專利名稱：木蘭科植物提取物、制備方法以及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯的植物提取物，其制備方法和在食品、 醫(yī)藥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在世界上50多萬種植物中，蘊藏著豐富的藥用植物資源與天然活性產(chǎn)物。人類很 早就知道，許多植物及其所含有的天然活性有效部位和有效成分可以預(yù)防、治療疾病。100 多年來，尤其是近半個多世紀以來，人們在尋找藥用植物資源及其天然活性產(chǎn)物方面，獲得 了很大成功。直到現(xiàn)在，高等植物仍然是發(fā)現(xiàn)新藥的重要途徑。隨著人們生活水平的提高和 健康理念的改變，對天然藥物的需求也日益增長。盡管數(shù)千年來，人類已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了數(shù)以千計 的植物可以用于治療疾病，但就整體而言，已作為藥物開發(fā)使用的，僅僅只是全部植物中很 少部分，還有大量的植物及其所含有的天然活性有效部位和有效成分需要進一步地發(fā)掘。木蘭科Magnoliaceae是雙子葉植物中最古老的科之一，在我國共有73個種，廣泛 分布于東南部至西南部地區(qū)，多數(shù)作為觀賞性植物而種植，其中也有少部分種，如厚樸、辛 夷(望春花)等在我國作為傳統(tǒng)中藥使用。在民間，木蘭科的一些植物也作為草藥用于治 療疾病。除厚樸、辛夷等少數(shù)種在我國作為傳統(tǒng)中藥使用外，木蘭科植物中的多數(shù)種均未進 行藥用開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種具有功能性的、含有吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯的植物提取 物。本發(fā)明的另一目的在于提供這種植物提取物的制備方法。本發(fā)明的再一目的是提供這種植物提取物的用途。本發(fā)明所述的木蘭科植物提取物是由木蘭科玉蘭屬植物和含笑屬植物經(jīng)冷浸或 溫浸或回流方式提取，再以液液萃取，柱層析方式純化制備而得，其中含有重量百分比為 2% 95%吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯。更佳的范圍為吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯含量為重量百分比 50 95%。Ι^ ^ ^Μ Ι^^ ^ MagnoliaMagnolia grandiflora 等；所述的含笑屬植物為云南含笑Michelia yunnanensis、壯麗含笑Michelia Iacei等。本發(fā)明所述的木蘭科植物提取物的制備方法由以下步驟組成一、以上述植物的葉、根皮或/和莖皮為原料，用5 10倍重量、介電常數(shù)值為 1. 5 45的有機溶劑，在絕對壓力0. 03 4MPa、溫度15 85 °C條件下提取，得提取液；二、上述提取液在絕對壓力0. 03 0. llMPa、35 80°C條件下濃縮至無有機溶劑，得干浸膏；三、上述干浸膏以介電常數(shù)值為1. 5 45、在水中溶解度小于0. 08ml/ml的有機溶 劑-水體系，在室溫常壓下萃取，有機溶劑水的體積比為1 0.2 4，取有機溶劑層，濃 縮至膏狀物；四、取上述膏狀物與200 400目硅膠拌和后裝入層析柱，用介電常數(shù)值為1. 5 45、且互溶的二元或三元有機溶劑系，在室溫、絕對壓力0. 1 3. 5MPa壓力下進行洗脫；再 用薄層層析色譜，展開劑為石油醚-丙酮(4 0.8 2)，以吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯為對照物 質(zhì)進行流份的檢測，收集含吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯的流份，在0. 