具有黃原膠降解活性的多肽以及編碼其的核苷酸的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及具有黃原膠降解活性的分離的多肽,涉及催化結(jié)構(gòu)域，以及編碼這些多肽和催化結(jié)構(gòu)域的多核苷酸。本發(fā)明還涉及包括這些多核苷酸的核酸構(gòu)建體、載體以及宿主細(xì)胞連同生產(chǎn)和使用這些多肽和催化結(jié)構(gòu)域的方法。
【專(zhuān)利說(shuō)明】具有黃原膠降解活性的多肽以及編碼其的核苷酸
[0001] 序列表的引用
[0002] 本申請(qǐng)包括一個(gè)計(jì)算機(jī)可讀形式的序列表，將其通過(guò)引用結(jié)合在此。
[0003] 發(fā)明背景 發(fā)明領(lǐng)域
[0004] 本發(fā)明涉及具有黃原膠降解活性，特別是黃原膠裂解酶活性的多肽并且涉及對(duì)用 黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性的GH9內(nèi)切葡聚糖酶，催化結(jié)構(gòu)域，以及編碼這些 多肽和催化結(jié)構(gòu)域的多核苷酸。本發(fā)明還涉及包括這些多核苷酸的核酸構(gòu)建體、載體以及 宿主細(xì)胞連同生產(chǎn)和使用這些多肽和催化結(jié)構(gòu)域的方法。本發(fā)明進(jìn)一步涉及包括用于在洗 滌劑以及用于在鉆探和石油工業(yè)中使用的GH9內(nèi)切葡聚糖酶和/或黃原膠裂解酶的組合 物。
[0005] 相關(guān)技術(shù)說(shuō)明
[0006] 黃原膠是一種來(lái)源于野油菜黃單胞菌的細(xì)菌包被的多糖。黃原膠通過(guò)由野油菜黃 單胞菌細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖、蔗糖或乳糖而產(chǎn)生。在一個(gè)發(fā)酵周期后，用異丙醇將該多糖從生長(zhǎng) 培養(yǎng)基中沉淀，干燥，并磨成細(xì)粉。稍后，將其添加至液體介質(zhì)中，以形成膠質(zhì)。
[0007] 黃原膠是一種由不同糖組成的天然多糖，這些不同糖通過(guò)若干不同鍵連接，例如 3 -D-甘露糖基-0 -D-1，4-葡萄糖醛酸基鍵和0 -D-葡糖基-0 -D-1，4-葡糖基鍵。黃原 膠在水中至少部分地可溶并且形成高粘稠溶液或凝膠。
[0008] 黃原膠的完全酶降解需要若干酶活性，包括黃原膠裂解酶活性和內(nèi) 切-0-1，4-葡聚糖酶活性。黃原膠裂解酶是切割黃原膠的P-D-甘露糖基4-葡 萄糖醛酸基鍵的酶并且已經(jīng)被描述于文獻(xiàn)中。黃原膠降解酶在本領(lǐng)域中是已知的，例如具 有兩種分離自溶藻弧菌類(lèi)芽孢桿菌XL-1的黃原膠裂解酶（例如，Rui jssenaars (魯基森納 斯）等人?（1999) pyruvated mannose-specific xanthan lyase involved in xanthan degradation by Paenibacillus alginolyticus XL-1 (在由溶藻弧菌類(lèi)芽抱桿菌 XL-1 降 解黃原膠中涉及的一種丙酮酸甘露糖特異性黃原膠裂解酶）'，Appl. Environ. Microbiol. (應(yīng)用與環(huán)境微生物）65(6) : 2446-2452,和Rui jssenaars (魯基森納斯）等人?（2000)，'A novel gene encoding xanthan lyase of Paenibacillus alginolyticus strain XL-1(- 種編碼溶藻弧菌類(lèi)芽孢桿菌菌株XL-1的黃原膠降解酶的新穎基因）'，Appl. Environ. Microbiol.(應(yīng)用與環(huán)境微生物）66 (9) : 3945-3950)。
[0009] 糖苷水解酶是催化糖基鍵水解以釋放更小的糖的酶。存在超過(guò)100種已經(jīng)被 分類(lèi)的糖苷水解酶，參見(jiàn)Henrissat(漢麗塞塔）等人（1991) 'A classification of glycosyl hydrolases based on amino-acid sequence similarities (基于氛基酸序 列相似性的糖基水解酶分類(lèi)）'，J. Biochem.(生物化學(xué)雜志）280:309-316和Uniprot 網(wǎng)站，WWW,cazy. orR。糖苷水解酶家族9 (GH9)由超過(guò)70種不同的酶組成，這些酶大部 分是內(nèi)切-葡聚糖酶（EC3. 2. 1.4)、纖維二糖水解酶（EC 3. 2. 1.91)、葡糖苷酶（EC 3. 2. 1. 21)和外切-0 -葡糖胺酶（EC 3. 2. 1. 165)。已經(jīng)由T. Morohoshi (莫拉浩施）等 人，（2011) J.Bacteriol.(細(xì)菌學(xué)雜志）193 (8) ,2072-2073公開(kāi)了一種來(lái)自磚紅色微桿菌 〇\^(^(*&(^61^11111七68七&〇611111)5讓8037 的6119，該6119與5￡〇10勵(lì)：12具有84.5%序列一 致性、與SEQIDNO: 10具有79. 1 %序列一致性并且與SEQIDNO: 14具有74. 0%序列一致 性。
[0010] 近年來(lái)，黃原膠已經(jīng)被用作許多消費(fèi)品中的成分，包括食品（例如在沙拉醬 (salat dressing)和乳制品中作為增桐劑）和化妝品（例如在牙骨和化妝品中作為穩(wěn)定劑 和增稠劑，以阻止成分分離）和化妝品（例如防曬霜）。另外，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了黃原膠在石油工 業(yè)中的用途，連同作為添加劑以調(diào)節(jié)鉆井液的粘度的用途等。黃原膠的廣泛使用已經(jīng)使得 希望降解黃原膠的溶液或凝膠從而允許更簡(jiǎn)單地去除副產(chǎn)品。已經(jīng)提議向洗滌劑組合物中 添加黃原膠裂解酶以便除去包含黃原膠的污物，例如在EP0896998A中，但是這一公開(kāi)物不 包含展示其任何效果的任何實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
[0011] 本發(fā)明提供了用于降解黃原膠的新的且改進(jìn)的酶以及此類(lèi)酶用于清潔目的（例 如除去黃原膠污物）以及在鉆探和石油工業(yè)中的用途。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 在一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性的分 離的GH9內(nèi)切葡聚糖酶，該分離的GH9內(nèi)切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：
[0013] (a) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:2的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0014] (b) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:10的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0015] (c) 一種多肽，該多肽與SEQIDN0:12的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0016] ⑷一種多肽，該多肽與SEQIDN0:14的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0017] (e) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:48的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0018] (f) 一種多肽，該多肽與SEQIDN0:52的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0019](g) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:56的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0020](h) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:82的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0021](i) 一種多肽，該多肽與SEQIDN0:86的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0022] (j) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:90的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0023](k) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:94的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0024](1) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:98的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0025] (m) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:102的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0026] (n) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:130的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0027] (〇) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:134的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0028] (p)-種多肽，該多肽與SEQIDN0:138的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0029] (q)-種多肽，該多肽由在中嚴(yán)謹(jǐn)度條件、中-高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、高嚴(yán)謹(jǐn)度條件或非 常高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼：
[0030] (i)SEQIDN0:1的成熟多肽編碼序列；
[0031] (ii)SEQIDN0:9的成熟多肽編碼序列；
[0032] (iii)SEQIDN0:11的成熟多肽編碼序列；
[0033] (iv)SEQIDN0:13的成熟多肽編碼序列；
[0034] (v)SEQIDN0:47的成熟多肽編碼序列；
[0035] (vi)SEQIDN0:51的成熟多肽編碼序列；
[0036] (vii)SEQIDN0:55的成熟多肽編碼序列；
[0037] (viii)SEQ ID N0:81的成熟多肽編碼序列；
[0038] (ix)SEQIDN0:85的成熟多肽編碼序列；
[0039] (x)SEQ ID N0:89的成熟多肽編碼序列；
[0040] (xi)SEQIDN0:93的成熟多肽編碼序列；
[0041] (xii)SEQ ID N0:97的成熟多肽編碼序列；
[0042] (xiii)SEQ ID N0:101的成熟多肽編碼序列；
[0043] (xiv)SEQIDN0:129的成熟多肽編碼序列；
[0044] (xv) SEQ ID N0:133的成熟多肽編碼序列；
[0045] (xvi)SEQIDN0:137的成熟多肽編碼序列；或
[0046](xvii) (i)、（ii)、（iii)、（iv)、（v)、（vi)、（vii)、（viii)、（ix)、（x)、（xi)、（xii)、 (xiii)、（xiv)、（xv)、或（xvi)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體；
