一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑及其制備方法
【專利摘要】一種用于水體原位凈化的包埋微生物制劑制備方法，將適用于污水處理的多種微生物菌種和酶制劑進(jìn)行復(fù)配，并在包埋載體中加入了微生物生長所需要的營養(yǎng)鹽和生長因子，使其更適于其自身微生物生長，克服了水體營養(yǎng)匱乏和污水處理效率低下的缺點(diǎn)。并在包埋載體中加入了吸附能力強(qiáng)的活性炭和比重較大的硅藻土，并在包埋載體中加入聚谷氨酸，聚谷氨酸不僅增強(qiáng)包埋顆粒的強(qiáng)度，并且聚谷氨酸降解后的谷氨酸能夠作為菌種生長的營養(yǎng)成分，使得制劑能夠較好的定殖在河道中，不易流失。使用本發(fā)明對污水處理三周后，氨氮去除率達(dá)85-90%，COD去除率達(dá)90-95%。
【專利說明】一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生態(tài)和環(huán)境工程領(lǐng)域，特別涉及一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著我國的經(jīng)濟(jì)社會的不斷發(fā)展，越來越多的生活污水和工業(yè)污水排入河流，導(dǎo)致河流的水質(zhì)下降。2009年中國環(huán)境狀況公報顯示，全國203條河流408個地表水國控監(jiān)測斷面中，I III類、IV V類和劣V類水質(zhì)的斷面比例分別為57.3%、24.3%和18.4。傳統(tǒng)的水體原位修復(fù)技術(shù)是通過向水體投加菌液或菌粉制劑，利用微生物對水體進(jìn)行凈化處理，但是存在降解菌的有效濃度低、菌體易流失、反應(yīng)啟動慢等缺點(diǎn)。
[0003]包埋固定化微生物技術(shù)因為其包裹的微生物密度高、抗沖擊能力強(qiáng)、適應(yīng)性廣等優(yōu)點(diǎn)備受關(guān)注。水體原位凈化需要的固定化顆粒不僅需要有良好的機(jī)械強(qiáng)度和傳質(zhì)性能，還需要制劑能夠很好的定殖于水體中，同時要求微生物制劑能夠很好的適應(yīng)水體環(huán)境。為此，傳統(tǒng)的包埋固定化方法需要加以改進(jìn)，才能使其更適合處理污染的水體。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了解決上述 問題，本發(fā)明提供一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，所述菌劑為污水處理微生物和酶制劑的復(fù)配，同時加入微生物生長所必須的營養(yǎng)鹽和生長因子，以確保微生物在水體中的保持較高的活性，并通過改變包埋載體的組成進(jìn)一步改善包埋固定化產(chǎn)品的強(qiáng)度、吸附性和定殖能力等。
[0005]所述包埋微生物菌劑的制備方法如下:
[0006]稱取55_70g海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中，在60~80°C下完全溶解，加入聚乙烯醇、活性炭、硅藻土和聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫后形成包埋載體。按比例加入營養(yǎng)鹽溶液、生長因子溶液以及菌酶混合溶液，攪拌混合均勻后滴加到含2%的CaCl2溶液中，滴加完畢后放入4°C冰箱繼續(xù)交聯(lián)8-12h，形成固定化小球，然后用生理鹽水洗滌2-3次，既得包埋微生物菌劑。
[0007]所述微生物菌劑組成的體積比為:包埋載體:營養(yǎng)鹽溶液:生長因子溶液:菌酶混合溶液=200-300:0-10:0-15:50-100。
[0008]所述的包埋載體中各組分的質(zhì)量比為:海藻酸鈉:活性炭:聚乙烯醇:硅藻土:聚谷氨酸=55-70:2-5:0-5:1-2:1-4。
[0009]所述營養(yǎng)鹽溶液的組成為=NaCl0.4-0.6%，(NH4)2SO40.2-0.4%，NaNO30.1-0.2%，KH2PO40.1-0.3%，不足部分純凈水補(bǔ)足。
