專利名稱：具有減重功能的飲食品組成物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明與具有減重功能的飲食品組成物有關(guān)，特別是指一種由胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus pi ant arum)及野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)組成的飲食品組成物。
背景技術(shù)：
目前市售的乳酸菌產(chǎn)品主要訴求為整腸及過敏，近年來也有部分廠商宣稱乳酸菌具有減肥效果，但并無實(shí)際具公信力研究單位的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)左證，多數(shù)以明星或民眾代言方式營(yíng)銷于社會(huì)大眾。此外，市售的乳酸菌產(chǎn)品皆有搭配其他健康食品成分，例如:山茶花、綠茶、甲殼素、蘆薈、紅曲或寡糖等天然物成分，用以加強(qiáng)訴求功能的效果，但此復(fù)合配方中的有效活性成份正如藥物的交互作用一樣，也會(huì)發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)與抑制作用，而可能導(dǎo)致產(chǎn)品效果增強(qiáng)、減弱，甚至無效的情形。再者，異常的血脂肪是造成心臟血管疾病及粥狀動(dòng)脈硬化的主因之一(Hunninghake, 2001),此外，三酸甘油酯(Triglycerides, TG)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol, HDL-c)及低密度脂蛋白膽固醇(Low densitylipoprotein cholesterol, LDL-c)的濃度與心臟血管疾病也有極大的相關(guān)性(Pekkanenet al.，1990 ；Manson et al.，1992)。臨床上血中的膽固醇濃度可作為一個(gè)很好的預(yù)測(cè)指標(biāo)，根據(jù)美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃(National Cholesterol Education Program, NCEP),定義血中總膽固醇達(dá)240mg/dl為過高，介于200至239mg/dl則謂的邊緣型高血膽固醇，低于200mg/dl則為較可接受的濃度范圍。意即膽固醇值高者罹患心臟血管相關(guān)疾病的機(jī)會(huì)將會(huì)提高，同時(shí)死亡率亦會(huì)提高。當(dāng)血液中的膽固醇降低1%時(shí)，將減少2 3%心血管疾病的發(fā)生(Manson et al., 1992)。有鑒于此，故如何提供一種可有效降低血液中的膽固醇及三酸甘油脂濃度的飲食品組成物，即為本發(fā)明的首要課題，因此本案發(fā)明人在經(jīng)過不斷地苦思及試作后，才終于有本發(fā)明的產(chǎn)生。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的，在于提供一種具有減重功能的飲食品組成物，其具有對(duì)改善血脂質(zhì)及整腸有顯著的功效。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:—種具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:它是由胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus pi ant arum)及野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)組成，該胚芽乳酸桿菌，保藏于德國(guó)DSMZ菌種保存中心，保藏地址為Inhoffenstra β e7B, 3812姐raunschweig, GERMANY，保藏日期為 2010 年 7 月 15 日，保藏編號(hào)為 DSM23780。如上所述的具有減重功能的飲食品組成物，優(yōu)選地:所述胚芽乳酸桿菌占飲食品組成物的重量比例為20 30%。如上所述的具有減重功能的飲食品組成物，優(yōu)選地:所述野生型山苦瓜萃取物占飲食品組成物的重量比例為70 80%。如上所述的具有減重功能的飲食品組成物，優(yōu)選地:所述飲食品組成物還添加有鼠李糖乳酸桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、嗜熱鏈球菌(Streptococcusthermophlius)、副干酪乳酸桿菌(Lactobacillus paracasei)及發(fā)酵乳酸桿菌(Lactobacillus fermentum),并與所述胚芽乳酸桿菌構(gòu)成復(fù)合益生菌。如上所述的具有減重功能的飲食品組成物，優(yōu)選地:所述復(fù)合益生菌占飲食品組成物的重量比例為20 30%。如上所述的具有減重功能的飲食品組成物，優(yōu)選地:所述野生型山苦瓜萃取物占飲食品組成物的重量比例為70 80%。本發(fā)明的有益效果在于:采用本發(fā)明提供的胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)與野生型苦瓜萃取物(Glycostate)的組合物進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，并評(píng)估其體重變化、脂肪細(xì)胞大小及小鼠體內(nèi)的血質(zhì)改善等試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)胚芽乳酸桿菌混合野生型苦瓜萃取粉后，對(duì)小鼠腸道的乳酸菌確實(shí)有促進(jìn)生長(zhǎng)的效果，且可改善血液中的膽固醇及三酸甘油脂濃度，瘦素(Leptin)含量也顯著性降低，脂肪組織重量及細(xì)胞大小也明顯減少，而對(duì)改善血脂質(zhì)及整腸皆有顯著的功效。


