用于對(duì)映選擇性反應(yīng)的新的氧化還原酶的制作方法
【專利摘要】本申請(qǐng)描述了用于產(chǎn)生用于對(duì)映選擇性反應(yīng)的氧化還原酶的組合物和方法。本申請(qǐng)描述了用于產(chǎn)生(R)-2-羥基酸脫氫酶的新變體的組合物和方法，該酶能夠以酶法將1-羧基-2-酮酸轉(zhuǎn)換成1-羧基-(R)-2-羥基酸，或其逆反應(yīng)。示例性的例子包括(a)(R)-2-羥基己二酸脫氫酶及其用于將2-氧代己二酸轉(zhuǎn)換成(R)-2-羥基己二酸或其逆反應(yīng)的用途；以及(b)(R)-2-羥基戊二酸脫氫酶及其用于將2-氧代戊二酸轉(zhuǎn)換成(R)-2-羥基戊二酸或其逆反應(yīng)的用途。本申請(qǐng)還描述了用于產(chǎn)生非天然微生物有機(jī)體以酶法將2-氧代己二酸轉(zhuǎn)換成(E)-2-己烯二酸或己二酸，或以酶法將2-氧代戊二酸轉(zhuǎn)換成(E)-2-戊烯二酸或戊二酸或各自逆反應(yīng)的組合物和方法。
【專利說(shuō)明】用于對(duì)映選擇性反應(yīng)的新的氧化還原酶
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)
[0002] 本申請(qǐng)是非臨時(shí)申請(qǐng)，其要求遞交于2012年2月29日的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?61/604, 630的優(yōu)先權(quán)的權(quán)益，其在此以全文引用的方式并入本發(fā)明。本申請(qǐng)與遞交于2013 年2月27日的美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?3/_，_有關(guān)。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0003] 本發(fā)明記載的是用于產(chǎn)生用于對(duì)映選擇性反應(yīng)的氧化還原酶的組合物和方法。 本發(fā)明記載的是用于產(chǎn)生新變體（R)-2_羥基酸脫氫酶的組合物和方法，該酶能夠以酶 法將1-羧基-2-酮酸（即，1-羧基-2-含氧酸， α-酮羧酸，α-含氧酸）轉(zhuǎn)換成1-羧 基-(R)-2_羥基酸（即，1-羧基-D-2-羥基酸，（R)-a-羥基羧酸），或其逆反應(yīng)。示例性 的例子包括（a) (R)-2-羥基己二酸脫氫酶及其用于將2-氧代己二酸轉(zhuǎn)換成（R)-2-羥基己 二酸或其逆反應(yīng)的用途；以及（b) (R)-2-羥基戊二酸脫氫酶及其用于將2-氧代戊二酸轉(zhuǎn)換 成（R)-2_羥基戊二酸或其逆反應(yīng)的用途。本發(fā)明還記載的是用于產(chǎn)生非天然微生物有機(jī) 體以酶法將2-氧代己二酸轉(zhuǎn)換成（E)-2-己烯二酸或己二酸，或酶法將2-氧代戊二酸轉(zhuǎn)換 成（E)-2-戊烯二酸或戊二酸或各自逆反應(yīng)的組合物和方法。

【背景技術(shù)】
[0004] 己二酸，即，1，4-正丁烷二羧酸；C00H(CH2)4C00H，是世界范圍內(nèi)最常生產(chǎn)的化學(xué) 物質(zhì)之一，每年大約合成25億千克以及80億美元的全球市場(chǎng)。己二酸最常見(jiàn)的用途是用 于室內(nèi)裝飾、汽車配件、服裝和其它產(chǎn)品的尼龍6, 6的合成。己二酸合成的標(biāo)準(zhǔn)工業(yè)方法 是昂貴的，其主要缺點(diǎn)包括消耗化石燃料、效率低下的產(chǎn)出以及溫室氣體的產(chǎn)生。為了解決 該需要，已經(jīng)證實(shí)了生產(chǎn)己二酸的"更加綠色"的方法，但是這些方法還沒(méi)有被廣泛應(yīng)用，部 分原因是因?yàn)樗鼈円蕾囉诖笠?guī)模的過(guò)氧化氫氧化，或是因?yàn)樗鼈兩婕胺巧锖铣煞磻?yīng)的非 環(huán)保的發(fā)酵反應(yīng)。Sato et al. Science 281:1646-1647(1998) ;Niu et al，Biotechnol. Prog. 18:201-211(2002)。
[0005] 已經(jīng)討論了在細(xì)菌中通過(guò)一系列重組酶合成己二酸的生物學(xué)方法。Burgard et al，美國(guó)專利號(hào) 7, 799, 545 ;Burgard et al·，美國(guó)專利申請(qǐng)
【發(fā)明者】Z·J·雷特曼, H·閻, B·D·宙一, J·H·薩普森 申請(qǐng)人:杜克大學(xué)