[0010]所述生長因子溶液的制備方法為:維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品各30-50mg，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存。[0011]使用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液，用蒸餾水定容與IOmL容量瓶中，充分混勻，即為微生物生長因子溶液。
[0012]所述菌酶混合液為污水處理微生物發(fā)酵液與酶制劑的混合液，比例為v:m=100-200mL:l-5g。
[0013]所述污水處理微生物為:枯草芽孢桿菌、纖維單胞菌、不動桿菌、硝化菌、假單胞菌和地衣芽孢桿菌，菌種均是從污水中篩選出的處理污水的微生物。
[0014]所述污水處理微生物發(fā)酵液中各菌種發(fā)酵液的體積比如下:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌 :假單胞菌:地衣芽孢桿菌=1-10:1-8:2-15:1-5:1-6:1-7。
[0015]所述的污水處理微生物培養(yǎng)方法為:
[0016]種子培養(yǎng):將斜面菌種接種于種子培養(yǎng)基，于35-37°C，轉(zhuǎn)速150-200rpm培養(yǎng)1_2天。
[0017]種子培養(yǎng)基組成為:牛母膏0.5%，氯化鈉0.5%，蛋白胨1%，不足部分純凈水補(bǔ)足，PH7.2-7.4。
[0018]發(fā)酵培養(yǎng):將種子液按接種量1-2%接入發(fā)酵培養(yǎng)基接入發(fā)酵培養(yǎng)基，于35_37°C，轉(zhuǎn)速180-220rpm，恒溫培養(yǎng)1_2天得發(fā)酵液,發(fā)酵液菌液濃度0D_達(dá)到0.8-1 ;發(fā)酵培養(yǎng)基組成同種子培養(yǎng)基。
[0019]所述酶制劑為纖維素酶、中性蛋白酶、低溫淀粉酶、脂肪酶的混合物。
[0020]所述酶制劑混合的質(zhì)量比為:纖維素酶:中性蛋白酶:低溫淀粉酶:脂肪酶=1-4:1-13:1-7:1-4。
[0021]所述酶制劑的酶活力分別為:纖維素酶活力為200000u/g，中性蛋白酶活力100000u/g，低溫淀粉酶活力為100000u/g，脂肪酶活力為200000u/g。
[0022]一種優(yōu)選的水體原位凈化包埋微生物菌劑，其制備方法如下:
[0023]稱取68g的海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中，在70°C下完全溶解，然后加入2g聚乙烯醇、3g活性炭、3g硅藻土和2g聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫形成包埋載體。加入20mL營養(yǎng)鹽溶液、15mL生長因子溶液以及400mL菌酶混合溶液，攪拌混合均勻后滴加到含2%的CaCl2溶液中，滴加完畢后放入4°C冰箱繼續(xù)交聯(lián)10h，形成固定化小球，然后用生理鹽水洗滌3次既得包埋微生物菌劑。
[0024]所述營養(yǎng)鹽溶液組成為:NaC10.4%，(NH4) 2S040.2%，NaNO30.1%，KH2PO40.3%，加蒸餾水定容至500mL，調(diào)溶液pH到7.3。
[0025]所述生長因子溶液組成為:45mg維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品各45mg，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存。
[0026]臨用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液,置于IOmL容量瓶中，然后用水定容，充分混勻，即為微生物生長因子溶液。
[0027]所述菌酶混合液中混合菌液:酶制劑(v:m) =200mL: lg。
[0028]所述污水處理微生物分別經(jīng)過二級培養(yǎng)后，使發(fā)酵液的0D_達(dá)到0.9，按如下體積比混合:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌:假單胞菌:地衣芽孢桿菌=8:5:7:4:4:3ο[0029]所述酶制劑的質(zhì)量比為:纖維素酶:蛋白酶:淀粉酶:脂肪酶=2:7:3:1。
[0030]所述酶制劑的酶活力分別為:纖維素酶活力為200000u/g，中性蛋白酶活力100000u/g，低溫淀粉酶活力為100000u/g，脂肪酶活力為200000u/g。