03 0. IlMPa,35 80°C條件 下濃縮至干，即可得提取物。在步驟一中所使用的介電常數(shù)值為1. 5 45的有機溶劑主要是乙腈(介電常 數(shù)值36. 6)、甲醇(33)、乙醇(24. 3)、丙醇(20. 1)、異丙醇(17. 9)、丙酮(20. 7)、正丁醇 (17. 8)、乙酸(6. 15)、乙酸乙酯(6. 02)、氯仿(4. 81)、二氯甲烷(9. 08)、二氧六環(huán)(2. 25)、 環(huán)己烷(2. 02)、石油醚(1.8)等，可以是一種或一種以上混合使用，提取次數(shù)可以是多次， 每次2 24小時；步驟三中所述的介電常數(shù)值為1. 5 45、在水中溶解度小于0. 08ml/ ml的有機溶劑主要是氯仿、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯等，萃取次數(shù)可為多次；步驟四中 所述介電常數(shù)值為1. 5 45、且互溶的二元或三元有機溶劑系主要為氯仿-甲醇(體積比 8 0.6 3)，氯仿-甲醇-水(體積比9 0.3 3 0. 3 1)，丙酮-石油醚(體積比 4 0. 5 3)，丙酮-石油醚-水(體積比8 0. 5 4 0. 3 2)，醋酸乙酯-甲醇(體 積比9 0.4 3)，醋酸乙酯-石油醚-甲醇(體積比8 0.5 4 0.3 2)，二氯甲 烷_石油醚(體積比8 0. 6 3)等。上述步驟一至三所得膏狀物為粗提物，此粗提物中吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯含量約為 重量百分比2 12% ；步驟一至四所得提取物為精提物，其中吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯含量為 重量百分比12 95%。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)木蘭科木蘭屬和含笑屬中部分植物含有較為豐富的天然倍半萜 化合物。倍半萜是由3分子異戊二烯聚合而成，分子中含有15個C原子的一類天然 萜類化合物，是揮發(fā)油的主要組成成分之一，沸點較高，其含氧衍生物，如醇、醛、酮、羧 酸、酯(內(nèi)酯)類以及苷等，大多有較強的香氣。其中在部分木蘭科植物如玉蘭屬植 物玉蘭Magnolia denudate、荷花玉蘭Magnolia grandiflora或含笑屬植物云南含笑 Micheliayurmanensis、壯麗含笑Michelialacei中所含有的吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯，具有多 方面生物活性。我們的研究證明，上述植物中含有在Y2內(nèi)酯環(huán)C11 C13上具雙鍵的吉馬 烷型倍半萜的提取物、有效部位和有效成分者，活性均較強，可用于血管神經(jīng)性頭痛的預(yù) 防、治療和輔助治療，心腦血管疾病的預(yù)防、治療和輔助治療、實體性惡性腫瘤和白血病的 預(yù)防、治療和輔助治療等。本發(fā)明提取物可以依常規(guī)的方法加入適當(dāng)輔料制成藥物制劑或功能性食品，如散 劑、顆粒劑、膠囊劑、緩釋和控釋膠囊劑、素片和包衣片、緩釋和控釋片、分散片、口含片、口 服液、軟膠囊、滴丸等，吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯含量為重量百分比80%以上時也可以制備為注 射劑、注射用粉針、含藥輸液劑等。本發(fā)明所述的天然藥物和功能性食品可用于神經(jīng)血管性頭痛疾病的預(yù)防、治療和 輔助治療，心腦血管疾病的預(yù)防、治療和輔助治療、實體性惡性腫瘤(肺癌、黑色素瘤、肝癌、胃癌、卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等)和白血病的預(yù)防、治療和輔助治療等。