具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物和產(chǎn)生所述植物的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明通常涉及分子生物學(xué)的領(lǐng)域，涉及通過(guò)調(diào)節(jié)編碼GS1（谷氨酰胺合酶1）的核酸序列、編碼PEAMT（磷酸乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移酶）多肽的核酸序列、迄今為止未知的PEAMT-編碼核酸序列、編碼脂肪酰?；d體蛋白（ACP）硫酯酶B（FATB）多肽的核酸序列、編碼LFY樣（LEAFY-樣）的核酸序列在植物中的表達(dá)，來(lái)改善多種植物生長(zhǎng)特征的方法。本發(fā)明還關(guān)于包含所述核酸序列的受調(diào)節(jié)的表達(dá)的植物，其中相對(duì)于相應(yīng)的野生型植物或其他對(duì)照植物，所述植物具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀。
【專(zhuān)利說(shuō)明】具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物和產(chǎn)生所述植物的方法
[0001]本申請(qǐng)為2009年6月10日提交的、發(fā)明名稱(chēng)為“具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物和產(chǎn)生所述植物的方法”的PCT申請(qǐng)PCT/EP2009/057190的分案申請(qǐng)，所述PCT申請(qǐng)進(jìn)入中國(guó)國(guó)家階段的日期為2010年12月20日，申請(qǐng)?zhí)枮?00980123377.3。
[0002]本發(fā)明通常涉及分子生物學(xué)的領(lǐng)域，涉及通過(guò)調(diào)節(jié)編碼GSl (谷氨酰胺合酶I)的核酸序列在植物中的表達(dá)，來(lái)改善多種植物生長(zhǎng)特征的方法。本發(fā)明還關(guān)于具有編碼GSl的核酸序列的受調(diào)節(jié)的表達(dá)的植物，其中相對(duì)于相應(yīng)的野生型植物或其他對(duì)照植物，所述植物具有改善的生長(zhǎng)特征。本發(fā)明還提供了在本發(fā)明方法中有用的構(gòu)建體。
[0003]此外，本發(fā)明通常涉及分子生物學(xué)的領(lǐng)域，涉及通過(guò)調(diào)節(jié)編碼PEAMT (磷酸乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移酶)多肽的核酸序列在植物中的表達(dá)，來(lái)增強(qiáng)多種植物產(chǎn)量相關(guān)的性狀的方法。本發(fā)明還關(guān)于具有編碼PEAMT的核酸序列的受調(diào)節(jié)的表達(dá)的植物，其中相對(duì)于相應(yīng)的野生型植物或其他對(duì)照植物，所述植物具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀。本發(fā)明還提供了迄今為止未知的PEAMT-編碼核酸序列，和包含所述序列的構(gòu)建體，它們?cè)趯?shí)施本發(fā)明的方法中是有用的。
[0004]此外，本發(fā)明通常涉及分子生物學(xué)的領(lǐng)域，且涉及通過(guò)增加編碼脂肪酰?；d體蛋白(ACP)硫酯酶B(FATB)多肽的核酸序列在植物中的表達(dá)，來(lái)增加多種植物種子產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法。本發(fā)明還關(guān)于具有編碼FATB多肽的核酸序列的增加的表達(dá)的植物，其中相對(duì)于對(duì)照植物，所述植物具有增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀。本發(fā)明還涉及包含所述核酸序列的核酸序列、核酸序列構(gòu)建體、載體和植物。
[0005]此外，本發(fā)明通常涉及分子生物學(xué)的領(lǐng)域，且涉及通過(guò)調(diào)節(jié)編碼LFY樣(LEAFY-樣)的核酸序列在植物中的表達(dá)，來(lái)改善多種植物生長(zhǎng)特征的方法。本發(fā)明還關(guān)于具有編碼LFY樣的核酸序列的受調(diào)節(jié)的表達(dá)的植物，其中相對(duì)于相應(yīng)的野生型植物或其他對(duì)照植物，所述植物具有改善的生長(zhǎng)特征。本發(fā)明還提供了在本發(fā)明方法中有用的構(gòu)建體。
[0006]持續(xù)增長(zhǎng)的世界人口和農(nóng)業(yè)用可耕地供應(yīng)萎縮刺激了有關(guān)提高農(nóng)業(yè)效率的研究。常規(guī)的作物及園藝學(xué)改良手段利用選擇育種技術(shù)以鑒定具有受歡迎特征的植物。但是，此類(lèi)選擇育種技術(shù)具有幾個(gè)缺陷，即這些技術(shù)一般耗費(fèi)很多勞動(dòng)并且產(chǎn)生這樣的植物，其經(jīng)常含有異源的遺傳組分，其可能不總是導(dǎo)致從親代植物中傳遞的受歡迎性狀。分子生物學(xué)進(jìn)展已經(jīng)允許人類(lèi)改良動(dòng)物及植物的種質(zhì)。植物的遺傳工程使得可以分離和操作遺傳物質(zhì)(一般處于DNA或RNA形式)并且隨后導(dǎo)入該遺傳物質(zhì)至植物中。此類(lèi)技術(shù)具有產(chǎn)生具備多種經(jīng)濟(jì)學(xué)、農(nóng)學(xué)或園藝學(xué)改良性狀的作物或植物的能力。
[0007]具有特殊經(jīng)濟(jì)意義的性狀是提高的產(chǎn)量。產(chǎn)量通常定義為來(lái)自作物的經(jīng)濟(jì)價(jià)值的可測(cè)量結(jié)果。該結(jié)果可以就數(shù)量和/或品質(zhì)方面進(jìn)行定義。產(chǎn)量直接取決于幾個(gè)因素，例如器官的數(shù)目和大小、植物構(gòu)造(例如枝的數(shù)目)、種子產(chǎn)生、葉衰老等。根發(fā)育、養(yǎng)分?jǐn)z入量、脅迫耐受性和早期萌發(fā)勢(shì)(early v igor)也可以是決定產(chǎn)量的重要因素。優(yōu)化前述因素因而可以對(duì)提高作物產(chǎn)量有貢獻(xiàn)。