[0031]有益效果::
[0032]1、本發(fā)明將多種污水處理微生物和酶制劑進(jìn)行復(fù)配，污水處理效果優(yōu)于單一菌種。
[0033]2、發(fā)明中在包埋載體中加入了微生物生長所需要的營養(yǎng)鹽和生長因子，使其更適于其自身微生物生長，克服了水體營養(yǎng)匱乏和污水處理效率低下的缺點(diǎn)。
[0034]3、在包埋載體中加入了活性炭和比重較大的硅藻土在增加包埋機(jī)的吸附能力的同時使其能夠很好定殖在水中；另外高分子的聚谷氨酸的加入不僅增強(qiáng)包埋顆粒的強(qiáng)度，且其降解產(chǎn)物谷氨酸能夠作為菌種生長的營養(yǎng)成分，使得制劑能夠較好的定殖在河道中，使得制劑不易流失。
[0035]4、本發(fā)明中所采用的包埋載體均為生物可降解材料，不會給環(huán)境帶來二次污染，是一種綠色的水體原位凈化制劑。通過微生物降解和酶制劑的分解，不僅可以降低水體中有機(jī)物質(zhì)的含量，而且可以降解河道中的淤泥，凈化污染水體，進(jìn)而凈化污染水域環(huán)境。
[0036]5、而且本發(fā)明操作簡單方便，可適用各類污染水體，適用面廣，是一種高效、清潔、無污染、安全、環(huán)保的水環(huán)境凈化劑，效果優(yōu)于常規(guī)污水處理菌劑。
【具體實(shí)施方式】
[0037]下面通過具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對這些實(shí)施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0038]實(shí)施例1
[0039]( I)微生物營養(yǎng)鹽溶液配制
[0040]分別稱取質(zhì)量比為NaCl0.4%，(NH4)2SO40.2%，NaNO30.1%，KH2PO40.3% 的樣品，加入蒸餾水定容至500mL，調(diào)溶液pH到7.4。
[0041](2)微生物生長因子溶液配制
[0042]分別準(zhǔn)確稱取50mg維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存。
[0043]使用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液，蒸餾水定容于IOmL容量瓶中，充分混勻，即為微生物生長因子溶液。。
[0044](3)污水處理的微生物菌液的制備和酶制劑的加入
[0045]經(jīng)過二級培養(yǎng)后的發(fā)酵液其菌液濃度0D_達(dá)到1，按如下體積比混合:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌:假單胞菌:地衣芽孢桿菌=8:5:7:2:4:6,然后按如下質(zhì)量比加入酶制劑，具體比例為混合菌液:酶制劑=200mL:lg，均勻混合。其中酶制劑是按如下質(zhì)量比均勻混合而成:纖維素酶:蛋白酶:淀粉酶:脂肪酶=2:7:4:1。[0046](4)包埋菌劑的制備[0047]稱取70g的海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中在60~80°C下完全溶解，然后加入Og聚乙烯醇、5g活性炭、2g硅藻土和Ig聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫。分別加入20mL的營養(yǎng)鹽溶液、15mL的生長因子溶液以及400mL的步驟(3)的混合溶液，攪拌混合均勻。然后滴加到含2%的CaCl2溶液中，滴加完畢后放入4°C冰箱繼續(xù)交聯(lián)IOh左右，形成固定化小球，然后用生理鹽水洗滌2次。
[0048](5)污染水體的凈化效果
[0049]河道模擬實(shí)驗:向可循環(huán)玻璃容器中加入8L的污染水體和一些砂石及水藻，通過水泵緩慢循環(huán)，模擬河水流速。向該容器中加入本發(fā)明的微生物包埋制劑4g，混合均勻，通過水泵循環(huán)模擬河水流動，三周后氨氮去除率為85%，COD去除率為90%。
[0050]實(shí)施例2
[0051 ] (I)微生物營養(yǎng)鹽溶液配制
[0052]分別稱取質(zhì)量比為NaCl0.3%，(NH4)2SO40.2%，NaNO30.2%，KH2PO40.3% 的樣品，加入蒸餾水定容至500ML，調(diào)溶液pH到7.2之間。
