專利名稱：瑞香素與青蒿素衍生物配伍的抗瘧組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療瘧疾的新配方，更具體地說(shuō)提供一種主要由以瑞香素和青蒿素衍生物配伍的復(fù)方抗瘧組合物。
70年代初，我國(guó)學(xué)者自中草藥黃花蒿中分離出抗瘧藥青蒿素(artemisinin)后，又陸續(xù)部分合成了蒿甲醚、青蒿琥酯和雙氫青蒿素等有效衍生物。隨著多藥抗性瘧原蟲(chóng)株的擴(kuò)散，目前青蒿素類藥已成為治療抗性惡性瘧的有效一線藥物。
蒿甲醚(Artemether，Art)是治療抗性惡性瘧、兇險(xiǎn)型瘧疾和間日瘧均有滿意結(jié)果的青蒿素衍生物。國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究均證明，蒿甲醚對(duì)伯氏瘧原蟲(chóng)(Plasmodiumbeighei，P.berghei)抗氯喹株的抗瘧效果遠(yuǎn)強(qiáng)于青蒿素及雙氫青蒿素等；但經(jīng)廣泛應(yīng)用之后，最近有一些研究結(jié)果顯示，在海南、云南等地體外試驗(yàn)表明一些瘧原蟲(chóng)對(duì)青蒿素及其衍生物敏感性已呈下降的趨勢(shì)。因此，研究開(kāi)發(fā)青蒿素類復(fù)方以保護(hù)青蒿素類現(xiàn)有藥物，延緩抗藥性的產(chǎn)生已成為當(dāng)前瘧疾防治工作中的緊迫任務(wù)。
瑞香素(Daphnetin)是我國(guó)東北盛產(chǎn)的Daphne科植物中提取的中草藥單體，自80年代以來(lái)我國(guó)已廣泛用于治療血管閉塞性脈管炎等心血管疾病，臨床表明無(wú)明顯毒副作用。檢索顯示瑞香素在國(guó)內(nèi)外從未用于瘧疾治療。近年來(lái)我們的研究表明瑞香素作為一種抗氧化劑不僅具有抗溶血和抗紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化作用，瑞香素的抗溶血和抗膜脂質(zhì)過(guò)氧化作用，中國(guó)寄生蟲(chóng)病雜志，1999；17(2)87-89；同時(shí)瑞香素臨床治療心血管疾病的中草藥單體，從研究表明它可作為一種抗氧化劑，可阻斷自由基反應(yīng)，瑞香素具有抗溶血作用和抗紅細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化的活性。
青蒿素衍生物的抗瘧作用機(jī)制主要與自由基生成及廣泛烷化瘧原蟲(chóng)的蛋白質(zhì)、DNA有關(guān)。而本發(fā)明對(duì)瑞香素的抗瘧作用機(jī)制研究表明，它與青蒿素的作用機(jī)制有明顯差別，它們的抗瘧作用分子靶全然不同。作為一種溫和的鐵螯合劑瑞香素分子靶主要是核糖核酸還原酶，超氧化物歧化酶(SOD)等對(duì)瘧原蟲(chóng)生命活動(dòng)密切有關(guān)的含鐵大分子。如一種已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段的新抗瘧化合物去鐵胺(deferoxamine，DFO)，作為較溫和的鐵螯合劑，非但不影響青蒿素的抗瘧作用，而且在小鼠體內(nèi)試驗(yàn)中DF0還可降低青蒿素自由基反應(yīng)的毒性作用。我們的研究已證明瑞香素是一種比DFO更為溫和的鐵螯合劑，在小鼠體內(nèi)試驗(yàn)中并不直接影響宿主血清中或瘧原蟲(chóng)中游離鐵的含量。因此瑞香素、蒿甲醚單體復(fù)方不僅能增效，而且還有降低毒性作用。此外本發(fā)明還表明瑞香素配伍可明顯減少伯氨喹抗紅外期瘧原蟲(chóng)的用量，如果再加入適當(dāng)劑量的蒿甲醚等青蒿素衍生物，利用其強(qiáng)力清除間日瘧紅內(nèi)期原蟲(chóng)的作用，更有望開(kāi)發(fā)出優(yōu)于常規(guī)的氯喹-伯氨喹組合的間日瘧根治新方法。本發(fā)明為保護(hù)青蒿素類現(xiàn)有藥物，延緩抗藥性產(chǎn)生的后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。
本發(fā)明的青蒿素衍生物指蒿甲醚、青蒿琥酯、雙氫青蒿素。
本發(fā)明將瑞香素與青蒿素衍生物二種作用機(jī)制截然不同的天然單體設(shè)計(jì)出一種治療瘧疾的復(fù)方藥物。根椐不同類型的瘧疾采用不同劑型、劑量與療程治療。