圖1為本發(fā)明動(dòng)物試驗(yàn)的體重變化圖。圖2為本發(fā)明膽固醇降解情形的分析比對(duì)圖。圖3為本發(fā)明高密度脂蛋白(HDL)與低密度脂蛋白(LDL)比值的分析比較圖。圖4為本發(fā)明瘦素(I印tin)含量的分析比較圖。圖5為本發(fā)明進(jìn)行動(dòng)物糞便乳酸菌測(cè)試的菌數(shù)分析比較圖。圖6為本發(fā)明進(jìn)行腹腔脂肪組織細(xì)胞大小的分析比較圖。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供一種具有減重功能的飲食品組成物，主要由含有胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)的復(fù)合益生菌加上野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)組成，該胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)占飲食品組成物的重量比例為20 30%,而該野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)占飲食品組成物的重量比例為70 80% ;該胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)保藏于德國(guó)DSMZ菌種保存中心，保藏地址為Inhoffenstra β e 7B, 38124Braunschweig, GERMANY,保藏日期為 2010 年 7 月 15 日，保藏編號(hào)為 DSM 23780。較佳地，該復(fù)合益生菌由胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳酸桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophlius)、副干酪乳酸桿菌(Lactobacillus paracasei)及發(fā)酵乳酸桿菌(Lactobacillus fermentum)組成，且該復(fù)合益生菌占飲食品組成物的重量比例為20 30%，而該野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)占飲食品組成物的重量比例為70 80%。以下，以實(shí)驗(yàn)例搭配實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖，進(jìn)一步說明本發(fā)明及其可達(dá)成的功效。改善血■脂質(zhì)的動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)
(I)喂食已誘導(dǎo)高膽固醇血癥的小鼠:實(shí)驗(yàn)使用的C57BL6/J品系的雄性小鼠，購自國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖及研究中心。7 8周大，隨機(jī)分組，每組6只，分別喂養(yǎng)于獨(dú)立隔離的鼠籠(IVC)，室溫維持于25°C，并定時(shí)12小時(shí)光照與黑暗；飼料及無菌逆滲透水均任由自由取食，而在一星期的適應(yīng)環(huán)境期間，所喂食的飼料均為 AIN-93標(biāo)準(zhǔn)配方(Manufactured by MP Biomedicals Inc.，F(xiàn)rance),但分組后則喂食不同成分比例的飼料，詳述如后。(2)誘發(fā)高膽固醇血癥及治療分組:飼養(yǎng)一周后實(shí)驗(yàn)喂食的飼料配方主要以AIN-76為基礎(chǔ)，其成分包括:酪蛋白、玉米淀粉、玉米油、纖維質(zhì)、礦物質(zhì)混合物、維生素混合物、蔗糖、膽固醇以及膽酸等，各組均將大豆油比例提高至15%并添加0.5%的膽固醇，以誘發(fā)高膽固醇血癥，喂食高膽固醇時(shí)間為4周，接著進(jìn)行2周的治療，即實(shí)驗(yàn)組添加乳酸菌冷凍干燥粉末或野生型苦瓜萃取原料或兩者混合于標(biāo)準(zhǔn)飼料中，再于每日固定時(shí)間管灌喂食各組的小鼠一次，小鼠以平均25g計(jì)，每只喂食劑量為15mg。所喂食的飼料皆保存于4°C冰箱，且每天更換新鮮的飼料及無菌水。分組如下:A:負(fù)對(duì)照組(Negative control group)-此組的小鼠僅喂食添加膽固醇飼料。