[0053](2)微生物生長因子溶液配制
[0054]分別準(zhǔn)確稱取40mg維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存。
[0055]臨用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液，蒸餾水定容于IOmL容量瓶中，充分混勻，即為微生物生長因子溶液。
[0056](3)污水處理的微生物菌液的制備和酶制劑的加入
[0057]經(jīng)過二級培養(yǎng)后的發(fā)酵液其菌液濃度OD6tltl達(dá)到0.8，按如下體積比混合:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌:假單胞菌:地衣芽孢桿菌=9:5:7:4:5:3,然后按如下質(zhì)量比加入酶制劑，具體比例為混合菌液:酶制劑=200mL:lg，均勻混合。其中酶制劑是按如下質(zhì)量比均勻混合而成:纖維素酶:蛋白酶:淀粉酶:脂肪酶=2:7:4:1。
[0058](4)包埋菌劑的制備
[0059]稱取65g的海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中在60~80°C下完全溶解，然后加入Ig聚乙烯醇、5g活性炭、2g硅藻土和2g聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫。分別加入20mL的營養(yǎng)鹽溶液、15mL的生長因子溶液以及400mL的步驟(3)的混合溶液，攪拌混合均勻。然后滴加到含2%的CaCl2溶液中，滴加完畢后放入4°C冰箱繼續(xù)交聯(lián)IOh左右，形成固定化小球，然后用生理鹽水洗滌3次。
[0060](5)污染水體的凈化效果
[0061]河道模擬實(shí)驗:向可循環(huán)玻璃容器中加入8L的污染水體和一些砂石及水藻，通過水泵緩慢循環(huán)，模擬河水流速。向該容器中加入本發(fā)明的微生物包埋制劑4g，混合均勻，通過水泵循環(huán)模擬河水流動，三周后氨氮去除率為88%，COD去除率為92%。
[0062]實(shí)施例3
[0063]( I)微生物營養(yǎng)鹽溶液配制
[0064]分別稱取質(zhì)量比為NaCl0.4%，(NH4)2SO40.2%，NaNO30.1%，KH2PO40.3% 的樣品，加入蒸餾水定容至500mL，調(diào)溶液pH到7.3。[0065](2)微生物生長因子溶液配制
[0066]分別準(zhǔn)確稱取45mg維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存。
[0067]臨用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液，蒸餾水定容與IOmL容量瓶中，然后充分混勻，即為微生物生長因子溶液。
[0068](3)污水處理的微生物菌液的制備和酶制劑的加入
[0069]經(jīng)過二級培養(yǎng)后的發(fā)酵液OD6tltl達(dá)到0.9，按如下體積比混合:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌:假單胞菌:地衣芽孢桿菌=8:5:7:4:4:3,然后按如下質(zhì)量比加入酶制劑，具體比例為混合菌液:酶制劑=200mL:lg，均勻混合。其中酶制劑是按如下質(zhì)量比均勻混合而成:纖維素酶:蛋白酶:淀粉酶:脂肪酶=2:7:3:1。
[0070](4)包埋菌劑的制備
[0071]稱取68g的海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中在70°C下完全溶解，然后加入2g聚乙烯醇、3g活性炭、3g硅藻土和2g聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫。分別加入20mL的營養(yǎng)鹽溶液、15mL的生長因子溶液以及400mL的步驟(`3)的混合溶液，攪拌混合均勻。然后滴加到含2%的CaCl2溶液中，滴加完畢后放入4°C冰箱繼續(xù)交聯(lián)10h，形成固定化小球，然后用生理鹽水洗滌3次。
[0072](5)污染水體的凈化效果
