專利名稱：一種芽孢桿菌及其菌劑和制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種芽孢桿菌及其菌劑和制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
植物寄生線蟲是植物的主要病原物之一，每年造成約1000億美元的損失。其在全世界廣泛分布，寄主范圍廣泛，它能使細菌和真菌更易于侵染植物，是誘發(fā)植物病害的重要原因之一。煙草根結(jié)線蟲是兩種嚴重危害煙草的病害，隨著煙草生產(chǎn)的發(fā)展，連作面積的增加，危害日趨嚴重，線蟲病害是許多國家煙草生產(chǎn)的主要限制因素之一，在我國各大煙區(qū)造成了嚴重危害，僅根結(jié)線蟲病在云南省的年發(fā)病面積達2 3萬公頃，病株造成煙葉減 產(chǎn)30%-50%。煙草線蟲病害的防治目前多采用化學(xué)防治、輪作及抗病品種，但效果均不太理想，且存在諸多弊端。如目前使用的化學(xué)殺線蟲劑多為劇毒或高毒、高殘留農(nóng)藥，對土壤微生物、植物、水源和大氣層帶來嚴重污染或破壞，同時線蟲抗藥性問題也日益突出，而且藥物在植物體內(nèi)殘留會間接對人類造成危害。因此急需開發(fā)對環(huán)境友好，對人畜無毒的防治線蟲病害的微生物制劑。植物寄生線蟲生防細菌的研究是利用植株上附生的拮抗細菌來防治植物病蟲害的有效途徑，也是最近幾年興起的新的研究熱點，而篩選高效和活性穩(wěn)定的拮抗菌株則是保證生物防治獲得成功的先決條件。目前主要研究的生防細菌有植物根圍促生細菌(PGPR)、穿刺巴氏桿菌 iPas teuria pene trans )、假單胞桿菌 iPseudomonas spp.)、蘇云金芽孢桿菌{Bacillus thuringiensis)0這些植物內(nèi)生細菌能夠定殖在植物組織間，生存環(huán)境穩(wěn)定，不易受到外界環(huán)境的影響，且對人畜無毒害，對環(huán)境友好，是重要的植物病害生防細菌資源。但是據(jù)可查資料，源于植物內(nèi)生的解淀粉芽孢桿菌及其制劑的制備和利用該制劑對植物根結(jié)線蟲進行防治的研究一直未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明第一目的在于提供一種芽孢桿菌，第二目的在于提供一種以所述芽孢桿菌作為活性成分的菌劑，第三目的在于提供所述以芽孢桿菌作為活性成分的菌劑制備方法，第四目的在于提供所述菌劑在制備毒殺植物根結(jié)線蟲藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明第一目的是這樣實現(xiàn)的，所述的芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌OfeciJAz1Samyloliquefaciens ) WY11,保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏日2012年10月11日，保藏編號CGMCC No. 6663。所述解淀粉芽孢桿菌屬于真細菌界，后壁菌門，桿菌綱，芽孢桿菌目，芽孢桿菌科，芽孢桿菌屬。—解淀粉芽孢桿菌WYll的獲得與鑒定(I)解淀粉芽孢桿菌WYl I的獲得與鑒定
本發(fā)明所述的解淀粉芽孢桿菌，是從煙草葉片中分離得到。煙草樣品采自云南省玉溪市研和鎮(zhèn)，采集長勢良好無病煙株旺長期葉片，洗凈后隨即稱取葉片0. 4g，在70%酒精中振蕩浸泡lmin，再用有效氯含量1%的次氯酸鈉溶液振蕩浸泡Imin后，用無菌水沖洗4次。消毒后的組織與滅菌鋼珠一并放入2ml滅菌離心管，加入600ul無菌水，用QIAGEN高通量組織研磨器研磨3min，頻率為30r/s。研磨后的母液采用梯度稀釋法稀釋后涂布平板，各單操作分別重復(fù)四次，在28°C下黑暗培養(yǎng)48h。挑取單菌落，重新于平板上劃線純化保存，其中長勢旺盛者，定名為WYll菌株。所用培養(yǎng)基配方酵母浸出汁3.0g，牛肉浸膏l(xiāng).Og，大豆蛋白胨5.0g，NaCl 5. Og,瓊脂 17. Og,蒸餾水 IOOOmL, pH :7. O。對上述分離的菌株WY11，通過生物學(xué)特性觀察，進行進一步的形態(tài)鑒定，方法如下
觀察菌落的形態(tài)、大小、凹凸度、邊緣，革蘭氏染色，生理生化特征測試具體方法參照《常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊》。該菌16S rDNA序列擴增引物采用F27/R1492，擴增產(chǎn)物委托上
海英駿生物技術(shù)有限公司進行序列測定。以上實驗結(jié)果記錄如下
A、形態(tài)特征菌體形狀為桿狀，菌體平均大小為0. 5^1. 5umXl. 6^2. 5um，革蘭氏染色為陽性。內(nèi)生芽孢，無鞭毛。B、培養(yǎng)特征在NA培養(yǎng)基上菌落呈白色，褶皺凸起，邊緣不整齊。C、生理生化特性好氧生長，葡萄糖發(fā)酵陽性，淀粉水解試驗陽性，明膠液化試驗陽性，V. P試驗陽性，接觸酶反應(yīng)陽性，甲基紅反應(yīng)陽性，硝酸鹽還原試驗陽性，檸檬酸鹽利用陽性。表I菌株WYll的生理生化特征
