專利名稱：保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海洋浮游病毒的分離技術(shù)領(lǐng)域，尤其指一種保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法。
背景技術(shù)：
Bergh 0等早在1989年就研究發(fā)現(xiàn)，在海洋生態(tài)系統(tǒng)中，病毒和浮游植物是其重 要的一類生物，對海洋生態(tài)系統(tǒng)具有重要的調(diào)節(jié)作用。病毒在海水表層中大量存在會造成 宿主的死亡從而導(dǎo)致海洋初級生產(chǎn)力的下降，McDaniel L等(2002)已證實(shí)藻類病毒能夠 調(diào)節(jié)水生態(tài)系統(tǒng)中的藻細(xì)胞密度。藻類病毒所特有的生態(tài)功能，暗示藻類病毒可能會成為 將來的一種新型的生物防治有害藻類水華的手段，這種可能性已被越來越多的研究者所肯 定。Bratbak G等(1993)的研究證實(shí)藻類病毒作為水生態(tài)系統(tǒng)中的重要組成部分，能夠引 起一些有害藻類細(xì)胞的裂解死亡，對有害藻華起到一定的控制作用。Nagasaki K等(1999) 的研究證實(shí)了用赤潮異彎藻病毒HaVOl作為一種微生態(tài)制劑來控制此類有害藻華的可能 性。我國在藻類病毒方面的研究報(bào)道為數(shù)不多，田波等(1998)用空斑法(Plaque FormingUnits,PFU)對小球藻病毒進(jìn)行了分離報(bào)道；趙以軍等(2002)采用小型反向超濾濃 縮(Backflushing Ultrafiltration)裝置對淡水藍(lán)藻病毒(噬藻體)首次進(jìn)行了分離報(bào) 道。相比較而言，PFU法只適用于能在固體培養(yǎng)基上生長的藻類病毒的分離，而大部分的藻 類(尤其是海洋藻類)是不能在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)的，因此就不能采用此方法進(jìn)行分離；反 向超濾濃縮法只適用于小量體積淡水水樣的濃縮處理，相對于海水大量體積樣品的濃縮處 理而言是不適宜的。目前就我國藻類病毒的研究報(bào)道來看，只有淡水藻類病毒的幾例分離 報(bào)道，海洋藻類病毒的分離報(bào)道為數(shù)甚少。因此，如果想尋求用海洋藻類病毒來治理赤潮的 新方法，藻類病毒的分離工作顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀提供一種保持病毒活性的高 通量切向流分離海洋藻類病毒的方法。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀提供一種用于保持病 毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法中所使用的切向流膜包的清洗和保存方 法。本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為該保持病毒活性的高通量切向流 分離海洋藻類病毒的方法，其特征在于包括下述步驟1)在4 8°C的低溫和暗室條件下進(jìn)行一級過濾首先用0. 2μπι的濾芯對海水樣品進(jìn)行預(yù)過濾處理調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在90 IOOrpm之間，去除直徑大于0. 2 μ m的非病毒性顆?；蚣?xì)菌，得到預(yù)處理后的海水樣品；整 個(gè)操作在4 8°C的暗室條件下進(jìn)行；
然后用切向流膜包對預(yù)處理后的海水樣品進(jìn)行超濾濃縮處理調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速 在110 120rpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門， 調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1 2ba，回流壓P。utlet = 0. 5 lba，按原樣 濃縮樣體積比1000 500 1進(jìn)行濃縮，對預(yù)處理后的海水樣品反復(fù)進(jìn)行切向流滲透，獲 得粗濃縮病毒液；2)在無菌、4 8°C和暗室條件下進(jìn)行二級過濾首先用0. 0.5% (M/V)的小牛血清白蛋白潤濕0.22 μ m無菌針頭式過濾器， 在該過濾器中對粗濃縮病毒液進(jìn)行二級過濾，進(jìn)一步去除直徑大于0. 22 μ m的非病毒性顆 粒和一級過濾操作中可能污染的雜菌，得到純度較高的濃縮病毒液；其中小牛血清蛋白的 濃度是指將一定克數(shù)的小牛血清蛋白溶解在以毫升為單位的純凈水中得到的；3)特異性海洋藻病毒的分離用經(jīng)二級過濾的濃縮病毒液，對預(yù)先培養(yǎng)的不同種類的海洋藻細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的液 體感染，即可建立藻病毒-宿主藻的特異性系統(tǒng)，分離出與濃縮病毒液中具有特異性的海 洋藻類病毒。所述的切向流膜包在使用前最好先進(jìn)行潤濕，具體操作如下用純凈水潤濕膜包，純凈水的用量大于等于lOL/lO—1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵 的泵速在100 IlOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液 閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1 2ba、回流壓P。utlet = 0. 5 lba、滲 透壓Ppct = Oba ；循環(huán)流動(dòng)潤濕膜包，直到純凈水全部滲透流出。所述的切向流膜包在超濾濃縮后進(jìn)行清洗，清洗方法如下1)先用生理鹽水對超濾濃縮后的切向流膜包進(jìn)行等滲清洗，生理鹽水的用量大于 等于lOL/lCT1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 IlOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥 門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlrt =1 2ba，回流壓P。utlet = 0. 