專利名稱：苯丙氨醇衍生物的制作方法
血管細胞粘著分子-1(VCAM-1)，免疫球蛋白(Ig)超基因家族中的一員，表達在激活的而不是靜止的內(nèi)皮上。表達在包括循環(huán)的淋巴細胞、嗜曙紅細胞、嗜堿細胞和單核細胞而不是嗜中性白細胞的許多細胞類型上的整合素VLA-4(α4β1)是VCAM-1的主要的受體。VCAM-1或VLA-4的抗體能夠阻斷這些單核白細胞以及黑素瘤細胞對體外激活的內(nèi)皮的粘附。(兩者之中)任一蛋白的抗體在幾個發(fā)炎的動物模型中已經(jīng)有效地抑制白細胞浸潤和防止組織損傷。抗VLA-4單克隆抗體已經(jīng)顯示能夠阻斷T-細胞在輔劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎中滲出，防止嗜曙紅細胞在氣喘模型中積聚和支氣管收縮，并且減少麻痹和抑制單核細胞和淋巴細胞在實驗性自身免疫性腦炎(EAE)中的浸潤?？筕CAM-1單克隆抗體已經(jīng)顯示能夠延長心臟同種異體移植物的存活時間。近來的研究證明抗VLA-4mAbs能夠防止非肥胖的糖尿病小鼠中的胰島炎和糖尿病，并且顯著地使結(jié)腸炎羊胡子草羅望子模型中的炎癥減弱。
因此，抑制含有α4的整合素例如VLA-4和VCAM-1之間相互作用的化合物可用作治療由慢性炎癥性疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、多發(fā)性硬化(MS)、肺部炎癥(例如氣喘)和炎癥性腸病(IBD)所引起的炎癥的治療劑。
一方面本發(fā)明包括下式醇 其中X是式X-1所示的基團 其中R15是鹵素、硝基、低級烷磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、羧基、低級烷基氨基磺?；⑷图壨榛?、低級烷硫基、羥基低級烷基、烷氧基低級烷基、烷硫基低級烷基、烷亞磺酰基低級烷基、烷磺?；图壨榛?、低級烷亞磺酰基、低級烷?；?、芳?；?、芳基、芳氧基；R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、OH、全氟低級烷基或低級烷硫基；或X是式X-2所示的基團 其中Het是含有1，2或3個選自N、O和S雜原子的5-或6-元雜芳環(huán)，或Het是含有1，2，3或4個選自O(shè)、S和N雜原子的9-或10-元二環(huán)雜芳環(huán)；R15和R16如上面X-1中所定義，以及R30是氫或低級烷基，p是0-1的整數(shù)；或X是式X-3所示的基團 其中R18是芳基、雜芳基，R19是取代的或未被取代的低級烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基，以及R20是取代的或未被取代的低級烷酰基或芳?；?；Y是式Y(jié)-1所示的基團 其中R22和R23獨立地是氫、低級烷基、低級烷氧基、低級環(huán)烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基、低級烷硫基、低級烷亞磺?；?、低級烷磺?；?、低級烷酰基、鹵素或全氟低級烷基，R22和R23中至少一個不是氫，以及R24是氫、低級烷基、低級烷氧基、芳基、硝基、氰基、低級烷磺?；螓u素；或者Y是經(jīng)碳原子連接酰胺羰基的五或六元雜芳環(huán)的基團Y-2，其中所述的環(huán)含有一個、兩或三個選自N、O和S的雜原子，所述環(huán)中一個或兩個原子獨立地被低級烷基、環(huán)烷基、鹵素、氰基、全氟烷基或芳基取代，至少一個所述的取代的原子與連接酰胺羰基的碳原子相鄰；或者Y是下式所示3-7元環(huán)的基團Y-3 其中R25是低級烷基、未被取代的或者氟取代的低級鏈烯基，或者基團R26-(CH2)e-，R26是芳基、雜芳基、疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、低級烷?；?、低級烷硫基、低級烷磺?；?、低級烷亞磺?；?、全氟代低級烷?；?、硝基或者R26是基團-NR28R29；R28是氫或者低級烷基；R29是氫、低級烷基、低級烷氧羰基、低級烷酰基、芳酰基、全氟代低級烷?；被⒌图壨榛酋；⒌图壨榘被驶?、芳氨基羰基，或者R28和R29一起形成選擇性地含有選自O(shè)、S和N的一個雜原子的4，5或6-元飽和碳環(huán)；環(huán)上的碳原子未被取代或被低級烷基或鹵素取代；
Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或鍵；R27是H、低級烷基、芳基、低級烷?；⒎减；虻图壨檠豸驶?；e是0-4的整數(shù)；f是1-3的整數(shù)；以及虛線的鍵可以被選擇性地氫化。
這些化合物可以用作治療炎癥性疾病的抗炎劑。與衍生它們的相應(yīng)的酸和酯相比，式1所示的這些醇是更有效的體內(nèi)VCAM-VLA-4相互作用的抑制劑和消炎劑。與衍生它們的相應(yīng)的酸和酯相比，它們更加生物可利用性?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物比衍生它們的酸或酯更容易口服吸收。
式I所示的醇化合物衍生自下式相應(yīng)的酸和酯 其中X和Y定義如上，Z是低級烷基或氫。
WO99/10313和WO99/10312中描述了式2化合物的制備。WO99/10312中公開了其中Y是Y-1和Y-2的式2化合物以及它們的制備方法。WO99/10313中公開了式2中Y是Y-3的化合物以及它們的制備方法。式1所示的這些醇以及式2所示的酯可用于治療包括由VLA-4與VCAM-1結(jié)合所引起的炎癥的炎癥疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、與肺有關(guān)的關(guān)節(jié)炎、氣喘以及炎癥性腸病。式1所示的醇比相應(yīng)的羧酸更容易吸收以及更加生物可利用性。