生化特征 |WY11菌株D一葡萄糖 ；D一甘露糖 T
淀粉水解T酪氨酸水解 ^
明膠水解_+_V-P反應(yīng)十
接觸酶T甲基紅T
硝酸還原_+_2% NaCl+
￥ 酸鹽利用 I+|5%NaCl1~
注“ + ”表示陽性反應(yīng)，表示陰性反應(yīng)。D、菌株的穩(wěn)定性該菌生長溫度范圍在12 48°C，最適宜生長溫度為28 34°C，生長pH值在6. 5 8，最適宜pH值為7。E、16S rDNA序列分析對該菌株進行16S rDNA序列測定，GenBank注冊號JQ936682. 1，WYll菌株16S rDNA序列與假單胞菌屬的菌株相似性達到99%。通過序列比對和生理生化特性將WYll菌株鑒定為解淀粉芽孢桿菌{Bacillus amyloliquefaciens\本發(fā)明所述的WYll菌株其16S rDNA序列見GenBank: JQ936682. I。(2)解淀粉芽抱桿菌 CfeciJJw1S amyloli quefaci ens ) WY11 的保藏
通過上述鑒定結(jié)果，確認菌株WYll為解淀粉芽孢桿MiBacillus的一個株系,命名為WY11,于2012年10月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱06110，地址為北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100080)，其保藏編號為CGMCC No. 6663。本發(fā)明第二目的是這樣實現(xiàn)的，以所述解淀粉芽孢桿mBacillusamyloli quefaci ens ) WYl I經(jīng)斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵并添加活性劑后制成的菌劑。
本發(fā)明第三目的是這樣實現(xiàn)的，包括斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵、液體菌劑制備、固體菌劑制備步驟，具體包括
A、斜面培養(yǎng)將解淀粉芽抱桿菌CfeciBy1Samyloli quefaci ens ) WY11接種到斜面培養(yǎng)基上，在溫度為28 30°C下培養(yǎng)48h，得斜面菌種；
B、種子培養(yǎng)將斜面菌種接種到液體培養(yǎng)基中，在溫度為28 34°C下培養(yǎng)18 24h，得液體發(fā)酵種子；
C、發(fā)酵將液體發(fā)酵種子按培養(yǎng)基體積3 5%的量接種入發(fā)酵罐，在28 34°C下培養(yǎng)36 48h，攪拌速度為120 150印111，通氣量5 10%，得到解淀粉芽孢桿菌1￥11發(fā)酵液；
D、液體菌劑制備在發(fā)酵液中添加0.16^0. 6%的活性劑充分混勻，得到目標液體菌劑； E、固體菌劑制備在目標液體菌劑中加入吸附劑吸附經(jīng)風(fēng)干至水分含量重量比小于13%得到目標固體菌劑。本發(fā)明第四目的是這樣實現(xiàn)的，所述菌劑在制備毒殺植物根結(jié)線蟲藥物中的應(yīng)用。除非另有說明外，本發(fā)明中所采用的百分數(shù)均為體積百分數(shù)。本發(fā)明所述解淀粉芽孢桿菌和以所述解淀粉芽孢桿菌為活性成分的制劑可應(yīng)用于植物根結(jié)線蟲的防治，具有以下優(yōu)點
I、本發(fā)明所述解淀粉芽孢桿菌iBacillus amyloli quefaci ens ) WYll是一種高效生防細菌，以所述解淀粉芽孢桿菌(AaciVAz1S amyloli quefaci ens ) WY11為活性成分的制劑對植物根結(jié)線蟲具有顯著的毒殺作用，其液體制劑100倍稀釋液對根結(jié)線蟲的毒殺死亡率為
100% o2、本發(fā)明所述以解淀粉芽孢桿菌amyloli quefaci ens ) WY11為活性成分的制劑的制備方法簡單易行，合理有效，成本低廉，有利于該制劑的工業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用普及。3、本發(fā)明所述的解淀粉芽孢桿菌amyloli quefaci ens ) WY11及以解淀粉芽孢桿菌iBacillus為活性成分的制劑對人畜無毒,并且具有很強的環(huán)境適應(yīng)性和環(huán)境友好性。


圖I為本發(fā)明工藝流程圖。
具體實施例方式下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步的說明，但不以任何方式對本發(fā)明加以限制，基于本發(fā)明教導(dǎo)所作的任何變換或改進，均落入本發(fā)明的保護范圍。本發(fā)明所述的芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌iBaci Ilus amyloli quefaci ens ) W Y11,保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏日2012年10月11日，保藏編號CGMCC No. 6663。所述解淀粉芽孢桿菌屬于真細菌界，后壁菌門，桿菌綱，芽孢桿菌目，芽孢桿菌科，芽孢桿菌屬。本發(fā)明所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑，是以所述解淀粉芽孢桿菌amyloli quefaci ens ) WYl I經(jīng)斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵并添加活性劑后制成的菌劑。
