一種鼠李糖乳酸桿菌atcc 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法
【專利摘要】一種鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法，其特征是利用庫拉索蘆薈原汁與鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469共發(fā)酵，通過設(shè)定不同的溫度梯度和PH梯度，經(jīng)活菌計(jì)數(shù)后，確定其最佳發(fā)酵條件。用蘆薈發(fā)酵液對(duì)致病菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，確定其抗菌能力；并通過對(duì)其抗氧化性指標(biāo)的測(cè)定，如DPPH自由基清除能力的測(cè)定、鐵離子螯合能力的測(cè)定和總還原力的測(cè)定等，初步確定了該蘆薈益生菌發(fā)酵液的抗氧化能力，并進(jìn)行評(píng)價(jià)，以實(shí)現(xiàn)蘆薈洗液和蘆薈飲品的研制。
【專利說明】一種鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明主要涉及鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈原汁共發(fā)酵條件的摸索，將發(fā)酵液進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，測(cè)定其并抑菌效果；并對(duì)發(fā)酵液的抗氧化能力進(jìn)行了測(cè)定和評(píng)價(jià)，主要用于今后相關(guān)蘆薈洗液和蘆薈飲品的研制，具體涉及種鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]蘆薈屬百合科草本植物，蘆薈凝膠中含有豐富的多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、活性酶及對(duì)人體十分有益的微量元素。它具有多重功效，美白、保濕、控油、除痘等作用。并且蘆薈提取液常添加在食品、藥品、牙膏及化妝品中，不僅具有抗細(xì)菌、防止皮膚干裂或油脂分泌多、對(duì)治療雀斑、青春痘和防止脫發(fā)、去頭屑、消炎、愈合傷口、免疫、抗腫瘤都有極好的療效。
[0003]益生菌是指一類對(duì)人和動(dòng)物有益的細(xì)菌，指投入后通過改善宿主腸道菌群生態(tài)平衡而發(fā)揮有益作用，提高宿主健康水平和使宿主健康達(dá)到最佳狀態(tài)的活菌制劑及其代謝產(chǎn)物，各種食品中更是添加多種益生菌，增強(qiáng)食品營養(yǎng)價(jià)值。
[0004]鼠李糖乳桿菌，從屬于乳桿菌屬，有調(diào)節(jié)微生態(tài)平衡、增強(qiáng)宿主腸道抵抗力、預(yù)防和治療腹瀉、消除過敏的功能，動(dòng)物和人體試驗(yàn)表明該菌有一定的抑菌效果和加強(qiáng)免疫系統(tǒng)的功效，能維持健康的腸道菌群，可用于各種食品，保健食品和微生態(tài)制品或藥品、腐乳、
豆豉、豆醬等。
[0005]本發(fā)明采用鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈原汁進(jìn)行共發(fā)酵，研究了發(fā)酵液的抗氧化能力和發(fā)酵液的抑菌能力，并進(jìn)行了評(píng)價(jià)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明主要用于蘆薈洗液和蘆薈飲品的研制，對(duì)研制前期的蘆薈發(fā)酵液最佳條件進(jìn)行探索，并進(jìn)行抗氧化性的測(cè)定，評(píng)價(jià)蘆薈發(fā)酵液產(chǎn)品研制過程中具有的優(yōu)勢(shì)，本發(fā)明提供一種鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法。
[0007]本發(fā)明所述制備方法包括下列步驟:
1、蘆薈的選擇和制備:采選新鮮、飽滿、肉質(zhì)肥厚的蘆薈葉片，剔除帶有病斑、軟腐的葉片，葉片均重30(T400 g;葉片采用75%酒精進(jìn)行表面消毒，去除蘆薈葉表面皮層，采用榨汁機(jī)榨汁，分裝后，6000 rpm/min離心10 min，再次分裝，制成蘆薈原汁，所述蘆薈為庫拉索蘆薈；
2、采用巴氏消毒法將蘆薈原汁滅菌，55°C處理30 min, 4 1:保存?zhèn)溆茫?br> 3、鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469的活化
A.從-80 °C冰箱取出鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，按培養(yǎng)基體積5%接種于5 mL MRS培養(yǎng)基中，于37 °C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
[0008]B.取過夜培養(yǎng)的鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，按按培養(yǎng)基體積5%接種5 mLMRS培養(yǎng)基中，二次活化。
[0009]4、最佳發(fā)酵條件的設(shè)定
A.設(shè)定溫度梯度分別為25°C、30 °C、37 °C、42 °C，在上述不同的發(fā)酵溫度條件下取5 mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469接種量為蘆薈原汁體積的5%，發(fā)酵20 h，得到不同溫度條件下的蘆薈發(fā)酵液；