單獨或結(jié)合用于本說明書的術(shù)語“低級烷基”是指含有最多六個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、正戊基、正己基等。低級烷基可以被一個或多個獨立地選自環(huán)烷基、硝基、芳氧基、芳基、羥基、鹵素、氰基、低級烷氧基、低級烷?；⒌图壨榱蚧?、低級烷亞磺?；⒌图壨榛酋；腿〈陌被〈?。取代的低級烷基的例子包括2-羥乙基、3-氧代丁基、氰基甲基和2-硝基丙基。
術(shù)語“環(huán)烷基”是指未被取代的或取代的3-7元碳環(huán)。用于本發(fā)明的取代基是羥基、鹵素、氰基、低級烷氧基、低級烷?；?、低級烷基、芳?；⒌图壨榱蚧?、低級烷亞磺?；?、低級烷磺?；⒎蓟?、雜芳基和取代的氨基。
術(shù)語“低級烷氧基”是指含有最多六個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等。
術(shù)語“低級烷硫基”是指通過二價硫原子連接的低級烷基，例如甲硫基或異丙硫基。
術(shù)語“芳基”是指單或二環(huán)芳基，例如苯基或萘基，其未被取代或被常用的取代基團取代。優(yōu)選的取代基是低級烷基、低級烷氧基、羥基低級烷基、羥基、羥基烷氧基、鹵素、低級烷硫基、低級烷亞磺?；?、低級烷磺酰基、氰基、硝基、全氟烷基、烷?；?、芳?；?、芳炔基、低級炔基和低級烷?；被？捎糜诒景l(fā)明的芳基的例子是對-甲苯基、對-甲氧基苯基、對-氯苯基、間-甲硫基苯基、2-甲基-5-硝基苯基、2，6-二氯苯基、1-萘基等。
術(shù)語“芳烷基”是指如在上文中定義的低級烷基，其中一個或多個氫原子被這里定義的芳基或雜芳基取代。任何常用的芳烷基可用于本發(fā)明，例如芐基等。
術(shù)語“雜芳基”是指含有1，2，3或4個獨立為N、S或O雜原子的未被取代的或取代的5-或6元單環(huán)雜芳環(huán)或9-或10-元二環(huán)雜芳環(huán)。雜芳環(huán)的例子是吡啶、苯并咪唑、吲哚、咪唑、噻吩、異喹啉、喹啉(quinzoline)等。上面用于“芳基”中定義的取代基包括在雜芳基的定義中。
術(shù)語“低級烷氧羰基”是指經(jīng)羰基連接的低級烷氧基。烷氧羰基的例子是乙氧羰基等。
術(shù)語“低級烷基羰氧基”是指經(jīng)氧原子連接的烷基羰氧基，例如乙酰氧基。
術(shù)語“低級烷?；笔侵附?jīng)羰基連接的低級烷基并且包含上文定義的基團例如乙酰基、丙?；?。
術(shù)語“低級烷羰基氨基”是指經(jīng)氮原子連接的低級烷羰基，例如乙酰氨基。
術(shù)語“芳?；笔侵附?jīng)羰基連接的單或二環(huán)的芳基或雜芳基。芳酰基的例子是苯甲?；?-氰基苯甲?；?-萘基等。
在具體的式1化合物的實施方案中，Y-1中的取代基優(yōu)選是其中R22和R23是低級烷基、三氟甲基或鹵素，R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素，尤其其中R22和R23優(yōu)選是低級烷基或鹵素，R24優(yōu)選是氫。
在Y-1基團中，當R23是低級烷基或鹵素時，Y-1優(yōu)選是 或 當Y是基團Y-2時，“Het”優(yōu)選是含有1，2或3個雜原子的6元單環(huán)雜芳環(huán)，特別其中雜原子是N；更特別Y-2是 當Y是基團Y-3時，Q優(yōu)選是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-或-(CH2)f-，更優(yōu)選-(CH2)f-；更特別Y-3是四-六元環(huán)，優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4，優(yōu)選2-4，R26是疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、低級烷?；?、低級烷磺?；⒌图壨閬喕酋；⑷图壨轷；⑾趸?、低級烷硫基、苯基或被烷氧基或鹵素取代的苯基，優(yōu)選疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、低級烷酰基、低級烷磺酰基、低級烷亞磺?；?、全氟代低級烷?；?、硝基、低級烷硫基或R26是NHR29，其中R29是低級烷?；?、優(yōu)選乙酰基，或低級烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整數(shù)；以及虛線的鍵是氫化了的；更特別Y-3是下式所示的五或六元環(huán)烷基環(huán) 其中Q是-(CH2)f，f是2和3；R25是R26-(CH2)e-；e是0-4的整數(shù)，優(yōu)選2-4，R26是低級烷基、羥基、低級烷氧基、低級烷硫基或低級烷磺?；摼€的鍵是氫化了的；最特別Y-3是
當X是X-1時，R15優(yōu)選是鹵素、硝基、低級烷磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷硫基、烷亞磺?；图壨榛⑼榛酋；图壨榛⒌图壨閬喕酋；⒌图壨轷；蚍减；琑16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基或低級烷硫基。
在X-1中基團R15優(yōu)選是低級烷基、硝基、鹵素(尤其是氯或氟)、全氟甲基或氰基，R16是氫、低級烷基、硝基、鹵素(尤其是氯或氟)、全氟甲基或氰基。
特別的是，R15和R16獨立地是氯或氟。
