專利名稱：：二甲基亞砜在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及二甲基亞砜延緩衰老的新用途，特別涉及其在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：二甲基亞砜，分子式為(CH3hS0(簡寫匿S0)，是一種透明、無色、無臭、呈微苦味的液體，毒性極低。它是一種水溶性的化合物，能溶解絕大多數(shù)有機(jī)化合物，甚至對(duì)無機(jī)鹽也能溶解。液態(tài)的二甲基亞砜能高度締合，屬極性溶劑具有很強(qiáng)的吸水性和對(duì)肌體的滲透性。二甲基亞砜主要用作農(nóng)藥、染料、醫(yī)藥中間體等有機(jī)合成溶劑；芳烴抽提、綸紡絲高分子聚合、石蠟精致、柴油精致、電子元件清洗、氣體吸收、稀有金屬萃取溶劑；電容器介質(zhì)防凍劑、液壓液原料；化學(xué)反應(yīng)加速溶劑；農(nóng)藥、農(nóng)肥醫(yī)藥效劑。二甲基亞砜本身具有消炎、止痛、鎮(zhèn)靜、利尿、促進(jìn)傷口愈合的作用；并能將溶于其中的其它藥物通過皮膚涂抹滲入體內(nèi)，代替口服或注射，用于治療關(guān)節(jié)炎、皮炎、腳氣、牛皮癬、扭傷、腫瘤等各種疾病。故得名"萬能藥"或"萬能溶媒"。但對(duì)其延緩衰老作用的研究尚無報(bào)道。秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditiselegans，簡稱線蟲)是一種相對(duì)簡單的多細(xì)胞生物，雌雄同體，是研究衰老的卓越的模式生物(H.Gershon，D.Gershon.Caenorhabditiseleg肌s-3paradigmforagingresearch:3drar1tegesandlimitations.MechanismsofAgeingandDevelopment123(2002)261-274)，與其它物種相比具有以下難以比擬的優(yōu)勢I.易培養(yǎng)，廉價(jià)；II.世代周期短，適合快速觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果；III.后代數(shù)目多，適合統(tǒng)計(jì)分析；IV.分子遺傳技術(shù)成熟；V.細(xì)胞譜系清楚VI.身體透明，可以很清楚的在顯微鏡下觀察活體的結(jié)構(gòu)；VII.也是最重要的，線蟲和人在基因和分子通路方面保守，比如在線蟲中首先發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞凋亡通路，RNAi通路在高等生物中保守。VIII.適合大規(guī)模，高通量篩選藥物。IX.線蟲中許多遺傳通路比如衰老相關(guān)類胰島素通路、限食通路等研究相對(duì)清楚。基于線蟲這一模式生物開發(fā)延緩衰老的藥物不但能進(jìn)一步挖掘現(xiàn)有藥物的價(jià)值，而且還能對(duì)延長人類的壽命做出貢獻(xiàn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供二甲基亞砜(DMS0)的新用途。本發(fā)明所提供的二甲基亞砜的一個(gè)新用途是其在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。所述產(chǎn)品可為藥物、保健品或食品添加劑等。本發(fā)明所提供的二甲基亞砜的另一個(gè)新用途是其在制備線蟲壽命延長劑中的應(yīng)用。其中，所述線蟲具體可為秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditiselegans)。需要的時(shí)候，在上述產(chǎn)品中還可以加入一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。所述載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。用二甲基亞砜制備的延緩衰老藥物、保健品可以制成注射液、片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊、口服液、膏劑、霜?jiǎng)┑榷喾N形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。本發(fā)明采用線蟲這一模式生物，以整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為檢測手段，觀察二甲基亞砜對(duì)線蟲壽命的影響，發(fā)現(xiàn)體積百分含量為0.5%和2%的二甲基亞砜能顯著延長線蟲的平均壽命和最大壽命。圖1為不同濃度的匿SO對(duì)線蟲平均壽命的影響的柱形圖。圖2為實(shí)施例1制備的線蟲生存曲線圖。具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和生物材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。實(shí)施例1、匿S0對(duì)秀麗隱桿線蟲壽命的影響實(shí)驗(yàn)1材料1.l菌株、線蟲菌株E.coli0P50、野生型秀麗隱桿線蟲Bristol(N》均購自于線蟲遺傳中心(CGC)。