使脾均質(zhì)化，并且平板接種在7H10 瓊脂上。
[0082] 魯計(jì)數(shù)在板上的菌落，并且分析數(shù)據(jù)。
[0083] 如在圖2和3中證明的，I. P或口服給予的阿米卡星脂質(zhì)卷為活性的，降低在脾中 細(xì)菌負(fù)載的數(shù)量。具有高鹽濃度的阿米卡星脂質(zhì)卷制劑口服進(jìn)行 結(jié)論：口服遞送阿米卡星脂質(zhì)卷制劑證明具有與I. P游離阿米卡星類似的體內(nèi)效力。
[0084] 實(shí)施例9氨基糖苷類藥物制劑的用于體外研究的高鹽程序 #9. 1實(shí)驗(yàn)制劑： 將2mg氨基糖苷類藥物在1.0 ml D. D水中通過(guò)0. 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50% 大豆PS在2. OmL無(wú)菌水中（脂質(zhì)體通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò)濾）合并，以形成含有 氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后向所得到的混合物中加入〇.206mL 0.1 M氯化鈣，以形成脂 質(zhì)卷。隨后用無(wú)菌水將混合物中的氨基糖苷類藥物的藥物濃度調(diào)節(jié)為〇.5mg/ml。為了制備 氨基糖苷類藥物的良好的結(jié)晶脂質(zhì)卷，其中脂質(zhì)：藥物比率為約10:1。
[0085] #9. 2實(shí)驗(yàn)制劑： 將2mg氨基糖苷類藥物在LOml D.D水中通過(guò)0. 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大 豆PS在2. OmL無(wú)菌水中（脂質(zhì)體通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò)濾）合并，以形成含有氨 基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后向所得到的混合物中加入0.206mL 0.1 M氯化鈣，以形成脂質(zhì) 卷。為了降低結(jié)晶脂質(zhì)卷的聚集尺寸，隨后將15mg氯化鈉在52W無(wú)菌水中的溶液加入到 脂質(zhì)卷的混合物中。隨后用無(wú)菌水將混合物中的氨基糖苷類藥物的濃度調(diào)節(jié)為〇. 5mg/ml。 另外，最終產(chǎn)品含有〇. 066M氯化鈉。為了制備氨基糖苷類藥物的良好的結(jié)晶脂質(zhì)卷，其中 脂質(zhì)：藥物比率為約10:1。
[0086] #9. 3實(shí)驗(yàn)制劑： 將2mg氨基糖苷類藥物在LOml D.D水中通過(guò)0. 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大 豆PS在2. OmL無(wú)菌水中（脂質(zhì)體通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò)濾）合并，以形成含有氨 基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后向所得到的混合物中加入0.206mL 0.1 M氯化鈣，以形成脂質(zhì) 卷。為了降低結(jié)晶脂質(zhì)卷的聚集尺寸，隨后將76mg氯化鈉在264W無(wú)菌水中的溶液加入到 脂質(zhì)卷的混合物中。隨后用無(wú)菌水將混合物中的氨基糖苷類藥物的濃度調(diào)節(jié)為〇. 5mg/ml。 另外，最終產(chǎn)品含有〇. 33M氯化鈉。為了制備氨基糖苷類藥物的良好的結(jié)晶脂質(zhì)卷，其中脂 質(zhì)：藥物比率為約10:1。
[0087] #9. 4實(shí)驗(yàn)制劑： 將2mg氨基糖苷類藥物在1.0 ml D. D水中通過(guò)0. 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50% 大豆PS在2. OmL無(wú)菌水中（脂質(zhì)體通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò)濾）合并，以形成含有 氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后向所得到的混合物中加入〇.206mL 0.1 M氯化鈣，以形成脂 質(zhì)卷。為了降低結(jié)晶脂質(zhì)卷的聚集尺寸，隨后將152mg氯化鈉在524W無(wú)菌水中的溶液加 入到脂質(zhì)卷的混合物中。隨后用無(wú)菌水將混合物中的氨基糖苷類藥物的濃度調(diào)節(jié)為〇. 5mg/ ml。另外，最終產(chǎn)品含有0.66M氯化鈉。為了制備氨基糖苷類藥物的良好的結(jié)晶脂質(zhì)卷，其 中脂質(zhì)：藥物比率為約10:1。
[0088] 表2由阿米卡星-脂質(zhì)卷上清液得到的內(nèi)部研究的阿米卡星卷成螺旋形的結(jié)果 (Degussa 85%相對(duì)類脂50%大豆PS，在凍干前后）