特別優(yōu)選的基團X-1如下式所示 在X-2中Het優(yōu)選是5-或6-元含有1，2或3個氮或氮和硫或氮和氧的單環(huán)雜芳環(huán)。當Het是二環(huán)雜芳環(huán)時，優(yōu)選含有1-3個氮作為雜原子。其中X是X-2，R15優(yōu)選是硝基、低級烷磺酰基、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷硫基、低級烷?；蚍蓟?尤其是未被取代的苯基)；R16優(yōu)選是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基；R30存在時，優(yōu)選是氫或低級烷基。
尤其優(yōu)選的基團X-2如下式所示 在基團X-3中R18優(yōu)選是苯基。R19優(yōu)選是低級烷基，其是未被取代的或被吡啶基或苯基取代。R20優(yōu)選是低級烷?；?。
在另一個X-3的實施方案中，R18是未被取代的或被鹵素或低級烷氧基取代的苯基；R19是未被取代的或被低級烷氧基、吡啶基低級烷基或低級烷基取代的苯基低級烷基；R20是取代的或未被取代的低級烷?；?。
尤其優(yōu)選的基團X-3如下式所示
Y優(yōu)選是基團Y-1，因此本發(fā)明包括下式化合物 其中X、R22、R23和R24定義如上。
在Y-1基團中，R22和R23優(yōu)選是低級烷基或鹵素，R24優(yōu)選是氫。
更優(yōu)選的基團X是X-1。
當X是X-1時，R15是鹵素、硝基、低級烷磺酰基、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷硫基、烷亞磺?；图壨榛?、烷磺酰基低級烷基、低級烷亞磺?；⒌图壨轷；蚍减；?，R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基或低級烷硫基。
最優(yōu)選的是下式所示的結(jié)構(gòu)的化合物 本發(fā)明的化合物可以以立體異構(gòu)體和非對映體形式存在，所有這些均包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
下列實施方案描述式1化合物和本發(fā)明的具體的實施方案。
1.1.在一個實施方案中X是下式所示的基團
R15和R16定義如上，特別是其中R15是低級烷基、硝基、鹵素、全氟甲基或氰基，R16是氫、低級烷基、硝基、鹵素、全氟甲基或氰基；更特別的是其中R15和R16獨立地是氯或氟。
尤其X-1選自如下基團 1.2.在另一個式1化合物的實施方案中，X是式X-2基團 p和R15、R16以及R30定義如上，尤其是其中Het是含有1，2或3個氮或氮和硫或氮和氧的5-或6元單環(huán)雜芳環(huán)，或者Het是含有1-3個氮的二環(huán)雜芳環(huán)，更特別地是Her是含有1或2個氮的6元單環(huán)雜芳環(huán)或者Het是含有一個氮的10元二環(huán)雜芳環(huán)，R15是低級烷基或全氟烷基，R16是氫、低級烷基或全氟烷基，R30不存在。
在X-2中，R15優(yōu)選是硝基、低級烷磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷硫基、低級烷?；蚍蓟?優(yōu)選是未被取代的苯基)，尤其R15是未被取代的苯基。在X-2中R16優(yōu)選是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基；R30是氫或者低級烷基。
尤其X-2選自如下基團 1.3.在式1化合物另一個實施方案中，X是 其中R18、R19以及R20定義如上，特別是其中R18是苯基，以及特別是其中R19是未被取代的或者被吡啶基或苯基取代的低級烷基，以及特別是其中R20是取代的或者未被取代的低級烷?；?。
具體的X-3基團優(yōu)選是其中R18是苯基、R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低級烷基，R20是低級烷酰基；或者其中R18是未被取代的或被鹵素或低級烷氧基取代的苯基，R19是未被取代的或被低級烷氧基、吡啶基低級烷基或低級烷基取代的苯基低級烷基，R20是取代的或未被取代的低級烷?；挥绕涫瞧渲蠿選自如下基團
1.4.在式1化合物的另一個實施方案中 其中R22、R23以及R24定義如上，尤其是其中R22和R23是低級烷基、三氟甲基或者鹵素，R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或者鹵素，特別是其中Y-1選自如下基團 1.5.在式1化合物的另一個實施方案中Y是 其中p和Het、R30和R31定義如上，尤其是其中Het是6元雜芳環(huán)，特別是其中雜原子是氮，更特別是其中Y-2選自如下基團
1.6.在式1化合物的又一個實施方案中Y是Y-3基團 其中R25和Q定義如上；e是0-4的整數(shù)；f是1-3的整數(shù)；虛線鍵可以被選擇性地氫化，尤其是其中Y選自下式基團 此外，應(yīng)當理解的是在如開始定義的式1化合物中基團X和基團Y可以是基團X-1以及Y是基團Y-1、Y-2或Y-3；或者X是X-2以及Y是基團Y-1、Y-2或Y-3；或者X是X-3以及Y是Y-1、Y-2或者Y-3，其中X-1、X-2、X-3、Y-1、Y-2和Y-3如上述任何獨立的實施方案中所定義。
更特別的是，優(yōu)選下列X和Y的結(jié)合。
在一個實施方案中X是X-1，Y是Y-3，更特別是其中R15和R16之一是鹵素、全氟代低級烷基、硝基、低級烷基，另一個是鹵素、氫、全氟代低級烷基、硝基、低級烷基，Y是下式所示的五或六元環(huán)烷基環(huán) 其中Q是-(CH2)f，f是2和3；R25是R26-(CH2)e-；e是0-4的整數(shù)，R26是低級烷基、羥基、低級烷氧基、低級烷硫基或低級磺?；?，虛線鍵是氫化了的；其中特別優(yōu)選的化合物是4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-三氟甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，或4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲磺?；?丁基]環(huán)戊基]-L-苯丙氨醇。
