專利名稱：用于皮脂腺疾病的膽甾醇酯和蠟酯合成的雙重抑制劑的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及一種應(yīng)用命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽甾治療皮脂腺疾病中的方法。具體而言，本發(fā)明提供了治療皮脂腺疾病的方法，其中所述疾病選自皮脂溢、痤瘡、口周皮炎、酒渣鼻和皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。
痤瘡是一類與多種病因有關(guān)的皮膚疾病。這類痤瘡包括氯痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡和尋常痤瘡。在其尋常痤瘡中，其主要出現(xiàn)在面部和軀干區(qū)域，影響患者的外觀。它可能會帶來更多的精神痛苦，并且從身體的觀點(diǎn)看，比許多其他疾病更加嚴(yán)重地折磨病患者。
痤瘡家族疾病共同的基本損害是毛囊皮脂腺囊的粉刺或″黑頭″。這種情況可以較輕且短暫同時(shí)只有少數(shù)黑頭，其可以很容易地通過擠壓排出并且可以不必?fù)?dān)心；或者這種情況會較嚴(yán)重，長時(shí)間持續(xù)并且非常有損于容顏，同時(shí)在更加嚴(yán)重的情況中會引起囊性損害并常常遺留下永久性瘢痕。
痤瘡惡化中可能會出現(xiàn)毛囊中首先充入粘性、角質(zhì)的物質(zhì)。這種角質(zhì)物質(zhì)的嵌塞就是白頭和黑頭粉刺。由于細(xì)菌在這些角質(zhì)嵌塞中的生長，毛囊破裂引發(fā)了疾病的炎性期，其為膿皰、丘疹、囊腫和小結(jié)節(jié)的形式。雖然業(yè)已利用許多不同的方式來治療這種疾患，但沒有一種方法普遍性有效，而且絕大多數(shù)具有不良副作用。
常用于痤瘡治療的一種方法是采用″去皮″，即，作為收斂劑，在較輕的情況中用這種試劑引起表皮脫落同時(shí)除去一些角質(zhì)嵌塞。在存在膿皰或囊性損傷的較嚴(yán)重情況中，同樣可以通過切口排除并排放出包含物。迄今為止已經(jīng)利用了許多其他方法，例如疫苗療法，協(xié)助控制慢性感染并增強(qiáng)患者對葡萄球菌的抗性；可的松類甾族化合物；激素療法，其僅僅適用于可以接受常規(guī)雌激素避孕方案的女性患者；抗菌療法，用于治療大膿皰或囊性痤瘡，其中可以用四環(huán)素、青霉素、紅霉素或其他抗菌劑治療患者，并且在某些情況中，可以采用一般性外科皮膚平刨術(shù)。激素和抗菌劑的全身性給藥業(yè)已出現(xiàn)某些治療功效，但對于慢性治療來說是不可接受的。
有人建議口服施用大劑量的維生素A對痤瘡有益(Straumford J.V.，″維生素A其對痤瘡的作用″，Northwest Med.，August 1943；42219-225)，雖然其他研究人員發(fā)現(xiàn)其無效(Anderson J.A.D.等.，″維生素A在尋常痤瘡中″，Brit.Med.J.，August 1963；2294-296；LynchF.W.等，″用維生素A治療尋常痤瘡，″Arch Derm.，March 1947；55355，357；和Mitchell G.H.等，″肌肉內(nèi)注射維生素A對尋常痤瘡治療的結(jié)果″Arch.Derm.，October 1951；64428-430)。
迄今為止發(fā)現(xiàn)無一普通局部治療特別有效。業(yè)已局部使用維生素A酸(Beer Von P.，″Untersuchungen ber die Wirkung Vitamin A-Saure，″Dermatologica，March 1962；124192-195和Stuttgen G.，″ZurLokalbehandlung von Keratosen mit Vitamin A-Saure，″Dermatologica，F(xiàn)ebruary 1962；12465-80)，在那些全身角化性疾病中獲得良好的結(jié)果，所述疾病對口服高劑量的維生素A具有應(yīng)答。其中用Beer和Stuttgen治療的那些人是患有痤瘡的患者；然而，這些被調(diào)查人員報(bào)告對于這種疾病沒有有效的結(jié)果。
Goldstein J.A.等在″sotretinoin和etretinate對痤瘡和皮脂腺分泌的對比效果″J.Am Acad Dermatol，1982；6760765中描述了用異維甲酸和依曲替酯治療痤瘡。Shapiro S.S.等在″潛在治療物質(zhì)在痤瘡治療中的評估″《Phannacology of Retinoids in the Skin.Pharmacol.Skin》Reichert和Shroot，編輯，Karger，Basel，1989；3104-122中討論了用多種可能有效的物質(zhì)治療痤瘡。
Lambert R.W.和Smith R.E.在J.Invest Derm，1989；93(2)321-325中業(yè)已進(jìn)行討論了″13-順式視黃酸對于倉鼠瞼板腺的作用″，而Lowe N.J.和David M.在″牛皮癬中的全身性視黃醛衍生物對比功效和毒性″《Phannacology of Retinoids in the Skin.Pharmacol.Skin》Reichert and Shroot編輯，Karger，Basel，1989；3104-122中討論了視黃醛衍生物(retinoids)對牛皮癬的作用。
美國專利號3,729,568涉及維生素A酸(視黃酸或維甲酸)在尋常痤瘡治療中的應(yīng)用。
