金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法
【專利摘要】本發(fā)明是一種金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑方法。按以下步驟進(jìn)行：經(jīng)金耳酵母狀孢子菌種的培養(yǎng)、金耳酵母狀菌株液體種子的培養(yǎng)、金耳酵母狀孢子的搖床培養(yǎng)、金耳的發(fā)酵罐培養(yǎng)后，將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后，進(jìn)行勻漿處理，加工成金耳食品或食品添加劑。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，解決了用混合菌株發(fā)酵生產(chǎn)的金耳產(chǎn)量低，原料不足的問題。用本發(fā)明的發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)金耳食品和食品添加劑大大提高了產(chǎn)時(shí)，同時(shí)減少了加工金耳食品和食品添加劑原料的用量，通過本發(fā)明生產(chǎn)的金耳多糖質(zhì)量上乘，加工的食品和食品添加劑具有獨(dú)特的乳香味。
【專利說明】
金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及食品技術(shù)領(lǐng)域，尤其是金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]金耳(Tremella aurantialba Bandoni et Zang)為擔(dān)子菌綱銀耳目銀耳科銀耳屬的食藥兩用真菌，主要分布于我國西南地區(qū)，金耳人工栽培已成功(包括段木、袋料栽培)。
[0003]用金耳子實(shí)體和混合菌株[金耳(Tremella aurantialba Bandoni et Zang)和毛韌革菌(Stereum hirsutum(willd:Fr.) S.F.Gray)]發(fā)酵生產(chǎn)的金耳多糖、金耳食品和食品添加劑已逐步投放市場。由于栽培技術(shù)及森林保護(hù)方面的原因，沒有足夠的金耳子實(shí)體或子實(shí)體加工產(chǎn)品提供市場。而用混合菌株發(fā)酵生產(chǎn)金耳食品或食品添加劑時(shí)，由于金耳菌絲生長較弱，毛韌革菌占優(yōu)勢，混合菌株發(fā)醇生產(chǎn)的產(chǎn)品以毛韌革菌為主，金耳少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于解決金耳產(chǎn)品生產(chǎn)中存在的問題，提供一種針對(duì)金耳酵母狀孢子生長的條件、通過深層發(fā)酵技術(shù)提高金耳產(chǎn)量并生產(chǎn)出包括多糖在內(nèi)的金耳食品或食品添加劑的方法。
[0005]本發(fā)明通過孢子分離得到的酵母狀(yeast-like)孢子的金耳菌株，Yaasm_17，以酵母狀的金耳菌株為生產(chǎn)菌株，通過深層發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)金耳食品和食品添加劑。通過發(fā)酵可生產(chǎn)具生物活性的金耳胞內(nèi)和胞外多糖。深層發(fā)酵的產(chǎn)品勻漿處理后可制成營養(yǎng)豐富的食品或食品添加劑。具體方法下:
[0006]按以下步驟進(jìn)行，所用原料按重量百分比計(jì):
[0007]I)金耳酵母狀孢子菌種的培養(yǎng):將金耳酵母狀孢子接種在改進(jìn)的PDA培養(yǎng)基斜面上20?28°C培養(yǎng)7?10天，改進(jìn)PDA培養(yǎng)基為10%馬鈴薯煮液加0.05?0.2%酵母粉或膏，0.05?0.2%蛋白胨，0.05?0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂，2%葡萄糖或蔗糖；
[0008]2)金耳酵母狀菌株液體種子的培養(yǎng):在5?10%黃豆粉，5?10%玉米粉，0.05?
0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入試管種，20?28 °C 100?300rpm搖床培養(yǎng)3?10天。
[0009]3)金耳酵母狀孢子的搖床培養(yǎng):在5?15%黃豆粉，5?15%玉米粉，0.05?