在另一個優(yōu)選的結(jié)合中X是 R16是氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷硫基、全氟低級烷基，R15是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷磺?；?、全氟低級烷基，以及Y是式Y(jié)-1所示的基團 其中R22是氫、鹵素、三氟烷基或低級烷基，R23是鹵素、三氟烷基或低級烷基，R24是氫或Y是式Y(jié)-3所示的基團 其是四-六元環(huán)烷基環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4以及R26是疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、低級烷?；⒌图壨榛酋；?、低級烷亞磺?；?、全氟代低級烷?；?、硝基或低級烷硫基或者R25是NHR29其中R29是低級烷酰基或低級烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整數(shù)；以及虛線鍵是氫化了的；特別是X是式X-1所示的基團 R16是氫、低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷硫基、全氟低級烷基，R15是低級烷基、硝基、氰基、鹵素、低級烷磺?；?、全氟低級烷基；以及Y是 其中R22是氫、鹵素或者低級烷基，R23是鹵素或者低級烷基，R24是氫，特別是其中在X-1中R15是鹵素以及R16是氫或者鹵素；R22是氫、鹵素、乙基或者甲基，R23是鹵素、乙基或者甲基。
本發(fā)明的化合物以及它們的代謝物抑制在循環(huán)的淋巴細胞、嗜曙紅細胞、嗜堿細胞和單核細胞(“VLA-4表達的細胞”)上VCAM-1和纖維結(jié)合蛋白與VLA-4的結(jié)合。人們知道VCAM-1和纖維結(jié)合蛋白在這種細胞上與VLA-4結(jié)合涉及一定的疾病狀態(tài)，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病，特別是嗜曙紅細胞與肺內(nèi)皮的結(jié)合，其是發(fā)生氣喘的肺炎的原因。因此，在另一個方面本發(fā)明的化合物用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病，特別是氣喘。
基于它們能夠抑制在循環(huán)的淋巴細胞、嗜曙紅細胞、嗜堿細胞和單核細胞上VCAM-1和纖維結(jié)合蛋白與VLA-4的結(jié)合，本發(fā)明的化合物以及它們的代謝物能被用作治療熟知與這種結(jié)合有關(guān)的疾病的藥物。這種疾病的例子是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、氣喘以及炎癥性腸病。本發(fā)明的化合物優(yōu)選用于治療包括與肺炎例如氣喘的疾病。氣喘中出現(xiàn)的肺炎與嗜曙紅細胞滲入肺有關(guān)，其中嗜曙紅細胞與已經(jīng)被一些氣喘-觸發(fā)事件或物質(zhì)激活的內(nèi)皮結(jié)合。
此外，代謝地衍生自本發(fā)明化合物的?；奖彼嵫苌镆材軌蛞种芕CAM-1和MadCAM與細胞的受體α4-β7亦稱LPAM結(jié)合，其表達在淋巴細胞、嗜曙紅細胞以及T細胞上。α4-β7與不同的配位體在炎癥性的狀況例如氣喘下相互作用的精確的作用沒有完全了解，抑制α4-β1和α4-β7受體結(jié)合的本發(fā)明的化合物在氣喘的動物模型中特別有效。此外單克隆抗體對α4-β7的作用顯示抑制α4-β7與MadCAM或VCAM結(jié)合的化合物可用于治療炎癥性腸病。它們也可用于治療其他的疾病，其中這種結(jié)合涉及病害或癥狀的原因。
本發(fā)明的化合物可以經(jīng)口、直腸或腸胃外，例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)或經(jīng)皮膚給藥；或舌下給藥，或作為眼制劑，或作為肺炎的氣溶膠。用于口服的膠囊、片劑、懸浮液或溶液，栓劑，注射溶液，滴眼劑，藥膏或噴霧溶液是給藥形式的例子。
靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、口服或吸入給藥是優(yōu)選的使用形式。本發(fā)明化合物給藥的有效劑量取決于特定有效成份的性質(zhì)、病人的年齡和需要以及給藥的方式。劑量可以通過任何傳統(tǒng)方法、例如通過劑量-限定的臨床試驗來確定。因此，本發(fā)明進一步包括治療患有其中與VLA-4-表達的細胞結(jié)合的纖維結(jié)合蛋白VCAM-1是病癥或病害的病因因素的疾病的宿主的方法，通過給藥足夠抑制VCAM-1或與VLA-4-表達的細胞結(jié)合的纖維結(jié)合蛋白量的本發(fā)明化合物以致減少所述的癥狀或所述的損害。通常，優(yōu)選每天大約0.1-100毫克/仟克體重的劑量，其中特別優(yōu)選每天1-25毫克/仟克的劑量，尤其優(yōu)選每天1-10毫克/仟克體重的劑量。
在另一個方面，本發(fā)明進一步包括含有藥學(xué)上有效量的本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。這種組合物可以通過任何傳統(tǒng)的方法配制。在這一點上本發(fā)明涉及藥物制劑，尤其是用于治療或預(yù)防類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病和氣喘的藥物制劑，其含有本發(fā)明的任何一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯和相容的藥物載體材料。片劑或顆?？梢院幸幌盗械恼澈蟿?、填料、載體或稀釋劑。液體組合物可以是例如無菌的與水可混溶的溶液形式。除有效成份之外膠囊可以含有填料或增稠劑。此外，還可以含有增加香味的添加劑以及通常用作防腐劑、穩(wěn)定劑、保濕劑和乳化劑的物質(zhì)以及用于改變滲透壓力的鹽、緩沖劑及其他添加劑。
