專利名稱：用于治療心血管及有關(guān)疾病的噻唑或噁唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及某些新化合物。具體而言，本發(fā)明涉及刺激α亞型的人過氧化氫酶體增殖劑活化的受體(“hPPARα”)的化合物。本發(fā)明還涉及制備這些化合物的方法以及預(yù)防或治療PPARα介導(dǎo)的疾病或病癥的方法。
有數(shù)種非依賴性危險(xiǎn)因素與心血管疾病有關(guān)。這些包括高血壓、纖維蛋白原水平增高、甘油三酯高、LDL膽固醇升高、總膽固醇升高和HDL膽固醇低。HMG CoA還原酶抑制劑(”抑制素”)用于治療特征為高LDL-c水平的病癥。據(jù)顯示，降低LDL-c不足以減小某些患者，特別是LDL-c水平正常的患者的心血管疾病的危險(xiǎn)性。這類人群被確定為具有低HDL-c的非依賴性危險(xiǎn)因素。藥物治療尚不能成功地對(duì)付增高的與低HDL-c水平有關(guān)的心血管疾病的危險(xiǎn)性(即，目前市場(chǎng)上沒有可用于使HDL-c升高至40％以上的藥物)。(Bisgaier，C.L.；Pape，M.E.Curr.Pharm.Des.1998，4，53-70)。
X綜合癥(包括代謝性綜合癥)被寬松地定義為各種異常的總稱，包括高胰島素血癥，肥胖，甘油三酯、尿酸、纖維蛋白原、低密度LDL-c顆粒和纖溶酶原活化劑抑制劑1(PAI-1)水平升高，以及HDL-c水平降低。
據(jù)記載，NIDDM是胰島素耐藥性的，其結(jié)果引起葡萄糖異常產(chǎn)生以及骨骼肌攝取的葡萄糖減少。這些因素最終導(dǎo)致葡萄糖耐量減低(IGT)和高胰島素血癥。
過氧化氫酶體增殖劑活化的受體(PPARs)是屬于配體活化的轉(zhuǎn)錄因素的類固醇/類視黃酸(retinoid)受體亞族的孤立受體。參見，例如Willson，T.M.和Wahli，W.，Curr.Opin.Chem.Biol.，(1997)，Vol.1，pp 235-241。
已經(jīng)分離出三種哺乳動(dòng)物過氧化氫酶體增殖劑活化的受體，它們被稱為PPAR-α、PPAR-γ和PPAR-δ(也稱為NUJC1或PPAR-β)。這些PPARs通過與被稱為PPAR響應(yīng)單元(PPRE)的DNA序列單元結(jié)合調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)。至今，已經(jīng)確定了PPRE在許多編碼調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的蛋白質(zhì)的基因促進(jìn)劑方面的作用，這表明PPAR在脂肪形成信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)和脂質(zhì)動(dòng)態(tài)平衡中起著關(guān)鍵作用(H.Keller和W.Wahli，Trends Endocrin.Met 291-296，4(1993))。
在動(dòng)物模型中，激活或者以其它方式與一種或多種PPARs作用的某些化合物參與調(diào)節(jié)甘油三酯和膽固醇水平。參見，例如美國專利5847008(Doebber等)和5859051(Adams等)以及PCT公開WO97/28149(Leibowitz等)和WO 99/04815(Shimokawa等)。
纖維酸(Fibrates)是一類可降低20-50％血清甘油三酯、降低10-15％LDL-c、使具更易于致動(dòng)脈粥樣硬化粒徑的低密度LDL轉(zhuǎn)化為正常密度LDL-c以及增高10-15％HDL-c的藥物。實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，纖維酸對(duì)于血清脂質(zhì)的作用通過PPARα的活化作用介導(dǎo)的。參見，例如B.Staels等，Curr.Pharm.Des.，1-14，3(1)，(1997)。PPARα的活化導(dǎo)致肝臟中增加脂肪酸異化和減少脂肪酸重新合成的酶發(fā)生轉(zhuǎn)錄，結(jié)果是甘油三酯合成和VLDL-c產(chǎn)生/分泌減少。此外，PPARα活化使apoC-III的產(chǎn)生減少。apoC-III(一種LPL活性抑制劑)的減少增加了VLDL-c的清除。參見，例如J.Auwerx等，Atherosclerosis，(Shannon，Irel.)，S29-S37，124(Suppl.)，(1996)。PPARα配體可用于治療異常脂血癥(dyslipidemia)和心血管疾病，參見Fruchart，J.C.，Duriez，P.，和Staels，B.，Curr.Opin.Lipidol.(1999)，Vol 10，pp 245-257。
本發(fā)明第一方面，提供式(I)化合物及其可藥用鹽、溶劑化物和可水解的酯 其中R1和R2獨(dú)立地是氫或C1-3烷基，或者與同一個(gè)碳原子相連的R1和R2可以與它們連接的碳原子一起形成3-5元環(huán)烷基環(huán)；X1表示O或S；R3、R4、R8和R9各自獨(dú)立地表示H、鹵素、-CH3或-OCH3；R5表示H或C1-6烷基或者R4和R5一起形成3-6元環(huán)烷基環(huán)。
X2表示NH、NCH3或O；Y和Z之一是N，另一個(gè)是O或S；R6表示苯基或吡啶基(其中N位于2或3位)并且可任選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、CF3、C1-6直鏈或支鏈烷基(可任選被鹵素取代)取代，條件是當(dāng)R6是吡啶基時(shí)，N是未取代的。
R7表示C1-6烷基(可任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代)、-C0-6烷基-5元雜芳基、C0-6烷基-(O)n-苯基，其中n是0或1，條件是當(dāng)R1和R2是甲基，R8和R9是H，R5是H時(shí)，則R7不能是CH3或CF3。
另一方面，本發(fā)明公開一種預(yù)防或治療人PPAR(hPPAR)介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括施用治療有效量的本發(fā)明化合物。hPPAR介導(dǎo)的疾病或病癥包括異常脂血癥，包括有關(guān)的糖尿病性異常脂血癥和混合性異常脂血癥；X綜合癥(如本申請(qǐng)中所定義，包括代謝性綜合癥)；心衰；高膽固醇血癥；心血管疾病，包括動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化和高甘油三酯血癥；II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素耐藥；高脂血癥；炎癥；上皮增殖性疾病，包括濕疹、銀屑??；及與內(nèi)層和腸有關(guān)的病癥以及肥胖、貪食癥和神經(jīng)性厭食癥患者的食欲和食物攝入的調(diào)節(jié)。本發(fā)明的化合物尤其可用于治療和預(yù)防心血管疾病和病癥，包括動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈硬化、高甘油三酯血癥和混合性異常脂血癥。