5 lba，滲透壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，直到生理鹽 水全部滲透流出；2)用lmol/L的NaOH溶液堿洗等滲清洗后的切向流膜包，NaOH溶液的用量大于等 于lL/liTm2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 IlOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門， 打開回流液閥門，循環(huán)流動(dòng)切向流清洗膜包，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlrt = 1 2ba，回流壓P。utlet = Oba ；清洗三次，每次清洗10 15分鐘，清洗結(jié)束后打開透過液閥 門，讓NaOH溶液全部滲透流出；3)用純凈水清洗堿洗后的切向流膜包，純凈水的用量大于等于lOL/lCT1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 IlOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然 后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1 2ba，回流壓P。utlrt =0. 5 lba，滲透壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，直到純凈水全部滲透流出。所述的切向流膜包在等滲清洗、堿洗潤濕后的短期保存方法用0. lmol/L的NaOH溶液作為貯存緩沖液潤濕切向流膜包，NaOH溶液的用量大于等于δΙνΙ Τ1!!!2膜包表面積；調(diào) 節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 IlOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開 啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1 2ba，回流壓P。utlet = 0. 5 lba，滲透壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，5 10分鐘后關(guān)閉蠕動(dòng)泵，同時(shí)關(guān)閉透過液與回流液閥門，將膜包原位保存在超濾濃縮儀器上。該方法可以保存3天左右。所述的切向流膜包在等滲清洗、堿洗潤濕后的長期保存方法用0. lmol/L的NaOH 溶液作為貯存緩沖液潤濕切向流膜包，NaOH溶液的用量大于等于δΙνΙ Τ1!!!2膜包表面積；調(diào) 節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 IlOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開 啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1 2ba，回流壓P。utlet = 0. 5 lba，滲透壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，5 10分鐘后關(guān)閉蠕動(dòng)泵，取出膜包于0. Imol/ L的NaOH溶液中保存。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了海洋浮游藻類病毒的新分離方法，即在短時(shí)間內(nèi) 大批量的處理水樣，在保持病毒活性的前提下，高通量的濃縮病毒后感染藻細(xì)胞，從而建立 特異性的藻病毒-宿主藻系統(tǒng)，更方便、快捷、更有時(shí)效性。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。首先用純凈水潤濕新的Sartocon切向流膜包，純凈水用量為lOL/lCT1!!!2膜包表面 積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在105rpm之間，此時(shí)，硅膠管內(nèi)的流速為3. 50L/min ；流速與管的內(nèi) 徑和材質(zhì)有關(guān)，管徑和材質(zhì)不同，其流速不同。首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后 慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門，使進(jìn)水壓Pinlet = 2ba、回流壓P。utlet = 0. 5ba、滲透 壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)潤濕膜包，直到純凈水全部滲透流出。1)海水樣品的預(yù)過濾首先調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在90 IOOrpm之間，將50L自然海水經(jīng)0. 2 μ m聚丙烯折 疊濾芯預(yù)過濾，去除直徑大于0. 2 μ m的非病毒性顆?；蚣?xì)菌，得到預(yù)處理后的海水樣品； 整個(gè)操作在4 8°C的暗室條件下進(jìn)行；2)在4 8°C的低溫和暗室條件下進(jìn)行一級過濾用潤濕的Sartocon切向流膜包對預(yù)處理后的50L海水樣品進(jìn)行超濾濃縮處理。具 體操作如下調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在110 120rpm之間，過濾前關(guān)閉透過液閥門，打開回流液 閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlrt = 1.5ba，回流 壓P。utlet = 0.8ba，按原樣/濃縮樣體積比800 1進(jìn)行濃縮。整個(gè)操作在4 8°C的低溫 暗室條件下進(jìn)行，經(jīng)反復(fù)的切向流滲透海水之后，可獲得40-50mL的粗濃縮病毒液。3)在無菌、4 8 °C和暗室條件下對粗濃縮病毒液進(jìn)行二級過濾首先用0. 3% (M/V)的小牛血清白蛋白潤濕0. 22 μ m Millex無菌針頭式過濾器， 然后在該過濾器中對粗濃縮病毒液進(jìn)行過濾，進(jìn)一步去除直徑大于0. 22 μ m的非病毒性顆 粒和一級過濾操作中可能污染的雜菌，得到純度相對較高的濃縮病毒液；整個(gè)操作在4 8 °C的無菌低溫暗室條件下進(jìn)行。