前面提到的載體材料和稀釋劑可以包括任何常用的藥學(xué)上可接受的有機或無機物質(zhì)，例如水、明膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、阿拉伯膠、聚乙二醇等。
口服的單位劑型例如片劑和膠囊，優(yōu)選含有25毫克-1000毫克本發(fā)明化合物。
在另一個方面，本發(fā)明涉及制備式1化合物的方法。本發(fā)明的化合物可以通過任何傳統(tǒng)的方法制備。在反應(yīng)路線1中，用能夠有選擇地還原羧酸酯的還原劑處理式2化合物，其中Z是低級烷基，該化合物是按照如WO99/10313和WO99/10312中所述的方法制備的已知化合物。例如在大約室溫下在醇溶液中用堿金屬氫硼化物例如硼氫化鈉處理式2化合物能夠順利地進行還原得到式1化合物。路線1 其中X和Y定義如上。
一般的方法熔點在Thomas-Hoover儀器上測定并且未校正。旋光度用Perkin-Elmer241型旋光計測定。1H-NMR波譜是使用四甲基硅烷(TMS)作為內(nèi)標物、用Varian XL-200和Unityplus 400 MHz波譜儀記錄。電子轟擊(EI，70 ev)和快速原子轟擊(FAB)質(zhì)譜是在VG Autospec或VG 70E-HF質(zhì)譜儀上測定。用于柱色譜法的硅膠是用于快速色譜法的Mallinkrodt SiliCar 230-400目硅膠；該柱在頂端0-5 psi氮氣下運行以促進流動。薄層色譜是在涂有由E.Merck(E.Merck#1.05719)提供的硅膠的玻璃薄層板上進行，通過在12蒸汽中曝露在254 nm紫外線燈下在觀察盒中觀察或者通過用乙醇水溶液中的磷鉬酸(PMA)或在C12中曝露之后用根據(jù)E.Von Arx，M.Faupel和M Brugger，J.Chromatography，1976，120，224-228制備的4，4’-四甲基二氨基二苯基甲烷試劑噴霧來目測。
反相高壓液相色譜法(RP-HPLC)使用采用3×30厘米、WatersDeltaPak 15μM C-18柱的Waters Delta Prep 4000在40毫升/分鐘的流量下采用一般含有5-95％乙腈的乙腈水(每個含有0.75％TFA)梯度在35-40分鐘內(nèi)或者使用采用41.4毫米×30厘米、8μM DynamaxTMC-18柱的Rainin HPLC在49毫升/分鐘的流量下和如上所述相似的乙腈水梯度進行。
二氯甲烷(CH2C12)、2-丙醇、DMF、THF、甲苯、己烷、乙醚和甲醇是Fisher試劑級并且無需另外的純化即可使用，除非另有說明，乙腈是Fisherhplc級并且直接使用。
定義THF是四氫呋喃，DMF是N，N-二甲基甲酰胺，
HOBT是1-羥基苯并三唑，BOP是六氟磷酸[(苯并三唑-1-基)氧]三-(二甲基氨基)鏻，HATU是六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓(uronium)，HBTU是六氟磷酸O-苯并三唑-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓(uronium)，DIPEA是二異丙基乙胺，DMAP是4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，DPPA是二苯基磷酰基疊氮化物，DBU是1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯，NaH是氫化鈉，鹽水是飽和的氯化鈉水溶液TLC是薄層色譜法LDA是二異丙基氨基鋰BOP-Cl是二(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯(phosphinic chloride)NMP是N-甲基吡咯烷酮(pyrrolidinone)實施例實施例1.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨醇的合成 在室溫下在8小時期間內(nèi)向含有4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨酸甲酯(9.9毫摩爾，5.14克)的甲醇(55毫升)溶液中分六部分加入過量的硼氫化鈉(198毫摩爾，7.49克)。為了控制放熱反應(yīng)和形成泡沫時氣體的放出，緩慢的加入硼氫化鈉是至關(guān)緊要的。加入之后，形成的溶液在室溫下攪拌2天，在此期間TLC分析混合物顯示沒有原料。過量的氫化物通過緩慢加入水(20毫升)破壞。在真空下除去甲醇，將得到的固體溶于水(30毫升)、飽和氯化銨(80毫升)和乙酸乙酯(150毫升)的混合物中。分離兩層，水層用乙酸乙酯(70毫升)萃取。合并的萃取液用鹽水溶液(100毫升)洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾出干燥劑后，在真空下濃縮濾液得到5.3克粗化合物，其通過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯和己烷(3∶1)洗脫純化，獲得4.5克(92％)4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)-羰基]-L-苯丙氨醇，為白色固體熔點198-200℃，HRMS觀察到的質(zhì)量491.0699；計算的質(zhì)量491.0696(M+H)。