[0008]種子產(chǎn)量是特別重要的性狀，因?yàn)樵S多植物的種子對(duì)人與動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)是重要的。作物如玉米、稻、小麥、卡諾拉油菜和大豆占超過(guò)一半的人類(lèi)總熱量攝入，無(wú)論通過(guò)直接消費(fèi)種子本身或通過(guò)消費(fèi)基于加工的種子而產(chǎn)生的肉產(chǎn)品。作物也是糖、油及工業(yè)加工中所用許多類(lèi)型代謝物的來(lái)源。種子含有胚(新枝條和新根的來(lái)源)和胚乳(萌發(fā)期間及籽苗早期生長(zhǎng)期間用于胚生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源)。種子發(fā)育涉及多種基因并且需要代謝物從根、葉和莖轉(zhuǎn)移至正在生長(zhǎng)的種子中。胚乳尤其同化糖類(lèi)、油和蛋白質(zhì)的代謝前體并且將它們合成為忙藏大分子以灌滿籽粒(grain)。
[0009]植物生物量為飼料作物如苜蓿、青貯玉米和干草的產(chǎn)量。在籽粒作物中已使用了多種代表(proxy)。其中主要的是植物大小的估計(jì)值。根據(jù)物種和發(fā)育階段，可以以多種方式測(cè)量植物大小，包括總植物干重、地上部分干重、地上部分鮮重、葉面積、莖體積、植物高度、蓮座直徑、葉長(zhǎng)度、根長(zhǎng)度、根量、分蘗數(shù)和葉數(shù)量。許多物種在給定發(fā)育階段的植物不同部分的大小之間維持了保守的比例。上述異速生長(zhǎng)關(guān)系用于從上述一種大小測(cè)量推測(cè)另一種(例如，Tittonell 等人,2005Agric Ecosys & Environ 105:213)。在早期發(fā)育階段的植物大小通常與發(fā)育晚期的植物大小相關(guān)。具有較大葉面積的較大的植物通?？梢员容^小的植物吸收更多的光和二氧化碳，從而在相同的時(shí)期可能獲得更多重量(Fasoula &Tollenaar 2005 Maydica 50:39)。除微環(huán)境的潛在連續(xù)性或遺傳優(yōu)勢(shì)外，植物必須在一開(kāi)始就獲得較大的尺寸。對(duì)于植物的大小和生長(zhǎng)速率而言存在強(qiáng)烈的遺傳成分(例如，terSteege等人,2005Plant Physiology 139:1078),并且迄今為止,在同一環(huán)境條件下，一系列不同基因型的植物大小可能與另一種環(huán)境條件下的大小相關(guān)(Hittalmani等人，2003Theoretical Applied Geneticsl07:679)。因此，使用標(biāo)準(zhǔn)的環(huán)境作為田間作物在不同地區(qū)和時(shí)間遇到的多樣且變化的環(huán)境的代表。
[0010]對(duì)于許多作物的另一個(gè)重要性狀是早期萌發(fā)勢(shì)。改善早期萌發(fā)勢(shì)是現(xiàn)代稻育種計(jì)劃在溫帶和熱帶稻品種上的重要目標(biāo)。長(zhǎng)根在水栽稻中對(duì)于正確土壤固定是重要的。在稻直接播種至被淹沒(méi)田地的情況下，以及在植物必須從水中迅速出苗的情況下，較長(zhǎng)的枝條與萌發(fā)勢(shì)相關(guān)。在實(shí)施條播(drill-seeding)的情況下，較長(zhǎng)的中胚軸和胚芽鞘對(duì)于良好出幼苗是重要的。將早期萌發(fā)勢(shì)人工改造到植物內(nèi)的能力將在農(nóng)業(yè)中是極其重要的。例如，不良的早期萌發(fā)勢(shì)已經(jīng)限制了基于玉 米帶種質(zhì)(Corn Belt germplasm)在歐洲大西洋地區(qū)引種玉米(Zea mayes L.)雜種。
[0011]收獲指數(shù)，種子產(chǎn)量與地上部分干重的比例，在許多環(huán)境條件下是相對(duì)穩(wěn)定的，從而通常能夠獲得植物大小和籽粒產(chǎn)量之間強(qiáng)有力的相互關(guān)系(例如，Rebetzke等人，2002Crop Science42:739)。這些方法是內(nèi)在相關(guān)聯(lián)的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)籽粒生物量取決于植物莖葉的現(xiàn)有的或儲(chǔ)存的光合作用生產(chǎn)力(Gardener等人，1985Physiology of CropPlants.1owa State University Press,第68-73頁(yè))。因此，即使在發(fā)育的早期階段,選擇植物的大小已用作未來(lái)潛在產(chǎn)量的提示(例如，Tittonell等人,2005 Agric Ecosys &Environ 105:213)。當(dāng)測(cè)試遺傳差異對(duì)脅迫耐受的影響時(shí),將土壤性質(zhì)、溫度、水和養(yǎng)分的有效性，以及光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)化的能力，是溫室或植物培養(yǎng)室環(huán)境相比田間的內(nèi)在優(yōu)勢(shì)。然而，由于缺少風(fēng)或昆蟲(chóng)而造成的低下的授粉，或者對(duì)于成熟的根或株冠生長(zhǎng)不充足的空間所造成的對(duì)產(chǎn)量的人為限制，可以制約這些受控環(huán)境用于測(cè)試產(chǎn)量差異的應(yīng)用。因此，在培養(yǎng)室或溫室的標(biāo)準(zhǔn)化條件下，測(cè)量早期發(fā)育階段的植物大小，是為潛在的遺傳產(chǎn)量?jī)?yōu)勢(shì)提供提示的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)踐。
[0012]又一個(gè)重要性狀是改善的非生物脅迫耐受性。非生物脅迫是世界范圍作物損失的主要原因，對(duì)于大多數(shù)主要作物植物而言降低平均產(chǎn)量超過(guò)50% (Wang等、Planta(2003) 218:1_14)。非生物脅迫可以由干旱、鹽度、極端溫度、化學(xué)毒性和氧化脅迫引起。改善植物對(duì)非生物脅迫耐受性的能力將在世界范圍對(duì)農(nóng)民而言是巨大經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì)并且會(huì)允許在不利條件期間及在作物栽培否則是不可能的陸地上栽培作物。
[0013]作物產(chǎn)量因而可以通過(guò)優(yōu)化前述因素之一而提高。