國際專利申請PCT/US92/06485教導(dǎo)了維生素A衍生物在包括痤瘡在內(nèi)的皮膚疾病中的治療。
美國專利號4,703,110描述了對位取代的苯甲酸衍生物在包括囊性痤瘡在內(nèi)的皮膚病的治療中的應(yīng)用。
美國專利號4,927,928教導(dǎo)了苯甲酰胺類化合物在具有炎性和/或免疫變應(yīng)性成分的皮膚病的治療中的應(yīng)用，包括尋常痤瘡、老年性痤瘡，和藥物性或職業(yè)性痤瘡。
美國專利號4,716,175(1987年12月29日授權(quán))公開了ACAT抑制劑，其包括命名為2，2-二甲基-N-(2，4，6-三甲氧基苯基)-十二烷酰胺的化合物。該化合物具有下面的結(jié)構(gòu) 該專利在此引入作為參考。
歐洲專利申請?zhí)朎P0699439A2公開了有效治療皮脂腺疾病，特別是痤瘡的ACAT抑制劑。本申請?jiān)诖艘胱鳛閰⒖?。但化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯沒有公開在EP0699439A2或其中引入的參考文獻(xiàn)中。
抑制?；o酶A膽固醇基(cholesteryl)轉(zhuǎn)移酶的化合物被稱為ACAT抑制劑。一種ACAT抑制劑[(2，4，6-三異丙基苯基)-乙酰基]-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯及其制備方法公開在美國專利號5,491,172及其分案5,633,287中，它們在此引入作為參考。命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物通常也被稱作avasimibe。該化合物可以應(yīng)用在高膽固醇血癥和動脈粥樣硬化。
應(yīng)用[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基]-氨基磺酸2，6二異丙基-苯基酯降低Lp(a)水平的方法在美國專利號6,117,909中有所教導(dǎo)。
應(yīng)用[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6二異丙基-苯基酯防止血小板破裂的方法在待決專利申請60/163,814中(1999年11月5日提交)有所教導(dǎo)。
我們現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)令人驚奇的和有益的結(jié)果。給予[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯可以抑制蠟酯合成。所以，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)[2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基]-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯對于皮脂腺疾病具有意想不到的有益效果，特別是痤瘡、口周皮炎、酒渣鼻和皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。痤瘡選自，例如，綠痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡、尋常痤瘡、老年痤瘡和藥物性痤瘡。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一種治療皮脂腺疾病的方法，包括給需要所述治療的患者施用有效量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽。還應(yīng)理解本發(fā)明提供一種治療哺乳動物、尤其是人體中的皮脂腺疾病的方法，包括施用治療有效量的稱作[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基]-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物及其藥學(xué)可接受鹽。
具體而言，本發(fā)明提供一種治療皮脂腺疾病的方法，其中所述的疾病選自痤瘡、酒渣鼻和皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。本發(fā)明尤其提供治療痤瘡的方法，例如氯痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡、尋常痤瘡、老年痤瘡和藥物性痤瘡。
附圖簡述

圖1是一幅表示小鼠包皮腺和肝臟微粒體中膽固醇酯和蠟酯合成的百分抑制率相對于[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯和2，2-二甲基-N-(2，4，6-三甲氧基苯基)十二烷酰胺的抑制劑濃度的線圖。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供一種治療皮脂腺疾病的方法，包括給需要所述治療的患者施用有效量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽?；衔颷(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯(其通用名也稱作avasimibe)首次公開在美國專利號5,491,172和分案專利美國專利號5,633,287中。avasimibe或式I的化合物具有下列結(jié)構(gòu) 本發(fā)明提供一種治療哺乳動物、特別是人體中的皮脂腺疾病的方法，包括施用治療有效量的式I的化合物[(2，4，6三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯或其藥學(xué)可接受鹽。