另一方面，本發(fā)明提供藥物組合物，該組合物包含本發(fā)明化合物，優(yōu)選與可藥用稀釋劑或載體結(jié)合。
另一方面，本發(fā)明提供治療用的，尤其是人類藥用的本發(fā)明化合物。
另一方面，本發(fā)明提供本發(fā)明化合物制備治療hPPAR介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物的用途。
另一方面，本發(fā)明提供治療hPPAR介導(dǎo)的疾病或病癥患者的方法，該方法包括施用治療有效量的本發(fā)明化合物。
本文中使用的“本發(fā)明化合物”是指式(I)化合物或者其可藥用鹽、溶劑化物或可水解酯。
雖然本發(fā)明范圍中包括可水解的酯，但酸是優(yōu)選的，因?yàn)閿?shù)據(jù)表明雖然這類酯是有用的化合物，但實(shí)際上可能是它們水解的酸是活性化合物。易水解的酯可在分析條件下或體內(nèi)產(chǎn)生羧酸。通常，羧酸在結(jié)合和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染測(cè)定中都具有活性，而酯類一般不能很好地結(jié)合，但在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染測(cè)定中具有活性，這大概是由于水解作用。優(yōu)選的可水解酯是C1-6烷基酯，其中的烷基可以是直鏈或支鏈烷基。更優(yōu)選甲基或乙基酯。
X1優(yōu)選表示0。
R1和R2優(yōu)選是甲基。
R3優(yōu)選是甲基或H。
R4優(yōu)選是H或與R5一起形成6元環(huán)烷基環(huán)。
R8和R9優(yōu)選都表示H。
R5優(yōu)選表示CH3、H或者與R4一起形成6元環(huán)烷基環(huán)。
X2優(yōu)選表示NH。
Z優(yōu)選表示N。
Y優(yōu)選表示S。
R7優(yōu)選表示CH3-CH2-O-苯基，或者CH2-O-噻吩(其中S位于2位)。
R6優(yōu)選是可任選取代的苯基。R6優(yōu)選是一-或二-取代的。當(dāng)R6優(yōu)選是吡啶基時(shí)，N位于2位。R6優(yōu)選是對(duì)位一取代的，更優(yōu)選是苯基。優(yōu)選的取代基是CF3。
雖然上面針對(duì)各變項(xiàng)概括性地列出了每個(gè)變項(xiàng)的優(yōu)選基團(tuán)，但本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括那些化合物，其中式(I)中的數(shù)個(gè)或者每個(gè)變項(xiàng)選自各變項(xiàng)的優(yōu)選的、更優(yōu)選的或者最優(yōu)選的基團(tuán)。因此，本發(fā)明旨在包括所有優(yōu)選的、更優(yōu)選的和最優(yōu)選的基團(tuán)的組合。
式(I)化合物優(yōu)選是hPPAR激動(dòng)劑。式(I)的hPPAR激動(dòng)劑可以是僅針對(duì)一種類型的激動(dòng)劑(“選擇性激動(dòng)劑”)、針對(duì)兩種PPAR亞型的激動(dòng)劑(“雙重激動(dòng)劑”)或者針對(duì)所有三種亞型的激動(dòng)劑(“全能激動(dòng)劑”)。本文中使用的“激動(dòng)劑”、“活化化合物”或“活化劑”等是指那些化合物，它們?cè)谙旅婷枋龅慕Y(jié)合測(cè)定中，針對(duì)有關(guān)PPAR，例如hPPARδ的pKi至少為6.0，優(yōu)選至少為7.0的，并且在以10-5M或更低的濃度進(jìn)行的下述轉(zhuǎn)染測(cè)定中，相對(duì)于適當(dāng)指示的陽性對(duì)照，使相關(guān)PPAR實(shí)現(xiàn)至少50％活化。更優(yōu)選地，在以10-6M或更低的濃度進(jìn)行的有關(guān)轉(zhuǎn)染測(cè)定中，本發(fā)明化合物使至少一種人PPAR實(shí)現(xiàn)50％活化。更優(yōu)選地，在以10-7M或更低的濃度進(jìn)行的有關(guān)轉(zhuǎn)染測(cè)定中，本發(fā)明化合物使至少一種人PPAR實(shí)現(xiàn)50％活化。
本發(fā)明化合物優(yōu)選是hPPARα激動(dòng)劑。
最優(yōu)選地，式(I)化合物是選擇性hPPARα激動(dòng)劑。本文中使用的“選擇性hPPARα激動(dòng)劑”是其針對(duì)PPARα的EC50比其針對(duì)PPARγ和PPARδ的EC50低至少10倍的hPPARα激動(dòng)劑。這類選擇性化合物可以被稱為“10倍選擇性的”。下述的轉(zhuǎn)染測(cè)定中定義了EC50，EC50是化合物達(dá)到其50％最大活性時(shí)的濃度。最優(yōu)選的化合物是大于100倍選擇性的hPPARα激動(dòng)劑。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物包括2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-苯氧基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-苯氧基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-噻吩-2-基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-噻吩-2-基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[5-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]-5，6，7，8-四氫萘-2-基氧]丙酸乙酯2-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙酯本發(fā)明的更優(yōu)選的化合物是2-甲基-2-[5-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]-5，6，7，8-四氫萘-2-基氧]丙酸本發(fā)明的最優(yōu)選的化合物是2-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸上面列出的優(yōu)選化合物是選擇性hPPARα激動(dòng)劑。