所述的菌劑包括固體菌劑和液體菌劑。本發(fā)明所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，包括斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵、液體菌劑制備、固體菌劑制備步驟，具體包括
A、斜面培養(yǎng)將解淀粉芽抱桿菌Uiacillusamyloli quefaci ens ) WYll接種到斜面培養(yǎng)基上，在溫度為28 30°C下培養(yǎng)48h，得斜面菌種；
B、種子培養(yǎng)將斜面菌種接種到液體培養(yǎng)基中，在溫度為28 34°C下培養(yǎng)18 24h，得液體發(fā)酵種子；
C、發(fā)酵將液體發(fā)酵種子按培養(yǎng)基體積3 5%的量接種入發(fā)酵罐，在28 34°C下培養(yǎng)36 48h，攪拌速度為120 150印111，通氣量5 10%，得到解淀粉芽孢桿菌1￥11發(fā)酵液；
D、液體菌劑制備在發(fā)酵液中添加0.16^0. 6%的活性劑充分混勻，得到目標液體菌劑；
E、固體菌劑制備在目標液體菌劑中加入吸附劑吸附經(jīng)風(fēng)干至水分含量重量比小于13%得到目標固體菌劑。所述的斜面培養(yǎng)步驟中斜面培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。所述的種子培養(yǎng)步驟中液體培養(yǎng)基為體積百分比牛肉浸膏2 4%、蛋白胨0. 4^0. 6%、氯化鈉 0. 4^0. 6%，其余為水，pH 值為 6. 5^8. O。所述的發(fā)酵步驟中培養(yǎng)基為重量體積比豆餅粉廣2%、可溶性淀粉廣2%、牛肉浸膏
0.5 0. 8%、NaCNO3O. 02 0. 04%、CaCO3O. I 0. 3%,其余為水。所述的活性劑為體積比0. 05、. 2%腐植酸鈉、0. OrO. 1%殼聚糖或0. 0. 3%幾丁質(zhì)中的一種或幾種。所述的固體菌劑制備步驟中吸附劑為硅藻土、草炭或活性炭的一種或幾種。本發(fā)明所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的應(yīng)用為所述菌劑在制備毒殺植物根結(jié)線蟲藥物中的應(yīng)用。解淀粉芽孢桿菌菌劑制備
a.斜面培養(yǎng)培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，28 30°C保溫培養(yǎng)48 h。b.搖瓶種子培養(yǎng)將解淀粉芽孢桿菌WYll斜面菌種接種到配方(體積百分比)為牛肉膏3%、蛋白胨0. 5%、氯化鈉0. 5%、其余為自來水、pH 6. 5-8. 0的搖瓶培養(yǎng)液中，在28 —34°C溫度、搖瓶轉(zhuǎn)速為150rpm的條件下培養(yǎng)18 — 24h，獲得液體發(fā)酵種子。c.液體發(fā)酵工藝將發(fā)酵種子接種到裝有液體培養(yǎng)基配方(g/L):豆餅粉10-20、可溶性淀粉10-20、牛肉浸膏5-8、NaCN03 0 . 2-0 . 4, CaCO3 1-3，發(fā)酵溫度28 34°C、接種量3 5%，發(fā)酵罐攪拌速度120 150 rpm，通氣量5 10%，發(fā)酵時間為36 48h的條件下得到解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液；上述接種量和通氣量的百分比為體積百分比。d.液體制劑制備液體發(fā)酵后，發(fā)酵液中添加0. 05-0. 2%腐植酸鈉，0. 01-0. 1%殼聚糖和0. 1-0. 3%幾丁質(zhì)而制成解淀粉芽孢桿菌WYll液體制劑。液體制劑中的腐植酸鈉可以促進植物的生長，殼聚糖和幾丁質(zhì)有利于促進植物根際微生物菌群的繁殖，提高植物本身的抗性。e.固體制劑制備上述液體制劑中添加等比例的草炭、硅藻土，然后進行風(fēng)干，至水分含量小于13% (w/w)即成解淀粉芽孢桿菌WYll固體制劑。本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌菌劑作為微生物農(nóng)藥毒殺植物根結(jié)線蟲。本發(fā)明的優(yōu)點在于1.本發(fā)明所用菌種為芽孢桿菌，芽孢耐高溫和干燥等不利環(huán)境條件，利于菌劑的加工、運輸和儲存。2.發(fā)酵周期短，制備成本低，節(jié)約能源。3.具有良好的毒殺植物根結(jié)線蟲功能，改善植物根微生態(tài)環(huán)境，促進植物生長。下面通過實施例加以說明
實施例I