本發(fā)明涉及所述提取物在制備治療和輔助治療神經(jīng)血管性頭痛疾病的藥物中的 應(yīng)用。本發(fā)明涉及所述提取物在制備治療和輔助治療神經(jīng)血管性頭痛疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及所述提取物在制備治療和輔助治療實體性惡性腫瘤的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及所述提取物在制備治療和輔助治療白血病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及所述提取物在制備預(yù)防和輔助降血壓的功能性食品中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及所述提取物在制備預(yù)防和輔助保護輻射危害的功能性食品中的應(yīng)用。以下提供本發(fā)明所述提取物的藥效學(xué)及功能性實驗資料實驗一 MPA體外抗血小板聚集活性試驗材料實驗動物雄性日本大耳白兔，體重2.0 2. 2kg。藥品及試劑供試樣品實施例4所得提取物(MPA-3)，以20%聚乙二醇配制成適宜濃度備用， PH值為6. 5左右?；ㄉ臒捤?arachidonic acid, AA)禾口小牛血i青蛋白(bovine serum albumin, BSA)系Sigma公司產(chǎn)品.前者溶于含0. 25 %小牛血清蛋白的Tris-NaCl緩沖液中， PH7. 6 ；后者溶于無水乙醇中，用前以Na2CO3稀釋成0.25%的工作液。二磷酸腺苷 (adenosindiphosphate, ADP)系 AMRESC0 進 口分裝，溶于生理鹽水中。試驗方法富血小板血菜(platelet rich plasma, PRP)禾口貧血小板血菜(platelet poor 1狀1^，？ 朽的制備自清醒兔頸總動脈取血，以3.8%枸櫞酸鈉9 l(v ν)抗凝收集于 塑料離心管中，900rpm離心8min，取上層液即為PRP，剩余血液再以3000rpm離心5min，取 上層液即為PPP，PRP中的血小板數(shù)控制在約5 X IO11ceIVLt5按Born氏比濁法原理，采用LBY-NJ2型血小板多道凝集儀(北京普利生公司產(chǎn) 品)進行。溶媒或藥物與PRP孵育IOmin后，加入誘導(dǎo)劑(PAF 4. 5nmol/L, AA 100 μ mol/ L,ADP:5ymol/L)誘導(dǎo)聚集，測試5min并記錄最大聚集百分率，以[(對照管聚集％—樣品 管聚集％ )/對照管聚集％ ] X 100計算血小板聚集抑制率。結(jié)果結(jié)果表明供試樣品MPA-3體外對AA誘導(dǎo)的兔血小板聚集有明顯抑制作用，終濃 度 10 μ g/ml 時，抑制率達 99. 94士0. 12%，其 IC50 為 2. 15士0. 99μ g/ml。與抗AA誘導(dǎo)的血小板聚集作用類似，MPA-3對ADP和PAF誘導(dǎo)的血小板聚集也 有明顯抑制作用，但對PAF誘導(dǎo)聚集的抑制作用較強，終濃度10yg/ml時，抑制率均達 100. 00士0. 00%,M IC50 分別為 2. 17士0. 67 和 1. 22士0. 31 μ g/ml。表IMPA體外對AA、ADP和PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集的影響(χ士 s，η = 4) **P < 0. 01，與對照相比(t-test)O結(jié)論所送樣品MPA-3體外對AA、ADP和PAF和誘導(dǎo)的兔血小板聚集都有明顯的抑制 作用，并呈濃度_效應(yīng)相關(guān)性，對PAF誘導(dǎo)聚集的抑制作用較強，IC5tl分別為2. 15士0. 