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，式(I)化合物中存在立體中心。因此，本發(fā)明包括式(I)的所有可能的立體異構(gòu)體，本發(fā)明不僅包括外消旋化合物，還包括外消旋形式、富含形式或純凈形式的這些異構(gòu)體。當(dāng)式(I)化合物需要呈對(duì)映體單體時(shí)，其可以通過拆分終產(chǎn)物獲得或者用光學(xué)活性配體或立體異構(gòu)體純的原料或任何方便的中間體使用光學(xué)活性催化劑或催化體系經(jīng)立體特異性合成獲得。終產(chǎn)物、中間體或原料的拆分可通過本領(lǐng)域已知的任何適宜的方法進(jìn)行。參見，例如，Stereochemistry of Carbon Compounds，E.L.Eliel(Mcgraw Hill，1962)和Tables of Resolving Agents，S.H.Wilen。此外，在式(I)化合物可能存在互變異構(gòu)體的情況下，本發(fā)明還包括化合物的所有互變異構(gòu)體形式。具體而言，本發(fā)明的許多優(yōu)選化合物中，與R1和R5鍵合的碳原子是手性的。在某些這類手性化合物中，對(duì)于不同PPAR受體的活性依S和R異構(gòu)體而不同。這些異構(gòu)體中的何者是優(yōu)選的取決于化合物的特定的預(yù)期用途。換而言之，即使是相同的化合物，對(duì)于某些應(yīng)用，S異構(gòu)體可能是優(yōu)選的，但對(duì)于其它應(yīng)用，R異構(gòu)體則可能是優(yōu)選的。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該清楚，本發(fā)明的化合物也可以以其可藥用鹽或溶劑化物的形式使用。式(I)化合物的生理可接受鹽包括由可藥用的無機(jī)或有機(jī)的酸或堿形成的常用鹽以及季銨酸加成鹽。適宜酸鹽的更具體實(shí)例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、高氯酸鹽、富馬酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、乙醇酸鹽、甲酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、棕櫚酸(palmoic)、丙二酸鹽、羥基馬來酸鹽、苯乙酸鹽、谷氨酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、富馬酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、苯磺酸鹽、羥基萘磺酸鹽、氫碘酸鹽、蘋果酸鹽、steroic、鞣酸鹽等。其它酸，例如草酸，雖然它們本身不可藥用，但它們可在獲得本發(fā)明化合物及它們的可藥用鹽的過程中用來制備作為中間體的鹽。適宜堿鹽的更具體實(shí)例包括鈉、鋰、鉀、鎂、鋁、鈣、鋅、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺和普魯卡因的鹽。下文提及的本發(fā)明化合物包括式(I)化合物及它們的可藥用鹽和溶劑化物。
本發(fā)明化合物和它們的可藥用衍生物常以藥物組合物形式服用。這類組分以常規(guī)方式與一種或多種生理可接受的載體或賦形劑混合呈常用形式。
雖然本發(fā)明化合物有可能以化學(xué)原料藥形式治療給藥，但活性成分優(yōu)選呈藥物制劑形式。載體須在與制劑的其它成分可相容并且對(duì)于其接受者無害的意義上是“可接受的”。
因此，本發(fā)明還提供一種藥物制劑，該制劑包含式(I)化合物或者其可藥用鹽或溶劑化物與一種或多種其可藥用載體，并且任選地包含其它治療和/或預(yù)防性成分。
制劑包括適于口服、非胃腸(包括例如以注射劑或緩釋片形式皮下、皮內(nèi)、鞘內(nèi)、以緩釋制劑和靜脈制劑形式肌內(nèi))、直腸和局部(包括真皮、頰和舌下)給藥的那些，但最適合的途徑取決于例如接受者的狀況和疾病。制劑通?？梢猿蕟挝粍┝啃问讲⑶铱梢酝ㄟ^藥學(xué)領(lǐng)域公知的任何常規(guī)方法來制備。所有的方法均包括將本發(fā)明化合物(“活性成分”)與組成一種或多種輔助成分的載體結(jié)合的步驟。通常，該制劑可以如下進(jìn)行制備，即，使活性成分與液體載體或者細(xì)顆粒的固體載體或者這兩組載體一起均勻和緊密地結(jié)合，然后如果需要，使該產(chǎn)物成形為所需制劑。
適于口服的制劑可以呈獨(dú)立的單元，如膠囊、扁囊劑或片劑(如特別適合于兒童服用的咀嚼片)，每個(gè)單元包含預(yù)定量的活性成分；粉末或顆粒形式；含水液體或非水液體的溶液或混懸液形式；或者水包油乳液或油包水乳液形式?；钚猿煞忠部梢猿蚀笏幫?、干糖漿或糊劑形式。
片劑可以任選地與一種或多種輔助成分一起通過壓制或模壓來制備。壓制片可如下制備在適合的機(jī)器上，將自由流動(dòng)形式，如粉末或顆粒狀的活性成分，任選與其它常規(guī)賦形劑(例如下列的)一起混合進(jìn)行壓縮，如粘合劑(例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃芪膠、淀粉膠漿或聚乙烯吡咯烷酮)、填充劑(如乳糖、蔗糖、微晶纖維酸、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨醇)、潤滑劑(如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或二氧化硅)、崩解劑(例如土豆淀粉或淀粉甘醇酸鈉)或潤濕劑，例如月桂基硫酸鈉。模壓片可通過在適合的機(jī)器上模壓用惰性液體稀釋劑潤濕的粉末化合物的混合物來制備。片劑可任選地進(jìn)行包衣或刻痕并且可制成提供緩釋或控釋釋放活性成分的形式。片劑可以按照本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行包衣。
或者，可將本發(fā)明化合物摻入口服液體制劑，如水性或油性混懸液、溶液、乳液、糖漿或酏劑中。此外，包含這些化合物的制劑可以呈在使用前用水或其它適合的載體構(gòu)成的干燥產(chǎn)品形式。這類液體制劑可包含常規(guī)的添加劑，如助懸劑，例如山梨醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/蔗糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或水凝膠化食用脂肪；乳化劑，如卵磷脂、脫水山梨醇一油酸酯或阿拉伯膠；非水性賦形劑(可包括食用油)，如杏仁油、精餾椰子油、油性酯、丙二醇或乙醇；和防腐劑，如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或丙酯或者山梨酸。這類制劑還可配制成栓劑，如包含常規(guī)栓劑基質(zhì)，如可可脂或其它甘油酯的。
