本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、益生菌可改善機體微生態(tài)平衡，在促進營養(yǎng)吸收、控制腸道感染和調(diào)節(jié)免疫功能等方面具有特殊的功效，但存在胃腸道環(huán)境難定植、口服生物利用度低等問題。生物被膜是多個細菌黏附于非生物或生物表面，分泌胞外聚合物，并將自身包裹其中形成的一種有組織的細菌集團，包含胞外多糖、蛋白質(zhì)、胞外dna和脂質(zhì)等多種組成成分，是一個具有三維立體空間結(jié)構(gòu)的聚集體。被膜狀態(tài)的益生菌較浮游菌在抗逆性、對抗病原菌和調(diào)節(jié)免疫功能等方面具有明顯優(yōu)勢。

2、有報道指出，大多數(shù)益生菌在口服后和停止食用后不久隨糞便排出結(jié)腸，臨床效果往往不佳，主要與其不能在腸道中有效定植有關(guān)。然而，定植并非易事。口服是一種常見的益生菌攝入方式，但由于胃腸道環(huán)境惡劣，導(dǎo)致其生物利用度普遍偏低。對此，生物被膜作為一種新策略引起了很多學(xué)者的關(guān)注。生物被膜是細菌種群產(chǎn)生以黏附于某一界面的封閉基質(zhì)，其內(nèi)部細菌互相附著，成為一種細菌群體共同生存的形式，任何界面都可能有生物被膜產(chǎn)生。

3、大部分益生菌具有形成生物被膜的特性，利用生物被膜可使得益生菌在體內(nèi)存活、定植更有優(yōu)勢，從而提高療效與抗病菌的能力，展現(xiàn)出良好的研究與應(yīng)用前景，對進一步探明益生菌發(fā)揮作用的機制、開發(fā)高效益生菌產(chǎn)品等具有重大意義。

4、真菌次級代謝物具有多種生物活性，對人類和動物具有潛在的藥用價值。例如，真菌次級代謝物可以抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、解毒等。真菌的腸道定植難度更大，意義也更大。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑及其制備方法，該抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑能夠防止消化道中消化液對真菌的殺滅，有效提高腸道定植率，長期保持和增強真菌菌絲體的活性，產(chǎn)生有利的次級代謝產(chǎn)物。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑的制備方法，包括如下步驟：

3、s1.將枯草芽孢桿菌接種在加入蒙脫石粉末的lb培養(yǎng)基中，進行振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)24-48h，將發(fā)酵液離心收集沉淀，重懸于pbs溶液中，高速均質(zhì)，再進行超聲處理，靜置后收集懸浮液，使多糖含量為10-15g/l，即得粗生物被膜懸浮液；

4、生物被膜中主要活性成分是多糖，通過前面加入pbs溶液可以調(diào)節(jié)懸浮液中多糖含量。多糖含量用苯酚-硫酸法測定。一般情況下，是加入pbs溶液處理后，得到的濃度比預(yù)計濃度大，然后測定多糖含量后，再兌入pbs溶液，調(diào)至所需的濃度。

5、s2.將酵母粉、蛋黃卵磷脂和乳酸鈣混合均勻，制得復(fù)合營養(yǎng)素；

6、s3.將大豆低聚糖、云芝多糖和分離乳清蛋白混合均勻，制得復(fù)合益生元；

7、s4.在步驟s1制得的粗生物被膜懸浮液中加入步驟s2制得的復(fù)合營養(yǎng)素和步驟s3制得的復(fù)合益生元，采用60co輻照滅菌后，加入蛹蟲草成熟子實體和雞油菌成熟子實體，在2-8℃下充分攪拌后再加入殼寡糖，之后取出蛹蟲草成熟子實體和雞油菌成熟子實體，剩余的液體冷凍干燥得到抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑。