B.取上述各蘆薈發(fā)酵液，加生理鹽水按11?16比例稀釋，取50μ L涂板，過夜培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，確定最佳發(fā)酵溫度；
C.在最佳溫度的條件下，設(shè)定蘆薈原汁PH梯度為3、4、5、6、7、8、9，在上述不同的PH條件下取5 mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469接種量為蘆薈原汁體積的5%，發(fā)酵20 h，采用PH計(jì)調(diào)節(jié)PH ；
D.取上述各蘆薈發(fā)酵液，加生理鹽水按11?16比例稀釋，取50μ L涂板，過夜培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，確定最佳發(fā)酵ΡΗ。
[0010]5、在最佳發(fā)酵溫度和PH值條件下發(fā)酵培養(yǎng):在步驟4確定最佳PH和溫度后，取5mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，接種蘆薈原汁5%的鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，發(fā)酵48 h，10000 rpm/min離心10 min，重新分裝，獲得鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液，4 °C保存?zhèn)溆谩?br> [0011]6、蘆薈發(fā)酵液抗氧化性指標(biāo)的測(cè)定和后期評(píng)價(jià) A.DPPH自由基清除能力的測(cè)定
取2 ml蘆薈發(fā)酵液，加入0.2 mol/LDPPH乙醇溶液2ml，黑暗下室溫反應(yīng)30 min，然后用等體積的三氯甲烷抽提，取上清517nm測(cè)0D，對(duì)照為去離子水加DPPH溶液。
[0012]B.羥基自由基清除能力的測(cè)定
取2 mmol/L的硫酸亞鐵溶液I mL, 6 mmol/L過氧化氫I mL, 6 mmol/L水楊酸I mL,并加入蘆薈發(fā)酵液I mL，靜置30 min，以蒸餾水為參比，在510 nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算羥自由基的清除率。
[0013]C.3，5- 二硝基水楊酸法測(cè)定還原糖
a.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:取8支15 mmX 180 mm試管,分別編號(hào)為O至7,向其中依次加入
0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.4、1.6、2.0 mL的I mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后用蒸懼水定容到2 mL再依次加入1.5 mL水楊酸，水浴5 min，取出立即冷卻到室溫，加21.5 mL蒸餾水，搖勻，在540 nm處測(cè)定吸光度。
[0014]b.樣品中還原糖含量的測(cè)定:以標(biāo)準(zhǔn)曲線制作中O號(hào)為對(duì)照，向15 mmX 180 mm試管中加入I mL樣品溶液，I mL蒸餾水和1.5 mL水楊酸，水浴5 min，取出立即冷卻到室溫，加21.5 mL蒸餾水，搖勻，在540 nm處測(cè)定吸光度。
[0015]D.對(duì)Fe2+的螯合能力的測(cè)定
取0.5 mL蘆薈發(fā)酵液中加入0.4%的FeS04溶液0.1 mL混合均勻后，再加入0.1 mL1%的抗壞血酸溶液和0.2 mol/L氫氧化鈉溶液I mL，37°C下反應(yīng)20 min，然后用10%的三氯乙酸去除蛋白，取0.4 mL上清并加入4 mL 0.1%鄰二氮菲，室溫反應(yīng)10 min,測(cè)定536 nm處吸光度。
[0016]E.總還原力的測(cè)定取I mL的樣品，加入I mL的磷酸緩沖液和1%鐵氰化鉀溶液I mL，混勻，在50°C下保溫20 min,加入10 %的三氯乙酸溶液I mL,振蕩混勻后取I mL的混合液，加入4 mL去離子水和0.1 %的三氯化鐵溶液0.4 mL，靜置10 min，用去離子水為空白，在700 nm下進(jìn)行比色，吸光度的值越大，說明還原力越強(qiáng)。
[0017]7、抑菌試驗(yàn)
A.活化鼠傷寒、腸炎沙門、志賀301、福氏志賀、單增ATCC、金黃色葡萄球菌大腸0157、痤瘡丙酸桿菌，過夜培養(yǎng)。
[0018]B.將8株致病菌的菌體濃度調(diào)至18 CFU/mL左右，分別取100 μ L菌液涂布于LB平板。
[0019]C.待菌液吹干后，在平板中小心放入無菌的牛津杯；將發(fā)酵液上清10000 rpm/min離心10 min,向牛津杯中加入發(fā)酵液上清。
[0020]D.37°C培養(yǎng)6-8 h，每隔2?3 h觀察。
[0021]E.測(cè)量平板中的抑菌圈直徑，并照相。
[0022]8、蘆薈發(fā)酵液后期評(píng)價(jià)
針對(duì)步驟6中的抗氧化性指標(biāo)測(cè)定結(jié)果，對(duì)該蘆薈發(fā)酵液上清進(jìn)行抗氧化能力的評(píng)價(jià)。
[0023]