在形成脂質(zhì)卷并且隨后離心后，通過(guò)測(cè)量在上清液中阿米卡星的量（水合茚三酮測(cè) 定），測(cè)定卷成螺旋形百分?jǐn)?shù)。隨后從在卷成螺旋形過(guò)程期間的總量減去在上清液中的量。 這作為在上清液中的百分?jǐn)?shù)報(bào)道。在上清液中的百分?jǐn)?shù)越低，則卷成螺旋形功效越高。在 表2中列舉的結(jié)果清楚地證明50%大豆PS比85% PS在卷成螺旋形方面更有效。
[0089] 表3由在400nm下的吸光度得到的阿米卡星制劑的結(jié)果
在形成脂質(zhì)卷并且隨后離心后，通過(guò)測(cè)量在上清液中阿米卡星的量（水合茚三酮測(cè) 定），測(cè)定卷成螺旋形百分?jǐn)?shù)。隨后從在卷成螺旋形過(guò)程期間的總量減去在上清液中的量。 這作為在上清液中的百分?jǐn)?shù)報(bào)道。在上清液中的百分?jǐn)?shù)越低，則卷成螺旋形功效越高。在 表3中列舉的結(jié)果清楚地證明50%大豆PS比85% PS在卷成螺旋形方面更有效。
[0090] 表4由在400nm下的吸光度得到的阿米卡星制劑的結(jié)果
在形成脂質(zhì)卷并且隨后離心后，通過(guò)測(cè)量在上清液中阿米卡星的量（水合茚三酮測(cè) 定），測(cè)定卷成螺旋形百分?jǐn)?shù)。隨后從在卷成螺旋形過(guò)程期間的總量減去在上清液中的量。 這作為在上清液中的百分?jǐn)?shù)報(bào)道。在上清液中的百分?jǐn)?shù)越低，則卷成螺旋形功效越高。在 表4中列舉的結(jié)果清楚地證明50%大豆PS比99. 99% PS在卷成螺旋形方面更有效。
[0091] 圖4顯示慶大霉素卷成螺旋形，與PS性質(zhì)相關(guān)。與表1-3類似，在表4中列舉的 結(jié)果清楚地證明50%大豆PS在較低膽汁鹽濃度下比85% PS或99. 99% PS在卷成螺旋形慶 大霉素方面更有效。
[0092] 實(shí)施例10阿米卡星、慶大霉素和巴龍霉素膽汁鹽脂質(zhì)卷的卷成螺旋形功效 #10. 1具有膽汁鹽（在鈣之后）的氨基糖苷類藥物制劑的用于體外研究的程序。
[0093] 具有不同量的膽汁鹽（Sigma -Aldrich目錄#48305 Fluka膽汁酸鈉鹽，~50%脫 氧膽汁酸鈉鹽，~50%)的氨基糖苷類藥物制劑的結(jié)晶脂質(zhì)卷： 將2mg氨基糖苷類藥物在0. 2ml無(wú)菌水中通過(guò)0. 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50% 大豆PS脂質(zhì)體在2. Oml無(wú)菌水中（大豆PS脂質(zhì)體首先通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò) 濾）合并，以形成含有氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后劇烈攪拌下向所得到的混合物中加 入0. 159mL 0.1 M氯化鈣，以形成氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷。為了使得氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷 結(jié)晶的粒徑較小，隨后將20. 4mg膽汁鹽加入到氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷的混合物中。隨后使 用作為懸浮液的緩沖液將混合物調(diào)節(jié)至氨基糖苷類藥物的藥物濃度為〇. 5mg/ml。最終氨基 糖苷類藥物脂質(zhì)卷制劑含有11. 3mM。
[0094] 將2mg氨基糖苷類藥物在0?2ml無(wú)菌水中通過(guò)0?22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大豆PS脂質(zhì)體在2. Oml無(wú)菌水中（大豆PS脂質(zhì)體首先通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò) 濾）合并，以形成含有氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后劇烈攪拌下向所得到的混合物中加 入0. 159mL 0.1 M氯化鈣，以形成氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷。為了使得氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷 結(jié)晶的粒徑較小，隨后將13. 6mg膽汁鹽加入到氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷的混合物中。隨后使 用作為懸浮液的緩沖液將混合物調(diào)節(jié)至氨基糖苷類藥物的藥物濃度為〇. 5mg/ml。最終氨基 糖苷類藥物脂質(zhì)卷制劑含有7. 8mM。
