一種抗菌肽活性淡水魚養(yǎng)殖專用飼料添加劑及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于飼料領域，具體涉及一種抗菌肽活性淡水魚養(yǎng)殖專用飼料添加劑及其 制備方法。
【背景技術】
[0002] 隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，淡水魚的養(yǎng)殖已經(jīng)成為我國漁業(yè)最重要的組成部分，但 是，隨著養(yǎng)殖環(huán)境的劣變和高密度養(yǎng)殖的發(fā)展，細菌性感染已經(jīng)成為淡水魚類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展 壯大的阻礙，常見的由細菌引起的爛尾、爛鰭癥、細菌性鰓病、立鱗病、紅點病、細菌性敗血 癥對淡水魚的養(yǎng)殖都會帶來致命的危害，特別是細菌性敗血癥，主要由嗜水氣單胞菌和溫 和氣單胞菌等感染引起，該病對團頭魴，鯽魚、鰱魚、鳙魚危害最為嚴重，感染初期，魚的頌、 咽腔、鰓蓋、眼睛、鰭基及體側呈點狀出血，腸內有少量食物，嚴重時體表成片出血，眼球突 出，眼眶發(fā)紅，肛門紅腫，腹部膨大，腹腔有腹水并有溶血現(xiàn)象，解剖后可見腮絲末端腐爛， 肝、腎腫大，脾呈紫黑色，膽囊脹大，腸系膜、腹壁、腸壁充血發(fā)紅，該病死亡率極高，在養(yǎng)殖 戶中也被稱為"淡水魚之癌"，一般該病爆發(fā)時傳染性極強，且必須通過清塘、消毒才能杜絕 該病的再次爆發(fā)。基于淡水魚養(yǎng)殖中存在的以上問題，目前獸醫(yī)采用的主要手段是抗生素 療法，在魚類飼料中加入抗生素，在池塘中加入生石灰等消毒。但是，由于持續(xù)低水平飼喂 抗生素，抗生素飼料添加劑造成的細菌耐藥性、肉制品中藥物殘留、過敏中毒反應以及"三 致"作用等危害日益嚴重，越來越受到人們的關注和許多國家的限制。從現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢 看，在食用動物中禁用、限用抗生素飼料添加劑已經(jīng)成為世界共識，是大勢所趨。
[0003] 目前，飼料抗生素的替代方式主要有兩種，其一為飼喂微生物添加劑即益生素 (菌)來改善腸道微生物的比例，抑制有害微生物，促進動物生長;其二為使用飼用酸化劑， 改善腸道內容物的酸堿度，抑制有害菌，促進有益菌生長。但總體而言，以上兩種措施相對 于抗生素的作用仍然有一定的差距。各種動物在長期的自然進化過程中在體內已建立了平 衡的微生物菌群共生生態(tài)系統(tǒng)，并建立了一套維持其體內菌群穩(wěn)態(tài)的機制，抗菌肽是這一 機制中的主要因子之一在維持腸道正常菌群平衡中起著非常重要的作用，并可能與腸道粘 膜免疫有一定的關系。與抗生素相比，抗菌肽的抑菌活性更高、抑菌范圍更廣，對于動物的 生產(chǎn)性能也具有明顯的促進作用；更為重要的是，抗菌肽不會產(chǎn)生任何的耐藥性；因此，研 制和開發(fā)出合適的抗菌肽，將是飼料抗生素的最佳替代品。
[0004] 抗菌肽是指存在于生物體內能抵抗外界微生物侵害，消除體內突變細胞的一類小 分子多肽，它是先天免疫系統(tǒng)的重要組成部分。抗菌肽通常由15-45個氨基酸殘基組成，大 部分帶正電荷。多種生物如細菌、昆蟲、植物和脊椎動物體內都含有抗菌肽。由于抗生素耐 藥性和殘留問題的日益突出，作為一種抗生素的替代物，抗菌肽因其沒有抗生素的上述缺 點而備受關注?？股卦谛竽辽a(chǎn)中應用已久，但其長期使用也引起了耐藥性和殘留等嚴 重問題。因此有必要尋找與抗生素效果相似，而又沒有上述問題的抗生素替代物。抗菌肽是 在生物體內廣泛存在的一種抗菌物質，是一種低分子量的多肽，對革蘭氏陽性和陰性菌均 有較強的殺傷作用。
[0005] 盡管抗菌肽的有效作用已經(jīng)得到普遍的確認，也在業(yè)界內得到了認可，但是近年 來，抗菌肽的應用仍受到較大的局限，具體而言，一方面，其生產(chǎn)工藝不成熟，高產(chǎn)菌株難以 發(fā)現(xiàn)和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，另一方面，成本高昂，難以在大范圍內推廣?；诖耍?jīng)與國內多所知名 高校長期合作研究，在大量實驗的基礎上，得到了一種抗菌肽活性飼料的制備方法，并且具 體研究了各種飼喂對象，例如豬、雞、鴨、牛和水產(chǎn)動物的生長和攝食習慣，進行了差異化的 深入研究，獲得了多種具體活性肽飼料及其制備方法，例如本發(fā)明所涉及的抗菌肽活性淡 水魚養(yǎng)殖專用飼料添加劑及其制備方法。

【發(fā)明內容】