——以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的制劑的制備
A、斜面培養(yǎng)將解淀粉芽孢桿菌iBaci Ilus amyloli quefaci ens ) WYll接種到瓊脂培養(yǎng)基上，在30°C下培養(yǎng)48h，獲得斜面菌種。B、種子培養(yǎng)將上述斜面菌種接入種子培養(yǎng)液中，30°C下培養(yǎng)24h，搖瓶轉(zhuǎn)速為150rpm，得到液體發(fā)酵種子。種子培養(yǎng)液成分牛肉浸膏3%，、蛋白胨0. 5%、氯化鈉0. 5%，其 余為水，pH值為7。C、液體發(fā)酵培養(yǎng)按5%的接種量，將上述液體發(fā)酵種子接種到裝有液體發(fā)酵體系的發(fā)酵罐中，在32°C下培養(yǎng)48h，攪拌速度為150rpm，通氣量8%，得到解淀粉芽孢桿菌WYll發(fā)酵液，發(fā)酵懸浮液的活菌含量為I. 3X IO9個/ml。發(fā)酵培養(yǎng)基成分豆餅粉I. 5%、可溶性淀粉 I. 5%、牛肉浸膏 0. 7%, NaCNO3O. 03%、CaCO3O. 2%，其余為水。D、制劑制備取上述解淀粉芽孢桿菌(ifeciBys amyIoIiquefaciens、WiW添說體積比0. 05、. 2%腐植酸鈉、0. OrO. 1%殼聚糖和0. ro. 3%幾丁質(zhì)充分混勻，制成液體制劑。實施例2
——以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的制劑的制備
與實施例I基本相同，不同之處在于A、斜面培養(yǎng)的溫度為28°C。B、種子培養(yǎng)的溫度為28°C，時間為18h，搖瓶轉(zhuǎn)速為120rpm。種子培養(yǎng)液pH值為6. 5。C、液體發(fā)酵培養(yǎng)按3%接種，溫度為28°C，時間為36h，攪拌速度為120rpm，通氣量5%。發(fā)酵培養(yǎng)基成分為豆餅粉1%、可溶性淀粉 1%、牛肉浸膏 0. 5%, NaCNO3O. 02%、CaCO3O. 1%。實施例3
——以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的制劑的制備
與實施例I基本相同，不同之處在于A、斜面培養(yǎng)的溫度為28°C。B、種子培養(yǎng)的溫度為34°C，時間為18h，搖瓶轉(zhuǎn)速為130rpm。種子培養(yǎng)液pH值為8。C、液體發(fā)酵培養(yǎng)按4%接種，溫度為34°C，時間為40h，攪拌速度為130rpm，通氣量10%。發(fā)酵培養(yǎng)基成分為豆餅粉2%、可溶性淀粉 2%、牛肉浸膏 0. 8%、NaCNO3O. 04%、CaCO3O. 3%。實施例4
——以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的制劑的制備
與實施例2基本相同，不同之處在于將實施例2中的液體制劑進一步混入草炭I份，風(fēng)干至含水率為12%，制成固體制劑。實施例5
——以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的制劑的制備
與實施例2基本相同，不同之處在于將實施例2中的液體制劑進一步混入硅藻土 I份，風(fēng)干至含水率為9%，制成固體制劑。實施例6
——以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的液體制劑對植物根結(jié)線蟲的毒殺實驗以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的液體制劑的制備同實施例2。根結(jié)線蟲的分離采用貝曼漏斗法進行，獲得根結(jié)線蟲的二齡幼蟲。將分離的根結(jié)線蟲添加到解淀粉芽孢桿菌液體制劑的100倍稀釋液中，以等量的水為對照，室溫放置Ih觀測線蟲存活和死亡數(shù)量，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，在對照中，根結(jié)線蟲二齡幼蟲的死亡率是
4.41%，而解淀粉芽孢桿菌液體制劑的100倍稀釋液的處理根結(jié)線蟲二齡幼蟲的死亡率達到了 100%，由此可見，以解淀粉芽孢桿菌WYll為活性成分的液體制劑對根結(jié)線蟲二齡幼蟲具有強烈的毒殺效果。表2解淀粉芽孢桿菌液體制劑對根結(jié)線蟲的毒殺效果
權(quán)利要求
1.一種芽孢桿菌，其特征在于所述的芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌OfeciJAz1Samyloliquefaciens ) WY11,保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏日2012年10月11日，保藏編號=CGMCC No. 6663 ;所述解淀粉芽孢桿菌屬于真細菌界，后壁菌門，桿菌綱，芽孢桿菌目，芽孢桿菌科，芽孢桿菌屬。