本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明所制備的發(fā)酵飲料，安全無毒，將蘆薈本身原有的保健功能和鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469的益生效果完美結(jié)合在一起，具有美容、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、促進(jìn)腸道蠕動(dòng)等功效，有益于人體健康。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0024]圖1不同溫度活菌計(jì)數(shù)圖2不同PH活菌計(jì)數(shù)；
圖3鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469發(fā)酵液抗氧化參數(shù)測(cè)定；
圖4還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線；
圖5鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469蘆薈發(fā)酵液抑菌結(jié)果；
圖6鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469蘆薈發(fā)酵液抑菌圖片。

【具體實(shí)施方式】
[0025]實(shí)施例1:
一種鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法:
1、蘆薈的選擇和制備:采選新鮮、飽滿、肉質(zhì)肥厚的蘆薈葉片，剔除帶有病斑、軟腐的葉片，葉片均重30(T400 g;葉片采用75%酒精進(jìn)行表面消毒，去除蘆薈葉表面皮層，采用榨汁機(jī)榨汁，分裝后，6000 rpm/min離心10 min，再次分裝，制成蘆薈原汁，所述蘆薈為庫拉索蘆薈；
2、采用巴氏消毒法將蘆薈原汁滅菌，55°C處理30 min, 4 1:保存?zhèn)溆茫?br> 3、鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469的活化
A.從-80 °C冰箱取出鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，按培養(yǎng)基體積5%接種于5 mL MRS培養(yǎng)基中，于37 °C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。
[0026]B.取過夜培養(yǎng)的鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，按按培養(yǎng)基體積5%接種5 mLMRS培養(yǎng)基中，二次活化。
[0027]4、最佳發(fā)酵條件的設(shè)定
A.設(shè)定溫度梯度分別為25°C、30 °C、37 °C、42 °C，在上述不同的發(fā)酵溫度條件下取5 mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469接種量為蘆薈原汁體積的5%，發(fā)酵20 h，得到不同溫度條件下的蘆薈發(fā)酵液；
B.取上述各蘆薈發(fā)酵液，加生理鹽水按11?16比例稀釋，取50μ L涂板，過夜培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，確定最佳發(fā)酵溫度；
C.在最佳溫度的條件下，設(shè)定蘆薈原汁PH梯度為3、4、5、6、7、8、9，在上述不同的PH條件下取5 mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469接種量為蘆薈原汁體積的5%，發(fā)酵20 h，采用PH計(jì)調(diào)節(jié)PH ；
D.取上述各蘆薈發(fā)酵液，加生理鹽水按11?16比例稀釋，取50μ L涂板，過夜培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，確定最佳發(fā)酵ΡΗ。
[0028]5、在最佳發(fā)酵溫度和PH值條件下發(fā)酵培養(yǎng):在步驟4確定最佳PH和溫度后，取5mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，接種蘆薈原汁5%的鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，發(fā)酵48 h，10000 rpm/min離心10 min，重新分裝，獲得鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液，4 °C保存?zhèn)溆谩?br> [0029]實(shí)施例2:抗氧化指標(biāo)的測(cè)定及評(píng)價(jià)
1、相關(guān)試劑:0.2 mmol/T, DPPH 乙醇溶液；150 mmol/T, pH 8.0 Tris-Hcl ；1.2 mmol /L鄰苯三酚；0.4% FeS04: FeS04*7H20 ；1%抗壞血酸；0.2 mol/L氫氧化鈉；10%三氯乙酸；0.1%鄰二氮菲；P H為6.6磷酸緩沖液；0.1%三氯化鐵。
[0030]2、確定最佳PH和溫度后，發(fā)酵48 h, 10000 rpm/min離心10 min,重新分裝,獲的鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液，4 °C保存?zhèn)溆谩?br> [0031]3、抗氧化指標(biāo)的測(cè)定
A.DPPH自由基清除能力的測(cè)定