[0095] 將2mg氨基糖苷類藥物在0? 2ml無(wú)菌水中通過(guò)0? 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大豆PS脂質(zhì)體在2. Oml無(wú)菌水中（大豆PS脂質(zhì)體首先通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò) 濾）合并，以形成含有氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后劇烈攪拌下向所得到的混合物中加 入0. 159mL 0.1 M氯化鈣，以形成氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷。為了使得氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷 結(jié)晶的粒徑較小，隨后將6. Smg膽汁鹽加入到氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷的混合物中。隨后使 用作為懸浮液的緩沖液將混合物調(diào)節(jié)至氨基糖苷類藥物的藥物濃度為〇. 5mg/ml。最終氨基 糖苷類藥物脂質(zhì)卷制劑含有3. 9mM。
[0096] 將2mg氨基糖苷類藥物在0? 2ml無(wú)菌水中通過(guò)0? 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大豆PS脂質(zhì)體在2. Oml無(wú)菌水中（大豆PS脂質(zhì)體首先通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò) 濾）合并，以形成含有氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后劇烈攪拌下向所得到的混合物中加 入0. 159mL 0.1 M氯化鈣，以形成氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷。為了使得氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷 結(jié)晶的粒徑較小，隨后將3. 4mg膽汁鹽加入到氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷的混合物中。隨后使 用作為懸浮液的緩沖液將混合物調(diào)節(jié)至氨基糖苷類藥物的藥物濃度為〇. 5mg/ml。最終氨基 糖苷類藥物脂質(zhì)卷制劑含有I. 95mM。
[0097] 將2mg氨基糖苷類藥物在0? 2ml無(wú)菌水中通過(guò)0? 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大豆PS脂質(zhì)體在2. Oml無(wú)菌水中（大豆PS脂質(zhì)體首先通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器過(guò) 濾）合并，以形成含有氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。隨后劇烈攪拌下向所得到的混合物中加 入0. 159mL 0.1 M氯化鈣，以形成氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷。為了使得氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷 結(jié)晶的粒徑較小，隨后將I. 7mg膽汁鹽加入到氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷的混合物中。隨后使 用作為懸浮液的緩沖液將混合物調(diào)節(jié)至氨基糖苷類藥物的藥物濃度為〇. 5mg/ml。最終氨基 糖苷類藥物脂質(zhì)卷制劑含有0. 97mM。
[0098] #10. 2具有膽汁鹽（在鈣之前）的氨基糖苷類藥物制劑的用于體外研究的程序。
[0099] 將2mg氨基糖苷類藥物在0? 2ml無(wú)菌水中通過(guò)0? 22Mm過(guò)濾器過(guò)濾，并且與20mg 50%大豆PS脂質(zhì)體在2. Oml無(wú)菌水中（大豆PS脂質(zhì)體首先通過(guò)5、0. 8和0. 45Mm過(guò)濾器 過(guò)濾）合并，以形成含有氨基糖苷類藥物的脂質(zhì)體。為了使得氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷結(jié)晶 的粒徑較小，隨后將20. 4mg膽汁鹽加入到氨基糖苷類藥物脂質(zhì)體的混合物中。隨后劇烈攪 拌下向所得到的混合物中加入〇.159mL 0.1 M氯化鈣，以形成氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷。隨后 使用作為懸浮液的相同的緩沖液將混合物調(diào)節(jié)至氨基糖苷類藥物的藥物濃度為〇. 5mg/ml。 最終氨基糖苷類藥物脂質(zhì)卷