[0014]取決于最終用途，對(duì)某些產(chǎn)量性狀的改良可能優(yōu)先于其它產(chǎn)量性狀。例如對(duì)于應(yīng)用如飼料或木材生產(chǎn)或生物燃料資源而言，增加植物營(yíng)養(yǎng)體部分可能是希望的，而對(duì)于應(yīng)用如面粉、淀粉或油生產(chǎn)而言，種子參數(shù)的提高可能是特別希望的。即便在種子參數(shù)當(dāng)中，某些參數(shù)可以更優(yōu)先于其它參數(shù)，這取決于應(yīng)用。多種機(jī)制可以對(duì)增加種子產(chǎn)量有貢獻(xiàn)，無(wú)論形式為增加的種子大小或是增加的種子數(shù)目。
[0015]增加植物中產(chǎn)量(種子產(chǎn)量和/或生物量)的一種方法可以是通過(guò)修飾植物的內(nèi)在生長(zhǎng)機(jī)制如細(xì)胞周期或參與植物生長(zhǎng)或參與防御機(jī)制的多種信號(hào)傳導(dǎo)途徑。
[0016]關(guān)于GSl多肽，目前已發(fā)現(xiàn)通過(guò)調(diào)節(jié)植物中編碼GSl (谷氨酰胺合酶I)的核酸在植物中的表達(dá),可以改善植物中的多種生長(zhǎng)特征。
[0017]關(guān)于PEAMT多肽，目前已發(fā)現(xiàn)通過(guò)調(diào)節(jié)植物中編碼PEAMT(磷酸乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移酶)的核酸序列在植物中的表達(dá)，可以改善植物中的多種產(chǎn)量相關(guān)性狀。
[0018]關(guān)于FATB多肽，目前已發(fā)現(xiàn)通過(guò)增加編碼脂肪酰?；d體蛋白(ACP)硫酯酶B (FATB)多肽的核酸序列在植物中的表達(dá)，可以相對(duì)于對(duì)照植物增加植物中多種種子產(chǎn)量相關(guān)性狀。增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀包括一種或多種的:增加的每株植物的種子總產(chǎn)量、增加的種子總數(shù)、增加的飽滿(filled)種子數(shù)、增加的種子飽滿率(fill rate)和增加的收獲指數(shù)。
[0019]關(guān)于LFY樣多肽，目前已發(fā)現(xiàn)通過(guò)調(diào)節(jié)植物中編碼LFY樣(LEAFY-樣)的核酸序列在植物中的表達(dá),可以改善植物中的多種生長(zhǎng)特征。
[0020]
[0021]谷氨酰胺合酶(GSl)
[0022]谷氨酰胺合酶催化從谷氨酸和NH3形成谷氨酰胺，這是硝酸鹽同化通路的最后一步?；谛蛄斜容^，谷氨酰胺合酶分為兩個(gè)家族，細(xì)胞溶膠(cytosolic)(GSl)和葉綠體(GS2)同種型。GSl谷氨酰胺合酶形成小的基因家族，其中GS2似乎作為單拷貝基因存在，GSl和GS2都存在于植物和藻類(lèi)中。許多報(bào)告描述了在氮受限的條件下，來(lái)自高等植物的谷氨酰胺合酶具有對(duì)植物生長(zhǎng)的直接影響(Oliveira等人，Plant Physiol.129，1170-1180，2002 ；Fuentes 等人，J.Exp.Bot.52，1071-1081，2001 ；Migge 等人，Planta210，252-260，2000 ;Martin等人，Plant Cell 18，3252-3274)。然而，迄今為止，沒(méi)有獲得關(guān)于藻類(lèi)類(lèi)型的谷氨酰胺合酶對(duì)植物生長(zhǎng)的影響，特別是在降低氮有效性的條件下的影響的任何數(shù)據(jù)。
[0023]磷酸乙醇胺N-甲某轉(zhuǎn)移酶(PEAMT)
[0024]磷酸乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移酶(PEAMT)也稱(chēng)為S-腺苷-L-甲硫氨酸:乙醇胺磷酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶，涉及植物中的膽堿生物合成。PEAMT在將磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)化為磷酸膽堿所需的甲基化步驟中發(fā)揮 功能(Nuccio等人，2000.J Biol Chem.275(19):14095-101)。因此，PEAMT酶催化一種或多種下列反應(yīng):
[0025]1)N- 二甲基乙醇胺磷酸+S-腺苷-L-甲硫氨酸《磷酰膽堿+S-腺苷-高半胱氨酸
[0026]2)N-甲基乙醇胺磷酸+S-腺苷-L-甲硫氨酸發(fā)^二甲基乙醇胺磷酸+S-腺苷-高半胱氨酸
[0027]3)磷酸-乙醇胺+S-腺苷-L-甲硫氨酸O S-腺苷-高半胱氨酸+N-甲基乙醇胺磷酸
[0028]IUPAC-1UBMB(生物化學(xué)和分子生物學(xué)國(guó)際聯(lián)盟)賦予PEAMT的酶學(xué)會(huì)編號(hào)是EC2.1.1.103。PEAMT酶屬于依賴于S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)的甲基轉(zhuǎn)移酶(Mtases)類(lèi)另O。在從細(xì)菌到植物和哺乳動(dòng)物的多種生物中，頻繁的使用從獨(dú)特的SAM向氮、氧或碳原子轉(zhuǎn)移甲基。結(jié)構(gòu)分析顯示，PEAMT蛋白屬于Mtases類(lèi)別，包含形成Rossman樣α-β折疊的甲基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域(Yang等人，2004 J.Mol.Biol.340，695-706)。此外，磷脂酰乙醇胺轉(zhuǎn)移酶通常包含ubiE/C0Q5甲基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域(Pfam參考PFO1209)。該結(jié)構(gòu)域還存在于多種參與泛醌/甲萘醌、生物素和固醇的生物合成的甲基轉(zhuǎn)移酶中。
[0029]磷脂是細(xì)胞膜的重要結(jié)構(gòu)組分，此外，它們?cè)诒匦杌衔锶缰舅岬拇x中扮演相關(guān)的角色。在人中，膽堿、維生素B樣分子，是天然產(chǎn)生的必需養(yǎng)分，參與構(gòu)建細(xì)胞膜和在細(xì)胞之間移動(dòng)脂肪和養(yǎng)分。
[0030]磷酸膽堿是大部分各種植物組織的主要磷脂。在非光合作用的組織中，磷酸乙醇胺是第二多的磷脂，而在綠色組織中，磷酸膽堿的水平與磷脂酰甘油的水平相似(Dykes等人，1976.Biochem J.158(3):575-581)。
[0031]已報(bào)道，過(guò)表達(dá)編碼PEAMT酶的基因的煙草植物具有增加水平的磷酸膽堿和游離膽堿，而不影響磷脂酰膽堿的含量或生 長(zhǎng)(McNeil等人，2001.PNAS.2001，第98卷，第17期，10001-10005)。