非胃腸給藥制劑包括水性或非水性無菌注射溶液，該溶液可包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與預(yù)期接受者的血液等滲的溶質(zhì)；以及水性和非水性無菌混懸液，該混懸液可包含助懸劑和增稠劑。
制劑可以存放在單位劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶中，并且可以以冷凍-干燥(凍干)形式貯存，這種形式只需在臨用前加入無菌液體載體，例如注射用水。臨時(shí)注射液和注射混懸液可以用前面描述過的無菌粉末、顆粒和片來制備。
直腸給藥制劑可以呈栓劑，其包含常用的載體，如可可脂、硬脂肪(hard fat)或聚乙二醇。
用于口腔，例如經(jīng)頰或舌下的局部給藥制劑包括糖錠劑，其在適口基質(zhì)，如蔗糖和阿拉伯膠或黃芪膠中包含活性成分；和軟錠劑，其在例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠的基質(zhì)中包含活性成分。
可將本發(fā)明化合物配制成緩釋制劑。這類緩釋制劑可以通過植入(例如皮下或肌內(nèi))或肌內(nèi)注射給藥。因此，例如本發(fā)明化合物可使用適合的聚合物或疏水性材料(例如呈可接受的油的乳劑形式)或離子交換樹脂配制，或者以微溶衍生物，如微溶鹽的形式配制。
除上面具體提及的成分外，制劑可包括所論及類型的制劑領(lǐng)域常用的其它物質(zhì)，例如適于口服給藥的制劑可包括矯味劑。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該清楚，本文提及的治療擴(kuò)展到預(yù)防以及治療所確定的疾病或癥狀。并且，應(yīng)該清楚治療中所需的本發(fā)明化合物的用量將隨治療的病癥的性質(zhì)以及患者的年齡和健康狀況而變化并且最終的決定權(quán)在值班醫(yī)生或獸醫(yī)。但一般說來，對(duì)于成人治療使用的劑量通常為每日0.02-5000mg，優(yōu)選每日1-1500mg。每日所需的劑量可方便地以單劑形式或者以適當(dāng)?shù)臅r(shí)間間隔分成數(shù)劑，例如二、三、四或更多次劑量形式服用。本發(fā)明的制劑可包含0.1-99％的活性成分，片劑和膠囊一般含30-95％的活性成分，液體制劑則包合3-50％的活性成分。
本發(fā)明中使用的式(I)化合物可以與其它治療劑，例如抑制素和/或其它降脂劑，如MTP抑制劑和LDLR上調(diào)劑聯(lián)合施用。本發(fā)明化合物還可以與糖尿病治療劑，如甲福明、磺酰脲類和/或PPARγ激動(dòng)劑(例如噻唑烷二酮類，如吡格列酮或Rosiglitazone)聯(lián)合施用。本發(fā)明化合物還可以與抗高血壓藥，如鈣通道拮抗劑和ACE抑制劑聯(lián)合施用。因此，另一方面，本發(fā)明提供了包括式(I)化合物與其它治療劑的聯(lián)合用藥物在治療hPPARα介導(dǎo)的疾病中的應(yīng)用。
當(dāng)式(I)化合物與其它治療劑聯(lián)合使用時(shí)，化合物可以經(jīng)任何常規(guī)途徑順序或同時(shí)給藥。
上面提及的聯(lián)合用藥物通常以藥物制劑形式使用，因此包含如上定義的聯(lián)合用藥物和任選的可藥用載體或賦形劑的藥物制劑構(gòu)成了本發(fā)明的另一方面。這類聯(lián)合用藥的各個(gè)組分可以以獨(dú)立的或結(jié)合的藥物制劑形式順序或同時(shí)給藥。
當(dāng)結(jié)合在同一種制劑中時(shí)，應(yīng)該清楚，兩組化合物必須是穩(wěn)定的且是彼此相容的，并且它們與制劑中的其它組分也是相容的，因此可一起配制給藥。當(dāng)單獨(dú)配制時(shí)，它們可以便利地呈本領(lǐng)域已知的這類化合物的任何方便的制劑形式。
當(dāng)式(I)化合物與對(duì)抗相同的hPPAR介導(dǎo)的疾病的第二種治療劑聯(lián)合使用時(shí)，各種化合物的劑量可以不同于它們單獨(dú)使用時(shí)的劑量。適合的劑量易于由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。
本發(fā)明化合物可方便地通過一般性方法來制備，其中運(yùn)用肽偶聯(lián)反應(yīng)將(A)部分與酸(B)偶聯(lián)。應(yīng)注意該合成反應(yīng)可以使用被R保護(hù)的酸基進(jìn)行。R優(yōu)選是C1-6烷基，它可被水解得到式(I)的酸或者如果容易水解，可以服用得到的酯。
式(A)和(B)化合物有市售或者它們的合成方法對(duì)于專業(yè)技術(shù)人員是顯而易見的，例如下述那些方法的類似方法。
本發(fā)明還描述了下列實(shí)施例，不應(yīng)將這些實(shí)施例理解為構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
中間體1將2-氯乙酰乙酸乙酯(35.3g，29.7ml，0.21mol)和4-(三氟甲基)硫代苯甲酰胺(44g，0.21mol)的乙醇(300ml)溶液回流過夜。冷卻到室溫后，真空除去溶劑。用最少量的甲醇重結(jié)晶終產(chǎn)物(中間體1)，得到40g(59％)的白色固體終產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ8.10(d，2H)，7.70(d，2H)，4.40(q，2H)，2.80(s，3H)，1.4(t，3H)。
中間體2往中間體1(15.75g，50mmol)在250ml CCl4中的溶液中加入NBS(1.96g，11mmol)。往所得懸浮液中加入AIBN(1g)并將該混合物在80℃加熱3小時(shí)后，過濾并真空濃縮。將殘余物加到CH2Cl2(500ml)中并用鹽水(100ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥、過濾并濃縮至干，經(jīng)柱色譜，用CH2Cl2/C6H12(40/60)洗脫后，得到標(biāo)題化合物(73％)。
GC/MSm/z393-395 中間體3往中間體2(394mg，1mmol)在25ml丙酮中的溶液中加入苯酚(100mg，1.1mmol)和Cs2CO3(355mg，1.1mmol)。將所得混合物在50℃加熱12小時(shí)。過濾后，真空濃縮，將殘余物加到二氯甲烷(100ml)中并用NaOH 0.1N(10ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，濃縮至干，得到白色固體的標(biāo)題化合物(94％)。1H NMR(CDCl3)δ8.05(d，2H)，7.65(d，2H)，7.2(m，2H)，7.0(d，2H)，6.9(t，1H)，5.45(s，2H)，4.25(q，2H)，1.25(t，3H).