B:藥物對(duì)照組——此組的小鼠的飼料中添加2%的考來烯胺(cholestyramine)臨床藥物于飼料中，即于每只每日喂食劑量15mg中約含有0.3mg的cholestyramine臨床藥物。C:野生型苦瓜萃取粉組一將苦瓜萃取粉添加于飼料中，濃度為40%。即于每只每日喂食劑量15mg中約含有6mg的苦瓜萃取粉。D:復(fù)合益生菌組一僅以101(lCFU/g的本發(fā)明復(fù)合益生菌的冷凍干燥粉末，使其終濃度為I X 1010CFU/g并將AIN-93標(biāo)準(zhǔn)配方的玉米淀粉作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，于每只每日喂食劑量15mg中約含有1.5mg的復(fù)合益生菌冷凍干燥粉末。E:本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)組一由本發(fā)明的復(fù)合益生菌(101(lCFU/g) +野生型苦瓜萃取粉添加于飼料中組成，本實(shí)驗(yàn)例中，在每只每日喂食劑量15mg中含有1.5mg的復(fù)合益生菌冷凍干燥粉末以及6mg的苦瓜萃取粉。較佳地，復(fù)合益生菌冷凍干燥粉末與苦瓜萃取粉兩者的重量比例為:復(fù)合益生菌冷凍干燥粉末約占20 30 %，而山苦瓜萃取粉約占70 80 %。(3)檢驗(yàn)分析項(xiàng)目:a.體重測(cè)量——每周記錄小鼠體重。b.血液分析——收集的血液以3000rpm低速離心10分鐘后，吸取上層血清后立刻冷凍于_80°C，直到進(jìn)行膽固醇及HDL、LDL分析，并計(jì)算HDL/LDL比例。分析方法以血液生化分析儀進(jìn)行，瘦素則以酶聯(lián)免疫分析試劑盒(ELISA kit)進(jìn)行分析。c.分析糞便中及腸道各部份的復(fù)合益生菌分布情形與存活菌數(shù)一于喂食2周治療期之后，收集各組每只小鼠的糞便，稱重后以適當(dāng)?shù)臒o菌PBS進(jìn)行序列稀釋，再以Rogosa agar進(jìn)行分析乳酸菌菌數(shù)。另外，將喂食復(fù)合益生菌組的小鼠，隨機(jī)選出3只以頸椎分離術(shù)，快速剪取各段消化部位，包括胃、小腸段、大腸及盲腸段。分別秤重后以重量比200倍的無菌PBS進(jìn)行組的均質(zhì)破碎，使消化菌道內(nèi)的細(xì)菌充分釋出，最后連續(xù)稀釋進(jìn)行乳酸菌計(jì)數(shù)。d.脂肪組織分析——分析方法參考Hirsch等人(1968)的方法后修飾。將腹腔脂肪組織取出以四氧化鋨(osmium tetroxide)固定,再以250 μ m的膜過濾紙進(jìn)行過濾,并以PBS沖洗以去除結(jié)締組織，然后再以25 μ m將濾液去除，并使細(xì)胞固定在濾紙上，隨機(jī)觀察100個(gè)脂肪細(xì)胞的大小并記錄。(4)生物統(tǒng)計(jì):本實(shí)施例中的每個(gè)分析項(xiàng)目皆進(jìn)行三重復(fù)試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以SPSS 10.0軟件包于計(jì)算機(jī)中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，均先經(jīng)單向變方分析(one way ANOVA, analysis of variance)檢定處理效應(yīng)是否有顯著差異，再以鄧肯氏多變域測(cè)驗(yàn)(Duncan’s multiple range test)測(cè)定各組間的差異，顯著性差異的判斷標(biāo)準(zhǔn)為P < 0.05,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以SigmaPlot 10.0軟件作圖。(5)食品原料對(duì)本發(fā)明的抑制作用試驗(yàn):利用瓊脂擴(kuò)散法(Well-agar diffusion method)進(jìn)行乳酸菌菌液的抑菌能力評(píng)估，步驟參考Lin et al.(2006)的方法。將滅菌的瓊脂_培養(yǎng)基(MRS agar, Difco公司)倒入細(xì)菌培養(yǎng)皿中，待凝固后以無菌玻璃管在培養(yǎng)皿上打出直徑7mm的孔洞，再將隔夜培養(yǎng)的本發(fā)明的復(fù)合益生菌液稀釋至約107cfu/mL，以無菌棉棒均勻涂抹于培養(yǎng)皿上，待菌液稍微干后加入100 μ L溶于水中的各種食品原料(10%)于孔洞中，切勿使菌液溢出而造成誤差。每個(gè)樣品進(jìn)行三重復(fù)，最后將培養(yǎng)盤正面放置于37°C培養(yǎng)箱，16^18小時(shí)后測(cè)量其抑菌圈直徑大小。(6)儲(chǔ)存安定性試驗(yàn):野生型苦瓜萃取粉(Glycostate)與本發(fā)明的復(fù)合益生菌粉混合后，顯示無抑制乳酸菌的現(xiàn)象，因此，將野生型苦瓜萃取粉(Glycostate) 10%與本發(fā)明的復(fù)合益生菌粉10%,再加上80%玉米淀粉等復(fù)合物，分別裝入血清瓶中并鎖緊，接著避光貯存于4°C冰箱及室溫(25±3°C)中，以及37°C的烘箱中，于第O及30天貯存期間，采樣分析乳酸菌存活菌數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(I)小鼠體重測(cè)量:每周記錄小鼠體重。