99、 2. 17 士 0.67和1. 22 士 0. 31μ g/ml。提示MPA抗血小板聚集作用譜廣。實驗二 MPA對離體血管及回腸平滑肌活性的影響一、材料和方法1、動物日本大耳白兔，體重2.0 士 0.2kg，雄性。雜種狗，體重10. 0-12. 0kg，雌雄兼用。豚 鼠，體重300-400g，雌雄兼用。2、供試品實施例5所得提取物(MPA-4)。取IOmg MPA-3加20 %聚乙二醇-4000. 5ml加 熱溶解后加生理鹽水至10ml，則原液濃度為lmg/ml。取原液2ml稀釋至IOml得濃度為 2X IO-Wml液，取此液Iml稀釋至IOml得2X 10_2mg/ml。以此類推得經(jīng)稀釋后分別得 2 X 1(Γ3，2 X 1(Γ4，2 X 1(Γ5，2 X l(T6mg/ml。3、試劑去甲腎上腺素注射液，天津市和平制藥廠，規(guī)格2mg/ml，取含量為2mg/ml的去甲 腎上腺素注射液Iml稀釋至10ml，則稀釋后的濃度為0. 2mg/ml。五羥色胺，瑞士進口分裝， 批號65-92-28，取五羥色胺8. 5mg配至10ml，再稀釋10倍，則五羥色胺的濃度為0. 85mg/ ml。組胺，中科院上海生化所東風(fēng)生化技術(shù)公司，批號1703，取組胺15mg配至10ml，再稀釋 10倍，則組胺的濃度為0. 15mg/ml。4、營養(yǎng)液配方1)血管營養(yǎng)液配方1000ml g/L(mM)Nacl 7. 5 (128) CaCl2 (單獨稀釋 100 倍)0. 24Kcl0.35(4.7) NaHCO31.0Mgcl2 0. 025(0. 4) Glucose1.0
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NaH2PO4 0. 1 (0. 8) 通 O2 兩次共 Ihb)回腸平滑肌營養(yǎng)液配方1000ml g/L(mM)Nacl 7. 5 (128) CaCl2 (單獨稀釋 100 倍)0. 18Kcl 0.35(4.7) NaHCO31.5Mgcl2 0.05(0.6) Glucose1.0NaH2PO4 0. 1 (0. 8)通 O2 兩次共 Ih5、儀器Shimadzu平衡自動記錄儀型號3771SSY型離體器官恒溫浴槽型號253張力傳感器6、方法1)離體血管取兔子降主動脈、門靜脈及狗頸動脈，分離周圍脂肪，將其置于盛有營養(yǎng)液的培養(yǎng) 皿中，剪取4mm血管環(huán)，用一對不銹鋼絲懸掛并置于離體器官恒溫浴槽內(nèi)，通02，2g負荷，平 衡Ih后在盛兔主動脈、門靜脈及盛狗頸動脈的裝置中分別加入激動劑0. Iml去甲腎上腺素 注射液及0. Iml五羥色胺，繪制去甲腎上腺素對照曲線及五羥色胺對照曲線，沖洗三次。分別加入0. Iml去甲腎上腺素注射液及五羥色胺在兔主動脈、門靜脈及狗頸動脈 中，當(dāng)其升高到最高點時，走紙，順序加入D. C. B. A液，求EC50。加1500ml藥原液，走紙約lOmin，再加去甲腎上腺素注射液及五羥色胺0. 1ml，走 紙lOmin，沖洗。2)離體平滑肌與離體血管方法相似，取豚鼠回腸將其內(nèi)容物沖洗干凈，剪取2cm回腸段兩端穿 線，置于離體器官恒溫水浴槽內(nèi)(37°C 士0.5°C)，連接于張力換能器和自動平衡記錄儀，通 02、lg負荷，平衡0.5h，用激動劑組胺(lug/ml)產(chǎn)生收縮反應(yīng)。作用至少lOmin，然后用營 養(yǎng)液沖洗2-3遍，平衡15min后采用單次劑量法依次加入MPA的系列濃度D. C. B. A.觀察該 藥對肌條收縮反應(yīng)的影響，求抑制率。二、實驗結(jié)果1、藥物對兔離體主動脈、門靜脈的影響該藥物對去甲腎上腺素抑制作用較強，兔主動脈IX 10_7g/L，門靜脈僅lX10_9g/ 1就能抑制去甲腎上腺素的收縮。而且藥物劑量加大，抑制作用隨之增強(見表一)，兔 主動脈、兔門靜脈抑制率的EC50值分別為7.74X10_6g/l.和1.44X 10VLo且效應(yīng)與 劑量呈良好的正相關(guān)。此外，若先給1500ulMPA，再給去甲腎上腺素，則可明顯觀察到藥 物對去甲腎上腺素的抑制作用，主動脈的抑制率為23. 01 士29. 88%,門靜脈的抑制率為 36. 50士 15. 66%。2、藥物對離體狗頸動脈的影響該藥能較好的抑制五羥色胺，其抑制率EC50為1. 13X10_6g/l，且效應(yīng)與劑量也呈 良好的正相關(guān)。3、藥物對豚鼠回腸的影響