[0047] (r) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 1的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0048] (s) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:9的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0049] (t) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:11的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0050](u) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:13的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0051](V)-種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:47的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0052](w) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:51的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0053](x) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:55的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0054](y) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:81的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0055](z) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:85的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0056](aa) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:89的成熟 多肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0057](ab) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:93的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0058](ac) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:97的成熟 多肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0059] (ad) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:101的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0060] (ae) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:129的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；[0061] (af) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:133的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0062] (ag) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:137的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0063] (ah)SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:14, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52,SEQ ID NO:56,SEQ ID NO:82,SEQ ID NO:86,SEQ ID NO:90,SEQ ID NO:94, SEQ ID N0:98、SEQ ID NO: 102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134 或 SEQ ID NO: 138 的成熟 多肽的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)位置（例如若干個(gè)）處包括取代、缺失、和/或插入； 以及
[0064] (ai) (a)、（b)、（c)、（d)、（e)、（f)、（g)、（h)、（i)、（j)、（k)、（1)、（m)、（n)、（〇)、（p)、 (q)、（r)、（s)、（t)、（u)、（v)、（w)、（x)、（y)、（z)、（aa)、（ab)、（ac)、（ad)、（ae)、（af)、（ag) 或（ah)的多肽的一個(gè)片段，該片段對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性、具有黃原 膠降解活性和/或內(nèi)切_0 -1，4-葡聚糖酶活性。
[0065] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種具有黃原膠裂解酶活性的分離的多肽，該多肽 選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：
[0066] (a) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:4的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0067] (b) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:46的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0068] (c) 一種多肽，該多肽與SEQIDN0:60的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0069] (d) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:64的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、 至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0070] (e) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:106的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0071] (f) 一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:110的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0072] (g) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:114的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0073] (h) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:118的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0074] ⑴一種多肽，該多肽與SEQIDN0:122的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0075] (j) -種多肽，該多肽與SEQIDN0:126的成熟多肽具有至少80%，例如至少 81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少 89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少 97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0076] (k)-種多肽，該多肽由在中嚴(yán)謹(jǐn)度條件、中-高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、高嚴(yán)謹(jǐn)度條件或非 常高嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼：
[0077] (i)SEQIDN0:3的成熟多肽編碼序列；
[0078] (ii)SEQIDN0:45的成熟多肽編碼序列；
[0079] (iii)SEQIDN0:59的成熟多肽編碼序列；
[0080] (iv)SEQIDN0:63的成熟多肽編碼序列；
[0081] (v)SEQ ID N0:105的成熟多肽編碼序列；
[0082] (vi)SEQIDN0:109的成熟多肽編碼序列；
[0083] (vii)SEQIDN0:113的成熟多肽編碼序列；
[0084] (viii)SEQ ID N0:117的成熟多肽編碼序列；
[0085] (ix)SEQIDN0:121的成熟多肽編碼序列；
[0086] (x)SEQIDN0:125的成熟多肽編碼序列；或
[0087](xi) (i)、（ii)、（iii)、（iv)、（v)、（vi)、（vii)、（viii)、（ix)、或（x)的全長(zhǎng)互補(bǔ) 體；
[0088] (1) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 3的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0089] (m) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:45的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0090] (n) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:59的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0091] (〇) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:63的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0092] (P)-種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:105的成熟 多肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0093] (q) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:109的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0094] (r) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:113的成熟 多肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0095] (s) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:117的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0096] ⑴一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:121的成熟 多肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0097] (u) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQIDN0:125的成熟 多肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、 至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至 少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性；
[0098] (v)SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:106, 5￡〇10勵(lì)：110、5￡〇10勵(lì)：114、5￡〇10勵(lì)：118、5￡〇10勵(lì)：122或5已〇10勵(lì)：126的成熟 多肽的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)位置（例如若干個(gè)）處包括取代、缺失、和/或插入； 以及
[0099](w)(a)、（b)、（c)、（d)、（e)、（f)、（g)、（h)、（i)、（j)、（k)、（1)、（m)、（n)、（o)、（p)、 (q)、（r)、（s)、（t)、（u)或（v)的多肽的一個(gè)片段，該片段具有黃原膠裂解酶活性。
[0100] 在另一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及一種組合物，該組合物包括一種根據(jù)本發(fā)明的對(duì)用 黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性的分離的GH9內(nèi)切葡聚糖酶。在一個(gè)另外的方面 中，該組合物進(jìn)一步包括一種根據(jù)本發(fā)明的具有黃原膠裂解酶活性的分離的多肽。本發(fā)明 的組合物優(yōu)選是一種洗滌劑組合物，該洗滌劑組合物包括用于降解黃原膠的一種或多種洗 滌劑組分或一種組合物。
[0101] 已經(jīng)出人意料地發(fā)現(xiàn)，包括一種黃原膠裂解酶及一種對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的 黃原膠具有活性的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的組合物在降解黃原膠方面比基于單獨(dú)的酶的活性 所預(yù)期的顯著更有效。
[0102] 本發(fā)明還涉及編碼本發(fā)明的多肽的分離的多核苷酸；核酸構(gòu)建體；重組表達(dá)載 體；包括這些多核苷酸的重組宿主細(xì)胞；以及產(chǎn)生這些多肽的方法。
[0103] 本發(fā)明進(jìn)一步涉及本發(fā)明的組合物用于降解黃原膠，用于洗滌或清潔紡織品和/ 或硬表面（例如餐具洗滌）的用途，其中該組合物具有酶洗滌益處，或用于控制鉆井液的粘 度的益處。本發(fā)明還涉及降解黃原膠的方法，其中黃原膠位于硬表面或紡織品的表面上，其 中黃原膠用于壓裂由鉆井孔造成的地下地層，或其中黃原膠是一種鉆孔濾餅中的組分。
[0104] 序列表綜述