[0073]河道模擬實(shí)驗:向可循環(huán)玻璃容器中加入8L的污染水體和一些砂石及水藻，通過水泵緩慢循環(huán)，模擬河水流速。向該容器中加入本發(fā)明的微生物包埋制劑4g，混合均勻，通過水泵循環(huán)模擬河水流動，三周后氨氮去除率為90%，COD去除率為95%。
[0074]實(shí)施例4:污水凈化效果對比試驗
[0075]河道模擬實(shí)驗:向可循環(huán)玻璃容器中加入8L的污染水體和一些砂石及水藻，通過水泵緩慢循環(huán)，模擬河水流速。向容器中分別加入不同的微生物包埋制劑4g，混合均勻，通過水泵循環(huán)模擬河水流動，三周后測定不同微生物包埋制劑的氨氮去除率和COD去除率，結(jié)果如表1。
[0076]本實(shí)驗所使用的4中微生物包埋制劑，以本發(fā)明實(shí)施例3中的微生物包埋劑為實(shí)驗組，以實(shí)施例3中的微生物包埋劑不同的成分進(jìn)行刪減所得的菌劑為對照組。
[0077]表1
[0078]
【權(quán)利要求】
1.一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述包埋微生物菌劑各組分的體積比為:包埋載體:營養(yǎng)鹽溶液:生長因子溶液:菌酶混合溶液=200-300:0-10:0-15:50-100。
2.如權(quán)利要求1所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述包埋載體由海藻酸鈉、活性炭、聚乙烯醇、硅藻土和聚谷氨酸組成，其質(zhì)量比為55-70:2-5:0-5:1-2:1-4 ;制備方法如下:稱取55_70g海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中，在60~80°C下完全溶解，按比例加入聚乙烯醇、活性炭、硅藻土和聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫后形成包埋載體。
3.如權(quán)利要求1所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述酶菌混合液為污水處理微生物發(fā)酵混合液與酶制劑的混合液，二者的比例為v:m=100-200mL:l-5g。
4.如權(quán)利要求3所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述污水處理微生物發(fā)酵混合液為枯草芽孢桿菌、纖維單胞菌、不動桿菌、硝化菌、假單胞菌和地衣芽孢桿菌發(fā)酵液的混合，其混合體積比為:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌:假單胞菌:地衣芽孢桿菌=1-10:1-8:2-15:1-5:1-6:1-7。
5.如權(quán)利要求3所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述微生物發(fā)酵液的制備方法為: 種子培養(yǎng):將斜面菌種接種于種子培養(yǎng)基，于35-37°C，轉(zhuǎn)速150-200rpm培養(yǎng)1_2天； 種子培養(yǎng)基組成為:牛母膏0.5%，氯化鈉0.5%，蛋白胨1%，不足部分純凈水補(bǔ)足，PH7.2-7.4 ； 發(fā)酵培養(yǎng):將種子液按接種量1-2%接入發(fā)酵培養(yǎng)基，于35-37°C，轉(zhuǎn)速180-220rpm，恒溫培養(yǎng)1-2天,發(fā)酵液菌液濃度OD_達(dá)到0.8-1 ;發(fā)酵培養(yǎng)基組成同種子培養(yǎng)基。
6.如權(quán)利要求3所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述酶制劑為纖維素酶、中性蛋白酶、低溫淀粉酶、脂肪酶的混合物，質(zhì)量比為:纖維素酶:中性蛋白酶:低溫淀粉酶:脂肪酶=1-4:1-13:1-7:1-4。
7.如權(quán)利要求1所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述營養(yǎng)鹽溶液的組成為:NaC10.4-0.6%, (NH4)2SO40.2-0.4%, NaNO30.1-0.2%, KH2PO40.1-0.3%,不足部分純凈水補(bǔ)足。