[0032]脂肪酰?；d體蛋白(ACP)硫酯酶B (FATB)
[0033]植物含有相當(dāng)多的膜脂和貯藏脂類(lèi)，在每種脂中，可發(fā)現(xiàn)多種不同的脂肪酸。脂肪酸的鏈長(zhǎng)度和雙鍵數(shù)量不同。不同于其它生物，所有的植物細(xì)胞都從乙酰-CoA通過(guò)位于質(zhì)體中的共同通路從頭合成脂肪酸。脂肪酸或者在該細(xì)胞器中被利用，或者被運(yùn)輸供應(yīng)多個(gè)細(xì)胞質(zhì)生物合成通路和細(xì)胞過(guò)程。用于運(yùn)輸?shù)闹舅岬纳a(chǎn)依賴于脂肪酰?；d體蛋白(ACP)硫酯酶(FATs ;也稱(chēng)為?；?ACP TE)的活性，所述酶釋放游離脂肪酸和ACP。其活性代表質(zhì)體脂肪酸生物合成通路的最終步驟。獲得的游離脂肪酸可以進(jìn)入細(xì)胞溶膠(cytosol)，在該處其與輔酶A酯化，并進(jìn)一步代謝進(jìn)入膜脂和/或貯藏的甘油三酯。
[0034]FAT在決定進(jìn)入貯藏脂庫(kù)的脂肪酸的量和組成中扮演關(guān)鍵性角色。在植物中已描述了兩類(lèi)FAT，基于氨基酸序列比較和底物特異性:FATA類(lèi)和FATB類(lèi)(Voelker等人，(1997) Plant Physiol 114:669-677)。這些同種型的底物特異性確定了植物的飽和脂肪酸的鏈長(zhǎng)度和水平。FATA的最高活性是使用油酰-ACP，一種不飽和的?；?ACP，而與其它?；?ACP具有極低的活性。FATB與飽和的?；?ACP具有最高活性。
[0035]FATA和FATB是核編碼的、質(zhì)體靶向的球狀蛋白質(zhì)，作為二聚體發(fā)揮功能。此外，F(xiàn)ATB多肽包括螺旋跨膜錨。FATB活性在擬南芥(Arabidopsis)中至少由2種基因編碼(Bonaventure 等人，(2003) Plant Cell 15:1020-1033)，而在稻中至少由 4 種基因編碼。
[0036]在種子特異性啟動(dòng)子控制下表達(dá)編碼FATB的基因的轉(zhuǎn)基因擬南芥植物(Doermann 等人，(2000) Plant Physiol 123:637-643)和轉(zhuǎn)基因卡諾拉油菜(canola)植物(Jones等人，(1995)Plant Cell 7:359-371)表現(xiàn)出修飾的種子油組成。
[0037]國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 2008/006171描述了通過(guò)調(diào)節(jié)FAD2和/或FATB基因表達(dá)，遺傳修飾稻植物的方法，例如從其生產(chǎn)的米糠油(rice oil)、米糠(rice bran)和稻種(riceseed)，具有改變的油酸、棕櫚酸和/或亞油酸的水平。
[0038]Leafy 樣(LFY-樣)
[0039]Leafy是花誘導(dǎo)和花發(fā)育必需的轉(zhuǎn)錄因子，參與花分生組織決定的特化:LFY表達(dá)是受調(diào)控的，限于芽頂端分生組織側(cè)翼的小群細(xì)胞，其中它的高水平表達(dá)標(biāo)志著葉原基向花原基的命運(yùn)的改變(Weigel等人，Cell 69，843-859，1992)。蛋白質(zhì)序列是高度保守的，在許多植物物種中，蛋白質(zhì)是由單個(gè)基因編碼的，在少數(shù)物種中也存在旁系同源物。在玉米中，存在2個(gè)拷貝的基因(zfll和zf 12)。雙突變體顯示在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)過(guò)程中的正常發(fā)育，但花發(fā)育受干擾(Bomblies 等人，Development 130，2385-2395，2003)。在擬南芥中，LFY 的失功能突變體也表現(xiàn)出花發(fā)育的缺陷，具有花部分轉(zhuǎn)化為花序芽(inflorescence shoot)(Weigel等人，1992)。也報(bào)道Leafy在開(kāi)花時(shí)間中起作用。
[0040]概沭
[0041]谷氨酰胺合酶(GSl)
[0042]令人驚訝的，已發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)編碼藻類(lèi)-類(lèi)型GSl多肽的核酸序列的表達(dá)，使植物相對(duì)于對(duì)照植物具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀，特別是增加的種子產(chǎn)量。
[0043]根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，提供了相對(duì)于對(duì)照植物，改善植物的產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，包括調(diào)節(jié)植物中編碼GSl多肽的核酸序列的表達(dá)。
[0044]磷酸乙醇胺N-甲某轉(zhuǎn)移酶 (PEAMT)
[0045]令人驚訝的，已發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)編碼PEAMT多肽的核酸序列的表達(dá)，使植物相對(duì)于對(duì)照植物具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀。
[0046]根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，提供了相對(duì)于對(duì)照植物，增強(qiáng)植物的產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，包括調(diào)節(jié)植物中編碼PEAMT多肽的核酸序列的表達(dá)。
[0047]脂肪酰?；d體蛋白(ACP)硫酯酶B (FATB)
[0048]令人驚訝的，已發(fā)現(xiàn)增加編碼如本文定義的FATB多肽的核酸序列在植物中的表達(dá)，使植物相對(duì)于對(duì)照植物具有增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀。
[0049]根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，提供了相對(duì)于對(duì)照植物，增加植物的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法,包括增加植物中編碼如本文定義的FATB多肽的核酸序列的表達(dá)。增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀包括一種或多種的:增加的每株植物的種子總產(chǎn)量、增加的種子總數(shù)、增加的飽滿種子數(shù)、增加的種子飽滿率和增加的收獲指數(shù)。