此外，本發(fā)明提供治療上述皮脂腺疾病的方法，其中所述的疾病選自皮脂溢、痤瘡、口周皮炎、酒渣鼻或皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。
本發(fā)明提供治療上述皮脂腺疾病的方法，其中所述的疾病選自氯痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡、尋常痤瘡、老年痤瘡，或藥物性痤瘡。
本發(fā)明的一種優(yōu)選實(shí)施方式提供治療上述痤瘡的方法，其中所述的痤瘡選自氯痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡、尋常痤瘡、老年痤瘡或藥物性痤瘡。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種抑制需要所述治療的人體中的皮脂生成的方法，包括給該人體施用皮脂生成抑制量的[(2，4，6-三異丙基-苯基)乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯或其藥學(xué)可接受鹽。這種方法適于治療任何上述皮脂腺疾病，或者治療或預(yù)防其他由于皮脂過度生成引起的病癥，例如油性皮膚。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，該化合物經(jīng)局部給藥。
本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其含有皮脂腺分泌抑制量的稱作[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物和藥學(xué)可接受載體。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種藥物組合物，其含有痤瘡抑制量的命名為[(2，4，6-三異丙基苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物和藥學(xué)可接受載體。此外，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有痤瘡抑制量的ACAT抑制劑[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯和藥學(xué)可接受載體。
本發(fā)明還提供一種治療痤瘡的方法，包括給需要該治療的患者施用痤瘡抑制量的化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯或其藥學(xué)可接受鹽。本發(fā)明還提供一種治療痤瘡的方法，包括給需要該治療的患者施用含有痤瘡抑制量的化合物[(2，4，6-三異丙基苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯和藥學(xué)可接受載體的載體。另外，本發(fā)明提供了化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯在制備治療痤瘡的藥物中的應(yīng)用。
而且，本發(fā)明提供了化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基]-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯在制備治療皮脂腺失調(diào)引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯在制備在需要該治療的患者中用于治療由皮脂腺失調(diào)引起的疾病(包括痤瘡)的藥物組合物中的應(yīng)用。
本發(fā)明進(jìn)一步提供[(2，4，6-三異丙基苯基)-乙酰基]-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯或其藥學(xué)可接受鹽在制備可以抑制人體中皮脂生成的藥物中的用途。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述的藥物適合局部涂敷。
此外，本發(fā)明提供一種抑制AFAT的方法，包括給需要該治療的患者施用AFAT抑制量的化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯或其藥學(xué)可接受鹽。
本發(fā)明還提供一種抑制ACAT和AFAT的方法，包括給需要該治療的患者施用ACAT和AFAT抑制量的化合物[(2，4，6-三異丙基-苯基)乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯。
Avasimibe業(yè)已顯示出乎意料的抑制皮脂腺分泌的能力。這種活性有益于皮脂腺疾病的治療，其中該疾病的一個(gè)組成特征在于皮脂的過度分泌。所以，Avasimibe可以有效治療、特別是患有這類疾病的患者中的痤瘡、口周皮炎、酒渣鼻和皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。