2.—種權(quán)利要求I所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑，其特征在于是以所述解淀粉芽孢桿菌iBaci Ilus amyloli quefaci ens ) WYll經(jīng)斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵并添加活性劑后制成的菌劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑，其特征在于所述的菌劑包括固 體菌劑和液體菌劑。
4.一種權(quán)利要求2所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于包括斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵、液體菌劑制備、固體菌劑制備步驟，具體包括 A、斜面培養(yǎng)將解淀粉芽抱桿菌Uiacillusamyloli quefaci ens ) WYll接種到斜面培養(yǎng)基上，在溫度為28 30°C下培養(yǎng)48h，得斜面菌種； B、種子培養(yǎng)將斜面菌種接種到液體培養(yǎng)基中，在溫度為28 34°C下培養(yǎng)18 24h，得液體發(fā)酵種子； C、發(fā)酵將液體發(fā)酵種子按培養(yǎng)基體積3 5%的量接種入發(fā)酵罐，在28 34°C下培養(yǎng)36 48h，攪拌速度為120 150印111，通氣量5 10%，得到解淀粉芽孢桿菌1￥11發(fā)酵液； D、液體菌劑制備在發(fā)酵液中添加O.16^0. 6%的活性劑充分混勻，得到目標液體菌劑； E、固體菌劑制備在目標液體菌劑中加入吸附劑吸附經(jīng)風(fēng)干至水分含量重量比小于13%得到目標固體菌劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于所述的A步驟中斜面培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于所述的B步驟中液體培養(yǎng)基為體積百分比牛肉浸膏2 4%、蛋白胨O. 4^0. 6%、氯化鈉O. 4^0. 6%，其余為水，pH值為6. 5 8. O。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于所述的C步驟中培養(yǎng)基為重量體積比豆餅粉f 2%、可溶性淀粉f 2%、牛肉浸膏O. 5^0. 8%、NaNO3O. 02 O. 04%、CaCO3 O. Γθ. 3%，其余為水。
8.根據(jù)權(quán)利要求2或4所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于所述的活性劑為體積比O. 05、. 2%腐植酸鈉、O. ΟΓΟ. 1%殼聚糖或O. Γ0. 3%幾丁質(zhì)中的一種或幾種。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于所述的E步驟中吸附劑為硅藻土、草炭或活性炭的一種或幾種。
10.一種權(quán)利要求2或3所述的芽孢桿菌為活性成分的菌劑的應(yīng)用，其特征在于所述菌劑在制備毒殺植物根結(jié)線蟲藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種芽孢桿菌，所述的芽孢桿菌為解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)WY11，保藏單位中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏日2012年10月11日，保藏編號CGMCC No.6663；所述芽孢桿菌為活性成分的菌劑，是以所述解淀粉芽孢桿菌經(jīng)斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵并添加活性劑后制成的菌劑；所述芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，包括斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)、發(fā)酵、液體菌劑制備、固體菌劑制備步驟；所述芽孢桿菌為活性成分的菌劑在制備毒殺植物根結(jié)線蟲藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述解淀粉芽孢桿菌和菌劑對植物根結(jié)線蟲均有顯著的毒殺作用，使用方便，對人畜無毒害作用，同時還能調(diào)節(jié)植物微生物生態(tài)區(qū)系，促進植物生長。
文檔編號C12N1/20GK102952768SQ201210435610
公開日2013年3月6日 申請日期2012年11月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月5日
發(fā)明者夏振遠, 汪安云, 吳玉萍, 莫笑晗, 雷麗萍 申請人:云南省煙草農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院