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該藥物對組胺(lug/ml)有一定抑制作用，即僅當(dāng)藥物濃度為ZXli^mg/ml及l(fā)mg/ ml時有抑制作用，其抑制率分別為16. 33士28. 79%和65. 30士 12. 38%。且抑制作用隨濃度 增強而增強(見表2)。表2MPA對各激動劑誘發(fā)血管條收縮反應(yīng)的影響(X士S)

表3MPA對豚鼠回腸平滑肌收縮反應(yīng)的影響(X士S、n = 8) 三、討論一般認為去甲腎上腺素激動血管的α rR，使血管收縮，主要是使小動脈和小靜脈 收縮，給藥后由于MPA抑制了去甲腎上腺素對血管平滑肌的直接收縮效應(yīng)，使得血管舒張。五羥色胺使血管收縮是因為它引起電位敏感性鈣離子通道的開放及Ca2+內(nèi)流所 致，MPA對五羥色胺有拮抗作用，可能是因為MPA作用于受體及鈣通道所致，MPA影響五羥色 胺的分泌，拮抗了五羥色胺的作用，阻滯Ca2+內(nèi)流，能明顯舒張血管。組胺是廣泛存在于人體組織的自身活性物質(zhì)，具強烈的舒血管作用，引起血壓下 降甚至休克，興奮平滑肌，引起支氣管痙攣。一定濃度的MPA對阻胺有抑制作用，可產(chǎn)生 抗外周組胺H1-R效應(yīng)，從而使胃、腸、氣管、支氣管平滑肌收縮，又釋放血管內(nèi)皮松弛因子 (EDRF)和PGI2，使小血管擴張，通透性增加。實驗三對腫瘤細胞株生長的抑制試驗(一 )材料和儀器癌株MCF_7人乳腺癌細胞株、V937人惡性淋巴瘤細胞株、SGC-7901人胃癌細胞株。
1、受試藥物實施例4所得提取物(MPA-3)，實施例2所得提取物(MPA-17)。
陽性對照藥物5_氟尿嘧啶(5-FU)。
陰性對照含10%新生牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基。
0.4%臺盼藍溶液；
Hank，s 平衡鹽水(HBSS)。
二氧化碳培養(yǎng)箱；生物顯微鏡；超凈工作臺。
2、實驗方法
取對數(shù)生長期的腫瘤細胞，用含10%新生牛血清的RPMI1-640配成濃度為4X104個/ml的腫瘤細胞懸液，分裝于每個培養(yǎng)瓶中，接種細胞懸液4ml的第2天每瓶加入受試藥物40 μ1 (受試藥物用時溶于少量DMSO和95 %乙醇，用含5 %新生牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基分別稀釋成1，5，10 μ g/ml3個濃度，每個濃度3瓶，陰性對照組加等體積的含10%新生牛血清的RPMI1640，陽性對照組加等體積的5-氟尿嘧啶(濃度為4μ 8/1111)，繼續(xù)在371，5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，搖勻組織培養(yǎng)瓶，取懸浮液0. 2ml，加入0. 4%臺盼藍溶液0. 5ml及平衡鹽水0. 3ml，充分混合，在血球計數(shù)板上分別計數(shù)(200個以上)其中未染色的活細胞及染色的死細胞。計算出殺傷率(公式殺傷率=染色細胞/總細胞X 100% )，并通過X2 (2 X 2)統(tǒng)計法對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計。