中間體4在氮?dú)夥障?，往中間體2(1g，2.5mmol)在50ml DME中的溶液中加入Pd(PPh3)4(87mg，0.075mmol)。在50℃加熱20分鐘后，加入2-噻吩基硼酸(480mg，3.75mmol)在混合EtOH/DME(20ml/20ml)中的溶液，然后加入2M Na2CO3(5ml)溶液。在50℃攪拌18小時(shí)后，用二氯甲烷(150ml)進(jìn)行萃取(x3)。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮至干。T.1.c.和1H NMR顯示該粗品混合物仍含有原料中間體3。使該粗產(chǎn)物在DMF(10ml)中與PS-三苯基膦(1g，1-1.5mmol/g，Argonaut)攪拌過夜，以捕集溴化物衍生物。過濾后，真空濃縮，得到淺黃色油狀的標(biāo)題化合物(33％)。
GC/MSm/z 397。
中間體5在室溫下，往4-甲氧基-3-甲基苯甲醛(1當(dāng)量，Acros)的乙醇(150ml)混合液中加入H2NOH，HCl(1.6當(dāng)量)和NaOAc(3當(dāng)量)在150ml水中的溶液并將該反應(yīng)物攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)乙醇，殘余物用二氯甲烷萃取(3×50ml)。合并有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干，得到白色固體的標(biāo)題化合物(93％)。
Mp 71-73℃ 中間體6在室溫下，往中間體5(1當(dāng)量)的甲醇(200ml)溶液中加入HCO2NH4(6當(dāng)量)、Pd/C(0.01當(dāng)量)和分子篩。然后將該反應(yīng)物加熱回流18小時(shí)。將反應(yīng)物通過硅藻土過濾，蒸發(fā)至干并用鹽酸(1N)處理。水層用二氯甲烷洗滌，過濾，堿化至pH＞14并用二氯甲烷萃取(3×50ml)。合并的有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干，得到油狀的標(biāo)題化合物(46％)。
MS m/z 151 中間體7在過量40％的HBr/H2O(Aldrich)中將中間體6(1當(dāng)量)回流18小時(shí)。將反應(yīng)物蒸發(fā)至干，得到灰色固體的標(biāo)題化合物氫溴酸鹽(97％)。
Mp 235-237℃ 中間體8在0℃下，往中間體7(1當(dāng)量)的二氯甲烷(300ml)溶液中加入Et3N(3當(dāng)量)。滴加Boc酸酐(0.95當(dāng)量)的二氯甲烷(50ml)溶液。使該反應(yīng)物溫?zé)岬绞覝夭⒗^續(xù)攪拌18小時(shí)。加入HCl(1N)并將該反應(yīng)物用二氯甲烷萃取(3×100ml)。有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空除去溶劑，得到白色固體的標(biāo)題化合物(96％)。
Mp 105-107℃ 中間體9往中間體8(1當(dāng)量)的DMF(150ml)溶液中加入K2CO3(3當(dāng)量)并將反應(yīng)物加熱至70℃。滴加2-溴-2-甲基丙酸乙酯(1.3當(dāng)量)并將該反應(yīng)物在70℃攪拌72小時(shí)。將反應(yīng)物到入冰中并用二氯甲烷萃取(3×150ml)。合并的有機(jī)層用NaOH(0.5N)洗滌，然后用水洗滌并經(jīng)硫酸鈉干燥。將溶液過濾，蒸發(fā)至干，得到油狀的標(biāo)題化合物(69％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.05(d，1H)，6.90(dd，1H)，6.60(d，1H)，4.80(bs，1H)，4.25(q，2H).4.20(d，2H)，2.20(s，3H)，1.60(s，6H)，1.45(s，9H)，1.25(t，3H)。
中間體10在室溫下，往中間體9(1當(dāng)量)的二氯甲烷(10ml)溶液中滴加CF3COOH(7當(dāng)量)并將該反應(yīng)物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。該反應(yīng)物蒸發(fā)至干，用飽和碳酸鉀溶液處理并用二氯甲烷萃取(3×150ml)。合并的有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干，得到油狀的標(biāo)題化合物(82％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.00(d，1H)，6.90(dd，1H)，6.55(d，1H)，4.20(q，2H)，3.70(s，2H)，2.15(s，3H)，1.85(bs，2H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H)。
中間體11往4-羥基-3′-甲基苯乙酮(50g；0.33mol)在1.5L丙酮中的溶液中加入碳酸銫(216.9g，0.66mol)。攪拌回流30分鐘后，往該混合物中加入2-溴代異丁酸乙酯(97ml，0.66mol)并保持回流。以兩次加入與前面等量的碳酸銫和溴代異丁酸乙酯以使反應(yīng)完全。然后將混合物過濾并濃縮至干后，將殘余物加到2L二氯甲烷中，用水(500ml)洗滌三次。將有機(jī)層合并并經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到棕色油狀的標(biāo)題化合物(87％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.71(s，1H)，7.61(d，1H)，6.5(d，1H)，4.15(q，2H)，2.45(s，3H)，2.20(s，3H)，1.58(s，6H)，1.15(t，3H)。

中間體12往中間體11(7.55g，28.6mmol)的溶液中加入羥胺鹽酸鹽(3.2g，45.76mmol)和乙酸鈉(7g，85.8mmol)的水(75ml)溶液。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓除去乙醇并將殘余物加到二氯甲烷(500ml)中，用水(100ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮至干，得到油狀標(biāo)題化合物(96％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.30(s，1H)，7.2(d，1H)，6.55(d，1H)，4.15(q，2H)，2.15(s，6H)，1.55(s，6H)，1.15(t，3H)。
中間體13在氮?dú)夥障拢虚g體12(7.7g，27.6mmol)的甲醇(150ml)溶液中加入甲酸銨(10.4g，166mmol)和10％Pd/C(700mg)。將該混合物加熱回流24小時(shí)并通過硅藻土濾墊過濾。用甲醇(100ml)洗滌后，將濾液真空濃縮，殘余物加到二氯甲烷(250ml)和1N HCl(250ml)中。分離水層并用35％NaOH堿化至pH＝14。然后用二氯甲烷進(jìn)行萃取(300ml)，有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮至干，得到無色油狀的預(yù)期化合物(57％)。
MSm/z 265 中間體14將6-羥基-1-四氫萘酮(20g，0.125mol)和碳酸鉀(28g，0.2mol)在室溫下于250ml甲基異丙基酮中攪拌15分鐘。加入溴代異丁酸乙酯(20ml；0.13mol)并在攪拌下將該混合物回流10小時(shí)。將該混合物過濾、濃縮，用水處理并用乙醚萃取。該乙醚溶液用稀氫氧化鈉溶液和水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并真空濃縮，得到油狀標(biāo)題化合物(42％)。
