專利名稱：一種山芪參膠囊的五次發(fā)酵制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，特別涉及一種山芪參膠囊的五次發(fā)酵制備方法。
背景技術(shù)：
山芪參膠囊為效果顯著、安全低毒、配方精簡(jiǎn)的輔助降血糖藥物，為中國(guó)國(guó)家藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市的保健食品，該產(chǎn)品已經(jīng)申請(qǐng)專利CN2011104129944，是由精選的葛根、黃芪、山藥、桑葉、丹參等5味中藥材經(jīng)過(guò)科學(xué)配比制備而成，經(jīng)功能試驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)均表明本發(fā)明產(chǎn)品具有顯著的輔助降糖效果，經(jīng)多年的臨床應(yīng)用表明，有效率達(dá)到99%以上；經(jīng)安全性試驗(yàn)表明，本發(fā)明產(chǎn)品安全低毒，符合國(guó)家規(guī)定的人體安全性標(biāo)準(zhǔn)。然而，由于中藥在人體內(nèi)需要消化分解過(guò)程，加之中藥中有較多的無(wú)治療活性的大分子物質(zhì)，對(duì)于產(chǎn)品的療效會(huì)有較大影響，因而，只有對(duì)山芪參膠囊的制備工藝的不斷改進(jìn)，才能進(jìn)一步提高該藥物的療效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種具有更高治愈率的山芪參膠囊的五次發(fā)酵制備方法，具體的技術(shù)方案為本發(fā)明的山芪參膠囊的五次發(fā)酵制備方法，保留原有山芪參膠囊所需的中藥原料組合及配比，即葛根10. 0-30. O、黃芪8. 7-25. 5、山藥5. 0-15. O、桑葉2. 5-7. 5、丹參2. 5-7. 5，經(jīng)益生菌接種，置于高溫有氧和低溫?zé)o氧條件下，五次發(fā)酵制成的發(fā)酵液，與
O.0035-0. 0105重量份的吡啶甲酸鉻混合而成，接入的菌種重量占總重量的10-15%，第五次發(fā)酵至每ml活菌數(shù)達(dá)到個(gè)IO5-IO9,所述五次發(fā)酵的條件為第一次發(fā)酵將各中藥原料單獨(dú)發(fā)酵，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基的重量份組成包括 K2HPO4 O. 5-1. 5，MgSO4 O. 5-1，NaCl I. 5-2. 5,NaHCO3 O. 1-0. 3g，起始 pH值為6. 2-7. 2，培養(yǎng)溫度25-270C，搖床轉(zhuǎn)速120-180轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間170-230小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理得第一次發(fā)酵液、待用，；第二次發(fā)酵取各個(gè)藥材原料的第一次發(fā)酵液，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，繼續(xù)單獨(dú)發(fā)酵，培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，起始pH值為6. 2-7. 2，接種量6-12%，培養(yǎng)溫度25-27°C，搖床轉(zhuǎn)速140-200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間160-200小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理，得第二次發(fā)酵液、待用；第三次發(fā)酵取各個(gè)藥材原料的第二次發(fā)酵液，混合，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，起始PH值為6. 2-7. 2 ;培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，接種量5-12%，培養(yǎng)溫度25_27°C，攪拌轉(zhuǎn)速120-160轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間120-200小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理，得第三次發(fā)酵液、待用；第四次發(fā)酵取第三次發(fā)酵液，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，起始pH值為6. 2-7. 2，接種量5-12 %，培養(yǎng)溫度25-27°C，攪拌轉(zhuǎn)速100-190轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間100-180小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理，得第四次發(fā)酵液、待用；第五次發(fā)酵取第四次發(fā)酵液，培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，起始pH值為6. 2-7. 2，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，在37°C左右發(fā)酵12小時(shí)，獲得的發(fā)酵液過(guò)濾，濃縮，干燥，即得。