8.如權(quán)利要求1所述的一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑，其特征在于，所述生長因子溶液的制備方法為:取維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品各30-50mg，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存；使用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液，用蒸餾水定容于IOmL容量瓶中，充分混勻，即為微生物生長因子溶液。
9.一種用于水體原位凈化的包埋微生物菌劑的制備方法，其特征在于，具體步驟如下: 稱取55-70g海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中，在60~80°C下完全溶解，按比例加入聚乙烯醇、活性炭、硅藻土和聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫后形成包埋載體。按比例加入營養(yǎng)鹽溶液、生長因子溶液以及菌酶混合溶液，攪拌混合均勻后滴加到含2%的CaCl2溶液中，滴加完畢后放入4°C冰箱繼續(xù)交聯(lián)8-12h，形成固定化小球，然后用生理鹽水洗滌2-3次，既得包埋微生物菌劑； 所述包埋微生物菌劑各組分的體積比為:包埋載體:營養(yǎng)鹽溶液:生長因子溶液:菌酶混合溶液=200-300:0-10:0-15:50-100 ； 所述包埋載體由海藻酸鈉、活性炭、聚乙烯醇、硅藻土和聚谷氨酸組成，其質(zhì)量比為55-70:2-5:0-5:1-2:1-4 ;制備方法如下:稱取55_70g海藻酸鈉加入1000mL蒸餾水中，在60~80°C下完全溶解，按比例加入聚乙烯醇、活性炭、硅藻土和聚谷氨酸混合均勻，冷卻至室溫后形成包埋載體； 所述酶菌混合液為污水處理微生物發(fā)酵混合液與酶制劑的混合液，二者的比例為v:m=100-200mL:l-5g ； 所述污水處理微生物發(fā)酵混合液為枯草芽孢桿菌、纖維單胞菌、不動桿菌、硝化菌、假單胞菌和地衣芽孢桿菌發(fā)酵液的混合，其混合體積比為:枯草芽孢桿菌:纖維單胞菌:不動桿菌:硝化菌:假單胞菌:地衣芽孢桿菌=1-10: 1-8:2-15:1-5:1-6:1-7 ； 所述微生物發(fā)酵液的制備方法為: 種子培養(yǎng):將斜面菌種接種于種子培養(yǎng)基，于35-37°C，轉(zhuǎn)速150-200rpm培養(yǎng)1_2天；種子培養(yǎng)基組成為:牛母膏0.5%，氯化鈉0.5%，蛋白胨1%，不足部分純凈水補(bǔ)足，PH7.2-7.4 ； 發(fā)酵培養(yǎng):將種子液按接種量1-2%接入發(fā)酵培養(yǎng)基，于35-37°C，轉(zhuǎn)速180-220rpm，恒溫培養(yǎng)1-2天,發(fā)酵液菌液濃度OD_達(dá)到0.8-1 ;發(fā)酵培養(yǎng)基組成同種子培養(yǎng)基； 所述酶制劑為纖維素酶、中性蛋白酶、低溫淀粉酶、脂肪酶的混合物，質(zhì)量比為:纖維素酶:中性蛋白酶:低溫淀粉酶:`脂肪酶=1-4:1-13:1-7:1-4 ； 所述營養(yǎng)鹽溶液的組成為=NaCl0.4-0.6%，(NH4)2SO40.2-0.4%，NaNO30.1-0.2%，KH2PO40.1-0.3%，不足部分純凈水補(bǔ)足； 所述生長因子溶液的制備方法為:取維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素樣品各30-50mg，分別以25%乙醇溶液溶解并定容至500mL，充分混勻，即可分別得到維生素B1、維生素B6、維生素K、尼克酸和硫胺素四種溶液，將上述四種溶液置于于冰箱中4°C保存；使用時分別吸取1.0OmL上述配置的四種溶液，用蒸餾水定容于IOmL容量瓶中，充分混勻，即為微生物生長因子溶液。
10.如權(quán)利要求1所述的一種水體原位凈化的包埋微生物菌劑在污水處理中的應(yīng)用。
【文檔編號】C12N11/14GK103695412SQ201310751374
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月28日
【發(fā)明者】喬長晟, 彭巧, 王羿超, 李雪 申請人:天津北洋百川生物技術(shù)有限公司