結(jié)果如圖1所示，顯示藥物組及本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)組于治療2周后，體重較負(fù)對(duì)照組有顯著降低的現(xiàn)象。野生型苦瓜萃取粉組也有體重降低的現(xiàn)象，但統(tǒng)計(jì)上無顯著差異。(2)血液分析:血脂質(zhì)分析的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2及圖3所示，顯示喂食藥物組的膽固醇降解效果最佳36.2% ;其次為本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)組，達(dá)30.8%，而單純喂食復(fù)合益生菌組的小鼠的膽固醇也有顯著性降低現(xiàn)象，達(dá)26.6%。在HDL與LDL膽固醇的比值方面，發(fā)現(xiàn)喂食藥物組及本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)組的HDL/LDL比值皆有較高現(xiàn)象。瘦素也發(fā)現(xiàn)在藥物治療及乳酸菌投予組皆有明顯降低現(xiàn)象，如圖4所示。整體來看，本發(fā)明由復(fù)合益生菌+野生型苦瓜萃取粉的組合配方有較佳的降血脂效果，因此證明兩者有協(xié)同效應(yīng)。
(3)分析糞便中及腸道各部份的乳酸菌分布情形與存活菌數(shù):由下表一及圖5為分析糞便中乳酸菌的存活菌數(shù)，由結(jié)果明確可知治療2周后喂食乳酸菌的各組小鼠，其糞便中的乳酸菌菌數(shù)明顯高于無乳酸菌喂食的組別，而由圖5即可清楚看出本發(fā)明的復(fù)合益生菌具有極良好的整腸效果，分析糞便菌數(shù)可達(dá)9Log CFU/g。另外，分析小鼠的各部位消化器官，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的復(fù)合益生菌有高濃度存活于大腸及盲腸部位。表一、小鼠治療2周后小鼠的糞便乳酸菌菌數(shù)分析
權(quán)利要求
1.一種具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:它是由胚芽乳酸桿菌及野生型山苦瓜萃取物組成，該胚芽乳酸桿菌，保藏于德國(guó)DSMZ菌種保存中心，保藏地址為Inhoffenstra β e 7B, 38124Braunschweig, GERMANY,保藏日期為 2010 年 7 月 15 日，保藏編號(hào)為 DSM 23780。
2.如權(quán)利要求1所述的具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:所述胚芽乳酸桿菌占飲食品組成物的重量比例為20 30%。
3.如權(quán)利要求1所述具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:所述野生型山苦瓜萃取物占飲食品組成物的重量比例為70 80%。
4.如權(quán)利要求1所述具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:所述飲食品組成物還添加有鼠李糖乳酸桿菌、嗜熱鏈球菌、副干酪乳酸桿菌及發(fā)酵乳酸桿菌，并與所述胚芽乳酸桿菌構(gòu)成復(fù)合益生菌。
5.如權(quán)利要求4所述具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:所述復(fù)合益生菌占飲食品組成物的重量比例為20 30%。
6.如權(quán)利要求4所述具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于:所述野生型山苦瓜萃取物占飲食品組成物的重量比例為70 80%。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種具有減重功能的飲食品組成物，其特征在于它是由胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)及野生型山苦瓜萃取物(Glycostate)組成，該胚芽乳酸桿菌，保藏于德國(guó)DSMZ菌種保存中心，保藏地址為Inhoffenstraβe7B,38124Braunschweig,GERMANY，保藏日期為2010年7月15日，保藏編號(hào)為DSM 23780。采用本發(fā)明提供的組合物進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)對(duì)小鼠腸道的乳酸菌確實(shí)有促進(jìn)生長(zhǎng)的效果，且可改善血液中的膽固醇及三酸甘油脂濃度，瘦素含量也顯著性降低，脂肪組織重量及細(xì)胞大小也明顯減少，而對(duì)改善血脂質(zhì)及整腸皆有顯著的功效。
文檔編號(hào)A23L1/29GK103190609SQ20121020863
公開日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2012年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月4日
發(fā)明者黃瓊瑩 申請(qǐng)人:綠立生醫(yī)國(guó)際股份有限公司