[0050]Leafy-樣(LFY-樣)
[0051]令人驚訝的，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)編碼LFY-樣多肽的核酸序列的表達(dá)使植物相對(duì)于對(duì)照植物，具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀，特別是增加的種子產(chǎn)量。
[0052]根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，提供了相對(duì)于對(duì)照植物，改善植物的產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，包括調(diào)節(jié)編碼LFY-樣多肽的核酸序列在植物中的表達(dá)。改善的產(chǎn)量相關(guān)性狀包括增加的種子產(chǎn)量，并是在與對(duì)照植物相比不改變開(kāi)花時(shí)間的條件下獲得的。
[0053]定義
[0054]多肽/蛋白質(zhì)[0055]術(shù)語(yǔ)“多肽”和“蛋白質(zhì)”在本文中可相互交換地使用并且指由肽鍵連接起來(lái)的任意長(zhǎng)度聚合物形式的氨基酸。
[0056]多核苷酸/核酸序列/核酸序列/核苷酸序列
[0057]術(shù)語(yǔ)“多核苷酸”、“核酸序列”、“核苷酸序列”、“核酸序列”、“核酸序列分子”在本文中可相互交換地使用并且指任意長(zhǎng)度的聚合非分支形式的核苷酸，即核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸或這二者的組合。
[0058]對(duì)照棺物
[0059]選擇合適的對(duì)照植物是實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的例行部分并且可以包括相應(yīng)的野生型植物或無(wú)目的基因的相應(yīng)植物。對(duì)照植物一般是相同的植物物種或甚至是與待評(píng)估植物相同的品種。對(duì)照植物也可以是待評(píng)估植物的失效合子。失效合子是因分離而丟失轉(zhuǎn)基因的個(gè)體。如本文中所用的“對(duì)照植物”不僅指完整植物，也指植物部分，包括種子和種子部分。
[0060]同源物
[0061]蛋白質(zhì)的“同源物”包括這樣的肽、寡肽、多肽、蛋白質(zhì)和酶，它們相對(duì)于非修飾的所討論蛋白質(zhì)具有氨基酸替換、缺失和/或插入并且與從中衍生它們的非修飾蛋白質(zhì)具有相似的生物學(xué)活性和功能活性。
[0062]缺失指從蛋白質(zhì)中移除一個(gè)或多個(gè)氨基酸。
[0063]插入指一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基被導(dǎo)入蛋白質(zhì)中的預(yù)定位點(diǎn)。插入可以包含氨基端融合和/或羧基端融合以及序列內(nèi)插入單個(gè)或多個(gè)氨基酸。通常，在氨基酸序列內(nèi)部的插入物比氨基端融合物或羧基端融合物小約I至10個(gè)殘基級(jí)別。氨基端或羧基端融合蛋白或融合肽的例子包括如酵母雙雜交系統(tǒng)中所用的轉(zhuǎn)錄激活物的結(jié)合結(jié)構(gòu)域或激活結(jié)構(gòu)域、噬菌體外殼蛋白、(組氨酸)-6-標(biāo)簽、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶-標(biāo)簽、蛋白A、麥芽糖結(jié)合蛋白、二氫葉酸還原酶、Tag.100表位、c-myc表位、FLAG? _表位、IacZ, CMP (鈣調(diào)蛋白結(jié)合肽)、HA表位、蛋白C表位和VSV表位。
[0064]取代指以具有相似特性(如相似的疏水性、親水性、抗原性、形成或破壞α -螺旋結(jié)構(gòu)或折疊結(jié)構(gòu)的傾向性)的其他氨基酸替代蛋白質(zhì)的氨基酸。氨基酸取代一般是單個(gè)殘基的，不過(guò)根據(jù)給予多肽的功能性約束條件，可以是簇集的；插入通常是約I至10個(gè)氨基酸殘基級(jí)別。氨基酸取代優(yōu)選地是保守性氨基酸取代。保守性取代表是本領(lǐng)域熟知的(見(jiàn)例如 Creighton (1984) Proteins, ff.H.Freeman and Company (編著)和下表 I)。
[0065]表1:保守性氨基酸取代的例子
[0066]
【權(quán)利要求】
1.相對(duì)于對(duì)照植物，在植物中增強(qiáng)產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，包括在植物中調(diào)節(jié)編碼PEAMT多肽或其同源物的核酸的表達(dá)，所述PEAMT多肽或其同源物包含以增加的優(yōu)選順序與表C2所述的任一蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域具有至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98% 或 99% 的序列同一性的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域。
2.權(quán)利要求1的方法，其中核酸編碼PEAMT多肽或其同源物，所述PEAMT多肽或其同源物以增加的優(yōu)選順序，與SEQ ID勵(lì):58表示的氨基酸序列具有至少50%、55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%,98%或99%的整體序列同一性。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中所述編碼PEAMT多肽或其同源物的核酸是SEQIDNO:57表示的核酸的一部分，或者編碼SEQ ID NO:58的氨基酸序列的直向同源物或旁系同源物的核酸的一部分，其中所述部分的長(zhǎng)度是至少150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、610、620、630、640、650、660、670、680、690、700、710、720、730、740、750、760、770、780、790、800、810個(gè)連續(xù)核苷酸，所述連續(xù)核苷酸是SEQ ID NO:57的連續(xù)核苷酸，或者是編碼SEQ IDNO:58的氨基酸序列的直向同源物或旁系同源物的核酸的連續(xù)核苷酸。