[0105] SEQ ID NO: 1是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062047的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序 列。
[0106] SEQ ID N0:2是如從SEQ ID NO: 1推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0107] SEQ ID勵(lì):3是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬剛018054的黃原膠裂解酶的截短的0嫩序 列。
[0108] SEQ ID N0:4是如從SEQ ID N0:3推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0109] SEQ ID N0:5是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID NO: 1的重組體表達(dá)序列 的DNA序列。
[0110] SEQ ID N0:6是如從SEQ ID N0:5推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0111] SEQ ID N0:7是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:3的重組體表達(dá)序列 的DNA序列。
[0112] SEQ ID N0:8是如從SEQ ID N0:7推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0113] SEQ ID N0:9是如分離自微桿菌屬NN062149的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序列。
[0114] SEQ ID N0:10是如從SEQ ID N0:9推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0115] SEQ ID N0:11是如分離自微桿菌屬NN062148的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序列。
[0116] SEQ ID N0:12是如從SEQ ID N0:11推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0117] SEQ ID N0:13是如分離自微桿菌屬NN062045的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序列。
[0118] SEQ ID N0:14是如從SEQ ID N0:13推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0119] SEQ ID N0:15是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:9的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0120] SEQ ID N0:16是如從SEQ ID N0:15推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0121]SEQ ID NO: 17是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID NO: 11的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0122] SEQ ID NO: 18是如從SEQ ID NO: 17推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0123] SEQ ID NO: 19是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID NO: 13的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0124] SEQ ID NO:20是如從SEQ ID NO: 19推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0125] SEQ ID NO:21是引物D88F。
[0126] SEQ ID NO:22是引物D89R。
[0127] SEQ ID N0:23是引物D124F。
[0128] SEQ ID N0:24是引物D125R。
[0129] SEQ ID N0:25是引物D126F。
[0130] SEQ ID N0:26是引物D127R。
[0131] SEQ ID N0:27是引物D128F。
[0132] SEQ ID N0:28是引物D129R。
[0133] SEQ ID NO: 29是賽威蛋白酶信號(hào)肽的DNA序列。
[0134] SEQ ID NO: 30是His-標(biāo)記（也叫做聚組氨酸標(biāo)記）。
[0135] SEQ ID N0:31是引物D117F。
[0136] SEQ ID N0:32是引物D118R。
[0137]SEQ ID N0:33是引物D158F。
[0138]SEQ ID N0:34是引物D159R。
[0139]SEQ ID N0:35是引物D168F。
[0140]SEQ ID N0:36是引物D169R。
[0141]SEQ ID N0:37是引物D170F。
[0142]SEQ ID N0:38是引物D170R。
[0143]SEQ ID N0:39是引物D171F。
[0144]SEQ ID N0:40是引物D172R。
[0145]SEQ ID N0:41是引物D160F。
[0146]SEQ ID N0:42是引物D161R。
[0147]SEQ ID N0:43是引物F-C3AQX。
[0148]SEQ ID N0:44是引物R-C3AQX。
[0149]SEQ ID N0:45是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN018054的黃原膠裂解酶的全長(zhǎng)的DNA 序列。
[0150]SEQ ID NO:46是如從SEQ ID NO:45推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0151]SEQ ID N0:47是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062047的截短的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的 DNA序列。
[0152]SEQ ID NO:48是如從SEQ ID NO:47推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0153]SEQ ID NO:49是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID NO:47的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0154]SEQ ID NO:50是如從SEQ ID NO:49推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0155] SEQ ID N0:51是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062047的截短的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的 DNA序列。
[0156] SEQ ID N0:52是如從SEQ ID N0:51推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0157] SEQIDN0:53是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQIDN0:51的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0158] SEQ ID N0:54是如從SEQ ID N0:53推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0159] SEQIDN0:55是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062253的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序 列。
[0160] SEQ ID N0:56是如從SEQ ID N0:55推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0161] SEQ ID N0:57是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:55的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0162] SEQ ID N0:58是如從SEQ ID N0:57推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0163] SEQIDN0:59是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062250的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0164] SEQ ID N0:60是如從SEQ ID N0:59推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0165] SEQ ID N0:61是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:59的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0166] SEQ ID N0:62是如從SEQ ID N0:61推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0167] SEQIDN0:63是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062047的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0168] SEQ ID N0:64是如從SEQ ID N0:63推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0169] SEQ ID N0:65是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:63的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0170] SEQ ID N0:66是如從SEQ ID N0:65推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0171] SEQ ID N0:67是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:45的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0172] SEQ ID N0:68是如從SEQ ID N0:67推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0173] SEQ ID N0:69 是引物 D244F。
[0174] SEQ ID N0:70 是引物 D245R。
[0175] SEQ ID N0:71 是引物 D242F。
[0176] SEQ ID N0:72 是引物 D243R。
[0177] SEQ ID N0:73 是引物 D271F。
[0178] SEQ ID N0:74 是引物 D272R。
[0179] SEQ ID N0:75 是引物 D289F。
[0180] SEQ ID N0:76 是引物 D290R。
[0181] SEQ ID N0:77 是引物 D293F。
[0182] SEQ ID N0:78 是引物 D294R。
[0183] SEQ ID N0:79 是引物 D332F。
[0184] SEQ ID N0:80 是引物 D333R。
[0185] SEQIDN0:81是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062046的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序 列。
[0186] SEQ ID NO:82是如從SEQ ID NO:81推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0187] SEQ ID NO:83是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID NO:81的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0188] SEQ ID NO:84是如從SEQ ID NO:83推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0189] SEQ ID N0:85是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN018054的截短的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的 DNA序列。
[0190] SEQ ID NO:86是如從SEQ ID NO:85推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0191] SEQ ID N0:87是來(lái)自SEQ ID N0:85的重組體表達(dá)序列的DNA序列。