實施例2.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇的合成 在30-35℃下在6小時期間內(nèi)向含有4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨酸甲酯(3.34毫摩爾，2.0克)的甲醇(40毫升)溶液中分四部分加入過量的硼氫化鈉(10毫摩爾，378毫克)。透明溶液在室溫下攪拌15小時，在這時TLC分析混合物顯示含有原料。然后，在6小時期間內(nèi)分四部分再加入一些硼氫化鈉(16.9毫摩爾，640毫克)，該溶液再攪拌3天。過量的氫化物通過緩慢加入水(10毫升)破壞。在真空下除去甲醇，在熱的條件下將得到的固體溶于水(30毫升)、飽和氯化銨(80毫升)、乙酸乙酯(100毫升)和四氫呋喃(50毫升)的混合物中。分離兩層，水層用乙酸乙酯(50毫升)和四氫呋喃(50毫升)萃取。合并的萃取液用鹽水溶液(100毫升)洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾出干燥劑后，在真空下濃縮濾液，將粗的殘余物通過硅膠柱色譜法，用乙酸乙酯洗脫純化，獲得0.89克(47％)4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，為無定形的白色固體。HRMS觀察到的質(zhì)量569.1645；計算的質(zhì)量569.1643(M+H)。
實施例3.使用實施例1中描述的一般方法，可以制備下列化合物4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2-三氟甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺?；?丙基)-環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-甲基-6-乙基苯基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-三氟甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇實施例4.特應(yīng)性靈長目動物的急性導(dǎo)氣管炎癥。
使用Turner等人描述的改進的實驗設(shè)計測定猴子的導(dǎo)氣管炎癥(Tumer等人，1994)。重量在3.6-5.8仟克之間的成熟的雄性cynomolgus猴(Macacafascicularis，Hazelton Labs，Denver，PA)用于這些研究中。當經(jīng)受蛔蟲屬萃取液的氣溶膠時，所有的動物顯示對蛔蟲屬sutim抗原的積極的皮膚和導(dǎo)氣管反應(yīng)，對于乙酰甲膽堿(MCh)的敏感性至少增加3倍。
在每個實驗的當天，插進裝上膠管管頭的氣管內(nèi)導(dǎo)管(3毫米，Mallinckrodt Medical，St.Louis，MO)用12毫克/仟克氯胺酮鹽酸鹽和0.5毫克/仟克甲苯噻嗪使動物麻醉，然后直立放在專門設(shè)計的有機玻璃架子上。該氣管內(nèi)導(dǎo)管與熱的Fleisch呼吸氣流流速計連接。經(jīng)連接于呼吸氣流流速計的Validyn壓差傳感器(DP 45-24)測量空氣流量。經(jīng)連接在氣管套管的側(cè)臂和插入位于左側(cè)乳頭下面肋間隙的18-號胸膜內(nèi)的針之間的第二Validyne傳感器(DP 45-24)量經(jīng)肺壓力，使用如上所述的模塊儀器數(shù)據(jù)記錄壓力和流量以及計算RL。在每個實驗的當天測量所有動物的基線RL，平均值大約為0.04厘米H2O/毫升/秒。
實驗設(shè)計通過將動物暴露在A.Suum萃取液的氣溶膠中60秒誘發(fā)導(dǎo)氣管炎癥。該氣溶膠經(jīng)連接于氣管內(nèi)導(dǎo)管的噴霧器(De Vilbiss 5000型，Healt Care Inc.，Somerset，PA)傳送。預(yù)先決定每個動物的萃取液濃度(500-50,000 PNU)并且引起導(dǎo)氣管阻力至少加倍。在攻擊抗原24小時之后，按照前面描述的使動物麻醉并且放置在不銹鋼桌子上。通過將小兒科的支氣管鏡插入至導(dǎo)氣管腔中直到大約第4或第5代支氣管并且溫和地用無菌的Hanks平衡的鹽溶液的3X2毫升等分試樣灌洗來評價導(dǎo)氣管炎癥。然后使用標準血液學(xué)技術(shù)分析回收的灌洗液中總的細胞和有不同的細胞數(shù)。
藥物治療動物在攻擊抗原之前2小時口服藥物或賦形劑。相對于用賦形劑治療的對照動物，實施例1的化合物使存在于灌洗液中炎癥細胞數(shù)和百分比的顯著地減少。
權(quán)利要求
1.下式化合物 其中X是式X-1所示的基團 其中R15是鹵素、硝基、低級烷磺?；⑶杌?、低級烷基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、羧基、低級烷基氨基磺酰基、全氟低級烷基、低級烷硫基、羥基低級烷基、烷氧基低級烷基、烷硫基低級烷基、烷亞磺?；图壨榛?、烷磺酰基低級烷基、低級烷亞磺?；⒌图壨轷；⒎减；?、芳基、芳氧基；R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、OH、全氟低級烷基或低級烷硫基；或X是式X-2所示的基團 其中Het是含有1，2或3個選自N、O和S雜原子的5-或6-元雜芳環(huán)，或Het是含有1，2，3或4個選自O(shè)、S和N雜原子的9-或10-元二環(huán)雜芳環(huán)；R15和R16如上面X-1中所定義，以及R30是氫或低級烷基，p是0-1的整數(shù)；或X是式X-3所示的基團 其中R18是芳基、雜芳基，R19是取代的或未被取代的低級烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基，以及R20是取代的或未被取代的低級烷?；蚍减；?；Y是式Y(jié)-1所示的基團 其中R22和R23獨立地是氫、低級烷基、低級烷氧基、低級環(huán)烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基、低級烷硫基、低級烷亞磺?；⒌图壨榛酋；⒌图壨轷；?、鹵素或全氟低級烷基，R22和R23中至少一個不是氫，以及R24是氫、低級烷基、低級烷氧基、芳基、硝基、氰基、低級烷磺?；螓u素或者Y是經(jīng)碳原子連接酰胺羰基的五或六元雜芳環(huán)的基團Y-2，其中所述的環(huán)含有一個、兩或三個選自N、O和S的雜原子，所述環(huán)中一個或兩個原子獨立地被低級烷基、環(huán)烷基、鹵素、氰基、全氟烷基或芳基取代，至少一個所述的取代的原子與連接酰胺羰基的碳原子相鄰；或者Y是下式所示3-7元環(huán)的基團Y-3 其中R25是低級烷基、未被取代的或者氟取代的低級鏈烯基，或者基團R26-(CH2)e-，R26是芳基、雜芳基、疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、低級烷?；⒌图壨榱蚧?、低級烷磺?；?、低級烷亞磺酰基、全氟代低級烷酰基、硝基或者R26是基團-NR28R29；R28是H或者低級烷基；R29是氫、低級烷基、低級烷氧羰基、低級烷?；?、芳酰基、全氟代低級烷?；被?、低級烷磺?；⒌图壨榘被驶?、芳氨基羰基，或者R28和R29一起形成選擇性地含有選自O(shè)、S和N的一個雜原子的4，5或6-元飽和碳環(huán)；環(huán)上的碳原子未被取代或被低級烷基或鹵素取代；Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或鍵；R27是H、低級烷基、芳基、低級烷?；?、芳?；虻图壨檠豸驶籩是0-4的整數(shù)；f是1-3的整數(shù)；以及虛線的鍵可以被選擇性地氫化。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中X是下式所示的基團 R15和R16如權(quán)利要求1中所定義。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R15是鹵素、硝基、低級烷磺?；⑶杌?、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷硫基、烷亞磺?；图壨榛?、烷磺?；图壨榛?、低級烷亞磺酰基、低級烷?；蚍减；?，R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基或低級烷硫基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R15和R16獨立地是氯或氟。
5.權(quán)利要求3的化合物，其中X選自如下基團
6.權(quán)利要求1的化合物，其中X是基團X-2 其中p、R15、R16和R30如權(quán)利要求1中所定義。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中Het是含有1，2或3個氮或氮和硫或氮和氧的5-或6-元單環(huán)雜芳環(huán)。
8.權(quán)利要求6的化合物，其中Het是含有1-3個氮的二環(huán)雜芳環(huán)。
9.權(quán)利要求6的化合物，其中R15是硝基、低級烷磺?；?、氰基、低級烷基、低級烷氧基、全氟低級烷基、低級烷硫基、低級烷?；蚍蓟?。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R15是未被取代的苯基。
11.權(quán)利要求6的化合物，其中R16是氫、鹵素、硝基、氰基、低級烷基、全氟低級烷基；R30是氫或者低級烷基。
12.權(quán)利要求6的化合物，其中Het是含有1或2個氮的6元單環(huán)雜芳環(huán)或含有一個氮的10元二環(huán)雜芳環(huán)，R15和R16獨立地是氫、低級烷基或全氟烷基，R30不存在。
13.權(quán)利要求6的化合物，其中X-2選自如下基團
14.權(quán)利要求1的化合物，其中X是 R18、R19和R20如權(quán)利要求1中所定義。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中R18是苯基。
16.權(quán)利要求14的化合物，其中R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低級烷基。
17.權(quán)利要求14的化合物，其中R20是取代的或未被取代的低級烷?；?。
18.權(quán)利要求14的化合物，其中R18是苯基，R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低級烷基，R20是低級烷?；?br> 19.權(quán)利要求14的化合物，其中R18是未被取代的或被鹵素或低級烷氧基取代的苯基；R19是未被取代的或被低級烷氧基、吡啶基低級烷基或低級烷基取代的苯基低級烷基；R20是取代的或未被取代的低級烷酰基。
20.權(quán)利要求14的化合物，其中X選自如下基團
21.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是 R22、R23和R24如權(quán)利要求1中所定義。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中R22和R23是低級烷基、三氟甲基或鹵素，R24是氫、低級烷基、低級烷氧基或鹵素。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中Y-1選自如下基團