本發(fā)明瑞香素、蒿甲醚的天然單體片劑配方如下瑞香素 50-150g青蒿素衍生物10-30g硬脂酸鎂0.8-1g輔料醫(yī)用淀粉適量1000片膠囊的配制瑞香素 80-120g青蒿素衍生物15-25g藥用淀粉適量等量分裝1000個(gè)膠囊片劑制備稱取計(jì)算量的瑞香素單體和青蒿素衍生物和醫(yī)用淀粉充分混勻，混勻后制成粒，干燥加入硬脂酸鎂作為潤(rùn)滑劑，過(guò)篩，然后壓片即得片劑。
膠囊的制備將一定量的瑞香素、青蒿素衍生物和醫(yī)用淀粉充分混勻，然后分裝。
藥理試驗(yàn)方法蒿甲醚、瑞香素二種天然單體，二種新型截然不同的抗瘧作用機(jī)制組成的復(fù)方藥物對(duì)伯氏瘧原蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)治療如下實(shí)驗(yàn)鼠為昆明株小鼠，雌雄各半，體重為204±2克，以伯氏鼠瘧原蟲(chóng)感染小鼠。實(shí)驗(yàn)一治療方案A 組5mg/kg蒿甲醚A/天×4天A+D組2.5mg/kg蒿甲醚/天×4天+50mg/kg瑞香素D/天×4天對(duì)照組不喂藥4天抑制療法即感染后30分鐘喂藥，連續(xù)灌服4天。
表1 4天抑制療法的小鼠存活數(shù)(率％)首次服藥后D5D10D15D20對(duì)照組 6 0(0％)A+D組*6 4(36％)2A組*5 1(96％)0*A+D組為蒿甲醚+瑞香素復(fù)方治療組，*A組為單用蒿甲醚治療組，下列各表中A+D與A組含義相同。實(shí)驗(yàn)二治療方案A 組2.5mg/kg蒿甲醚/天×4天A+D組2.5mg/kg蒿甲醚/天×4天+50mg/kg瑞香素/天×4天對(duì)照組不喂藥4天抑制療法即感染后30分鐘喂藥，連續(xù)灌服4天。
表2 4天抑制療法的小鼠存活數(shù)(率％)首次服藥后 D5D10D15D20對(duì)照組 3(30％)0(0％)A+D組*8(80％)4(40％)2A組*4(40％)1(10％)0結(jié)論以D15存活率比較，兩次實(shí)驗(yàn)中A+D組D15存活率都是單用A組的4倍。
表3 4天抑制療法的小鼠原蟲(chóng)感染率實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)二對(duì)照組A+D組A組 對(duì)照組A+D組 A組D435.0(％) 1.2(％) 1.5(％)33.6(％) 0(％) 0(％)結(jié)論經(jīng)A+D組或A組治療后小鼠原蟲(chóng)感染率比對(duì)照組都有明顯下降，接近或等于0％，而兩治療組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)三治療方案A 組5mg/kg蒿甲醚/天×4天A+D組2.5mg/kg蒿甲醚/天×4天+50mg/kg瑞香素/天×4天對(duì)照組不喂藥感染率達(dá)20～30％時(shí)喂藥表4 小鼠感染高峰(感染率達(dá)20-30％)時(shí)治療的小鼠存活數(shù)(率％)首次服藥后 D5D10對(duì)照組 0A+D組*12 2A組* 12 1結(jié)論對(duì)照組小鼠于D5全部死亡，而A+D組或A組治療后無(wú)一死亡。A+D組或A組治療后小鼠存活時(shí)間與對(duì)照組相比延長(zhǎng)約1倍。實(shí)驗(yàn)三治療方案A 組5mg/kg蒿甲醚/天×4天A+D組2.5mg/kg蒿甲醚/天×4天+50mg/kg瑞香素/天×4天對(duì)照組不喂藥感染率達(dá)20～30％時(shí)喂藥表5 小鼠感染高峰時(shí)治療的小鼠原蟲(chóng)感染率對(duì)照組A+D組 A組治療前冶療后治療前冶療后治療前冶療后28.8(％) 27.6(％) 29.3(％) 21.8(％) 28.3(％) 26.9(％)A+D組減蟲(chóng)率(％)＝29.3-21.8/29.3×100％＝25.6％A組減蟲(chóng)率(％)＝28.3-26.9/28.3×100％＝4.6％結(jié)論于感染高峰時(shí)給藥治療，A+D組的減蟲(chóng)率達(dá)A組減蟲(chóng)率的5.6倍，A+D組療效明顯優(yōu)于單用A組。本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1、采用瑞香素抗瘧的新作用機(jī)制避免了瘧原蟲(chóng)對(duì)現(xiàn)在抗瘧藥產(chǎn)生的抗藥性，以致使本配方具有更好的抗瘧效果。