MSm/z 276
中間體15往中間體14(2g，7.2mmol)在50ml乙醇中的溶液中加入羥胺鹽酸鹽(1g；15mmol)的水(5ml)溶液，然后加入乙酸鈉(1.2g；15mmol)。將該混合物在回流下攪拌16小時(shí)。然后濃縮至干并用水加熱，得到油狀物，該油狀物經(jīng)放置結(jié)晶。過濾后，用水洗滌并干燥，得到乳白色結(jié)晶的標(biāo)題化合物(81％)。
Mp 80℃MSm/z 291 中間體16將中間體15(1.6g；5.5mmol)在100ml乙醇中的溶液和10％Pd/C(0.2g)在50℃下在帕爾裝置中于30巴壓力下氫化16小時(shí)。通過硅藻土濾墊過濾后，真空濃縮，獲得油狀標(biāo)題化合物(79％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.15(d，1H)，6.55(d，1H)，6.45(s，1H)，4.15(q，2H)，3.9(m，1H)2.65(m，2H)，2.2(m，2H)，1.9(m，2H)，1.65(m，2H)，1.5(s，6H)，1.2(t，3H)水解乙酯的通用方法1往乙酯(1mmol)的甲醇(50ml)溶液中加入(3當(dāng)量)NaOH(1N)并將該混合物在60℃加熱過夜。使反應(yīng)物冷卻到室溫，該溶液用HCl(1N)酸化并用二氯甲烷萃取(3×25ml)。合并的有機(jī)層用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干。固體用乙醚滴定，收集并真空干燥，得到終產(chǎn)物。

中間體17如通用方法1中所述，使中間體1反應(yīng)，得到白色固體的中間體17(89％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ13.55(bs，1H)，8.25(d，2H)，7.95(d，2H)，2.75(s，3H)。
中間體18如通用方法1中所述，使中間體3反應(yīng)。減壓除去乙醇后，殘余物用鹽酸處理并收集固體，用水洗滌，經(jīng)真空干燥，得到白色粉末(86％)。
1H NMR(CDCl3)δ8.05(d，2H)，7.65(d，2H)，7.2(m，2H)，6.95(d，2H)，6.9(t，1H)，5.45(s，2H)。
中間體19如通用方法1所述，使中間體4(330mg，0.85mmol)進(jìn)行反應(yīng)。減壓除去乙醇后，將殘余物加到乙酸乙酯(150ml)中，水相用1N HCl酸化至pH＝1。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并濃縮至干，經(jīng)柱色譜，用CH2Cl2/MeOH(85/15)洗脫后，得到近白色固體的標(biāo)題化合物(98％)。
MS(AP+)369.88(M+1)A與B型中間體之間肽偶聯(lián)反應(yīng)的通用方法2在室溫下，往中間體B(1當(dāng)量)的二氯甲烷(75ml)溶液中加入HOBT(1.1當(dāng)量)、EDC(1.1當(dāng)量)和Et3N(3當(dāng)量)。往該混合物中加入中間體A并將該反應(yīng)物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。該反應(yīng)物用HCl(1N)、NaOH(1N)和2×H2O洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干。如果需要，將化合物粗品進(jìn)行色譜或結(jié)晶，得到終產(chǎn)物。
A與B型中間體之間肽偶聯(lián)反應(yīng)的通用方法3在室溫下，往中間體B(1當(dāng)量)的DMF(25ml)溶液中加入HATU(1.1當(dāng)量)、中間體A(1當(dāng)量)和Et3N(2當(dāng)量)。將該反應(yīng)物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將該混合物真空蒸發(fā)至干，殘余物加到200ml二氯甲烷中并用鹽水(50ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干。如果需要，將化合物粗品進(jìn)行色譜或結(jié)晶，得到終產(chǎn)物。
實(shí)施例12-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙酯如通用方法3所述，將中間體22與中間體5反應(yīng)，得到白色固體的標(biāo)題化合物(94％)。色譜CH2Cl2/EtOAc(93/7)Mp 116℃MS(AP+)535.35(M+1) 實(shí)施例22-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸如通用方法1所述，使實(shí)施例1的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)色譜，用CH2Cl2/MeOH(95∶5)洗脫后，在甲苯中重結(jié)晶，得到白色固體的標(biāo)題化合物(63％)。
MS(AP-)505.1(M-1)
實(shí)施例32-甲基-2-[5-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]-5，6，7，8-四氫萘-2-基氧]丙酸乙酯如通用方法2所述，將中間體19與中間體2反應(yīng)，經(jīng)乙腈重結(jié)晶后，得到白色固體的標(biāo)題化合物(74％)。
Mp 142℃ 實(shí)施例42-甲基-2-[5-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]-5，6，7，8-四氫萘-2-基氧]丙酸如通用方法1所述，將實(shí)施例3的化合物進(jìn)行反應(yīng)，在乙腈中重結(jié)晶，得到白色粉末的標(biāo)題化合物(67％)。
Mp 158-160℃ 實(shí)施例52-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-苯氧基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯如通用方法2所述，將中間體19與中間體5反應(yīng)，得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(66％)。色譜C6H12/EtOAc(80/20)MS(AP-)611.2(M-1)MS(AP+)613.1(M+1)
實(shí)施例62-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-苯氧基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸如通用方法1所述，將實(shí)施例5的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)色譜，用CH2Cl2/MeOH(96∶4)洗脫，在己烷中重結(jié)晶，得到淺黃色粉末狀的標(biāo)題化合物(57％)。
Mp 146℃MS(AP-)583.1(M-1)MS(AP+)585(M+1) 實(shí)施例72-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-噻吩-2-基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯如通用方法3所述，將中間體7與中間體19進(jìn)行反應(yīng)，得到無色膠狀的標(biāo)題化合物(49％)。色譜CH2Cl2/EtOAc(90/10)。