Avasimibe尤其適合于痤瘡的治療，其包括氯痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡、尋常痤瘡、老年痤瘡和藥物性痤瘡。痤瘡是一種許多成年人和多數(shù)青少年患有的皮膚病。所以avasimibe被認(rèn)為可以使許多人受益。
在此所用的術(shù)語″AFAT″是指?；?輔酶A脂肪醇?；D(zhuǎn)移酶。
術(shù)語″ACAT″是指?；?輔酶A膽固醇基轉(zhuǎn)移酶。
術(shù)語″患者″是指哺乳動物，其包括人體。
術(shù)語″蠟酯″是指由脂肪酸和長鏈醇(也稱作脂肪醇)形成的酯。
術(shù)語″膽固醇酯″是指由脂肪酸和膽固醇形成的酯。
術(shù)語″皮脂″是指皮脂腺的分泌物，包括特別是甘油三酯、游離脂肪酸、蠟酯、角鯊烯、膽固醇和膽固醇酯。
本發(fā)明的化合物能夠進(jìn)一步形成藥學(xué)可接受的鹽，例如藥學(xué)可接受堿加成鹽。藥學(xué)可接受堿加成鹽是與金屬或胺生成的，例如堿金屬和堿土金屬或有機(jī)胺。用作陽離子的金屬的實(shí)例是鈉、鉀、鎂、鈣等。適當(dāng)胺的實(shí)例是N，N’-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、二環(huán)己基胺、乙二胺、N-甲葡糖胺和普魯卡因(參見，例如，Berge S.M.等，″Pharmaceutical Salts，″J.of Pharma.Sci.，1977；661)。這些形式全部落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
通過以常規(guī)方式使游離酸與足夠量的所需堿接觸生成鹽制備上述酸性化合物的堿加成鹽。通過使鹽形成與酸接觸可以重新生成游離酸并且以常規(guī)方式分離出游離的酸。
游離酸形式在某些物理性質(zhì)上、如在極性溶劑中的溶解度上多少不同于其各自的鹽形式，但對于本發(fā)明的目的來說其鹽等效于其各自的游離酸。
本發(fā)明的化合物可以以非溶劑化形式以及溶劑化形式存在，包括水合物形式。通常，溶劑化形式、包括水合物形式等效于非溶劑化形式并屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的化合物可以制備成并以多種不同的口服和非腸道劑型給藥。所以，本發(fā)明的化合物可以通過注射給藥，也就是靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、十二指腸內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥。另外，本發(fā)明的化合物可以通過吸入給藥。例如經(jīng)鼻內(nèi)給藥。而且，本發(fā)明的化合物可以經(jīng)皮給藥。對于所屬領(lǐng)域技術(shù)人員來說顯而易見的是，下列劑型可以含有式I的化合物或式I化合物的相應(yīng)藥學(xué)可接受鹽作為活性成分。
為了從本發(fā)明的化合物制備藥物組合物，藥學(xué)可接受載體可以是固體或液體。固體形式的制劑包括，粉末劑、片劑、丸劑、膠囊、囊形片、栓劑和可分散顆粒劑。固體載體可以是一種或多種物質(zhì)，其也可以作為稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或包封材料。
在粉末劑中，載體是細(xì)分的固體，其與細(xì)分的活性成分形成混合物。
在片劑中，活性成分與具有所需粘合性質(zhì)的載體以適當(dāng)比例混合并壓縮成所需的形狀和大小。
粉末劑和片劑優(yōu)選含有5-約70％的活性化合物。適當(dāng)?shù)妮d體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、蔗糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟、可可脂等。術(shù)語″制劑″包括活性化合物與作為載體的包封材料的制劑，得到一種膠囊，其中活性成分與或有或無的其他載體被一種與其有關(guān)的載體包圍。同樣地，包括扁囊劑和錠劑。片劑、粉末劑、膠囊、丸劑、扁囊劑和錠劑可以用作口服給藥的固體劑型。
為了制備栓劑，首先使低熔點(diǎn)蠟，例如脂肪酸甘油酯的混合物或可可脂熔化并使活性成分均勻地分散在其中，如通過攪拌。隨后將熔化的均勻混合物傾入普通大小的模具中，使其冷卻并由此固化。
液體形式的制劑包括溶液、混懸劑和乳液，例如水或水-丙二醇溶液。為了非腸道注射，液體制劑可以在聚乙二醇水溶液中配制為溶液。
通過把活性成分溶解在水中并根據(jù)需要加入適當(dāng)?shù)闹珓?、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑可以制備適合口服的水溶液。
通過把細(xì)分的活性成分分散在帶有粘性物質(zhì)的水中，如天然或合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其他已知助懸劑中可以制備適合口服使用的水性混懸液。
還包括那些在使用之前可立刻轉(zhuǎn)化為用于口服給藥的液體形式制劑的固體形式的制劑。此類液體形式包括溶液、混懸液和乳液。這些制劑除了含有活性成分以外還可以含有著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、人工和天然甜味劑、分粉末劑、增稠劑、增溶劑等。
