克浸提液。
全文摘要
一種透明質(zhì)酸菌種復(fù)壯方法。其特點(diǎn)是先制備浸提液，再用浸提液進(jìn)行透明質(zhì)酸菌種的復(fù)壯，浸提液的制備是(1)用新鮮紅薯或者土豆或者玉米切碎為細(xì)小塊狀物，按原料重量(克)∶水的容量(毫升)以1∶1.8-2.2混合；(2)將上述混合物加熱，加熱的時(shí)間大于或等于4小時(shí)，按重量比將水蒸發(fā)掉50％-70％；(3)在無(wú)菌操作臺(tái)上用滅菌的濾布按質(zhì)量百分比濾出50-150克浸提液，放入2℃-6℃的冰箱內(nèi)保存。將上述浸提液按傳統(tǒng)的復(fù)壯方法進(jìn)行操作，就可得到性能優(yōu)良的透明質(zhì)酸菌種。其優(yōu)點(diǎn)是復(fù)壯劑原料易得，制作和使用過程簡(jiǎn)單，提高了菌種的復(fù)壯率。
文檔編號(hào)C12N1/00GK101440348SQ200810306530
公開日2009年5月27日 申請(qǐng)日期2008年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月25日
發(fā)明者劉樹新, 歐韋福, 黃云兵 申請(qǐng)人:柳州市柳化集團(tuán)大力透明質(zhì)酸有限公司;柳州化學(xué)工業(yè)集團(tuán)有限公司