4.權(quán)利要求1-3的任一項(xiàng)的方法，其中編碼PEAMT多肽或其同源物的核酸能夠與SEQID NO:1表示的核酸雜交，或者能夠與編碼SEQ ID NO: 58的直向同源物、旁系同源物或同源物的核酸雜交。
5.權(quán)利要求1-4的任一權(quán)利要求的方法，其中所述編碼PEAMT多肽或其同源物的核酸編碼由SEQ ID NO:58表示的序列的直向同源物或旁系同源物。
6.權(quán)利要求1-5的任一項(xiàng)的方法，其中所述受調(diào)節(jié)的表達(dá)是通過(guò)在植物中導(dǎo)入和表達(dá)編碼PEAMT多肽或其同源物的核酸來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
7.權(quán)利要求1-6的任一項(xiàng)的方法，其中所述相對(duì)于對(duì)照植物增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)的性狀是在非脅迫條件下獲得的，所述性狀包括增加的產(chǎn)量，優(yōu)選的增加的生物量和/或增加的種子產(chǎn)量。
8.權(quán)利要求1-7的任一項(xiàng)的方法，其中所述相對(duì)于對(duì)照植物增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)的性狀是在干旱脅迫的條件下獲得的，所述性狀包括增加的產(chǎn)量，優(yōu)選的增加的生物量和/或增加的種子產(chǎn)量。
9.權(quán)利要求6、7或8的方法，其中所述核酸與組成型啟動(dòng)子，優(yōu)選的與GOS2啟動(dòng)子，最優(yōu)選的與來(lái)自稻的GOS2啟動(dòng)子有效連接。
10.權(quán)利要求1-9的任一項(xiàng)的方法，其中所述編碼PEAMT多肽的核酸是植物來(lái)源的，優(yōu)選的來(lái)自雙子葉植物，還優(yōu)選的來(lái)自十字花科(Brassicaceae),更優(yōu)選的來(lái)自擬南芥屬(Arabidopsis),最優(yōu)選的來(lái)自擬南芥(Arabidopsis thaliana)。
11.通過(guò)前述任一項(xiàng)的權(quán)利要求的方法可獲得的植物或其部分，包括種子，其中所述植物或其部分包含編碼PEAMT多肽或其同源物的重組核酸。
12.構(gòu)建體，其包含:(i)編碼如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)定義的PEAMT多肽或其同源物的核酸； (?)能夠驅(qū)動(dòng)(a)的核酸序列表達(dá)的一種或多種控制序列；和任選的 (iii)轉(zhuǎn)錄終止序列。
13.權(quán)利要求12的構(gòu)建體，其中一種所述控制序列是組成型啟動(dòng)子，優(yōu)選的是G0S2啟動(dòng)子，最優(yōu)選的是來(lái)自稻的G0S2啟動(dòng)子。
14.權(quán)利要求12或13的構(gòu)建體在方法中的用途，所述方法用于產(chǎn)生相對(duì)于對(duì)照植物，具有改變的產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物。
15.用權(quán)利要求12或13的構(gòu)建體的植物、植物部分或植物細(xì)胞。
16.用于生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因植物的方法，所述轉(zhuǎn)基因植物相對(duì)于對(duì)照植物具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀，其包括: (i)在植物中導(dǎo)入和表達(dá)編碼如權(quán)利要求1-5的任一項(xiàng)定義的PEAMT多肽或其同源物的核酸；和 (ii)在促進(jìn)植物生長(zhǎng)和發(fā)育的條件下培養(yǎng)植物細(xì)胞。
17.相對(duì)于對(duì)照植物，具有增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀的轉(zhuǎn)基因植物，其獲得自編碼如權(quán)利要求1-5的任一項(xiàng)定義的PEAMT多肽或其同源物的核酸的受調(diào)節(jié)的表達(dá)。
18.權(quán)利要求11、15或17的轉(zhuǎn)基因植物，或源自它們的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中所述植物是作物植物或單子葉植物或谷類(lèi)，例如稻、玉米、小麥、大麥、谷子(mi I let)、裸麥(rye)、黑小麥(triticale)、高粱、二粒小麥、斯佩爾特小麥(spelt)、黑麥屬(secale)、單粒小麥、埃塞俄比亞畫(huà)眉草(teff)、蜀黍(milo)和燕麥。
19.源自權(quán)利要求18的植物的產(chǎn)物。
20.編碼PEAMT多肽或其同源物的核酸在相對(duì)于對(duì)照植物，改變植物的產(chǎn)量相關(guān)性狀中的用途。
21.相對(duì)于對(duì)照植物，在植物中增加與種子產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，包括在植物中增加編碼脂肪酰?；d體蛋白(ACP)硫酯酶B (FATB)多肽的核酸序列的表達(dá)，以及任選的選擇具有增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物，所述FATB多肽包含(i)質(zhì)體轉(zhuǎn)運(yùn)肽；(ii)至少一個(gè)跨膜螺旋；(iii)和具有InterPro登錄號(hào)IPR002864的?；?ACP硫酯酶家族結(jié)構(gòu)域。
22.權(quán)利要求21的方法，其中所述FATB多肽具有(i)質(zhì)體轉(zhuǎn)運(yùn)肽；(ii)以增加的優(yōu)選順序與SEQ ID NO: 141 表示的跨膜螺旋具有至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性；且以增加的優(yōu)選順序與SEQ ID NO: 140表示的?；?ACP 硫酯酶家族結(jié)構(gòu)域具有至少 50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性。