0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的5?10%的上一步所得種子，20?28°C、100?300rpm搖床培養(yǎng)5?8天。
[0010]4)金耳的發(fā)酵罐培養(yǎng):在5?15%黃豆粉，5?15%玉米粉，0.05?0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻裝在發(fā)酵罐中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的5?10%的上一步所得種子，通氣0.5?2L/min，100?300rpm攪拌20?28°C培養(yǎng)5?8天。
[0011]5)將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后，進(jìn)行勻漿處理，加工成金耳食品或食品添加劑。
[0012]以上所述的金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法是:
[0013]1、金耳飲料的制備是:將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集進(jìn)行勻漿處理后，直接加工成金耳飲料或作飲料的輔料。
[0014]2、金耳食品添加劑的制備是:將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后進(jìn)行勻漿處理，勻漿液干燥后得乳白色粉末的金耳食品添加劑。
[0015]3、金耳多糖的提取是:將下罐后的發(fā)酵液靜置12?24小時(shí)，進(jìn)行煮沸處理，過濾，煮沸濾液用真空進(jìn)行濃縮，濃縮至原體積的20%左右時(shí)，濃縮液加2倍體積95%的酒精，攪拌均勻后靜置12小時(shí)，收集沉淀，干燥后得乳白色粉末的金耳多糖。
[0016]本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，解決了用混合菌株發(fā)酵生產(chǎn)的金耳產(chǎn)量低，原料不足的問題。用本發(fā)明的發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)金耳食品和食品添加劑大大提高了產(chǎn)時(shí)，同時(shí)減少了加工金耳食品和食品添加劑原料的用量，通過本發(fā)明生產(chǎn)的金耳多糖質(zhì)量上乘，加工的食品和食品添加劑有獨(dú)特的乳香味。
[0017]【具體實(shí)施方式】(所用百分比均為重量百分比)
[0018]實(shí)施例1:培養(yǎng)
[0019]I)金耳酵母狀菌株的試管種培養(yǎng):金耳酵母狀孢子接種在改進(jìn)的PDA培養(yǎng)基斜面上25°C培養(yǎng)7天，改進(jìn)PDA培養(yǎng)基為10%馬鈴薯煮液加0.05%酵母粉、0.05%蛋白胨、
0.05%磷酸氫二鉀(K2HPO4)、0.05%硫酸鎂(MgSO4)、2%葡萄糖。
[0020]2)金耳酵母狀菌株的液體種子培養(yǎng):在5%黃豆粉、5%玉米粉、0.05%磷酸氫二鉀、0.05%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入試管種，200C 10rpm搖床培養(yǎng)10天。
[0021]3)金耳酵母狀菌株的搖床培養(yǎng):在10%黃豆粉、10%玉米粉、0.05%磷酸氫二鉀、
0.05%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的5%的上一步(培養(yǎng))所得種子，200C 10rpm搖床培養(yǎng)8天。
[0022]4)金耳酵母狀菌株的發(fā)酵罐培養(yǎng):在10%黃豆粉、10%玉米粉、0.05%磷酸氫二鉀、0.05%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻裝在發(fā)酵罐中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的5%的上一步(培養(yǎng))所得種子，通氣0.5L/min，10rpm攪拌20°C培養(yǎng)8天。
[0023]實(shí)施例2:培養(yǎng)
[0024]I)金耳酵母狀菌株的試管種培養(yǎng):金耳酵母狀孢子接種在改進(jìn)的PDA培養(yǎng)基斜面上25°C培養(yǎng)7天，改進(jìn)PDA培養(yǎng)基為10%馬鈴薯煮液加0.2%酵母膏、0.2%蛋白胨、0.1%磷酸氫二鉀、0.1 %硫酸鎂、2%蔗糖。
[0025]2)金耳酵母狀菌株的液體種子培養(yǎng):在10%黃豆粉、10%玉米粉、0.2%磷酸氫二鉀、0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入試管種，28 0C 300rpm搖床培養(yǎng)3天。
[0026]3)金耳酵母狀菌株的搖床培養(yǎng):在15%黃豆粉、15%玉米粉、0.2%磷酸氫二鉀、
0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的10%的上一步(培養(yǎng))所得種子，28 0C 300rpm搖床培養(yǎng)3天。