為了獲得更好的發(fā)酵效果，本發(fā)明的中藥原料在發(fā)酵前，可先經(jīng)二氧化碳超臨界提取后經(jīng)益生菌接種，其中萃取溫度45-60°C、解析壓力6-8Mpa、解析溫度30_40°C、萃取壓力20-35Mpa、萃取時(shí)間2-3小時(shí)。本發(fā)明的益生菌選自但不限于高溫放線菌、酵母菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌、明串珠菌、保加利亞乳桿菌、地衣芽孢桿菌、農(nóng)桿菌、青春雙歧桿菌的一種或組合，均為已被市售或其他方式公開(kāi)菌種。本發(fā)明中益生菌的較佳的重量份配比為酵母菌1-3、嗜熱鏈球菌1-3、嗜酸乳桿菌1-3、明串珠菌1-3、保加利亞乳桿菌1-3。 本發(fā)明的各次發(fā)酵中，中藥原料與培養(yǎng)基按I : 3-6混合獲得最佳效果。本發(fā)明的更優(yōu)選的中藥原料重量份配比為葛根16. 0-24. O、黃芪14. 0_21.0、山藥
8.0-12. O、桑葉4. 0-6. O、丹參4. 0-6. 0，與O. 0056-0. 0084重量份的吡啶甲酸鉻配伍使用。最佳的是按如下重量份中藥原料與280mg的吡啶甲酸鉻制成1000粒膠囊，葛根800g、黃芪 700g、山藥 400g、桑葉 200g、丹參 200g。本發(fā)明的有益效果為采用五次發(fā)酵，模擬中藥在人體內(nèi)的消化分解過(guò)程，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，在人體外建立一個(gè)“工業(yè)化腸胃系統(tǒng)”，采用人體腸道內(nèi)的多種益生菌，對(duì)中藥進(jìn)行預(yù)消化、分解和轉(zhuǎn)化，把大分子的中間物質(zhì)，分解轉(zhuǎn)化成為能夠被直接吸收的有效小分子物質(zhì)。人體試食證明，本發(fā)明方法制得的產(chǎn)品相比傳統(tǒng)山芪參膠囊藥效提高4-28倍。下面通過(guò)試驗(yàn)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明試驗(yàn)例人體試食試驗(yàn)I材料和方法I. I樣品五次發(fā)酵法山芪參膠囊(試食組服用)和傳統(tǒng)山芪參膠囊(對(duì)照組服用)均由北京陽(yáng)光一佰生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司提供。食用方法為每日2次，每次2粒。對(duì)照組數(shù)據(jù)引用專利CN2011104129944試食試驗(yàn)的“試食組”數(shù)據(jù)。I. 2受試者選擇I. 2. I納入標(biāo)準(zhǔn)征集經(jīng)飲食控制或口服降糖藥后病情穩(wěn)定、不需要更換藥物品種及劑量、只服用維持量降糖藥的成年II型糖尿病例，年齡在18-65歲，空腹血糖^ 7. 8mmol/L,或餐后 2 小時(shí)血糖> 11. lmmol/L。I. 2. 2排除標(biāo)準(zhǔn)I. 2· 2· II型糖尿病人。I. 2. 2. 2年齡在18-65歲以外者，妊娠或哺乳婦女，對(duì)受試樣品過(guò)敏者。I. 2. 2. 3有嚴(yán)重心、肝、腎等并發(fā)癥，或合并有其他嚴(yán)重原發(fā)疾病，精神病患者，月艮用糖皮質(zhì)激素或其它影響血糖藥物者。I. 2. 2. 4不合作者，無(wú)法判斷療效或資料不全者。I. 2. 2. 5近3個(gè)月內(nèi)有糖尿病酮癥、酸中毒以及感染者。I. 2. 2. 6短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對(duì)結(jié)果的判定者。
I. 3試驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組隨機(jī)分為受試組和對(duì)照組。各組采用自身對(duì)照設(shè)計(jì)，兩組間對(duì)照設(shè)計(jì)。I. 4試食方法54例受試者，在原服用的降糖藥物品種及劑量均不變的基礎(chǔ)上，力口服五次發(fā)酵山芪參膠囊，服用方法均為每日二次，每次2粒。試食者原飲食習(xí)慣不變。I. 5儀器與試劑CYSMEX-SY18001型血球計(jì)數(shù)儀，Ci8200雅培生化-免疫工作站，長(zhǎng)春迪瑞-H500全自動(dòng)尿液分析儀。結(jié)果表I試食前后空腹血糖比較(mmol/L，X土S)
權(quán)利要求
1.一種山芪參膠囊的五次發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述山芪參膠囊的活性成分包括重量份為葛根10. 0-30. O、黃芪8. 7-25. 5、山藥5. 0-15. O、桑葉2. 5-7. 5、丹參2. 5-7. 5的中藥原料經(jīng)益生菌接種，置于高溫有氧和低溫?zé)o氧條件下，五次發(fā)酵制成的發(fā)酵液，與O.0035-0. 0105重量份的吡啶甲酸鉻混合而成，接入的菌種重量占總重量的10-15%，第五次發(fā)酵至每ml活菌數(shù)達(dá)到個(gè)IO5-IO9,所述五次發(fā)酵的條件為 第一次發(fā)酵將各中藥原料單獨(dú)發(fā)酵，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基的重量份組成包括 K2HPO4 O. 5-1. 5，MgSO4 O. 5-1, NaCl I. 5-2. 5、NaHCO3 O. 1-0. 3g，起始 pH 值為6. 2-7. 