23.權(quán)利要求21或22的方法，其中所述FATB多肽以增加的優(yōu)選順序具有與SEQIDNO:93表示的FATB多肽，或具有與本文表A3中給出的任何多肽序列至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%、99% 或更高的氨基酸序列同一性。
24.權(quán)利要求21-23的任一項(xiàng)的方法，其中所述FATB多肽是任意這樣的多肽序列，當(dāng)所述多肽序列在構(gòu) 建FAT進(jìn)化系統(tǒng)樹(shù)例如圖10所描述的進(jìn)化系統(tǒng)樹(shù)中使用時(shí)，與包含SEQID NO:93表示的多肽序列的FATB多肽進(jìn)化枝聚類(lèi)，而不與FATA多肽進(jìn)化枝聚類(lèi)。
25.權(quán)利要求21-24的任一項(xiàng)的方法，其中所述FATB多肽是具有酶活性的多肽，所述酶活性在于優(yōu)先從飽和的酰基_ACP(具有在8至18個(gè)碳之間變化的鏈長(zhǎng)度)上水解?；?ACP硫酯鍵，釋放游離的脂肪酸和?；d體蛋白(ACP)。
26.權(quán)利要求21-25的任一項(xiàng)的方法，其中所述編碼FATB多肽的核酸序列是由表A3中給出的任一核酸序列SEQ ID NO或其部分所表示的,或者是能夠與A3中給出的任一核酸序列SEQ ID NO或其部分雜交的序列。
27.根據(jù)任一項(xiàng)前述權(quán)利要求的方法，其中所述核酸序列編碼由表A3中給出的任何多肽序列SEQ ID NO的直向同源物或旁系同源物。
28.根據(jù)任一項(xiàng)前述權(quán)利要求的方法，其中所述增加的表達(dá)通過(guò)任意一種或多種:T-DNA活化標(biāo)簽、TILLING或同源重組來(lái)實(shí)現(xiàn)。
29.根據(jù)任一項(xiàng)前述權(quán)利要求的方法，其中所述增加的表達(dá)通過(guò)在植物中導(dǎo)入和表達(dá)編碼FATB多肽的核酸序列來(lái)實(shí)現(xiàn)。
30.根據(jù)任一項(xiàng)前述權(quán)利要求的方法，其中所述增加的產(chǎn)量相關(guān)性狀是一種或多種的:增加的每株植物的種子總產(chǎn)量、增加的種子總數(shù)、增加的飽滿種子數(shù)、增加的種子飽滿率和增加的收獲指數(shù)。
31.根據(jù)任一項(xiàng)前述權(quán)利要求的方法，其中所述核酸序列與組成型啟動(dòng)子有效連接。
32.權(quán)利要求31的方法，其中所述組成型啟動(dòng)子是GOS2啟動(dòng)子，優(yōu)選的是稻GOS2啟動(dòng)子，更優(yōu)選的是SEQ ID NO: 144表示的GOS2啟動(dòng)子。
33.根據(jù)任一項(xiàng)前述權(quán)利要求的方法，其中所述編碼FATB多肽的核酸序列是來(lái)自植物，還優(yōu)選的來(lái)自 雙子葉植物，更優(yōu)選的來(lái)自十字花科(Brassicaceae),最優(yōu)選的核酸序列來(lái)自擬南芥(Arabidopsis thaliana)。
34.通過(guò)前述任一項(xiàng)的權(quán)利要求的方法可獲得的植物、其部分(包括種子)或植物細(xì)胞，其中所述植物、其部分或細(xì)胞包含與組成型啟動(dòng)子有效連接的編碼FATB多肽的分離的核酸轉(zhuǎn)基因。
35.分離的核酸序列，包含: (i)由SEQID NO: 130表示的核酸序列； (ii)由SEQID NO: 130表示的核酸序列的互補(bǔ)序列； (iii)編碼FATB多肽的核酸序列，所述多肽以增加的優(yōu)選順序具有與SEQID NO: 131表示的多肽序列至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的氨基酸序列同一性。
36.分離的多肽，包含: (i)由SEQID NO: 131表示的多肽序列； (ii)以增加的優(yōu)選順序具有與SEQID NO: 131表示的多肽序列至少70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的序列同一性的多肽序列； (i i i )由上述(i )或(i i )給出的任意多肽序列的衍生物。
37.構(gòu)建體，包含: Ca)編碼如權(quán)利要求21-27任一項(xiàng)定義的FATB多肽的核酸序列； (b)能夠驅(qū)動(dòng)(a)的核酸序列表達(dá)的一種或多種控制序列；和任選的 (C)轉(zhuǎn)錄終止序列。
38.權(quán)利要求37的構(gòu)建體，其中所述控制序列是組成型啟動(dòng)子。
39.權(quán)利要求36的構(gòu)建體，其中所述組成型啟動(dòng)子是G0S2啟動(dòng)子，優(yōu)選的是稻的G0S2啟動(dòng)子，更優(yōu)選的是SEQ ID NO: 144表示的G0S2啟動(dòng)子。
40.根據(jù)權(quán)利要求37-39的任一項(xiàng)的構(gòu)建體在方法中的用途，所述方法用于制備相對(duì)于對(duì)照植物，具有增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀的植物，其中所述增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀是一種或多種的:增加的每株植物的種子總產(chǎn)量、增加的種子總數(shù)、增加的飽滿種子數(shù)、增加的種子飽滿率和增加的收獲指數(shù)。
41.用權(quán)利要求37-39的任一項(xiàng)的構(gòu)建體轉(zhuǎn)化的植物、植物部分或植物細(xì)胞。
42.用于生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因植物的方法，所述轉(zhuǎn)基因植物相對(duì)于對(duì)照植物具有增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀，包括: (i)在植物、植物部分或植物細(xì)胞中導(dǎo)入和表達(dá)編碼如權(quán)利要求21-27的任一項(xiàng)定義的FABT多肽的核酸序列；和 (ii)在促進(jìn)植物生長(zhǎng)和發(fā)育的條件下培養(yǎng)植物細(xì)胞、植物部分或植物。
43.相對(duì)于對(duì)照植物，具有增加的種子產(chǎn)量相關(guān)性狀的轉(zhuǎn)基因植物，或者源自所述轉(zhuǎn)基因植物的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因植物部分，所述轉(zhuǎn)基因植物獲得自與組成型啟動(dòng)子有效連接的編碼如權(quán)利要求21-27的任一項(xiàng)定義的FATB多肽的核酸序列的增加的表達(dá)。