[0027]4)金耳酵母狀菌株的發(fā)酵罐培養(yǎng):在15%黃豆粉、15%玉米粉、0.2%磷酸氫二鉀、0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻裝在發(fā)酵罐中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的10%的上一步(培養(yǎng))所得種子，通氣2L/min，300ram攪拌28°C培養(yǎng)5天。
[0028]實(shí)施例3:金耳飲料
[0029]將實(shí)施例1、2中搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后，進(jìn)行勻漿處理，勻漿液用離心或過濾的方法收集清液，清液含多種多糖、蛋白質(zhì)及礦物元素，可直接加工成金耳飲料或作飲料的輔料，加工的飲料為乳白色，不加糖的情況下有一定甜度，具乳香味。
[0030]實(shí)施例4:金耳添加劑
[0031]將實(shí)施例1、2中搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后進(jìn)行勻漿處理，勻漿液含多種多糖、蛋白質(zhì)及礦物元素，勻漿液干燥后為乳白色粉末(金耳添加劑)，干粉以5?10%的比例加入到面粉中加工面包、蛋糕、餅干等面食，生產(chǎn)的面食營養(yǎng)豐富，具乳香味，口感好。
[0032]實(shí)施例5:提取金耳多糖
[0033]將實(shí)施例1、2中下罐后的發(fā)酵液靜置12-24小時(shí)，進(jìn)行煮沸處理，煮沸液板筐過濾或離心的辦法收集濾液，濾液較粘，含糖量較高，濾液用真空進(jìn)行過濾，濃縮至原體積的20 %左右時(shí)，濃縮液加2倍體積95 %的酒精，攪拌均勻后靜置12小時(shí)，用過濾或離心的辦法收集沉淀，干燥后的乳白色粉末為金耳多糖(粗多糖)，粗多糖以粘多糖為主。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行，所用原料按重量百分比計(jì): 1)金耳酵母狀孢子菌種的培養(yǎng):將金耳酵母狀孢子接種在改進(jìn)的PDA培養(yǎng)基斜面上20?28°C培養(yǎng)7?10天，改進(jìn)PDA培養(yǎng)基為10%馬鈴薯煮液加0.05?0.2%酵母粉或膏，0.05?0.2%蛋白胨，0.05?0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂，2%葡萄糖或蔗糖； 2)金耳酵母狀菌株液體種子的培養(yǎng):在5?10%黃豆粉，5?10%玉米粉，0.05?0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入試管種，20?28 °C 100?300rpm搖床培養(yǎng)3?10天。 3)金耳酵母狀孢子的搖床培養(yǎng):在5?15%黃豆粉，5?15%玉米粉，0.05?0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻分裝在三角瓶中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的5?10%的上一步所得種子，20?28°C、100?300rpm搖床培養(yǎng)5?8天。 4)金耳的發(fā)酵罐培養(yǎng):在5?15%黃豆粉，5?15%玉米粉，0.05?0.2%磷酸氫二鉀，0.05?0.2%硫酸鎂中加入水余量，攪拌均勻裝在發(fā)酵罐中滅菌后冷卻，接入培養(yǎng)基量的5?10%的上一步所得種子，通氣0.5?2L/min，100?300rpm攪拌20?28°C培養(yǎng)5?8天。 5)將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后，進(jìn)行勻漿處理，加工成金耳食品或食品添加劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法，其特征在于金耳飲料的制備是:將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集進(jìn)行勻漿處理后，直接加工成金耳飲料或作飲料的輔料。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金耳酵母狀孢子發(fā)酵生產(chǎn)食品和食品添加劑的方法，其特征在于金耳食品添加劑的制備是:將搖床或發(fā)酵罐生長的發(fā)酵液收集后進(jìn)行勻漿處理，勻漿液干燥后得乳白色粉末的金耳食品添加劑。
【文檔編號(hào)】C12P19/04GK106063532SQ201410597535
【公開日】2016年11月2日
【申請(qǐng)日】2014年10月22日 公開號(hào)201410597535.1, CN 106063532 A, CN 106063532A, CN 201410597535, CN-A-106063532, CN106063532 A, CN106063532A, CN201410597535, CN201410597535.1
【發(fā)明人】楊玉坤, 鄧建波
【申請(qǐng)人】重慶市涪陵區(qū)屋機(jī)花椒種植場