專利名稱：一種新的生物組織包埋劑和包埋方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物組織包埋技術(shù)生物組織包埋法是生物技術(shù)領(lǐng)域常用的方法。傳統(tǒng)的包埋方法有石臘包埋法和塑料包埋法。前者存在有制作過程長(達2天左右)。組織內(nèi)脂質(zhì)成份不易保留、容易引起組織細胞收縮、對大多數(shù)酶的活性有不良影響、以及不能做源浮染色等不足;后者則存在有不能做免疫組織化學染色和需要昂貴的配套器材等不足。七十年代開始應(yīng)用的恒冷箱切片機雖然具有速度快和既能做酶組織化學染色、又能做免疫組織化學染色，但卻存在有難以制作5μm以下的較薄切片和連續(xù)切片，以及因冷凍而造成細胞結(jié)構(gòu)不清的缺陷。
本發(fā)明的目的是針對上述目前常用包埋方法的不足，提供一種新的生物組織包埋方法和相應(yīng)的新的包埋劑，使之具有操作簡便、成本低、速度快、既能作酶組化反應(yīng)切片又能做免疫組織化學反應(yīng)切片，并且對組織結(jié)構(gòu)具有良好的保護效果等特點。
本發(fā)明提供的生物組織包埋劑由下列物質(zhì)組成(為重量/體積百分比)丙烯酰胺10.00～14.00%甲叉雙丙烯酰胺0.28～0.67%三羥三甲基甲烷1.80～2.70%檸檬酸1.22～1.43%檸檬酸鈉7.50～1.50%蔗糖0.50～3.50%本發(fā)明所提供的使用上述包埋劑的新的生物組織包埋法的具體步驟如下
將擬切片的組織用固定劑(如福爾馬林或多聚甲醛等)固定之后水洗半小時，或直接將擬切片的組織置入盛有上述包埋劑的容器中浸泡1至3小時，加入促凝劑(過硫酸胺溶液和TEMED溶液)。凝固后取出切塊將切放入硅膠干燥器中3至8小時使其硬化。硬化后即可在普通石臘切片機上切片，將切片置入水中展開后貼片或薄片染色。
配制新型包埋劑的實施例取丙烯酰胺12.00克甲叉雙丙烯酰胺4.50克三羥三甲基氨基甲烷2.30克檸檬酸1.25克檸檬酸鈉10.00克蔗糖1.50克將上述物質(zhì)分別或混合后加入100毫升水溶液中使其溶解，即制成100毫升新型包埋劑，該包埋劑宜在4℃條件下保存。
促凝劑的配制取過硫酸銨0.1克溶于5毫升水溶液中取TEMED0.1毫升加水5毫升，將二液混合即制得10毫升促凝劑。
使用本發(fā)明提供的新型包埋劑和組織包埋方法，其包埋時間短，為8～10小時，且成本較目前使用的組織包埋方法低，操作簡便，利于推廣和基層單位應(yīng)用。該包埋方法能制作出較薄的切片(在0.5μm以下)。用該方法包埋作出的切片既能做酶組化反應(yīng)，又能做免疫組化反應(yīng)，對組織結(jié)構(gòu)的保存比較好，優(yōu)于目前使用的包埋法。
權(quán)利要求
1.一種新型的生物組織包埋劑，其特征在于這種生物組織包埋劑是含有丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺、三羥三甲基氨基甲烷、檸檬酸、檸檬酸鈉和蔗糖的水溶液。
2.一種新和生物組織包埋方法，其特片在于這種方法使用了權(quán)利要求1所述的新型生物組織包埋劑。
3.按照權(quán)利要求1所述的新型生和的包埋劑，其特征在于這種生物組織包埋劑的各組份的比例為(重量/體積百分比)丙烯酰胺 10.00～14.00%甲叉雙丙烯酰胺 0.28～0.67%三羥三甲基甲烷 1.80～2.70%檸檬酸 1.22～1.43%檸檬酸鈉 7.50～15.00%蔗糖 0.50～3.5%
全文摘要
一種新的生物組織包埋劑和使用該包埋劑的包埋方法，其特征在于這種包埋劑由丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺、三羥三甲基甲烷、檸檬酸、檸檬酸鈉和蔗糖組成。使用該包埋劑制作的組織切片具有速度快、切片薄、費用低、組織結(jié)構(gòu)保留完整、既能做酶組化反應(yīng)、又能做免疫組化反應(yīng)等優(yōu)點。
文檔編號C12N11/02GK1072779SQ91111069
公開日1993年6月2日 申請日期1991年11月27日 優(yōu)先權(quán)日1991年11月27日
發(fā)明者蔡立剛, 王健本 申請人:武漢同濟醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學研究所