24.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是 p和Het、R30和R31如權(quán)利要求1中所定義。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中Het是6元單環(huán)雜芳環(huán)。
26.權(quán)利要求25的化合物，其中雜原子是N。
27.權(quán)利要求26的化合物，其中Y-2選自如下基團
28.權(quán)利要求1的化合物，其中Y是式Y(jié)-3所示的基團 R25和Q如權(quán)利要求1中所定義；e是0-4的整數(shù)；f是1-3的整數(shù)；虛線的鍵可以被選擇性地氫化。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中Y-3是四-六元環(huán)，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4以及R26是疊氮基、氰基、羥基、低級烷氧基、低級烷氧羰基、低級烷酰基、低級烷磺?；?、低級烷亞磺酰基、全氟代低級烷酰基、硝基、低級烷硫基、苯基或被烷氧基或鹵素取代的苯基，或者R26是NHR29其中R29是低級烷酰基或低級烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整數(shù)；以及虛線的鍵是氫化了的。
30.權(quán)利要求28的化合物，其中Y選自下式基團
31.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，選自4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-氯-6-甲基苯基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲磺酰基)丁基]環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-三氟甲基苯基)碳基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺?；?丙基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)環(huán)戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺?；?丁基)環(huán)戊基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇，或4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇。
32.制備式1化合物的方法 其中X和Y如權(quán)利要求1中所定義，其特征在于用能夠有選擇地還原羧酸酯的還原劑處理式2化合物， 其中X和Y定義如上，Z是低級烷基。
33.根據(jù)權(quán)利要求1-31中任何一項的化合物，用作藥物尤其是用于治療或預(yù)防類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病和氣喘的藥物。
34.藥物制劑，尤其是用于治療或預(yù)防類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病和氣喘的藥物制劑，其含有權(quán)利要求1-31中任何一項的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯和相容的藥物載體材料。
35.生產(chǎn)藥物制劑、尤其是用于治療或預(yù)防類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病和氣喘的藥物制劑的方法，該方法包括將一個或多個根據(jù)權(quán)利要求1-31中任何一項的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯以及如果需要一個或多個其他治療有價值的物質(zhì)和相容的藥物載體制成蓋侖制劑給藥形式。
36.根據(jù)權(quán)利要求1-31中任何一項的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯用于治療或預(yù)防疾病，尤其是治療或預(yù)防類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病和氣喘的用途。
37.根據(jù)權(quán)利要求1-31中任何一項化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯用于制備治療或預(yù)防疾病，尤其是治療或預(yù)防類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、炎癥性腸病和氣喘的含有上述化合物作為活性物質(zhì)的藥物的用途。
38.基本上如在上文中描述的新的化合物、藥物、方法和用途。
全文摘要
式(1)化合物以及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯,其中X和Y如說明書中所定義,是VCAM－1與VLA－4在體內(nèi)結(jié)合的有效抑制劑并且用于治療炎癥性疾病中的炎癥,其中這種結(jié)合作用引起該炎癥。
文檔編號A61KGK1340043SQ00803869
公開日2002年3月13日 申請日期2000年2月12日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月18日
發(fā)明者阿奇薩拉奧·賽杜里, 杰斐遜·W·蒂利 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司