44.權(quán)利要求34、41或43的轉(zhuǎn)基因植物或源自所述轉(zhuǎn)基因植物的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中所述植物是作物植物或單子葉植物或谷類(lèi)，例如稻、玉米、小麥、大麥、谷子(mi I let)、裸麥(>76)、黑小麥(1:1'；[1:；[0316)、高粱和燕麥。
45.權(quán)利要求44的植物的包含編碼FATB多肽的分離核酸序列的可收獲部分，其中所述可收獲的部分優(yōu)選的是種子。
46.源自權(quán)利要求44的植物和/或源自權(quán)利要求45的植物的可收獲部分的產(chǎn)物。
47.編碼如權(quán)利要求21-27的任一項(xiàng)定義的FATB多肽的核酸序列在增加種子產(chǎn)量相關(guān)性狀中的用途，所述性狀包括一種或多種的增加的每株植物的種子總產(chǎn)量、增加的種子總數(shù)、增加的飽滿種子數(shù)、增加的種子飽滿率和增加的收獲指數(shù)。
48.用于相對(duì)于對(duì)照植物，在植物中增強(qiáng)產(chǎn)量相關(guān)性狀的方法，包括在植物中調(diào)節(jié)編碼LFY樣多肽的核酸的表達(dá)，其中所述LFY樣多肽包含F(xiàn)LO-LFY結(jié)構(gòu)域。
49.權(quán)利要求48的方法，其中所述LFY樣多肽具有與SEQID NO: 146至少50%序列同一性。
50.權(quán)利要求48或49的方法，其中所述受調(diào)節(jié)的表達(dá)通過(guò)在植物中導(dǎo)入和表達(dá)編碼LFY樣多肽的核酸來(lái)實(shí)現(xiàn)。
51.權(quán)利要求48-50的任一項(xiàng)的方法，其中所述編碼LFY樣多肽的核酸編碼表A4中列出的任一蛋白質(zhì)，或是此類(lèi)核酸的一部分，或者是能夠與此類(lèi)核酸雜交的核酸。
52.權(quán)利要求48-51的任一項(xiàng)的方法，其中所述核酸序列編碼表A4中給出的任何蛋白質(zhì)的直向同源物或旁系同源物。
53.權(quán)利要求48-52的任一項(xiàng)的方法，其中所述增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀包括相對(duì)于對(duì)照植物增加的產(chǎn)量，優(yōu)選的增加的種子產(chǎn)量。
54.權(quán)利要求48-53的任一項(xiàng)的方法，其中所述增強(qiáng)的產(chǎn)量相關(guān)性狀是在非脅迫條件下獲得的。
55.權(quán)利要求50-54的任一項(xiàng)的方法，其中所述核酸與組成型啟動(dòng)子，優(yōu)選的與G0S2啟動(dòng)子，最優(yōu)選的與來(lái)自稻的G0S2啟動(dòng)子有效連接。
56.權(quán)利要求48-55的任一項(xiàng)的方法，其中所述編碼LFY樣多肽的核酸是植物來(lái)源的，優(yōu)選的來(lái)自雙子葉植物，還優(yōu)選的來(lái)自十字花科(Brassicaceae),更優(yōu)選的來(lái)自擬南芥屬(Arabidopsis),最優(yōu)選的來(lái)自擬南芥(Arabidopsis thaliana)。
57.通過(guò)前述任一項(xiàng)的權(quán)利要求的方法可獲得的植物或其部分，包括種子，其中所述植物或其部分包含編碼LFY樣多肽的重組核酸。
58.構(gòu)建體，包含: (i)編碼如權(quán)利要求48或49定義的LFY樣多肽的核酸； (ii)能夠驅(qū)動(dòng)(a)的核酸序列表達(dá)的一種或多種控制序列；和任選的 (iii)轉(zhuǎn)錄終止序列。
59.權(quán)利要求58的構(gòu)建體，其中一種所述控制序列是組成型啟動(dòng)子，優(yōu)選的是G0S2啟動(dòng)子，最優(yōu)選的是來(lái)自稻的G0S2啟動(dòng)子。
60.權(quán)利要求58或59的構(gòu)建體在方法中的用途，所述方法用于制備相對(duì)于對(duì)照植物，具有增加的產(chǎn)量，特別是增加的種子產(chǎn)量的植物。
61.用權(quán)利要求58或59的構(gòu)建體轉(zhuǎn)化的植物、植物部分或植物細(xì)胞。
62.用于生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因植物的方法，所述轉(zhuǎn)基因植物相對(duì)于對(duì)照植物具有增加的產(chǎn)量，特別是增加的種子產(chǎn)量，包括: (i)在植物中導(dǎo)入和表達(dá)編碼如權(quán)利要求48或49定義的LFY樣多肽的核酸；和 (ii)在促進(jìn)植物生長(zhǎng)和發(fā)育的條件下培養(yǎng)植物細(xì)胞。
63.相對(duì)于對(duì)照植物具有增加的產(chǎn)量，特別是增加的種子產(chǎn)量的轉(zhuǎn)基因植物，或者源自所述轉(zhuǎn)基因植物的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，所述轉(zhuǎn)基因植物獲得自編碼如權(quán)利要求48或49定義的LFY樣多肽的核酸的受調(diào)節(jié)的表達(dá)。
64.權(quán)利要求57、61或63的轉(zhuǎn)基因植物，或源自它們的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中所述植物是作物植物或單子葉植物或谷類(lèi)，例如稻、玉米、小麥、大麥、谷子(millet)、裸麥(rye)、黑小麥(triticale)、高粱、二粒小麥、斯佩爾特小麥(spelt)、黑麥屬(secale)、單粒小麥、埃塞俄比亞畫(huà)眉草(teff)、蜀黍(milo)和燕麥。
65.權(quán)利要求64的植物的可收獲部分，其中所述可收獲的部分優(yōu)選的是種子。
66.源自權(quán)利要求64的植物和/或源自權(quán)利要求65的植物的可收獲部分的產(chǎn)物。
67.編碼LFY樣多肽的核酸在相對(duì)于對(duì)照植物，在植物中增加產(chǎn)量，特別是增加種子產(chǎn)量中的用途。
【文檔編號(hào)】C12N15/82GK103834683SQ201410036491
【公開(kāi)日】2014年6月4日 申請(qǐng)日期:2009年6月10日 優(yōu)先權(quán)日:2008年6月20日
【發(fā)明者】A·I·桑茲莫林納羅, Y·海茨費(fèi)爾德, V·弗蘭卡德, C·勒佐 申請(qǐng)人:巴斯夫植物科學(xué)有限公司