[0006] 為了彌補現(xiàn)有技術中抗菌肽飼料生產(chǎn)難以產(chǎn)業(yè)化以及生產(chǎn)成本高的缺陷，本發(fā)明 旨在提供一種抗菌肽活性淡水魚養(yǎng)殖專用飼料添加劑及其制備方法。
[0007] 為解決以上問題，本發(fā)明采用如下技術方案：
[0008] -種抗菌肽活性淡水魚養(yǎng)殖專用飼料添加劑及其制備方法，是由組分A和組分B組 成，其中組分A是由玉米粉300-500重量份，蘋果渣20-30重量份，DDGS 10-15重量份，玉米蛋 白粉20-30重量份和豆柏100-200重量份經(jīng)復合發(fā)酵菌劑發(fā)酵制備而成；組分B是由黃芪9-15重量份，馬齒莧22-30重量份，貫眾3_5重量份，牡丹皮5_7重量份，白研!〇. 05-0.1重量份， 米糠50-80重量份制備而成；其中所述的復合菌劑是地衣芽孢桿菌（Bacillus lichnifarimis)、短小芽抱桿菌(Bacillus brevis)和產(chǎn) |j元假絲酵母(Candida util is)組 成。
[0009] 其中制備組分A的制備方法包括如下步驟：
[0010]步驟（1)，按重量份稱取玉米粉、蘋果渣、DDGS、玉米蛋白粉和豆柏，將其混合均勻 后粉碎過10-30目篩，而后加入混合物重量30%的純凈水，攪拌均勻；
[0011] 步驟(2)，向步驟(1)攪拌得到的混合物中加入活化后的復合菌劑，繼續(xù)攪拌均勻， 而后在27-29°C發(fā)酵8-12小時，在此過程中向混合物中通過空氣，通氣量為15L空氣/100kg 飼料混合物/分鐘;而后調整發(fā)酵混合物的溫度，在35-38 °C發(fā)酵8-12小時，在此過程中向混 合物中通過空氣，通氣量為5L空氣/100kg飼料混合物/分鐘;接下來調整發(fā)酵物的溫度，在 42-44 °C靜置發(fā)酵12-24小時；
[0012] 步驟(3)，將步驟(2)制得的發(fā)酵產(chǎn)物進行低溫干燥，再粉碎成粉，過30-50目的，即 得組分A。
[0013] 其中組分B的制備方法包括如下步驟：
[0014]步驟(一），按重量份稱取黃芪、馬齒莧、貫眾、牡丹皮、白礬和米糠，并將稱取的牡 丹皮、貫眾和馬齒莧碎成10-20目的粉末，將稱取的米糠、白礬分別粉碎成50-60目的粉末； [0015]步驟(二），取稱取的牡丹皮、貫眾和馬齒莧，將其與體積濃度為75 %的乙醇按等質 量混合，在密閉容器中加熱至55-65Γ，提取3-5小時，而后過濾得到醇提濾渣和醇提濾液； 將醇提濾渣和稱取的黃芪以及白礬粉末混合，加入混合物質量1.5-2倍的水，在密閉容器中 加熱至50_55°C，提取8_12小時，而后過濾得到水提濾液；
[0016] 步驟(三），將步驟(二)制得的醇提濾液和水提濾液以及步驟(一)制得的米糠粉混 合，攪拌均勻后進行低溫干燥，再粉碎成30-50目的粉末，即得組分B。
[0017] 在生產(chǎn)過程中，可以將制得的組分A和組分B混合均勻后包裝出售，也可以是單獨 包裝出售，待用戶實際使用時進行混合。
[0018] 優(yōu)選地，組分A是由玉米粉400重量份，蘋果渣25重量份，DDGS 15重量份，玉米蛋白 粉25重量份和豆柏150重量份經(jīng)復合發(fā)酵菌劑發(fā)酵制備而成。
[0019] 優(yōu)選地，組分B是由黃芪12重量份，馬齒莧25重量份，貫眾4重量份，牡丹皮6重量 份，白研*0.08重量份，米糠60重量份。
[0020] 優(yōu)選地，作為建議，但并不強制地，所述的復合菌劑是地衣芽孢桿菌（Bacillus lichnifarimis)、短小芽抱桿菌(Bacillus pumilus)和產(chǎn) |j元假絲酵母(Candida util is)按 照活菌數(shù)(CFU)1:1:1組成。
[0021] 優(yōu)選地，作為建議，但并不強制地，所述的地衣芽孢桿菌為購自中國普通微生物菌 種保藏管理中心的編號為CGMCC 1.1858或者編號為CGMCC 1.7461的地衣芽孢桿菌;所述短 小芽孢桿菌為購自中國普通微生物菌種保藏管理中心的編號為CGMCC 1.3533或者編號為 CGMCC 1.2160的短小芽孢桿菌，所述產(chǎn)朊假絲酵母為購自中國普通微生物菌種保藏管理中 心的編號為CGMCC 2.1180或者編號為CGMCC 2.1005的產(chǎn)朊假絲酵母。
[0022] 本發(fā)明所涉及的抗菌肽活性淡水魚養(yǎng)殖專用飼料添加劑的使用方法是:將其與常 規(guī)的飼料原料按照1:80的質量比混合均勻后，按照常規(guī)的淡水魚顆粒飼料的制粒方法制粒 后，按照常規(guī)的淡水魚飼喂方法使用即可。
[0023] 基于以上
【發(fā)明內容】
，本發(fā)明具有如下優(yōu)點：
[0024] 第一，發(fā)明人經(jīng)反復實踐，得出發(fā)酵效