4)特異性海洋藻病毒的分離用經(jīng)二級過濾的濃縮病毒液，對預(yù)先培養(yǎng)的不同種類的海洋藻細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的液體感染，按濃縮病毒液培養(yǎng)的海洋藻細(xì)胞液體積比1 2接種，置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀 察，每天早晚各搖勻一次，與海洋藻的培養(yǎng)條件相同；如濃縮的病毒液中含有與感染的藻細(xì) 胞具有特異性的病毒，則可建立藻病毒-宿主藻的特異性系統(tǒng)，感染后的藻細(xì)胞會被裂解， 從而使培養(yǎng)的藻細(xì)胞液呈現(xiàn)出顏色變化，結(jié)合進(jìn)一步的生態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定，即可分離得到特異性的海洋藻類病毒。為了方便切向流膜包的保存和再利用，在超濾濃縮后最好對使用過的切向流膜包 進(jìn)行沖洗，具體方法如下首先進(jìn)行等滲清洗用生理鹽水對超濾濃縮后的切向流膜包進(jìn)行等滲清洗，生理 鹽水用量為lOL/KTW膜包表面積，調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在105rpm之間；首先關(guān)閉透過液閥 門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlrt =1. 5ba,回流壓P。utlet = 0. 8ba，滲透壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，直到生理鹽水全部 滲透流出。然后進(jìn)行堿洗用lmol/L的NaOH溶液堿洗等滲清洗后的切向流膜包，NaOH溶液 的用量為lL/lCTm2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在105rpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門， 打開回流液閥門，循環(huán)流動(dòng)切向流清洗膜包，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlrt = 1. 5ba,回流壓P。utlet = Oba ；清洗三次，每次清洗12 13分鐘，清洗結(jié)束后打開透過液閥 門，讓NaOH溶液全部滲透流出；最后進(jìn)行水洗用純凈水清洗切向流膜包，純凈水的用量為lOL/lCT1!!!2膜包表面 積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在105rpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開 啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1. 5ba,回流壓P。utlet = 0. 8ba, 滲透壓Ppct = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，直到純凈水全部滲透流出。切向流膜包的短期保存法用0. Imol/LNaOH溶液作為貯存緩沖液潤濕切向流膜 包，NaOH溶液的用量為δι/ΙΟ—1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在105rpm之間；首先關(guān)閉 透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn) 水壓Pinlet = 1· 5ba,回流壓P。utlet = 0. 8ba,滲透壓Ppct = Oba,循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，7 8分 鐘后關(guān)閉蠕動(dòng)泵，同時(shí)關(guān)閉透過液與回流液閥門，將膜包原位保存在超濾濃縮儀器上，一般 可保存3天左右。切向流膜包的長期保存法用0. lmol/L的NaOH溶液作為貯存緩沖液潤濕切向流膜包，NaOH溶液的用量為δι/ΙΟ—1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在105rpm之間；首先關(guān) 閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù) 進(jìn)水壓Pinlet = 1. 5ba,回流壓P。utlet = 0. 8ba,滲透壓Ppct = Oba,循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，7 8 分鐘后關(guān)閉蠕動(dòng)泵，取出膜包于0. Imol/LNaOH溶液中保存。
權(quán)利要求
一種保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法，其特征在于包括下述步驟1)在4～8℃的低溫和暗室條件下進(jìn)行一級過濾；首先用0.2μm的濾芯對海水樣品進(jìn)行預(yù)過濾處理調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速為90～100rpm之間，去除直徑大于0.2μm的顆?；蚣?xì)菌，得到預(yù)處理后的海水樣品；整個(gè)操作在4～8℃的暗室條件下進(jìn)行；然后用切向流膜包對預(yù)處理后的海水樣品進(jìn)行超濾濃縮處理調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在110～120rpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet＝1～2ba，回流壓Poutlet＝0.5～1ba，按體積比1000∶1～500∶1濃縮，對預(yù)處理后的海水樣品反復(fù)進(jìn)行切向流滲透，獲得粗濃縮病毒液；2)在無菌、4～8℃和暗室條件下進(jìn)行二級過濾；首先用0.1％～0.5％(M/V)的小牛血清白蛋白潤濕0.22μm無菌針頭式過濾器，在該過濾器中對粗濃縮病毒液進(jìn)行過濾，進(jìn)一步去除直徑大于0.22μm的非病毒性顆粒和一級過濾操作中可能污染的雜菌，得到純度較高的濃縮病毒液；3)特異性海洋藻病毒的分離；用經(jīng)二級過濾的濃縮病毒液，對預(yù)先培養(yǎng)的不同種類的海洋藻細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的液體感染，即可建立藻病毒-宿主藻的特異性系統(tǒng)，分離出與濃縮病毒液中具有特異性的海洋藻類病毒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法，其 特征在于所述的切向流膜包在使用前先進(jìn)行潤濕，具體操作如下用純凈水潤濕膜包，純凈水的用量為大于lOL/lO—1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速 在100 llOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門， 調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinlet = 1 2ba、回流壓P。