MS(AP-)601.03(M-1)MS(AP+)602.92(M+1) 實(shí)施例82-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-噻吩-2-基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸如通用方法1所述，將實(shí)施例7的產(chǎn)物進(jìn)行反應(yīng)。經(jīng)色譜，用CH2Cl2/MeOH(95∶5)洗脫后，在己烷和甲苯中連續(xù)重結(jié)晶，得到白色粉末的標(biāo)題化合物(23％)。
Mp 147℃MS(AP-)573.1(M-1)
結(jié)合測(cè)定采用閃爍親近測(cè)定法(SPA)測(cè)定化合物結(jié)合hPPARγ、hPPARα或PPARδ的能力。在大腸桿菌中表達(dá)作為polyHis靶向融合蛋白的PPAR配體結(jié)合域(LBD)并將其純化。然后用生物素標(biāo)記LBD并將其固定于鏈霉抗生物素蛋白-修飾的閃爍親近小珠。然后，將小珠與適合于該配體結(jié)構(gòu)和合成的恒定量的放射配體(對(duì)PPARγ使用3H-BRL.49653，對(duì)hPPARα使用放射標(biāo)記的2-(4-(2-(2，3-ditritio-1-庚基-3-(2，4-二氟苯基)脲基)乙基)苯氧基-2-甲基丁酸(參見WO 00/08002)，對(duì)PPARδ使用標(biāo)記的GW 2433(參見Brown，P.J.等，Chem.Biol.1997，4，909-918))和不同濃度的試驗(yàn)化合物一起保溫，平衡后，通過閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定與小珠結(jié)合的放射性。用每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)減去通過包含50μM相應(yīng)的未標(biāo)記的配體的對(duì)照孔估測(cè)的非特異性結(jié)合的量。對(duì)于每種試驗(yàn)化合物，建立配體濃度對(duì)放射配體結(jié)合的CPM的曲線并由假定樣品競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的非線性最小二乘方擬合數(shù)據(jù)估測(cè)表觀Ki值。該測(cè)定的詳細(xì)描述另有報(bào)道(參見Blanchard，S.G.等，測(cè)定過氧化氫酶體增殖劑活化的受體γ配體結(jié)合域的閃爍親近測(cè)定法的發(fā)展[Development of aScintillation Proximity Assay for Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ Ligand Binding Domain].Anal.Biochem.1998，257，112-119)。
轉(zhuǎn)染測(cè)定(i)2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-[4-(三氟甲基)苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫烷基(sulfanyl)]苯氧基}乙酸在下述轉(zhuǎn)染測(cè)定中，該化合物被用作PPARδ對(duì)照品，該化合物按照WO 200100603-A1中報(bào)道的方法制備。
(ii)2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基)羰基]氨基]甲基}-苯氧基]丙酸在下述轉(zhuǎn)染測(cè)定中，該化合物被用作PPARα對(duì)照品，該化合物按照WO 200140207-A1中報(bào)道的方法(并復(fù)制如下)進(jìn)行制備。
中間體(a)
采用與Stout，D.M.J.Med.Chem.1983，26(6)，808-13相同的方法。往4-甲氧基芐胺(25g，0.18mol；Aldrich)中加入46％HBr水溶液(106ml，0.9mol；Aldrich)。將反應(yīng)物回流過夜，然后使反應(yīng)物冷卻到0℃并用氫氧化鉀(s)中和到pH 7。將該反應(yīng)物攪拌約30分鐘后，過濾固體并將其干燥。將該固體再溶于熱甲醇中，過濾并使溶液冷卻，得到19g(85％)中間體1。1H NMR(DMSO-d6)δ8.0(bs，1H)，7.2(d，2H)，6.75(d，2H)，3.85(s，2H)，3.50(bs，2H)。
中間體(b)將2-氯乙酰乙酸乙酯(35.3g，29.7ml，0.21mol)和4-(三氟甲基)硫代苯甲酰胺(44g，0.21mol)的乙醇(300ml)溶液回流過夜。冷卻到室溫后，真空除去溶劑。在最少量的甲醇中重結(jié)晶終產(chǎn)物(中間體(b))，得到40g(59％)白色固體的終產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ8.10(d，2H)，7.70(d，2H)，4.40(q，2H)，2.80(s，3H)，1.4(t，3H)。
中間體(c)往中間體(b)(1.84g，5.8mmol)的THF溶液中加入1N LiOH(6ml，6mmol)并將反應(yīng)物在室溫進(jìn)行攪拌。約3小時(shí)后，該反應(yīng)物用1N HCl中和，用3×100ml EtOAc萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空除去溶劑，得到1.5g(89％)白色固體的中間體(b)。1H NMR(DMSO-d6)δ13.55(bs，1H)，8.25(d，2H)，7.95(d，2H)，2.75(s，3H)。
中間體(d)往中間體(c)(1g，7mmo l)在CH2Cl2/DMF(1∶1)中的溶液中加入HOBT(565mg，4.2mmol；Aldrich)、EDC(800mg，4.2mmol；Aldrich)和中間體1(860mg，7mmol)。將反應(yīng)物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。真空除去溶劑，用水處理并用3×100ml CH2Cl2c萃取。將有機(jī)相合并并用1NHCl洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)，得到混合物(N-取代的和N，O-取代的)。將該混合物溶于甲醇并用1N NaOH處理。將反應(yīng)物在50℃攪拌18小時(shí)。真空除去溶劑，溶于二氯甲烷，用水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。蒸發(fā)溶劑，殘余物進(jìn)行色譜(CH2Cl2/MeOH99/1)，得到610mg(47％)白色固體的中間體6。1H NMR(DMSO-d6)δ9.30(s，1H)，8.80(t，1H)，8.20(d，2H)，6.70(d，2H)，4.35(d，2H)，2.6(s，3H)。
中間體(e)2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯往中間體(d)(710mg，1.81mmol)的DMF(50ml)的溶液中加入碳酸鉀(275mg，1.99mmol)，然后加入2-溴-2-甲基丙酸乙酯(280μl，1.91mmol；Aldrich)，并將反應(yīng)物加熱到80℃。18小時(shí)后，使反應(yīng)物冷卻到室溫并真空除去溶劑。殘余物用水(200ml)處理，用3×50ml二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并真空除去溶劑。殘余物進(jìn)行色譜(CH2Cl2/MeOH99/1)，得到680mg(77％)透明油狀的實(shí)施例1化合物。1H NMR(CDCl3)δ7.95(d，2H)，7.60(d，2H)，7.15(d，2H)，6.75(d，2H)，6.05(t，1H)，4.45(d，2H)，4.15(q，2H)，2.65(s，3H)，1.50(s，6H)，1.20(t，3H).