取2ml蘆薈發(fā)酵液，加入0.2mol/LDPPH乙醇溶液2ml，黑暗下室溫反應(yīng)30min，然后用等體積的三氯甲烷抽提，取上清517nm測(cè)0D，對(duì)照為去離子水加DPPH溶液。
[0032]B.羥基自由基清除能力的測(cè)定
取2 mmol/L的硫酸亞鐵溶液I mL, 6 mmol/L過氧化氫I mL, 6 mmol/L水楊酸I mL,并加入蘆薈發(fā)酵液I mL，靜置30 min，以蒸餾水為參比，在510 nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算羥自由基的清除率。
[0033]C.3，5-二硝基水楊酸法測(cè)定還原糖
a.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:取8支15 mmX 180 mm試管,分別編號(hào)為O至7,向其中依次加入
0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.4、1.6、2.0 mL的I mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后用蒸懼水定容到2 mL再依次加入1.5 mL水楊酸，水浴5 min，取出立即冷卻到室溫，加21.5 mL蒸餾水，搖勻，在540 nm處測(cè)定吸光度。
[0034]b.樣品中還原糖含量的測(cè)定:以標(biāo)準(zhǔn)曲線制作中O號(hào)為對(duì)照，向15 mmX180 mm試管中加入I mL樣品溶液，I mL蒸餾水和1.5 mL水楊酸，水浴5 min，取出立即冷卻到室溫，加21.5 mL蒸餾水，搖勻，在540 nm處測(cè)定吸光度。
[0035]D.對(duì)Fe2+的螯合能力的測(cè)定
取0.5 mL蘆薈發(fā)酵液中加入0.4%的FeS04溶液0.1 mL混合均勻后，再加入0.1 mL1%的抗壞血酸溶液和0.2 mol/L氫氧化鈉溶液I mL，37°C下反應(yīng)20 min，然后用10%的三氯乙酸去除蛋白6000 rpm, 10 min,4°C,取0.4 mL上清并加入4 mL 0.1%鄰二氮菲，室溫反應(yīng)10 min，測(cè)定536 nm處吸光度。
[0036]E.總還原力的測(cè)定
取I mL的樣品，加入I mL的P H為6.6磷酸緩沖液和1%鐵氰化鉀溶液I mL，混勻，在50°C下保溫20 min,加入10 %的三氯乙酸溶液I mL，振蕩混勻后取I mL的混合液，加入4 mL去離子水和0.1 %的三氯化鐵溶液0.4 mL，靜置10 min，用去離子水為空白，在700 nm下進(jìn)行比色，吸光度的值越大，說明還原力越強(qiáng)。
[0037]實(shí)施例3:抑菌試驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)材料:鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469、鼠傷寒、腸炎沙門、志賀301、福氏志賀、單增JΤ?Γ、金黃色葡萄球菌com/77、大腸0157、痤瘡丙酸桿菌、庫拉索蘆薈、MRS培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基、SLB培養(yǎng)基、牛津杯。
[0038]實(shí)驗(yàn)步驟
1.活化鼠傷寒、腸炎沙門、志賀301、福氏志賀、單增J/tr、金黃色葡萄球菌com/77、大腸0157、痤瘡丙酸桿菌，過夜培養(yǎng)。
[0039]2.將8株致病菌的菌體濃度調(diào)至18 CFU/mL左右，分別取100 μ L菌液涂布于LB平板。
[0040]3.待菌液吹干后，在平板中小心放入無菌的牛津杯；將發(fā)酵液上清10000 rpm/min離心10 min,向牛津杯中加入發(fā)酵液上清。
[0041]4.37°C培養(yǎng)6-8 h，每隔2?3 h觀察。
[0042]5.測(cè)量平板中的抑菌圈直徑，并照相。
[0043]為評(píng)價(jià)鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469能否在蘆薈原汁中大量生長及評(píng)價(jià)其最適發(fā)酵溫度和pH，我們對(duì)不同溫度和pH蘆薈原液中的嗜熱鏈球菌ATCC 14485進(jìn)行了計(jì)數(shù)，
如圖1，2結(jié)果表明，鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液在發(fā)酵20 h后，當(dāng)溫度為37 °C，PH=7時(shí)，活菌計(jì)數(shù)結(jié)果細(xì)菌數(shù)量最多，基本達(dá)到18數(shù)量級(jí)。因此，我們將鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液發(fā)酵最佳條件設(shè)定為37 °C，PH=7。