2、本組合物經(jīng)藥理試驗(yàn)證明毒性更低。
3、本組合物的原料容易獲得，組份比較簡(jiǎn)單，只需采用常規(guī)方法即能制備，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
實(shí)施例1稱取蒿甲醚10克、瑞香素100克、醫(yī)用淀粉適量，將上述三種原、輔料充分混勻，然后加入淀粉漿制粒，制粒后干燥，加入0.8克的硬脂酸鎂作潤(rùn)滑劑，過(guò)篩，然后壓1000片，即得片劑。
或用前述膠囊配方將原、輔料充分混勻(制膠囊時(shí)硬酯酸鎂不需要)后即等量分裝膠囊。
實(shí)施例2稱取蒿甲醚20克、瑞香素120克、藥用淀粉適量，將上述三種原、輔料充分混勻，然后加入淀粉漿制粒，制粒后干燥，加入0.9克硬脂酸鎂作潤(rùn)滑劑，過(guò)篩，然后壓1000片，即得片劑。
或用上述膠囊配方將原、輔料充分混勻后，即可等量分裝膠囊。
實(shí)施例3稱蒿甲醚30克、瑞香素150克、藥用淀粉適量、硬脂酸鎂1克，操作方法同實(shí)施例1，同樣可制作膠囊，方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例4稱取雙氫青蒿素10克、瑞香素100克、醫(yī)用淀粉適量，將上述三種原料、輔料充分混勻，然后加入淀粉漿制粒，制粒后干燥，加入0.8克硬酯酸鎂作潤(rùn)滑劑，過(guò)篩，然后壓1000片即得片劑或用上述膠囊配方將原、輔料充分混勻后即等量分裝膠囊。
實(shí)施例5稱取雙氫青蒿素20或30克、瑞香素分別為120或150克，其他全部同實(shí)施例4，即可得1000片劑；同樣可制膠囊，方法同實(shí)施例1。
權(quán)利要求
1.一種由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于配方為瑞香素 50-150克青蒿素衍生物10-30克藥用淀粉適量硬脂酸鎂適量制成1000份
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于配方為瑞香素 50-150克蒿甲醚 10-30克藥用淀粉適量硬脂酸鎂適量制成1000份
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于配方為瑞香素 50-150克雙氫青蒿素 10-30克藥用淀粉 適量硬脂酸鎂 適量制成 1000份
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于配方為瑞香素 50-150克青蒿琥酯 10-30克藥用淀粉 適量硬脂酸鎂 適量制成 1000份
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于膠囊配方為瑞香素 50-150克蒿甲醚 10-30克藥用淀粉 適量等量分裝 1000份
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于膠囊配方為瑞香素 50-150克雙氫青蒿素 10-30克藥用淀粉 適量等量分裝 1000份
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述由瑞香素單體和青蒿素衍生物組成的抗瘧組合物其特征在于膠囊配方為瑞香素 50-150克青蒿琥酯 10-30克藥用淀粉 適量等量分裝 1000份
8.如權(quán)利要求1所述的抗瘧組合物其特征在于該配方在治療瘧疾中應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種瑞香素和青蒿素衍生物配伍的復(fù)方抗瘧藥，本發(fā)明中青蒿素衍生物指蒿甲醚、雙氫青蒿素、青蒿琥酯。本發(fā)明提供的配方制成的片劑或膠囊是目前較為理想的抗瘧藥，經(jīng)藥理試驗(yàn)證明對(duì)目前產(chǎn)生抗藥性的瘧原蟲(chóng)有更效果，毒性降低。
文檔編號(hào)A61P33/06GK1448133SQ0211123
公開(kāi)日2003年10月15日 申請(qǐng)日期2002年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月2日
發(fā)明者倪奕昌, 王琴美 申請(qǐng)人:中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院寄生蟲(chóng)病研究所