3、實驗結(jié)果
實驗結(jié)果見表4、表5、表6。
表4MPA對MCF-7人乳腺癌細胞株的殺傷作用
表5MPA對V937人惡性淋巴瘤細胞株的殺傷作用

表6MPA對SGC-7901人胃癌細胞株的殺傷作用 4、結(jié)論不同濃度(10，5，1 μ g/ml)的MPA(MPA_3，MPA-17)對體外培養(yǎng)的MCF-7人乳腺癌 細胞株和V937人惡性淋巴瘤細胞株、SGC-7901人胃癌細胞株均有殺傷作用，并且殺傷作用 呈劑量依賴性增強(P < 0. 05)。
具體實施例方式本發(fā)明以下引用實施例進一步說明，但所引用實施例并不對本發(fā)明涵蓋范圍形成 限制。實施例1 稱取云南含笑Michelia yunnanensis根皮10kg，用10倍重量甲醇，在 常壓下，室溫冷浸提取5次，每次提取時間為24小時。提取液在絕對壓力0. 06MPa, 50°C條 件下減壓濃縮至無有機溶劑。所得干浸膏以石油醚-水(體積比4 1)，在室溫常壓下萃 取3次。合并石油醚層，在絕對壓力0. 06MPa，45°C條件下減壓濃縮至膏狀物。取所得膏狀物40g研細，過100目篩，加入過100目篩的蔗糖粉600g，乳糖1200g， 微晶纖維素150g，香蘭素10g，混合均勻，用適量的10%淀粉漿制粒，干燥，分裝為1000份， 制成顆粒劑型藥物或功能性食品。實施例2 取實施例1所得膏狀物與400目硅膠拌和后裝入層析柱，以氯仿_甲醇 系統(tǒng)(8 1)，在室溫常壓下進行洗脫。用薄層層析色譜，展開劑為石油醚-丙酮(4 1)， 以吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯為對照物質(zhì)進行流份的檢測。收集含吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯的流份， 合并，在絕對壓力0. 06MPa，60°C條件下減壓濃縮至干，即得。稱取所得物10g，用20%注射用聚乙二醇-200分散，用4%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH7 7. 5，加1 %吐溫-80，濾過，灌裝，滅菌，制成注射劑。實施例3 稱取荷花玉蘭Magnolia grandiflora葉20kg，置索氏提取器中用5倍 重量80%乙醇加熱回流提取，提取溫度70°C，提取時間為28小時，合并提取液，用2%活性 炭脫色，濾過。在絕對壓力0. 06MPa，70°C條件下減壓濃縮至無有機溶劑。所得干浸膏以二氯 甲烷-水(體積比3 1)，在室溫常壓下萃取3次。合并二氯甲烷層，在絕對壓力0.03MPa， 60。C條件下減壓濃縮至膏狀物。取該膏狀物40g研細，過100目篩，加入過100目篩的淀粉100g，乳糖20g，微晶 纖維素10g，硬脂酸鎂10g，混合均勻，用適量的10%淀粉漿制粒，壓制成1000片或充填成 1000粒膠囊，制成片劑或膠囊劑。實施例4 實施例3所得膏狀物與400目硅膠拌和后裝入層析柱，以丙酮_石油
10醚-水系統(tǒng)(8 3 1)，在室溫，0.3MPa壓力下進行洗脫。用薄層層析色譜，展開劑為石 油醚-丙酮(4 1)，以吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯為對照物質(zhì)進行流份的檢測。收集含吉馬烷型 倍半萜內(nèi)酯的流份，合并，在絕對壓力0. 06MPa，60°C條件下減壓濃縮至干，即得。稱取該提取物10g，用少量乙醇溶解后，加入10%葡萄糖水溶液中，加8%甘露醇， 1 %吐溫-80，混合均勻，無菌濾過，分裝，冷凍干燥，制成注射用粉針。實施例5 稱取玉蘭Magnolia denudate葉和莖皮混合物30kg，用7倍重量乙酸乙 酯在2MPa壓力，60°C溫度下溫浸提取3次，每次6小時。提取液在常壓、78°C下濃縮至無有 機溶劑。所得浸膏用氯仿-水系統(tǒng)(體積比2 1)，在常溫常壓下萃取3次，合并氯仿層， 在絕對壓力0. 