[0044]為確保我們制備的蘆薈發(fā)酵液具有良好的抗氧化性，我們對(duì)常見的幾個(gè)抗氧化性指標(biāo)進(jìn)行了評(píng)價(jià)。如圖3、4結(jié)果表明，在37 °C, PH=7的條件下發(fā)酵48 h, 10000 rpm/min10離心后，發(fā)酵液澄清透亮。DPPH自由基清除能力實(shí)驗(yàn)中，清除率達(dá)到36.48%，說明鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液對(duì)自由基清除能力較弱；羥基自由基清除能力的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，清除率為38.18%，說明鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液對(duì)羥基自由基清除能力較弱；對(duì)Fe2+的螯合能力的測(cè)定中，螯合率為90.04%,說明鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液對(duì)鐵離子的螯合能力較強(qiáng)；總還原力的測(cè)定實(shí)驗(yàn)，數(shù)值為0.307，說明鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液具有較強(qiáng)還原力；在還原糖測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出還原糖含量為24.76 mg/mL。
[0045]同時(shí)，我評(píng)價(jià)蘆薈發(fā)酵液對(duì)致病菌的拮抗能力，我們?cè)u(píng)價(jià)了蘆薈發(fā)酵液對(duì)幾種常見食源性致病菌的抑制效果。
[0046]如圖5、6，結(jié)果表明，針對(duì)我們選用的八種致病菌:鼠傷寒、腸炎沙門、福氏志賀、大腸0157、單增ATCC、志賀301、金黃色葡萄球菌cowanl、痤瘡丙酸桿菌，通過抑菌實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液對(duì)痤瘡丙酸桿菌抑制效果最好；對(duì)鼠傷寒、腸炎沙門、福氏志賀、志賀301、金黃色葡萄球菌cowanl效果次之；對(duì)大腸0157、單增ATCC效果最差。
【權(quán)利要求】
1.一種鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法，其特征是: (1)蘆薈的選擇和制備:采選新鮮、飽滿、肉質(zhì)肥厚的蘆薈葉片，剔除帶有病斑、軟腐的葉片，葉片均重30(T400 g;葉片采用75%酒精進(jìn)行表面消毒，去除蘆薈葉表面皮層，采用榨汁機(jī)榨汁，分裝后，6000 rpm/min離心10 min,再次分裝,制成蘆薈原汁； (2)采用巴氏消毒法將蘆薈原汁滅菌，55°C處理30 min, 4 1:保存?zhèn)溆茫? (3)鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469的活化 A.從-80°C冰箱取出鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，按培養(yǎng)基體積5%接種于5 mL MRS培養(yǎng)基中，于37 溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜； B.取過夜培養(yǎng)的鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469，按按培養(yǎng)基體積5%接種5 mLMRS培養(yǎng)基中，二次活化； (4)最佳發(fā)酵條件的設(shè)定 A.設(shè)定溫度梯度分別為25°C、30 °C、37 °C、42 °C，在上述不同的發(fā)酵溫度條件下取5 mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469接種量為蘆薈原汁體積的5%，發(fā)酵20 h，得到不同溫度條件下的蘆薈發(fā)酵液； B.取上述各蘆薈發(fā)酵液，加生理鹽水按11?16比例稀釋，取50μ L涂板，過夜培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，確定最佳發(fā)酵溫度； C.在最佳溫度的條件下，設(shè)定蘆薈原汁PH梯度為3、4、5、6、7、8、9，在上述不同的PH條件下取5 mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469接種量為蘆薈原汁體積的5%，發(fā)酵20 h，采用PH計(jì)調(diào)節(jié)PH ； D.取上述各蘆薈發(fā)酵液，加生理鹽水按11?16比例稀釋，取50μ L涂板，過夜培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，確定最佳發(fā)酵PH ； (5)在最佳發(fā)酵溫度和PH值條件下發(fā)酵培養(yǎng):在步驟4確定最佳PH和溫度后，取5mL蘆薈原汁，加入蘆薈原汁體積的10%脫脂乳和2%葡萄糖，接種蘆薈原汁5%的鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469，發(fā)酵48 h，10000 rpm/min離心10 min，重新分裝，獲得鼠李糖乳酸桿菌ATCC 7469蘆薈發(fā)酵液，4 °C保存?zhèn)溆谩?br> 2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種鼠李糖乳酸桿菌ATCC7469與蘆薈共發(fā)酵飲料的制備方法，其特征是:所述蘆薈為庫拉索蘆薈。
【文檔編號(hào)】A23L2/38GK104382163SQ201410607668
【公開日】2015年3月4日 申請(qǐng)日期:2014年11月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月3日
【發(fā)明者】陳廷濤, 辛洪波, 王鑫 申請(qǐng)人:南昌大學(xué)