1.2藥物和試劑DMSO(Sigma)，瓊脂粉(日本協(xié)和株式會(huì)社)，5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-Fu)(Sigma)，蛋白胨(p印tone)、tryptone(0X0ID)，其余試劑均為國產(chǎn)。1.3儀器MIR-553恒溫培養(yǎng)箱(日本SANYO公司)，S6E體視顯微鏡(德國Leica公司)，XTS30-D體視顯微鏡(北京泰克儀器有限公司)，MLS-3780高壓滅菌鍋(日本SANYO公司)等。2方法2.1實(shí)驗(yàn)分組設(shè)為對(duì)照組(5-Fu組)和6個(gè)匿SO用藥組，匿SO在培養(yǎng)基中的濃度(體積百分含量)從低到高依次為0.01%，0.05%，0.2%，0.5%，2%，5%。2.2線蟲的常規(guī)培養(yǎng)雌雄同體線蟲N2，接種于涂布E.Coli0P50的標(biāo)準(zhǔn)線蟲培養(yǎng)基(nematodegrowthmedium,NGM)于2(TC恒溫培養(yǎng)。每升培養(yǎng)基含3g氯化鈉、20g瓊脂粉、2.5g蛋白胨、lml膽固醇乙醇溶液(濃度為5mg/ml)、lmlCaCl2溶液(lmol/L)、lmlMgS。4溶液(lmol/L)和25mlKP04溶液(pH=6)。2.3壽命實(shí)驗(yàn)2.3.1同步化用M9緩沖溶液(每升]9溶液含化2昍045.8g，KH2P043.Og，NaCl0.5g，NH4C11.0g)將年輕成蟲洗至無菌EP管中，加適量裂解液(0.5%次氯酸鈉，0.5N氫氧化鈉)裂解線蟲，置低速離心機(jī)上離心(3000rpm，lmin)，棄上清，再用M9緩沖溶液沖洗線蟲2次，離心棄上清后用移液槍吸取EP管底部線蟲滴于NGM的無菌區(qū)，約48小時(shí)后裂解的線蟲體4內(nèi)的受精卵基本發(fā)育成L4期幼蟲，完成同步化用于壽命實(shí)驗(yàn)。2.3.2培養(yǎng)基制備對(duì)照組培養(yǎng)基中含12.5mg/L5_Fu，藥物組培養(yǎng)基中含12.5mg/L5-Fu和不同濃度的DMS0。2.3.3壽命實(shí)驗(yàn)挑取同步化的L4線蟲到各組培養(yǎng)基中，每組平均80110條，每個(gè)板中約有15條。從轉(zhuǎn)移時(shí)刻起開始計(jì)算線蟲存活天數(shù)，轉(zhuǎn)移當(dāng)天記為壽命實(shí)驗(yàn)第0天(day0)。每天檢查線蟲，記錄死亡線蟲數(shù)，剔除意外死亡、逃逸和囊樣線蟲。線蟲死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)用鉑絲輕觸蟲體，無任何反應(yīng)，即判斷為死亡。以上實(shí)驗(yàn)均重復(fù)兩次。2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用AN0VA方差檢驗(yàn)分析壽命實(shí)驗(yàn)結(jié)果，定量資料以X±S表示。3結(jié)果不同濃度匿SO對(duì)線蟲壽命的影響的結(jié)果見表1。由表l可知，與對(duì)照組相比O.5%和2%匿S0顯著延長線蟲平均壽命和最大壽命。表1不同濃度匿S0對(duì)線蟲壽命的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注最大壽命為群體最后生存15%的平均壽命；與對(duì)照組比較，"P<0.01，2)P<0.05將不同濃度匿SO對(duì)線蟲平均壽命的影響結(jié)果做柱形圖(取第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果)，見圖1。與對(duì)照組5-Fu相比可以看出0.5%和2%匿S0顯著延長線蟲平均壽命，5X匿SO顯示了一定的毒性導(dǎo)致線蟲平均壽命縮短。使用SPSS16.0軟件對(duì)線蟲全程存活情況做生存曲線(K即lan-Meier生存曲線，取第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果)(見圖2)，由圖可以看出0.5%和2%匿SO均能使線蟲的生存曲線右移，顯示延壽效果。權(quán)利要求二甲基亞砜在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述產(chǎn)品為藥物、保健品或食品添加劑。3.二甲基亞砜在制備線蟲壽命延長劑中的應(yīng)用。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述線蟲為秀麗隱桿線蟲。全文摘要本發(fā)明公開了二甲基亞砜的新用途。該用途是二甲基亞砜在制備延緩衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用及其在制備線蟲壽命延長劑中的應(yīng)用。本發(fā)明采用線蟲這一模式生物，以整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)作為檢測手段，觀察二甲基亞砜對(duì)線蟲壽命的影響，發(fā)現(xiàn)體積百分含量為0.5％和2％的二甲基亞砜能顯著延長線蟲的平均壽命和最大壽命。文檔編號(hào)A23L1/30GK101732291SQ200910244038公開日2010年6月16日申請日期2009年12月25日優(yōu)先權(quán)日2009年12月25日發(fā)明者于友華,喻曉春,李連達(dá),汪曉燕,王丹巧,王香明申請人:中國中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心