出血性大腸桿菌o157:h7選擇性顯色培養(yǎng)基及其檢測(cè)試紙的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種出血性大腸桿菌O157：H7選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每1000mL培養(yǎng)基含有如下重量的組分：結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂15-25g、特異性酶顯色底物5-25g、二甲基甲酰胺0.05-20g、酵母粉1-5g、山梨醇1-8g、頭孢克肟15-25g、鼠李糖2-8g、亞碲酸鉀2-7g、水楊苷1-5g、氯化鈉5-10g、月桂基硫酸鈉0.1-0.3g、萬古霉素0.02-0.05g、余量為水。本發(fā)明還提供了一種含有所述出血性大腸桿菌O157：H7選擇性顯色培養(yǎng)基的檢測(cè)試紙。本發(fā)明在CT-SMAC培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加水楊苷、萬古霉素，進(jìn)一步提高選擇性和特異性，檢出率高、檢出時(shí)間短。
【專利說明】出血性大腸桿菌0157 :H7選擇性顯色培養(yǎng)基及其檢測(cè)試紙

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種適用于出血性大腸桿菌0157 :H7的選擇性顯色培養(yǎng)基，以及采用 該選擇性顯色培養(yǎng)基的檢測(cè)試紙。

【背景技術(shù)】
[0002] 產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌（shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)也稱為 產(chǎn)vero毒素大腸桿菌，是近來新出現(xiàn)的最重要的食源性病原菌。STEC主要引起胃腸炎和一 系列并發(fā)癥，如出血性腹瀉（HC)和導(dǎo)致兒童腎衰竭的溶血性尿毒綜合征（HUs)。腸出血性 大腸桿菌（enterohaemorrhagic Escherichia coli，EHEC)0157 :H7 是其中一種。反當(dāng)動(dòng) 物，特別是牛、山羊和綿羊已被認(rèn)定是其重要宿主。它通過被污染的未煮熟的肉類、未消毒 的牛奶和被糞便污染的蔬菜和水等傳播，人-人之間的密切接觸傳播也有報(bào)道。大部分引 起HC和HUS的爆發(fā)和散發(fā)病例與0157 :H7有關(guān)。
[0003] 0157可以迅速的分解乳糖，因此在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上無法和其他大腸桿菌相區(qū) 另IJ。然而不像大約80%的其他大腸桿菌，大部分0157經(jīng)過培養(yǎng)后，不分解山梨醇。因此利 用這個(gè)特性建立了山梨醇-康凱瓊脂（SMC)培養(yǎng)方法，用山梨醇取代麥康凱瓊脂中的乳 糖，便可制備SMAC。已證明SMAC對(duì)分離0157是很有效的選擇性培養(yǎng)基之一，目前被廣泛用 于實(shí)驗(yàn)室臨床診斷。然而，近幾年在世界各地發(fā)現(xiàn)了分解山梨醇的0157菌株，因此分離過 程中應(yīng)注意山梨醇發(fā)酵陽(yáng)性菌株的挑取，以防漏檢。
[0004] 一些非0157血清型的大腸埃希菌也不發(fā)酵山梨醇；同時(shí)一些其他種屬的非發(fā)酵 山梨醇細(xì)菌也存在于人和動(dòng)物的糞便中，特別是變形桿菌屬和氣單胞菌屬細(xì)菌。基于這種 情況，這就需要發(fā)展能抑制糞便中不發(fā)酵山梨醇的細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。頭孢克肟能抑制變 形桿菌的生長(zhǎng)而不抑制大腸桿菌，0157不發(fā)酵鼠李糖，而大部分不發(fā)酵山梨醇的大腸桿菌 發(fā)酵鼠李糖。于是，人們就制備了頭孢克肟-鼠李糖-山梨醇麥康凱培養(yǎng)基（CR-SMC)。亞 碲酸鉀80年前就被用于病原菌的分離，包括棒狀桿菌、白喉?xiàng)U菌、金黃色葡萄球菌、霍亂弧 菌和志賀氏菌。它對(duì)0157也具有選擇性，于是發(fā)展了頭孢克肟-亞碲酸鉀-山梨醇麥康凱 培養(yǎng)基（CT-SMAC)。然而，仍然有某些細(xì)菌能在CT-SMAC上形成與0157相似的菌落，使得在 CT-SMAC平板上選擇0157的困難增加。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供一種適用于出血性大腸桿菌0157 :H7的選擇性顯色培養(yǎng)基，以及采用 該選擇性顯色培養(yǎng)基的檢測(cè)試紙，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。
[0006] 本發(fā)明首先涉及一種出血性大腸桿菌0157 :H7選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每IOOOmL 培養(yǎng)基含有如下重量的組分：
[0007]

【權(quán)利要求】
1. 一種出血性大腸桿菌0157 :H7選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，其中每IOOOmL培養(yǎng) 基含有如下重量的組分： 結(jié)晶紫中性紅膽盆球脂 15_25g、 特異性酶顯色底物 5-2 5g、 二曱基曱酰胺 0. 05-20g、 酵母粉 l-5g、 山梨醇 l-8g、 頭孢克肟 15-25g、 鼠李糖 2-8 g、 亞碲酸鉀 2-7 g、 水楊苷 l-5g、 氯化鈉 5-1 Og、 月桂基石/u酸納 0. 1-0. 3g、 萬古霉素 0. 02-0. 05g、 余量為水。
2. 如權(quán)利要求1所述的出血性大腸桿菌0157 :H7選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所 述特異性酶顯色底物是5-溴-4-氯-3-吲哚-a -D-葡萄糖苷。
3. -種出血性大腸桿菌0157 :Η7選擇性顯色培養(yǎng)基檢測(cè)試紙，其特征在于，其中至少 含有一吸附有權(quán)利要求1或2所述出血性大腸桿菌0157 :Η7選擇性顯色培養(yǎng)基的吸水濾 紙。
【文檔編號(hào)】C12Q1/10GK104372066SQ201410681195
【公開日】2015年2月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月24日
【發(fā)明者】金京勛 申請(qǐng)人:蘇州嘉禧蘿生物科技有限公司