[0192] SEQ ID N0:88是如從SEQ ID N0:87推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0193] SEQ ID N0:89是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062408的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序 列。
[0194] SEQ ID N0:90是如從SEQ ID N0:89推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0195] SEQ ID N0:91是來(lái)自SEQ ID N0:89的重組體表達(dá)序列的DNA序列。
[0196] SEQ ID N0:92是如從SEQ ID N0:91推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0197] SEQ ID N0:93是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN018054的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序 列。
[0198] SEQ ID N0:94是如從SEQ ID N0:93推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0199] SEQ ID N0:95是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:93的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0200] SEQ ID N0:96是如從SEQ ID N0:95推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0201] SEQ ID N0:97是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062332的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序 列。
[0202] SEQ ID N0:98是如從SEQ ID N0:97推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0203] SEQ ID N0:99是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:97的重組體表達(dá)序 列的DNA序列。
[0204] SEQ ID N0:100是如從SEQ ID N0:99推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0205] SEQ ID N0:101是如分離自磚紅色微桿菌的GH9內(nèi)切葡聚糖酶的DNA序列。
[0206] SEQ ID N0:102是如從SEQ ID N0:101推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0207] SEQ ID N0:103是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:101的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0208] SEQ ID N0:104是如從SEQ ID N0:103推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0209] SEQIDN0:105是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062147的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0210] SEQ ID N0:106是如從SEQ ID N0:105推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0211] SEQ ID N0:107是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:105的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0212] SEQ ID N0:108是如從SEQ ID N0:107推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0213] SEQIDN0:109是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062193的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0214] SEQ ID N0:110是如從SEQ ID N0:109推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0215] SEQ ID NO: 111是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:109的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0216] SEQ ID NO: 112是如從SEQ ID NO: 111推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0217] SEQ ID NO: 113是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062408的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0218] SEQ ID N0:114是如從SEQ ID N0:113推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0219] SEQ ID N0:115是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:113的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0220] SEQ ID N0:116是如從SEQ ID N0:115推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0221] SEQ ID N0:117是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062332的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0222] SEQ ID N0:118是如從SEQ ID N0:117推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0223] SEQ ID N0:119是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:117的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0224] SEQ ID N0:120是如從SEQ ID N0:119推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0225] SEQIDN0:121是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062046的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0226] SEQ ID N0:122是如從SEQ ID N0:121推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0227] SEQ ID N0:123是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:121的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0228] SEQ ID N0:124是如從SEQ ID N0:123推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0229] SEQIDN0:125是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062253的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0230] SEQ ID N0:126是如從SEQ ID N0:125推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0231] SEQ ID N0:127是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:125的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0232] SEQ ID N0:128是如從SEQ ID N0:127推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0233] SEQIDN0:129是如分離自微桿菌屬NN062175的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0234] SEQ ID N0:130是如從SEQ ID N0:129推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0235] SEQ ID N0:131是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:129的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0236] SEQ ID N0:132是如從SEQ ID N0:131推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0237] SEQIDN0:133是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062193的黃原膠裂解酶的DNA序列。
[0238] SEQ ID N0:134是如從SEQ ID N0:133推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0239] SEQIDN0:135是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQIDN0:133的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0240] SEQ ID N0:136是如從SEQ ID N0:135推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0241] SEQIDN0:137是如分離自類(lèi)芽孢桿菌屬NN062193的截短的黃原膠裂解酶的DNA 序列。
[0242] SEQ ID N0:138是如從SEQ ID N0:137推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0243] SEQ ID N0:139是來(lái)自與His-標(biāo)記可操作地連接的SEQ ID N0:137的重組體表達(dá) 序列的DNA序列。
[0244] SEQ ID N0:140是如從SEQ ID N0:139推導(dǎo)的氨基酸序列。
[0245] SEQ ID N0:141 是引物 F-C597B。
[0246] SEQ ID NO: 142是引物R-C597B。
[0247] SEQ ID 勵(lì)：143是引物？氣5896。
[0248] SEQ ID 勵(lì)：144是引物1^：5896。
[0249] SEQ ID 勵(lì)：145是引物卩_〇59丁2。
[0250] SEQ ID NO: 146是引物R-C59T2。
[0251] SEQ ID NO: 147是引物F-C4AM9。
[0252] SEQ ID NO: 148是引物R-C4AM9。
[0253] SEQ ID勵(lì)：149是引物卩-04八肝。
[0254] SEQ ID NO: 150是引物R-C4AKF。
[0255] SEQ ID N0:151是引物F-C59TM。
[0256] SEQ ID NO: 152是引物R-C59TM。
[0257] SEQ ID 勵(lì)：153是引物？-0595丫。
[0258] SEQ ID 勵(lì)：154是引物1^：595￥。
[0259] SEQ ID勵(lì)：155是引物卩_〇3八父4。
[0260] SEQ ID NO: 156是引物R-C3AX4。
[0261] SEQ ID 勵(lì)：157是引物？-04八1(八。
[0262] SEQ ID NO: 158是引物R-C4AKA。
[0263] SEQ ID 勵(lì)：159是引物？_〇38父!'。
[0264] SEQ ID NO: 160是引物R-C3BXT。
[0265] SEQ ID N0:161是引物F-C597E。
[0266] SEQ ID NO: 162是引物R-C597E。
[0267] SEQ ID 勵(lì)：163是引物？氣597卩。
[0268] SEQ ID 勵(lì)：164是引物1^：597卩。
[0269] SEQ ID勵(lì)：165是引物卩_〇3卩〇￡。
[0270] SEQ ID NO: 166是引物R-C3FCE。
[0271] SEQ ID 勵(lì)：167是引物014疆6。
[0272] SEQ ID 勵(lì)：168是引物014疆11。
[0273] SEQ ID 勵(lì)：169是引物014吧8。
[0274] SEQ ID 勵(lì)：170是引物014吧9。