還包括局部形式的制劑，例如凝膠、霜劑、洗劑、溶液、軟膏等。局部形式的制劑還包括例如膠凍、糊劑、軟膏、油膏等。局部形式的制劑可以通過將一種或多種成膜劑與細(xì)分形式和溶液形式的活性成分混合來制成。成膜劑包括，硬脂醇、鯨蠟醇、丙二醇、甘油、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素等并且為所屬領(lǐng)域技術(shù)人員熟知。
用于涂覆本發(fā)明的活性化合物的載體的實(shí)例包括水或水-醇溶液，水包油或油包水型溶液，乳化凝膠，或兩相體系。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物是洗劑、霜劑、奶液、凝膠、面膜、微球或毫微球的形式，或囊形分散體。在囊形分散體的情況中，構(gòu)成囊泡的液體可以是離子或非粒子型的，或它們的混合物。
除了上述成膜劑以外，可以在本發(fā)明局部給藥的組合物中摻入多種其他成分以提高其治療功效和穩(wěn)定性。這些包括防腐劑如芐醇和適當(dāng)?shù)拇龠M(jìn)皮膚滲透的輔劑，例如癸二酸二乙酯(diethyl sebecate)等。這些組分是所屬領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。
所述的藥物制劑優(yōu)選是單位劑型。在此類劑型中，制劑被進(jìn)一步分為含有適量活性成分的單位劑量。所述的單位劑型可以是包裝的制劑，包裝中含有離散量的制劑，如包裝的片劑、膠囊和存在于小瓶或安瓿中的粉末劑。此外，單位劑型可以是膠囊、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或者它可以是適當(dāng)數(shù)量的任意上述劑型的包裝形式。
活性成分在單位劑量制劑中的量可以根據(jù)具體用途或活性成分的效價(jià)在1mg-1000mg、優(yōu)選10mg-100mg內(nèi)變化或調(diào)整。如果需要，所述的組合物也含有其他相容的治療劑。
在作為治療皮脂腺疾病的藥物的治療應(yīng)用中，本發(fā)明的藥學(xué)方法中所用的化合物可以以約1mg-約100mg/kg/天的起始劑量給藥。所以，所述的有效量、痤瘡抑制量、皮脂腺分泌抑制量、AFAT抑制量，以及ACAT和AFAT抑制量一般是在約1mg-約100mg/kg體重/天內(nèi)變化。日劑量范圍優(yōu)選是約25mg-約75mg/kg。
在決定有效量、痤瘡抑制量、皮脂腺分泌抑制量、皮脂生成抑制量、AFAT抑制量，以及ACAT和AFAT抑制量時(shí)，診斷醫(yī)生要考慮許多因素。所以，劑量可以根據(jù)患者的需要、被治療病癥的嚴(yán)重性以及化合物所采用的制劑而變化。針對具體情況決定適當(dāng)?shù)膭┝繉儆谠擃I(lǐng)域技術(shù)人員的職權(quán)范圍內(nèi)。通常，治療是從小于該化合物的最佳劑量的劑量開始。此后，通過小的增量來增加劑量直至在該情況下達(dá)到最佳效果。一般地，如果必要全天日劑量可以細(xì)分并在當(dāng)天內(nèi)分次給藥。
下面是一種口服制劑的實(shí)例。片劑制劑組分 含量(mg)[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基-25氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯乳糖50玉米淀粉(用于混合) 10玉米淀粉(糊)10硬脂酸鎂(1％) 5總量100所述的氨基磺酸、乳糖和玉米淀粉(混合用)均勻混合。使玉米淀粉(糊)懸浮在200mL的水中并加熱攪拌形成糊。用該糊將混合的粉末制粒。使?jié)竦念w粒通過8號手篩且在80℃下干燥。干顆粒用1％硬脂酸鎂潤滑并且壓縮為片劑。將該片劑給予患者、例如人體，每天4次用于治療皮脂腺疾病。
制備具有下面配方的口服溶液口服溶液組分 重量百分比((2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨 2.0基磺酸，2，6-二異丙基-苯基酯乙醇 10.0芐醇 1.0薄荷矯味劑0.2香草醛0.2多氧乙基醚40 0.1蔗糖 50.0純水 余量合并組分并混合形成均勻溶液。
制備具有下面組成的凝膠局部用凝膠組分 重量百分比[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基 0.50磺酸，2，6-二異丙基-苯基酯丙二醇20.00乙醇 20.00羧乙烯基聚合物[Carbomer 940(商標(biāo))]1.00羥乙基纖維素 0.40芐醇 1.00氫氧化鈉1N至pH6蒸餾水余量將除了氫氧化鈉之外的組分合并生成均勻的分散體。加入氫氧化鈉使該混合物膠凝生成備用的半固體。
制備組成如下的霜劑局部用霜劑組分 重量百分比[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基 0.50磺酸，2，6-二異丙基-苯基酯硬脂酸7.00硬脂醇5.00鯨蠟醇2.00甘油 10.00十二烷基硫酸鈉1.00對羥基苯甲酸丙酯 0.05對羥基苯甲酸甲酯 0.25乙二胺四乙酸二鈉 0.05蒸餾水余量將前四種組分加熱至約70℃生成均勻的熔融物?；旌掀溆嗟慕M分，加熱至約75℃，混合下將其加入到前面制備的熔融物中。由此形成的乳液隨后勻漿并冷卻，生成柔滑的白色霜劑。
制備具有下面組成的洗劑局部用洗劑組分 重量百分比[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基]-氨基 0.50磺酸2，6-二異丙基-苯基酯甘油一硬脂酸酯1.00棕櫚酸異丙酯 4.00聚乙二醇400二硬脂酸酯 2.00甘油 10.00對羥基苯甲酸甲酯 0.10鯨蠟基硫酸鈉 5.00