8、優(yōu)選的，步驟s1中，所述蒙脫石粉末的平均粒徑范圍為45-90μm，加入量為5-10w/v％。

9、優(yōu)選的，步驟s1中，所述振蕩培養(yǎng)氧氣含量控制為5-8v/v％。

10、優(yōu)選的，步驟s2中，所述酵母粉與蛋黃卵磷脂、乳酸鈣的投料比為10g:(300-800)mg:(100-350)mg。

11、優(yōu)選的，步驟s3中，所述大豆低聚糖、云芝多糖和分離乳清蛋白的投料比為10g:(1.0-2.0)g:(1.0-3.0)g。

12、優(yōu)選的，步驟s4中，所述粗生物被膜懸浮液中加入復(fù)合營養(yǎng)素和復(fù)合益生元的量分別為5-8w/v％和5-10w/v％。

13、優(yōu)選的，步驟s4中，所述蛹蟲草成熟子實體和雞油菌成熟子實體的加入量分別為1-1.5w/v％和1-1.5w/v％。

14、優(yōu)選的，步驟s4中，所述殼寡糖的加入量8-10w/v％。

15、本發(fā)明還提供了一種上述制備方法制備得到的抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑。

16、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

17、1)本發(fā)明利用枯草芽孢桿菌的生物被膜包裹真菌活性孢子，并補充益生元和營養(yǎng)素，通過生物大分子大豆低聚糖、云芝多糖和分離乳清蛋白以ca2+為核心構(gòu)建三維網(wǎng)狀體系，在其三維結(jié)構(gòu)內(nèi)部吸附營養(yǎng)因子，包括維生素b族、卵磷脂，使其經(jīng)胃腸環(huán)境在腸道中定植并誘導(dǎo)萌發(fā)，同時產(chǎn)生具有生理活性的次級代謝產(chǎn)物。

18、2)采用蒙脫石的粗糙表面結(jié)構(gòu)和大的比表面積能夠有效提高生物被膜的產(chǎn)量。在高速均質(zhì)過程中，蒙脫石互相接觸碰撞和摩擦，可以將附著在其表面的生物被膜完全剝離下來。

19、3)利用殼寡糖參與構(gòu)建三維網(wǎng)狀體系，殼寡糖具有氨基正離子，能夠有效結(jié)合真菌菌絲和孢子，提高其定植效率，也有利于真菌孢子的萌發(fā)。

20、4)蛹蟲草菌絲代謝能夠分泌蟲草素，而雞油菌菌絲代謝能夠分泌麥角硫因，前者具有免疫調(diào)節(jié)作用，后者具有抗氧化作用。

技術(shù)特征：

1.一種抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，所述加入蒙脫石粉末的lb培養(yǎng)基中，加入的蒙脫石粉末的平均粒徑范圍為45-90μm，加入量為5-10w/v％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，所述振蕩培養(yǎng)的氧氣含量控制為5-8v/v％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s2中，所述酵母粉、蛋黃卵磷脂、乳酸鈣的投料比為10g:(300-800)mg:(100-350)mg。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟s3中，所述大豆低聚糖、云芝多糖和分離乳清蛋白的投料比為10g:(1.0-2.0)g:(1.0-3.0)g。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s4中，所述粗生物被膜懸浮液中加入復(fù)合營養(yǎng)素和復(fù)合益生元的量分別為5-8w/v％和5-10w/v％。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s4中，所述蛹蟲草成熟子實體和雞油菌成熟子實體的加入量分別為1-1.5w/v％和1-1.5w/v％。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑及其制備方法，其特征在于，步驟s4中，所述殼寡糖的加入量8-10w/v％。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～8任一項所述制備方法制備得到抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，公開了一種抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑及其制備方法。該制備方法利用生物被膜將絲狀真菌孢子包裹同時加入復(fù)合益生元和復(fù)合營養(yǎng)素，得到抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑。該抗氧化免疫調(diào)節(jié)營養(yǎng)補劑能夠防止消化道中消化液對真菌的殺滅，有效提高腸道定植率，長期保持和增強真菌菌絲體的活性，產(chǎn)生有利的次級代謝產(chǎn)物。

技術(shù)研發(fā)人員：湯佳鵬,李瑞萌,李小蒙,張瑋,葛彥
受保護的技術(shù)使用者：南通大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10