[0275]GH9內(nèi)切葡聚糖酶序列的一致性矩陣
[0276]

【權(quán)利要求】
1. 一種組合物，該組合物包括一種對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性的分離 的GH9內(nèi)切葡聚糖酶，該分離的GH9內(nèi)切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成： (a) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:2的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (b) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:10的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (c) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:12的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑷一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:14的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (e) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:48的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (f) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (g) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (h) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO:82的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94%、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑴一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:86的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (j) 一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:90的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (k) 一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:94的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (l) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94%、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (m) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 102的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (η) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 130的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (〇) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 134的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (P) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:138的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (q) -種多肽，該多肽由在中嚴(yán)謹(jǐn)度條件、中-高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、高嚴(yán)謹(jǐn)度條件或非常高 嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼： (i) SEQ ID N0:1的成熟多肽編碼序列； (ii) SEQ ID N0:9的成熟多肽編碼序列； (iii) SEQ ID N0:11的成熟多肽編碼序列； (iv) SEQ ID N0:13的成熟多肽編碼序列； (v) SEQ ID N0:47的成熟多肽編碼序列； (vi) SEQ ID N0:51的成熟多肽編碼序列； (vii) SEQ ID N0:55的成熟多肽編碼序列； (viii) SEQ ID N0:81的成熟多肽編碼序列； (ix) SEQ ID N0:85的成熟多肽編碼序列； (x) SEQ ID N0:89的成熟多肽編碼序列； (xi) SEQ ID N0:93的成熟多肽編碼序列； (xii) SEQ ID N0:97的成熟多肽編碼序列； (xiii) SEQ ID N0:101的成熟多肽編碼序列； (xiv) SEQ ID N0:129的成熟多肽編碼序列； (xv) SEQ ID NO: 133的成熟多肽編碼序列； (xvi) SEQ ID N0:137的成熟多肽編碼序列；或 (xvii) (i)、（ii)、（iii)、（iv)、（v)、（vi)、（vii)、（viii)、（ix)、（x)、（xi)、（xii)、 (xiii)、（xiv)、（xv)、或（xvi)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體； (r) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:1的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (s) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:9的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (t) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:11的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (u) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:13的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (v) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:47的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (w) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:51的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (X) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:55的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (y) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:81的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (z) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:85的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (aa) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:89的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ab) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:93的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ac) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:97的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ad) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:101的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ae) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 129的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (af) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:133的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ag) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:137的成熟多 肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85 %、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ah) SEQ ID NO:2, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO: 102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134 或 SEQ ID NO: 138 的成熟多肽 的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)位置（例如若干個(gè)）處包括一個(gè)取代、缺失、和/或插入； 以及 (ai) (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k), (1), (m), (n), (o), (p), (q)、（r)、（s)、（t)、（u)、（v)、（w)、（x)、（y)、（z)、（aa)、（ab)、（ac)、（ad)、（ae)、（af)、（ag) 或（ah)的多肽的一個(gè)片段，該片段對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性、具有黃原 膠降解活性和/或內(nèi)切-β -1，4-葡聚糖酶活性。
2. 如權(quán)利要求1所述的組合物，該組合物進(jìn)一步包括一種具有黃原膠裂解酶的分離的 多肽。
3. 如權(quán)利要求2所述的組合物，其中具有黃原膠裂解酶活性的該多肽選自下組，該組 由以下各項(xiàng)組成： (a) -種多肽，該多肽與SEQ ID Ν0:4的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (b) -種多肽，該多肽與SEQ ID Ν0:46的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (c) 一種多肽，該多肽與SEQ ID Ν0:60的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑷一種多肽，該多肽與SEQ ID Ν0:64的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (e) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 106的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (f) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 110的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (g) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 114的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (h) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 118的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (i) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 122的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (j) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 126的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (k) 一種多肽，該多肽由在中嚴(yán)謹(jǐn)度條件、中-高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、高嚴(yán)謹(jǐn)度條件或非常高 嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼： (i) SEQ ID NO:3的成熟多肽編碼序列； (ii) SEQ ID N0:45的成熟多肽編碼序列； (iii) SEQ ID N0:59的成熟多肽編碼序列； (iv) SEQ ID N0:63的成熟多肽編碼序列； (v) SEQ ID NO: 105的成熟多肽編碼序列； (vi) SEQ ID N0:109的成熟多肽編碼序列； (vii) SEQ ID N0:113的成熟多肽編碼序列； (viii) SEQ ID N0:117的成熟多肽編碼序列； (ix) SEQ ID N0:121的成熟多肽編碼序列； (x) SEQ ID NO: 125的成熟多肽編碼序列；或 (xi) (i)、（ii)、（iii)、（iv)、（v)、（vi)、（vii)、（viii)、（ix)、或（X)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體； (l) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:3的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (m) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:45的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (η) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:59的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (〇) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:63的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (P) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:105的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (q) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 109的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (r) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 113的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (s) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 117的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑴一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 121的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (u) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO: 125的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (v) SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID N0:106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、SEQ ID NO: 122 或 SEQ ID NO: 126 的成熟多肽的 一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)位置（例如若干個(gè)）處包括取代、缺失、和/或插入；以及 (w) (a)、（b)、（c)、（d)、（e)、（f)、（g)、（h)、（i)、（j)、（k)、（1)、（m)、（η)、（〇)、（p)、（q)、 (r)、（s)、（t)、（u)或（v)的多肽的一個(gè)片段，該片段具有黃原膠裂解酶活性。
4. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的組合物，其中該成熟多肽對(duì)應(yīng)于SEQ ID N0:2的氨 基酸 1 至 1055、SEQ ID NO: 10 的氨基酸 1 至 918、SEQ ID NO: 12 的氨基酸 1 至 916、SEQ ID NO: 14的氨基酸1至918、SEQ ID NO:48的氨基酸1至1007、SEQ ID NO:52的氨基酸1至 915、SEQ ID N0:56 的氨基酸 1 至 1056、SEQ ID N0:82 的氨基酸 1 至 1371、SEQ ID N0:86 的氨基酸1至1203、SEQ ID N0:90的氨基酸1至1379、SEQ ID N0:94的氨基酸1至1371、 SEQ ID N0:98 的氨基酸 1 至 1372、SEQ ID N0:102 的氨基酸 1 至 922、SEQ ID N0:130 的氨 基酸1至916、SEQ ID NO: 134的氨基酸1至1373或SEQ ID NO: 138的氨基酸1至1204。
5. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的組合物，該組合物包括SEQ ID N0:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID N0:82、SEQ ID N0:86、SEQ ID N0:90、SEQ ID N0:94、SEQ ID N0:98、SEQ ID N0:102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134 或 SEQ ID NO: 138 或者 SEQ ID NO:2、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID N0:86、SEQ ID N0:90、SEQ ID N0:94、SEQ ID N0:98、SEQ ID N0:102、SEQ ID N0:130、SEQ ID NO:134或SEQ ID NO:138的成熟多肽，或由其組成。
6. 如權(quán)利要求5所述的組合物，其中該成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至1055、 SEQ ID NO: 10 的氨基酸 1 至 918、SEQ ID NO: 12 的氨基酸 1 至 916、SEQ ID NO: 14 的氨基 酸 1 至 918、SEQ ID NO:48 的氨基酸 1 至 1007、SEQ ID NO:52 的氨基酸 1 至 915、SEQ ID N0:56的氨基酸1至1056、SEQ ID N0:82的氨基酸1至1371、SEQ ID N0:86的氨基酸1至 1203、SEQ ID N0:90 的氨基酸 1 至 1379、SEQ ID N0:94 的氨基酸 1 至 1371、SEQ ID N0:98 的氨基酸1至1372、SEQ ID NO: 102的氨基酸1至922、SEQ ID NO: 130的氨基酸1至916、 SEQ ID NO: 134的氨基酸1至1373或SEQ ID NO: 138的氨基酸1至1204。
7. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的組合物，其中該多肽是SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:10、 SEQ ID N0:12、SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:48、SEQ ID N0:52、SEQ ID N0:56、SEQ ID N0:82、 SEQ ID N0:86、SEQ ID N0:90、SEQ ID N0:94、SEQ ID N0:98、SEQ ID N0:102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134或SEQ ID NO: 138的成熟多肽的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè) (例如若干個(gè)）位置處包括取代、缺失、和/或插入。
8. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的組合物，其中該多肽是SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 10、 SEQ ID N0:12、SEQ ID N0:14、SEQ ID N0:48、SEQ ID N0:52、SEQ ID N0:56、SEQ ID N0:82、 SEQ ID N0:86、SEQ ID N0:90、SEQ ID N0:94、SEQ ID N0:98、SEQ ID N0:102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134或SEQ ID NO: 138的一個(gè)片段，其中該片段對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處 理的黃原膠具有活性。
9. 如權(quán)利要求3所述的組合物，其中該成熟多肽對(duì)應(yīng)于SEQ ID N0:4的氨基酸1至 760、SEQ ID NO:46 的氨基酸 1 至 1043、SEQ ID NO:60 的氨基酸 1 至 896、SEQ ID NO:64 的 氨基酸1至 1038、SEQIDN0:106的氨基酸1至901、SEQIDN0:110的氨基酸1至899、SEQ ID NO: 114的氨基酸1至897、SEQ ID NO: 118的氨基酸1至933、SEQ ID NO: 122的氨基酸 1至1049或SEQ ID NO: 126的氨基酸1至900。
10. 如權(quán)利要求3所述的組合物，該組合物包括SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID NO: 106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、 SEQIDN0:122或SEQIDN0:126或者SEQIDN0:4、SEQIDN0:46、SEQIDN0:60、SEQID N0:64、SEQIDN0:106、SEQIDN0:110、SEQIDN0:114、SEQIDN0:118、SEQIDN0:122* SEQ ID NO: 126的成熟多肽，或由其組成。
11. 如權(quán)利要求10所述的組合物，其中該成熟多肽是SEQ ID N0:4的氨基酸1至760、 SEQ ID NO:46 的氨基酸 1 至 1043、SEQ ID NO:60 的氨基酸 1 至 896、SEQ ID NO:64 的氨基 酸 1 至 1038、SEQ ID NO: 106 的氨基酸 1 至 901、SEQ ID NO: 110 的氨基酸 1 至 899、SEQ ID NO: 114的氨基酸1至897、SEQ ID NO: 118的氨基酸1至933、SEQ ID NO: 122的氨基酸1 至1049或SEQ ID NO: 126的氨基酸1至900。
12. 如權(quán)利要求3所述的組合物，其中該多肽是SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID NO: 106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、 SEQ ID NO: 122或SEQ ID NO: 126的成熟多肽的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)（例如若干 個(gè)）位置處包括取代、缺失、和/或插入。
13. 如權(quán)利要求3所述的組合物，其中該多肽是SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID N0:106、SEQ ID N0:110、SEQ ID N0:114、SEQ ID N0:118、 SEQ ID NO: 122或SEQ ID NO: 126的一個(gè)片段，其中該片段具有黃原膠裂解酶活性。
14. 如權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)所述的組合物，該組合物是一種洗滌劑組合物，該洗滌 劑組合物包括一種或多種洗滌劑組分。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的組合物用于降解黃原膠的用途。
16. 如權(quán)利要求15所述的用途，用于控制鉆井液的粘度。
17. 如權(quán)利要求14所述的用途，用于洗滌或清潔紡織品和/或硬表面，例如餐具洗滌。
18. 如權(quán)利要求17所述的用途，其中如通過(guò)AMSA所確定，黃原膠與碳黑小塊布樣的 Δ Int酶值是至少3個(gè)單位、至少4個(gè)單位、至少5個(gè)單位、至少6個(gè)單位、至少7個(gè)單位、至 少8個(gè)單位、至少9個(gè)單位或至少10個(gè)單位。
19. 如權(quán)利要求17所述的用途，其中如通過(guò)MiniLOM所確定，黃原膠與碳黑小塊布樣 的Δ Rem酶值是至少1. 5個(gè)單位、至少1. 75個(gè)單位、至少2個(gè)單位、至少2. 25個(gè)單位、至少 2. 5個(gè)單位、至少2. 75個(gè)單位、至少3個(gè)單位、至少3. 5個(gè)單位或至少4個(gè)單位。
20. 如權(quán)利要求14所述的用途，其中該洗滌劑組合物具有一種酶洗滌益處。
21. -種用于降解黃原膠的方法，該方法包括向黃原膠應(yīng)用一種包括權(quán)利要求1-14中 任一項(xiàng)的組合物。
22. 如權(quán)利要求21所述的方法，其中該黃原膠在紡織品的表面上或硬表面，例如餐具 洗漆。
23. 如權(quán)利要求21所述的方法，其中該黃原膠在由鉆井孔形成的地下地層的壓裂中使 用。
24. 如權(quán)利要求21所述的方法，其中該黃原膠是鉆孔濾餅中的一種組分。