2-甲基-2-[4-{[(4-甲基-2-[(4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸往中間體(e)(680mg，1.39mmol)的甲醇溶液中加入1NNaOH(1.6ml，1.6mmol)并將反應(yīng)物在60℃攪拌。18小時(shí)后，將反應(yīng)物冷卻到室溫并蒸發(fā)溶劑。殘余物用1N HCl處理，用3×20ml THF萃取并真空除去溶劑。使500mg(75％)標(biāo)題化合物在最少量的二氯甲烷和戊烷中沉淀出白色固體。mp在60-70℃之間變化；LC/MS(m/z)477.22(100％，AP-)，479.12(100％，AP+)；C23H21F3N2O4S的元素分析C 5.71(57.73)，H 4.56(4.42)，N 5.77(5.85)，S 6.15(6.70)。
(iii)5-{4-[2-(甲基-吡啶-2-基氨基)乙氧基]芐基}噻唑烷-2，4-二酮在下述轉(zhuǎn)染測(cè)定中，該化合物被用作PPARγ的對(duì)照品，該化合物按照J(rèn).Med.Chem.1994，37(23)，3977中報(bào)道的方法制備。
在CV-1細(xì)胞中對(duì)它們激活PPAR亞型的能力進(jìn)行的臨時(shí)轉(zhuǎn)染測(cè)定中篩選化合物的潛在功能。利用先前建立的嵌合受體體系以比較針對(duì)相同靶基因的受體亞型的相關(guān)轉(zhuǎn)錄活性并避免內(nèi)源性受體活化而導(dǎo)致結(jié)果的翻譯復(fù)雜化。參見，例如，Lehmann，J.M.；Moore，L.B.；Smith-Oliver，T.A.；Wilkison，W.O.；Willson，T.M.；Kliewer，S.A.，抗糖尿病藥噻唑烷二酮是過氧化氫酶體增殖劑活化受體γ(PPARγ)的高度親和性配體[An antidiabetic thiazolidinedione is a highaffinity ligand for peroxisome proliferator-activatedreceptor gamma(PPARγ)]，J.Biol.Chem.，1995，270，12953-6。將鼠和人PPARα、PPARγ和PPARδ的配體結(jié)合域各自與酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4 DNA結(jié)合域融合。將CV-1細(xì)胞臨時(shí)用各自的PPAR嵌合體與報(bào)告結(jié)構(gòu)的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染，該報(bào)告結(jié)構(gòu)包含五個(gè)拷貝的驅(qū)動(dòng)分泌的胎盤堿性磷酸酶(SPAP)和β-半乳糖苷酶表達(dá)的GAL4 DNA結(jié)合位點(diǎn)。16小時(shí)后，培養(yǎng)基更換為補(bǔ)充有10％脫脂(delipidated)胎牛血清與適當(dāng)濃度的試驗(yàn)化合物的DME培養(yǎng)基。再過24小時(shí)后，制備細(xì)胞提取物并分析堿性磷酸酶和β-半乳糖苷酶活性。使用β-半乳糖苷酶活性作為內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)堿性磷酸酶活性的轉(zhuǎn)染效率(參見，例如Kliewer，S.A.等，Cell 83，813-819(1995))。在hPPARγ測(cè)定中，用吡格列酮(BRL 49653)作為陽性對(duì)照。在hPPARα測(cè)定中，用2-(2-甲基-3-[3-{3-(4-環(huán)己基氨基)-[6-(4-氟苯基哌嗪-1-基)][1，3，5]三嗪-2-基氨基}丙基]苯硫基)-2-甲基丙酸作為陽性對(duì)照。在PPARδ測(cè)定中，用2-{2-甲基-4-[({4-甲基-2-{三氟甲基)苯基]-1，3-噻唑-5-基}甲基)硫烷基}苯氧基}乙酸作為陽性對(duì)照。
相對(duì)于陽性對(duì)照，10-7或更低濃度的上面所有實(shí)施例的酸均顯示出活化至少50％的hPPARα。
下表中報(bào)告了實(shí)施例的酸對(duì)三種hPPAR亞型的活性，以毫微摩爾表示。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物及其可藥用鹽、溶劑化物和可水解的酯 其中R1和R2獨(dú)立地是H或C1-3烷基，或者與同一個(gè)碳原子相連的R1和R2可以與它們連接的碳原子一起形成3-5元環(huán)烷基環(huán)；X1表示O或S；R3、R4、R8和R9各自獨(dú)立地表示H、鹵素、-CH3或-OCH3；R5表示H或C1-6烷基或者R4和R5一起形成3-6元環(huán)烷基環(huán)；X2表示NH、NCH3或O；Y和Z之一是N，另一個(gè)是O或S；R6表示苯基或吡啶基(其中N位于2或3位)并且可任選地被一個(gè)或多個(gè)鹵素、CF3、C1-6直鏈或支鏈烷基(可任選被鹵素取代)取代，條件是當(dāng)R6是吡啶基時(shí)，N是未取代的；R7表示C1-6烷基(可任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代)、-C0-6烷基-5元雜芳基、C0-6烷基-(O)n-苯基，其中n是0或1，條件是當(dāng)R1和R2是甲基，R8和R9是H，R5是H時(shí)，則R7不能是CH3或CF3。
2.權(quán)利要求1的化合物，是選擇性hPPARα激動(dòng)劑。
3.權(quán)利要求1-2的化合物，其中X1表示O。
4.權(quán)利要求1-3的化合物，其中R1和R2是甲基。
5.權(quán)利要求1-4的化合物，其中R3是甲基或H。
6.權(quán)利要求1-5的化合物，其中R4是H或與R5一起形成6元環(huán)烷基環(huán)。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R8和R9表示H。
8.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的化合物，其中R5表示CH3或者與R4一起形成6元環(huán)烷基環(huán)。
9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物，其中X2表示NH。
10.權(quán)利要求1-9的化合物，其中Z表示N。
11.權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的化合物，其中Y表示S。
12.權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的化合物，其中R6是單取代的。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中R6是對(duì)位單取代的。
14.前述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中R6是苯基。
15.權(quán)利要求1的化合物，選自下列2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-苯氧基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-苯氧基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-噻吩-2-基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸乙酯2-甲基-2-[3-甲基-4-{[(4-噻吩-2-基甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]甲基}苯氧基]丙酸2-甲基-2-[5-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]-5，6，7，8-四氫萘-2-基氧]丙酸乙酯2-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸乙酯2-甲基-2-[5-{[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]-5，6，7，8-四氫萘-2-基氧]丙酸2-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸
16.2-甲基-2-[3-甲基-4-{1-[(4-甲基-2-[4-三氟甲基苯基]-噻唑-5-基羰基)氨基]乙基}苯氧基]丙酸。
17.權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的化合物，用于治療。
18.一種藥物組合物，包含權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的化合物。
19.權(quán)利要求18的藥物組合物，還包含可藥用稀釋劑或載體。
20.權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的化合物用于制備治療hPPARα疾病或病癥的藥物的用途。
21.權(quán)利要求20的用途，其中hPPARα介導(dǎo)的疾病或病癥包括異常脂血癥、X綜合癥、心衰、高膽固醇血癥、心血管疾病、II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素耐藥、高脂血癥、肥胖、貪食癥和神經(jīng)性厭食癥。
22.一種治療患者的hPPARα介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，包括施用治療有效量的權(quán)利要求1-16任一項(xiàng)的化合物。
23.權(quán)利要求22的方法，其中hPPARα介導(dǎo)的疾病或病癥包括異常脂血癥、X綜合癥、心衰、高膽固醇血癥、心血管疾病、II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素耐藥、高脂血癥、肥胖、貪食癥和神經(jīng)性厭食癥。
全文摘要
式(I)化合物及其可藥用鹽、溶劑化物和可水解的酯其中，R
文檔編號(hào)A61P3/04GK1529698SQ02811080
公開日2004年9月15日 申請(qǐng)日期2002年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月31日
發(fā)明者B·A·杜邁特雷, R·L·M·戈斯米尼, B A 杜邁特雷, M 戈斯米尼 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司