蒸餾水 余量先將前四種組分加熱至約70℃。隨后攪拌下加入到其余組分的混合物中，其余組分混合物的溫度也約為70℃。將乳液適當(dāng)勻漿并冷卻生成柔滑的白色可傾倒洗劑。
制備具有下面組成的局部用溶液局部用溶液組分 重量百分比[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙酰基-氨基 0.50磺酸，2，6-二異丙基-苯基酯丙二醇20.00乙醇 50.00芐醇 1.00乙二胺四乙酸二鈉 0.01沒食子酸丙酯 0.10檸檬酸0.20氫氧化鈉1N至pH6蒸餾水余量將除氫氧化鈉之外的所有組分?jǐn)嚢杌旌希⑶矣?N氫氧化鈉將所得溶液的pH調(diào)至6，得到自由流動的、快速干燥的局部用溶液。
本發(fā)明的材料和方法如下所述I.微粒體的制備溶液A.洗滌緩沖液(300mM蔗糖，5mM DTT)102.7g蔗糖+0.77g二硫蘇糖醇(DTT)+水至1L。
B.均化緩沖液(洗滌緩沖液含有亮抑蛋白酶肽和乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)四乙酸[EGTA])。制備如上所述的含有25mg亮抑蛋白酶肽和380mg EGTA的洗滌緩沖液。
C.磷酸鹽緩沖液(0.2M，pH 7.4)，混合100mL的1M KH2PO4和100mL的3M K2HPO4并用水使之達(dá)到1000mL。檢測pH并用0.1N H3PO4或0.1N KOH調(diào)至pH 7.4。微粒體的分離從大鼠或小鼠取出包皮腺(PG)a)用乙醚麻醉大鼠或小鼠，取出PG且置于含有洗滌緩沖液的燒杯(冰冷)內(nèi)。
b)一旦可以，將PG在Potter-Elvehjem勻漿器中與15mL的均化緩沖液一起均勻化。勻漿器保持在小冰浴上。操作活塞直至它10次觸到管的底部。
c)用均勻化緩沖液稀釋至200mL的體積。
d)將勻漿傾入置于冰浴中的15×100mm sorvall管內(nèi)。各管含有13.5mL至刻度。
e)在Sorvall離心機(jī)中、在5℃和10,000rpm(12,000×G)下離心15分鐘。
f)用藥刀的平刀片除去浮在頂部的脂肪并將上清液傾入新管內(nèi)。
g)重復(fù)步驟e和f。
h)小心地將盡可能多的上清液轉(zhuǎn)移到超速離心瓶中但不打散管底部的碎片，用于50 Ti或60 Ti Beckman超速離心器。該管保持在冰浴中。
i)在Beckman超速離心機(jī)中、在105,000×g下、在14℃下離心1小時(shí)。
j)棄去上清液。
k)向置于水浴中的瓶中加入1mL的0.2M KPO4緩沖液pH 7.4至瓶的一半。用聚四氟乙烯棒將全部沉淀團(tuán)刮松并轉(zhuǎn)移到15mL勻漿器中。用1mL的緩沖液洗滌瓶子且轉(zhuǎn)移到一個(gè)只有沉淀團(tuán)但沒有緩沖液的瓶內(nèi)。用手輕輕均化。
1)將等份試樣置于冷凍管(NalgeneTM)中且儲藏在液氮中。微粒體的活性至少能保持2年。
m)通過勞里(Lowry)法測定勻漿的蛋白濃度。用180μL鹽水稀釋20μL并測定2×10μL和2×20μL。注KPO4會在Lowry法中導(dǎo)致沉淀形成(Lowry O.H.，Rosebrough N.T.，F(xiàn)arr A.I.和Randal R.J.，J.Biol.Chem.，1951；193265-275)。期望的蛋白濃度是20mg/mL大鼠或小鼠PG微粒體。II.ACAT試驗(yàn)溶液A.蔗糖緩沖液(300mM蔗糖，40mM KH2PO4，50mM KCl，30mM EDTA，pH7.4)。制備1M磷酸鹽緩沖液。將70.89g的K2HPO4和12.65g KH2PO4溶解在480mL水中。用KOH或H3PO4根據(jù)需要調(diào)整pH 7.4。用水調(diào)整體積至500mL。將20mL的1M磷酸鹽緩沖液與1.865g KCl、51.35g蔗糖和5mgEDTA混合。用水調(diào)整體積至480mL，按上述方法調(diào)節(jié)pH至7.4且用水調(diào)至500mL。使終溶液通過0.45μm過濾滅菌單元(例如，Nalgene450-0045)。
B.1％甲基-β-環(huán)糊精10mL蔗糖緩沖液加100mg甲基-β-環(huán)糊精。
C.[4-14C]膽固醇或[1-14C]十六烷醇。蒸發(fā)除去瓶中的甲苯。使放射性標(biāo)記重新懸浮在0.1mL 2-丙醇中。
D.油基輔酶A(1mM存在于蔗糖緩沖液中)。將10.3mg油基輔酶A(Sigma 0-7002)溶解在10mL蔗糖緩沖液中。注保存在-10℃下。在分析測定之前即時(shí)用蔗糖緩沖液稀釋5倍至200μM。
E.[14C]膽固醇標(biāo)記的微粒體或[14C]十六烷醇標(biāo)記的微粒體。用蔗糖緩沖液將儲備微粒體的瓶子稀釋至4mg蛋白/ml。對于每1mL的稀釋微粒體溶液來說，使用玻璃注射器(Hamilton，GASTIGHT，1702)并且通過把注射針頭浸沒在該微粒體溶液中把2.5μL的放射性標(biāo)記物轉(zhuǎn)移至上述稀釋的微粒體中，并且在射出注射器的內(nèi)容物同時(shí)旋轉(zhuǎn)。采用微粒體溶液沖洗1次注射器。通過液體閃爍計(jì)數(shù)(LSC)測定小份試樣的溶液中的dpm。需要約4×106dpm/mL在微粒體溶液中。
F.酸中止溶液(0.5％H2SO4)。取0.5mL的36N H2SO4(濃)加入到100mL的水中。