25. -種對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性的分離的GH9內(nèi)切葡聚糖酶，該 分離的GH9內(nèi)切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成： (a) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:2的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (b) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:10的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (c) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 12的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑷一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:14的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (e) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:48的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑴一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:52的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94%、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (g) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO:56的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (h) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO:82的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (i) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:86的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (j) 一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:90的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94%、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (k) 一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:94的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94 %、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑴一種多肽，該多肽與SEQ ID NO:98的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (m) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 102的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (η) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 130的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (〇) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 134的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (P) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:138的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (q) -種多肽，該多肽由在中嚴(yán)謹(jǐn)度條件、中-高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、高嚴(yán)謹(jǐn)度條件或非常高 嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼： (i) SEQ ID N0:1的成熟多肽編碼序列； (ii) SEQ ID N0:9的成熟多肽編碼序列； (iii) SEQ ID N0:11的成熟多肽編碼序列； (iv) SEQ ID N0:13的成熟多肽編碼序列； (v) SEQ ID N0:47的成熟多肽編碼序列； (vi) SEQ ID N0:51的成熟多肽編碼序列； (vii) SEQ ID N0:55的成熟多肽編碼序列； (viii) SEQ ID N0:81的成熟多肽編碼序列； (ix) SEQ ID N0:85的成熟多肽編碼序列； (x) SEQ ID N0:89的成熟多肽編碼序列； (xi) SEQ ID N0:93的成熟多肽編碼序列； (xii) SEQ ID N0:97的成熟多肽編碼序列； (xiii) SEQ ID N0:101的成熟多肽編碼序列； (xiv) SEQ ID N0:129的成熟多肽編碼序列； (xv) SEQ ID N0:133的成熟多肽編碼序列； (xvi) SEQ ID N0:137的成熟多肽編碼序列；或 (xvii) (i)、（ii)、（iii)、（iv)、（v)、（vi)、（vii)、（viii)、（ix)、（x)、（xi)、（xii)、 (xiii)、（xiv)、（xv)、或（xvi)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體； (r) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:1的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (s) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:9的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82 %、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (t) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:11的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (u) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:13的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (v) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:47的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83 %、至少84%、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (w) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:51的成熟多肽 編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84 %、至少85 %、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (X) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:55的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (y) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:81的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (z) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:85的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (aa) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:89的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ab) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:93的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ac) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:97的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ad) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:101的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ae) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:129的成熟多 肽編碼序列具有至少80 %，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85 %、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (af) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:133的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82 %、至少83 %、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ag) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:137的成熟多 肽編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至 少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (ah) SEQ ID NO:2, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID N0:98、SEQ ID NO: 102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134 或 SEQ ID NO: 138 的成熟多肽 的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)位置（例如若干個(gè)）處包括取代、缺失、和/或插入；以及 (ai) (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k) , (1), (m), (n), (o), (p), (q)、（r)、（s)、（t)、（u)、（v)、（w)、（x)、（y)、（z)、（aa)、（ab)、（ac)、（ad)、（ae)、（af)、（ag) 或（ah)的多肽的一個(gè)片段，該片段對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具有活性、具有黃原 膠降解活性和/或內(nèi)切-β -1，4-葡聚糖酶活性。
26. 如權(quán)利要求25所述的多肽，其中該成熟多肽對(duì)應(yīng)于SEQ ID Ν0:2的氨基酸1至 1055、SEQ ID NO: 10 的氨基酸 1 至 918、SEQ ID NO: 12 的氨基酸 1 至 916、SEQ ID NO: 14 的 氨基酸1至918、SEQ ID NO:48的氨基酸1至1007、SEQ ID NO:52的氨基酸1至915、SEQ ID N0:56的氨基酸1至1056、SEQ ID N0:82的氨基酸1至1371、SEQ ID N0:86的氨基酸 1 至 1203、SEQ ID N0:90 的氨基酸 1 至 1379、SEQ ID N0:94 的氨基酸 1 至 1371、SEQ ID NO:98的氨基酸1至1372、SEQ ID NO: 102的氨基酸1至922、SEQ ID NO: 130的氨基酸1 至 916、SEQ ID NO: 134 的氨基酸 1 至 1373 或 SEQ ID NO: 138 的氨基酸 1 至 1204。
27. 如權(quán)利要求25-26中任一項(xiàng)所述的多肽，該組多肽包括SEQ ID N0:2、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID N0:82、SEQ ID N0:86、SEQ ID N0:90、SEQ ID N0:94、SEQ ID N0:98、SEQ ID N0:102、SEQ ID NO: 130、SEQ ID NO: 134 或 SEQ ID NO: 138 或者 SEQ ID NO:2、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO: 134或SEQ ID NO: 138的成熟多肽，或由其組成。