2，培養(yǎng)溫度25-27°C，搖床轉(zhuǎn)速120-180轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間170-230小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理得第一次發(fā)酵液、待用，； 第二次發(fā)酵取各個(gè)藥材原料的第一次發(fā)酵液，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，繼續(xù)單獨(dú)發(fā)酵，培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，起始pH值為6. 2-7. 2，接種量6-12 %，培養(yǎng)溫度25-27°C，搖床轉(zhuǎn)速140-200轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間160-200小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理，得第二次發(fā)酵液、待用； 第三次發(fā)酵取各個(gè)藥材原料的第二次發(fā)酵液，混合，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，起始PH值為6. 2-7. 2 ;培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，接種量5-12%，培養(yǎng)溫度25_27°C，攪拌轉(zhuǎn)速120-160轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間120-200小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理，得第三次發(fā)酵液、待用； 第四次發(fā)酵取第三次發(fā)酵液，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，起始PH值為6. 2-7. 2，接種量5-12%，培養(yǎng)溫度25_27°C，攪拌轉(zhuǎn)速100-190轉(zhuǎn)/分鐘，培養(yǎng)時(shí)間100-180小時(shí)，獲得的發(fā)酵液經(jīng)滅菌、過(guò)濾和冷凍處理，得第四次發(fā)酵液、待用； 第五次發(fā)酵取第四次發(fā)酵液，培養(yǎng)基同第一次發(fā)酵，起始PH值為6. 2-7. 2，將各益生菌種分別接種于培養(yǎng)基中，在37°C左右發(fā)酵12小時(shí)，獲得的發(fā)酵液過(guò)濾，濃縮，干燥，即得。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述中藥原料經(jīng)二氧化碳超臨界提取后經(jīng)益生菌接種，其中萃取溫度40-60°C、解析壓力6-8Mpa、解析溫度30-45°C、萃取壓力20-30Mpa、萃取時(shí)間1-3小時(shí)。
3.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述益生菌為高溫放線菌、酵母菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌、明串珠菌、保加利亞乳桿菌、地衣芽孢桿菌、農(nóng)桿菌、青春雙歧桿菌的一種或組合。
4.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述益生菌的重量份配比為酵母菌1-3、嗜熱鏈球菌1-3、嗜酸乳桿菌1-3、明串珠菌1-3、保加利亞乳桿菌1-3。
5.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述中藥原料與培養(yǎng)基按I: 3-6混合。
6.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，包括如下重量份中藥原料與O.0056-0. 0084重量份的吡啶甲酸鉻葛根 16. 0-24. O 黃芪 14.0-2L0 山藥 8. 0-12. O 桑葉 4. 0-6. O 丹參 4. 0-6. O。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，由如下重量份中藥原料與280mg的吡啶甲酸鉻制成1000粒膠囊 葛根800g黃芪700g山藥400g桑葉200g丹參200g。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種山芪參膠囊的五次發(fā)酵制備方法，所述山芪參膠囊的活性成分包括重量份為葛根10.0-30.0、黃芪8.7-25.5、山藥5.0-15.0、桑葉2.5-7.5、丹參2.5-7.5的中藥原料經(jīng)益生菌接種，置于高溫有氧和低溫?zé)o氧條件下，五次發(fā)酵制成的發(fā)酵液，與0.0035-0.0105重量份的吡啶甲酸鉻混合而成。本發(fā)明采用采用人體腸道內(nèi)的多種益生菌，五次發(fā)酵，產(chǎn)品經(jīng)長(zhǎng)期臨床和實(shí)踐證明，發(fā)酵中藥相比傳統(tǒng)中藥藥效提高4-28倍。
文檔編號(hào)A23L1/29GK102805341SQ201210239470
公開(kāi)日2012年12月5日 申請(qǐng)日期2012年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月11日
發(fā)明者習(xí)文有, 吳萬(wàn)有 申請(qǐng)人:北京陽(yáng)光一佰生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司