G.試驗(yàn)化合物溶液。稱重試驗(yàn)化合物制備1mM或4mM的二甲基亞砜(DMSO)儲備溶液。這些溶液用來制備含有40倍試驗(yàn)化合物濃度的DMSO溶液。這些溶液可以在測定之前24小時(shí)制備并保存在室溫下。ACAT測定方法a)通過在兩只試管的每只內(nèi)加入5μL的試驗(yàn)化合物溶液來制備一式兩份樣品。對照和空白樣品不含有抑制劑。注在110×17mm聚丙烯圓錐形底的管(Thermowells)內(nèi)進(jìn)行孵育。
b)向各管內(nèi)加入100μL的1％mβCD溶液。
c)向各管內(nèi)加入20μl的所需濃度(mg/mL)放射標(biāo)記的微粒體。
d)試管在37℃的振搖水浴中孵育30分鐘。
e)通過向除空白之外的所有試管內(nèi)加入10L的299μM油基輔酶A來引發(fā)該反應(yīng)。
f)向空白中加入10μl蔗糖緩沖液。
g)加入油基輔酶A后三分鐘，加入10μL的H2SO4中止溶液停止該反應(yīng)。
h)將40μL的酸化溶液轉(zhuǎn)移到Whatman LK6D硅膠TLC平板的預(yù)吸附區(qū)域，其隨后在熱平板上干燥5分鐘并且在三甲基戊烷/乙醚/乙酸(75∶25∶2)中展開。檢測含有放射標(biāo)記物的色帶并且通過磷光成象借助分子動力學(xué)磷光成像儀(phosphorimager)定量分析。III.數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)評估TLC可以使游離醇與其酯分開。通過磷光成像測定這些色帶中各自的放射性的相對量。該數(shù)據(jù)用來計(jì)算形成的酯的分?jǐn)?shù)，用E/E+A表示，其中(％抑制率＝[(Ec/Ec+Ac)-(Et/Et+At)]×(Ec+Ac/Ec)×100)其中，E＝酯帶的強(qiáng)度和A＝醇帶的強(qiáng)度。通過數(shù)據(jù)對邏輯函數(shù)的非線性最小二乘方擬合計(jì)算出產(chǎn)生50％抑制率(IC50)時(shí)的抑制劑濃度Y=100/1+(X/C)b其中Y是百分抑制率，X是抑制劑濃度，C是IC50并且b是獨(dú)立擬合參數(shù)(independent fitting parameter)。
對于這個(gè)研究，我們假設(shè)-總體分布至少大致標(biāo)準(zhǔn)。-如果X1，X2，....XN是正態(tài)分布中的隨機(jī)樣本，標(biāo)準(zhǔn)變量 具有t分布和n-1的自由度。-Hoμ＝μo-Haμ＜μo對檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量T。當(dāng)Ho是準(zhǔn)確時(shí)，檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量具有t分布和n-1的自由度。當(dāng)Ho是準(zhǔn)確(“零分布”)時(shí)檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量的分布的常識能夠構(gòu)建舍棄域，其中I型誤差概率被控制在預(yù)期的水平。
P(I型誤差)=P(當(dāng)其準(zhǔn)確時(shí)Ho可以被舍棄)＝α表1和圖1表示[(2，4，6-三異丙基一苯基)一乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基一苯基酯(化合物1)和2，2-二甲基-N-(2，4，6-三甲氧基苯基)-十二烷酰胺(化合物2)抑制膽固醇酯(CE)和蠟酯(WE)合成的試驗(yàn)結(jié)果。利用小鼠肝臟微粒體標(biāo)本得到CE合成抑制作用的數(shù)據(jù)。用小鼠包皮微粒體標(biāo)本得到WE合成抑制作用的數(shù)據(jù)。表1中的數(shù)據(jù)表示為IC50其是以微摩爾計(jì)的抑制50％合成時(shí)所需的抑制劑濃度。
表1.膽固醇酯(CE)和蠟酯(WE)合成的抑制作用化合物序號 IC50(μM)CE WE1 0.0913.92 0.27＞100對于各個(gè)化合物，蠟酯合成抑制作用和膽固醇酯合成抑制作用之間的差別表明不同的酶獨(dú)立地對蠟酯合成和膽固醇酯合成起作用。數(shù)據(jù)進(jìn)一步證實(shí)被稱作ACAT抑制劑的化合物不一定就是AFAT的抑制劑，如化合物2的結(jié)果所示。Avasimibe(化合物1)的數(shù)據(jù)首次提供了能夠同時(shí)抑制AFAT皮脂腺疾病的確定ACAT抑制劑的描述。這種令人驚奇的雙重抑制活性有益于皮脂腺疾病的治療，因?yàn)锳FAT和ACAT的蠟酯和膽固醇酯產(chǎn)物分別是構(gòu)成皮脂的主要部分，它們是在皮脂溢和有關(guān)痤瘡發(fā)作期間由皮脂腺過度分泌的?？傊?和圖1的數(shù)據(jù)證實(shí)Avasimibe是第一種并且是目前僅有的可同時(shí)抑制ACAT和AFAT的化合物。Avasimibe對AFAT和ACAT的意外的雙重抑制作用有益于患有以皮脂分泌過度為特征的疾病的患者，這是只能抑制ACAT的化合物所不能提供的。
附圖詳述圖1是2，2-二甲基-N-(2，4，6三甲氧基苯基)-十二烷酰胺(化合物2)對小鼠肝臟線粒體中膽固醇酯(CE)合成的百分抑制率以及[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯(化合物1)對小鼠包皮中的腺微粒體中蠟酯(WE)合成和在小鼠肝臟線粒體中CE合成的百分抑制率相對于0.01μM-100μM的抑制劑濃度的線圖。由于IC50＞100μM，化合物2對小鼠包皮腺微粒體中的WE合成的抑制作用沒有表示在圖1中。