utlet = 0. 5 lba、滲透壓 Pper = Oba ；循環(huán)流動(dòng)潤濕膜包，直到純凈水全部滲透流出。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法，其 特征在于所述的切向流膜包在超濾濃縮后進(jìn)行清洗，清洗方法如下1)先用生理鹽水對超濾濃縮后的切向流膜包進(jìn)行等滲清洗，生理鹽水的用量為大于等 于lOL/KTW膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 llOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門， 打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinl6t = 1 2ba，回流壓P。utlet = 0. 5 lba，滲透壓PpCT = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，直到生理鹽水 全部滲透流出；2)用lmol/L的NaOH溶液堿洗等滲清洗后的切向流膜包，NaOH溶液的用量為大于等于 lL/lCT1!!!2膜包表面積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 llOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打 開回流液閥門，循環(huán)流動(dòng)切向流清洗膜包，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinl6t = 1 2ba,回流壓P。utlet = Oba ；清洗三次，每次清洗10 15分鐘，清洗結(jié)束后打開透過液閥門， 讓NaOH溶液全部滲透流出；3)用純凈水清洗堿洗后的切向流膜包，純凈水的用量為大于等于lOL/KrW膜包表面 積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速在100 llOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinl6t = 1 2ba，回流壓P。utl6t =0. 5 lba，滲透壓PpCT = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，直到純凈水全部滲透流出。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法， 其特征在于所述的切向流膜包在等滲清洗、堿洗潤濕后的短期保存方法為用0. lmol/L的 NaOH溶液作為貯存緩沖液潤濕切向流膜包，NaOH溶液的用量大于等于SL/IO—W膜包表面 積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速約在100 llOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然 后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinl6t = 1 2ba，回流壓P。utl6t =0. 5 lba，滲透壓PpCT = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，5 10分鐘后關(guān)閉蠕動(dòng)泵，同時(shí)關(guān)閉 透過液與回流液閥門，將膜包原位保存在超濾濃縮儀器上。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法， 其特征在于所述的切向流膜包在等滲清洗、堿洗潤濕后的長期保存方法為用0. lmol/L的 NaOH溶液作為貯存緩沖液潤濕切向流膜包，NaOH溶液的用量大于等于SL/IO—W膜包表面 積；調(diào)節(jié)蠕動(dòng)泵的泵速約在100 llOrpm之間；首先關(guān)閉透過液閥門，打開回流液閥門，然 后慢慢開啟透過液閥門，調(diào)節(jié)回流液閥門至如下參數(shù)進(jìn)水壓Pinl6t = 1 2ba，回流壓P。utl6t =0. 5 lba，滲透壓PpCT = Oba，循環(huán)流動(dòng)沖洗膜包，5 10分鐘后關(guān)閉蠕動(dòng)泵，取出膜包 于0. lmol/L的NaOH溶液中保存。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種保持病毒活性的高通量切向流分離海洋藻類病毒的方法，其特征在于包括下述步驟1)在4～8℃的低溫和暗室條件下進(jìn)行一級過濾，去除直徑大于0.2μm的非病毒性顆粒或細(xì)菌；然后經(jīng)切向流系統(tǒng)進(jìn)行濃縮處理，可獲得粗濃縮病毒液；2)在無菌、4～8℃和暗室條件下進(jìn)行二級過濾，進(jìn)一步去除直徑大于0.22μm的非病毒性顆粒和一級過濾操作中可能污染的雜菌，得到純度較高的濃縮病毒液；3)特異性海洋藻病毒的分離。本發(fā)明可以高通量的處理大批量的海水樣品，并且保持病毒活性，對特異性的海洋浮游藻類病毒的分離而言具有操作簡單、方便、快捷等特點(diǎn)。
文檔編號C12N7/00GK101831409SQ20101016951
公開日2010年9月15日 申請日期2010年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月10日
發(fā)明者吳慶喜, 楊季芳, 程凱, 陳吉?jiǎng)?申請人:楊季芳