28. 如權(quán)利要求27所述的多肽，其中該成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸1至1055、 SEQ ID NO: 10 的氨基酸 1 至 918、SEQ ID NO: 12 的氨基酸 1 至 916、SEQ ID NO: 14 的氨基 酸 1 至 918、SEQ ID NO:48 的氨基酸 1 至 1007、SEQ ID NO:52 的氨基酸 1 至 915、SEQ ID NO:56的氨基酸1至1056、SEQ ID NO:82的氨基酸1至1371、SEQ ID NO:86的氨基酸1至 1203、SEQ ID N0:90 的氨基酸 1 至 1379、SEQ ID N0:94 的氨基酸 1 至 1371、SEQ ID N0:98 的氨基酸1至1372、SEQ ID NO: 102的氨基酸1至922、SEQ ID NO: 130的氨基酸1至916、 SEQ ID NO: 134的氨基酸1至1373或SEQ ID NO: 138的氨基酸1至1204。
29. 如權(quán)利要求25所述的多肽，其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO: 134或SEQ ID NO: 138的成熟多肽的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)（例如若干個(gè)） 位置處包括取代、缺失、和/或插入。
30. 如權(quán)利要求25所述的多肽，其中該多肽是SEQ ID NO:2、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:94、SEQ ID NO:98、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO: 134或SEQ ID NO: 138的一個(gè)片段，其中該片段對(duì)用黃原膠裂解酶預(yù)處理的黃原膠具 有活性。
31. -種具有黃原膠裂解酶活性的分離的多肽，該多肽選自下組，該組由以下各項(xiàng)組 成： (a) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:4的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (b) -種多肽，該多肽與SEQ ID N0:46的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (c) 一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:60的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑷一種多肽，該多肽與SEQ ID N0:64的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (e) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 106的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (f) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 110的成熟多肽具有至少80%，例如至少81 %、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (g) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 114的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (h) -種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 118的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (i) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 122的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (j) 一種多肽，該多肽與SEQ ID NO: 126的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%、至 少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至 少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少 98%、至少99%、或100%序列一致性； (k) 一種多肽，該多肽由在中嚴(yán)謹(jǐn)度條件、中-高嚴(yán)謹(jǐn)度條件、高嚴(yán)謹(jǐn)度條件或非常高 嚴(yán)謹(jǐn)度條件下與以下各項(xiàng)雜交的多核苷酸編碼： (i) SEQ ID NO:3的成熟多肽編碼序列； (ii) SEQ ID N0:45的成熟多肽編碼序列； (iii) SEQ ID N0:59的成熟多肽編碼序列； (iv) SEQ ID N0:63的成熟多肽編碼序列； (v) SEQ ID NO: 105的成熟多肽編碼序列； (vi) SEQ ID N0:109的成熟多肽編碼序列； (vii) SEQ ID N0:113的成熟多肽編碼序列； (viii) SEQ ID N0:117的成熟多肽編碼序列； (ix) SEQ ID N0:121的成熟多肽編碼序列； (x) SEQ ID NO: 125的成熟多肽編碼序列；或 (xi) (i)、（ii)、（iii)、（iv)、（v)、（vi)、（vii)、（viii)、（ix)、或（X)的全長(zhǎng)互補(bǔ)體； (l) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:3的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (m) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:45的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (η) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:59的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (〇) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID NO:63的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (P) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:105的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (q) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:109的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (r) 一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:113的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (s) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:117的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； ⑴一種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:121的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (u) -種多肽，該多肽由以下多核苷酸編碼，該多核苷酸與SEQ ID N0:125的成熟多肽 編碼序列具有至少80%，例如至少81 %、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少 86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91 %、至少92%、至少93%、至少 94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%序列一致性； (v) SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID N0:106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、SEQ ID NO: 122 或 SEQ ID NO: 126 的成熟多肽的 一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)位置（例如若干個(gè)）處包括取代、缺失、和/或插入；以及 (w) (a)、（b)、（c)、（d)、（e)、（f)、（g)、（h)、（i)、（j)、（k)、（1)、（m)、（η)、（〇)、（p)、（q)、 (r)、（s)、（t)、（u)或（v)的多肽的一個(gè)片段，該片段具有黃原膠裂解酶活性。
32.如權(quán)利要求31所述的多肽，其中該成熟多肽對(duì)應(yīng)于SEQ ID N0:4的氨基酸1至 760、SEQ ID N0:46 的氨基酸 1 至 1043、SEQ ID N0:60 的氨基酸 1 至 896、SEQ ID N0:64 的 氨基酸1至 1038、SEQIDN0:106的氨基酸1至901、SEQIDN0:110的氨基酸1至899、SEQ ID NO: 114的氨基酸1至897、SEQ ID NO: 118的氨基酸1至933、SEQ ID NO: 122的氨基酸 1至1049或SEQ ID NO: 126的氨基酸1至900。
33. 如權(quán)利要求31-32中任一項(xiàng)所述的多肽，該多肽包括SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、 SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID N0:106、SEQ ID N0:110、SEQ ID N0:114、SEQ ID N0:118、SEQIDN0:122或SEQIDN0:126或者SEQIDN0:4、SEQIDN0:46、SEQIDN0:60、 SEQ ID N0:64、SEQ ID NO: 106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、SEQ ID NO: 122或SEQ ID NO: 126的成熟多肽，或由其組成。
34. 如權(quán)利要求33所述的多肽，其中該成熟多肽是SEQ ID N0:4的氨基酸1至760、 SEQ ID NO:46 的氨基酸 1 至 1043、SEQ ID NO:60 的氨基酸 1 至 896、SEQ ID NO:64 的氨基 酸 1 至 1038、SEQ ID NO: 106 的氨基酸 1 至 901、SEQ ID NO: 110 的氨基酸 1 至 899、SEQ ID NO: 114的氨基酸1至897、SEQ ID NO: 118的氨基酸1至933、SEQ ID NO: 122的氨基酸1 至1049或SEQ ID NO: 126的氨基酸1至900。
35. 如權(quán)利要求31所述的多肽，其中該多肽是SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID NO: 106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、 SEQ ID NO: 122或SEQ ID NO: 126的成熟多肽的一種變體，該變體在一個(gè)或多個(gè)（例如若干 個(gè)）位置處包括取代、缺失、和/或插入。
36. 如權(quán)利要求31所述的多肽，其中該多肽是SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:46、SEQ ID N0:60、SEQ ID N0:64、SEQ ID NO: 106、SEQ ID NO: 110、SEQ ID NO: 114、SEQ ID NO: 118、 SEQ ID NO: 122或SEQ ID NO: 126的一個(gè)片段，其中該片段具有黃原膠裂解酶活性。
37. -種分離的多核苷酸，該多核苷酸編碼如權(quán)利要求25-36中任一項(xiàng)所述的多肽。
38. -種核酸構(gòu)建體或表達(dá)載體，包括可操作地連接至一個(gè)或多個(gè)控制序列的如權(quán)利 要求37所述的多核苷酸，該一個(gè)或多個(gè)控制序列指導(dǎo)該多肽在一個(gè)表達(dá)宿主中的產(chǎn)生。
39. -種重組宿主細(xì)胞，該重組宿主細(xì)胞包括如權(quán)利要求38所述的多核苷酸，該多核 苷酸可操作地連接至指導(dǎo)該多肽的產(chǎn)生的一個(gè)或多個(gè)控制序列。
40. -種產(chǎn)生如權(quán)利要求25-36中任一項(xiàng)所述的多肽的方法，該方法包括： (a) 在有助于產(chǎn)生該多肽的條件下，培養(yǎng)根據(jù)權(quán)利要求39所述的細(xì)胞；并且 (b) 回收該多肽。
【文檔編號(hào)】C12N9/88GK104271723SQ201380023711
【公開(kāi)日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2013年5月7日 優(yōu)先權(quán)日:2012年5月7日
【發(fā)明者】D.R.塞居拉, P.F.哈林, A.維克索-尼爾森, L.安德森, M.S.博徹特, L.墨菲, A.博伊森, L.G.帕爾曼, K.詹森, C.斯喬霍爾姆, T.霍夫, C.布盧姆 申請(qǐng)人:諾維信公司