在圖1中▲表示[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯(化合物1)對小鼠包皮皮脂腺微粒體中的蠟酯合成的抑制作用數(shù)據(jù)點(diǎn)
●表示[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯(化合物1)對小鼠肝臟微粒體中的膽固醇酯的抑制作用數(shù)據(jù)點(diǎn)。
◆表示2，2-二甲基-N-(2，4，6-三甲氧基苯基)-十二烷酰胺(化合物2)對小鼠肝臟微粒體中膽固醇酯合成的抑制作用數(shù)據(jù)點(diǎn)。
圖1中所示的抑制曲線表明，化合物1和2均為大鼠肝臟ACAT的有效抑制劑。然而，而化合物2不具有對小鼠包皮微粒體中WE合成的抑制作用，而化合物1意外地能夠抑制WE合成，其IC50＝13.9μM。
權(quán)利要求
1.一種治療皮脂腺疾病的方法，包括給需要該治療的患者施用有效量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是皮脂溢。
3.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是痤瘡。
4.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是氯痤瘡。
5.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述的疾病是睫狀肌痤瘡。
6.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是囊性痤瘡。
7.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是角化性痤瘡。
8.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是尋常痤瘡。
9.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是老年痤瘡。
10.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是藥物性痤瘡。
11.一種藥物組合物，含有痤瘡抑制量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物和藥學(xué)可接受載體。
12.一種治療痤瘡的方法，該方法包括給需要該治療的患者施用痤瘡抑制量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
13.命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物在制備用于治療痤瘡的藥物中的用途。
14.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述的疾病是口周皮炎。
15.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是酒渣鼻。
16.按照權(quán)利要求1的方法，其中所述疾病是皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。
17.一種藥物組合物，其中含有皮脂腺分泌抑制量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物和藥學(xué)可接受載體。
18.命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物在制備用于治療由皮脂腺疾病引起的疾病的藥物中的用途。
19.一種抑制AFAT的方法，包括給需要該治療的患者施用AFAT抑制量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽。
20.一種抑制ACAT和AFAT的方法，包括給需要該治療的患者施用ACAT和AFAT抑制量的命名為[(2，4，6-三異丙基-苯基)-乙?；鵠-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯的化合物。
21.一種在需要所述治療的人體內(nèi)抑制皮脂生成的方法，該方法包括給該人體施用皮脂生成抑制量的[(2，4，6-三異丙基-苯基)乙酰基]-氨基磺酸2，6-二異丙基-苯基酯或其藥學(xué)可接受鹽。
22.按照權(quán)利要求21的方法，其用于治療油性皮膚。
全文摘要
本發(fā)明提供一種治療皮脂腺疾病的方法，該方法包括給需要該治療的患者施用有效量的命名為[(2，4，6－三異丙基－苯基)乙?；鵠－氨基磺酸2，6－二異丙基－苯基酯的化合物或其藥學(xué)可接受鹽。具體而言，提供了治療皮脂腺疾病的方法，其中所述疾病選自皮脂溢、痤瘡、口周皮炎、酒渣鼻和皮質(zhì)類固醇引起的痤瘡樣損害。本發(fā)明提供治療痤瘡的方法，例如綠痤瘡、睫狀肌痤瘡、囊性痤瘡、角化性痤瘡、尋常痤瘡、老年痤瘡和藥物性痤瘡。
文檔編號A61P43/00GK1398182SQ01804520
公開日2003年2月19日 申請日期2001年1月23日 優(yōu)先權(quán)日2000年2月2日
發(fā)明者R·霍曼 申請人:沃尼爾·朗伯公司