05MPa，55°C條件下減壓濃縮至干膏狀。取該干膏100g，烘干后研細，過120目篩。900g PEG6000在油浴上加熱至約110°C， 加入藥粉，不斷攪拌使全部分散，趁熱過濾，置貯液瓶中，110°c下保溫，用管口內(nèi)、外徑分別 為9. 0mm、9. 8mm的滴管滴制，滴速60滴/min，滴入含43%煤油的液體石蠟(外層為冰水 浴)冷卻液中，冷凝成丸，以液體石蠟洗丸，至無煤油味，吸去粘附的液體石蠟，制備為滴丸 劑。實施例6 稱取壯麗含笑Michelia Iacei葉、根皮、莖皮混合物30kg，用8倍重量 丙酮，在絕對壓力0. 01MPa、55°C溫度下，溫浸提取3次，每次8小時。提取液在常壓、78°C 下濃縮至無有機溶劑。所得浸膏用石油醚-水系統(tǒng)(體積比4 1)，在常溫常壓下萃取3 次，合并石油醚層，在絕對壓力0. 05MPa、55°C條件下減壓濃縮至干膏狀。膏狀物與400目硅膠拌和后裝入層析柱，以氯仿-甲醇系統(tǒng)(9 1,8 1,7 1)， 在室溫，0. IMPa壓力下進行梯度洗脫。用薄層層析色譜，展開劑為石油醚-丙酮(4 1)， 以吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯為對照物質(zhì)進行流份的檢測。收集含吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯的流份， 合并，在絕對壓力0. 06MPa, 60°C條件下減壓濃縮至略顯渾濁，加入少量8 1氯仿-甲醇混 合溶劑，使之恢復(fù)澄清。冷卻至室溫，出現(xiàn)白色結(jié)晶，過濾，干燥即得。稱取該提取物10g，用20%注射用聚乙二醇-200分散在5%葡萄糖水溶液中，4% 氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH7 7. 5，加吐溫-80，濾過，灌裝，滅菌，制成含藥輸液劑。
1權(quán)利要求
木蘭科植物提取物在實體性惡性腫瘤和白血病的預(yù)防、治療和輔助治療中的應(yīng)用，所述的木蘭科植物提取物是由木蘭科玉蘭屬植物和含笑屬植物經(jīng)冷浸或溫浸或回流方式提取，再以液液萃取，柱層析方式純化制備而得，其中含有重量百分比為2％～95％吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯。
2.權(quán)利要求1所述提取物在制備治療和輔助治療實體性惡性腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述提取物在制備治療和輔助治療白血病的藥物中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1所述提取物在制備預(yù)防和輔助保護輻射危害的功能性食品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯的植物提取物，其制備方法和在食品、醫(yī)藥中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的木蘭科植物提取物是由木蘭科玉蘭屬植物和含笑屬植物經(jīng)冷浸或溫浸或回流方式提取，再以液液萃取，柱層析方式純化制備而得，其中含有重量百分比為2％～95％吉馬烷型倍半萜內(nèi)酯。該提取物可以制成各種口服以及注射制劑，用于血管神經(jīng)性頭痛的預(yù)防、治療和輔助治療，心腦血管疾病的預(yù)防、治療和輔助治療、實體性惡性腫瘤和白血病的預(yù)防、治療和輔助治療等。
文檔編號A23L1/30GK101919908SQ20101015917
公開日2010年12月22日 申請日期2007年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月13日
發(fā)明者韓穎 申請人:韓穎