專利名稱：異羥肟酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及異羥肟酸衍生物及其在藥物中的用途。
背景技術(shù)：
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是一組結(jié)構(gòu)相關(guān)的降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)單元的內(nèi)肽酶。MMP族成員共有許多重要的特征，其包括在催化部位存在鋅原子、在中性pH值下具有催化活性、開始時(shí)以非活性酶原的形式存在、活化包括更新N-末端區(qū)域、通過鈣獲得結(jié)構(gòu)上的穩(wěn)定、以及通過一類稱為金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)的特殊的蛋白質(zhì)抑制劑抑制催化活性形式。典型的MMP族目前由至少20個(gè)成員組成，包括膠原酶，白明膠酶，溶基質(zhì)素和膜式MMP。
MMP是包括Reprolysins、Serralysins以及Astacin族的更大一族含鋅蛋白酶的一個(gè)子族。
已經(jīng)表明，某些抑制典型MMP的化合物也能夠抑制大量由非基質(zhì)金屬蛋白酶(MP)傳遞的其他情況，其包括釋放TNFα、CSF-1和TGFα，以及脫除L-選擇蛋白和IL-6、TNF-R1、及TNF-RII受體。參見Hooper等人的Biochem.J.，(1997)，321265-279。
基質(zhì)金屬蛋白酶與多種病癥有關(guān)。因此，對一種或多種MMP活性的抑制可能會有益于這些病癥。這種狀況包括癌癥，發(fā)炎，自身免疫性、感染性或者眼睛疾病。參見Whittaker M.等人的Chem.Rev.，(1999)，99，2735-2776和Annals of the New York Academy of Sciences，第732卷，(1994)。
因此，具有MMP抑制特性的化合物可以用于治療很多不同的疾病。特別有用的是那些還具有優(yōu)良藥物代謝動力學(xué)特性的化合物。
但是，這些化合物對非基質(zhì)金屬蛋白酶(MP)的抑制可能不會提供任何治療效果，實(shí)際上可能是有害的。例如，已經(jīng)有人認(rèn)為，同時(shí)抑制TNFα釋放的MMP抑制劑可能在使肝臟傷害加劇中起到一定的作用；參見Solorzano等人的J.Immunol.，(1997)，158414-419。
同樣，使用MMP抑制劑(其中這種抑制劑并沒有單獨(dú)選擇用于典型的MMP)的早期臨床證據(jù)表明，它們的使用在許多患者中產(chǎn)生了關(guān)節(jié)疼痛(tendonitis)。參見Wojtowicz-Praga等人，Lombardi癌癥中心，Georgetown University Hospital DC & BBL Anapolis MD.，Am.Soc.Clin.Oncol.(1996五月)，″The Pharmacokinetics(PK) ofMarimastat(BB-2516)，新的金屬蛋白酶抑制劑(MMPI)對遷移性肺癌患者口服給藥″。關(guān)節(jié)疼痛的發(fā)展是由劑量限定的并且可能需要″休假″治療，這一休假占療程的高達(dá)50％，或者需要給以非甾族消炎藥(NSAID)。
因此，需要選擇性的MMP抑制劑，它們可以以不導(dǎo)致不希望的副作用，比如關(guān)節(jié)疼痛的劑量用于藥物中。
WO99/24399公開了一類作為MMP抑制劑的異羥肟酸衍生物。
發(fā)明概述現(xiàn)在我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了很多化合物，它們是有效的MMP抑制劑，它們的有利之處在于不會在相應(yīng)的動物模型中產(chǎn)生肌腱炎。這些化合物預(yù)期可用于藥物中，特別是希望在其中避免諸如關(guān)節(jié)疼痛的副作用的藥物中。因此，與公知的與劑量限定作用有關(guān)的化合物，例如Marimastat相比，本發(fā)明的化合物可以期待具有優(yōu)良的副作用分布圖。
因此，我們提供式(I)的化合物及其鹽、溶劑化物或者水合物 其中R1和R2可以相同或不同，各自為氫原子或CF3，CF2H或CFH2基團(tuán)，條件是當(dāng)R1或R2中的一個(gè)是氫原子時(shí)，另一個(gè)是CF3，CF2H或CFH2基團(tuán)。
發(fā)明詳述在一組特定的本發(fā)明的化合物中，R1是氫原子，R2是CF3，CF2H或CFH2基團(tuán)。在另一組特定的本發(fā)明的化合物中，R2是氫原子，R1是CF3，CF2H或CFH2基團(tuán)。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物是實(shí)施例中描述的那些。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物是其中R2是CF3基團(tuán)，R1是氫原子的式1化合物，即，4-[4-(4-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺?；谆鵠四氫吡喃-4-羧酸羥基酰胺。
應(yīng)當(dāng)理解，在需要的時(shí)候，本發(fā)明的化合物可以以前藥形式給藥，例如，以保護(hù)的異羥肟酸衍生物的形式給藥，這種衍生物可以保護(hù)為N或者O-取代的衍生物，如O-芐基或者O-叔丁基衍生物。還應(yīng)當(dāng)理解，所述前藥可以在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為式(I)的活性物質(zhì)，并且本發(fā)明想延伸到這種前藥。
式(1)化合物的鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽，例如來自于無機(jī)或者有機(jī)堿的堿加成鹽，比如諸如鎂或者鈣鹽的堿金屬鹽，和諸如嗎啉、哌啶、二甲胺或二乙胺鹽的有機(jī)胺鹽。
通式(I)的化合物可以通過本領(lǐng)域已知的任何適當(dāng)?shù)姆椒ê?或通過下面的過程制備。在說明書和下面的化學(xué)式中，除非另外指明，基團(tuán)R1和R2定義如上。應(yīng)當(dāng)理解，下述各種化合物中存在的官能團(tuán)，比如氨基、羥基或者羧基并且希望保留的話，可能需要在引發(fā)任何反應(yīng)之前形成被保護(hù)的形式。在這種情況下，保護(hù)基的脫除可以是特定反應(yīng)順序的最后一步。用于這種官能團(tuán)的適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說應(yīng)當(dāng)是顯而易見的，具體內(nèi)容參見Greene T.W.等人的″有機(jī)合成中的保護(hù)基″(1999)一書。
因此，例如，本發(fā)明的化合物可以通過中所示的如下通用路線來制備
式(iii)的化合物可以通過使用標(biāo)準(zhǔn)的形成醚鍵的方法使式(i)的化合物(其中X是，例如羥基或離去基團(tuán)，如氟原子)與式(ii)的化合物(其中PG1是適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基，如叔丁氧基羰基酯)反應(yīng)來制備。例如，當(dāng)式(i)的化合物中X是氟原子時(shí)，這種式(i)的化合物可以與式(ii)的化合物在適當(dāng)?shù)膲A，比如叔丁醇鉀的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇?，比如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中反應(yīng)得到式(iii)的化合物。
可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法除去保護(hù)基PG1得到式(iv)的化合物。因此，例如當(dāng)PG1是叔丁氧基羰基酯基時(shí)，該基團(tuán)可以在諸如三氟乙酸的酸性條件下，在諸如二氯甲烷的鹵化溶劑中脫除。
式(vi)的化合物可以通過使式(iv)的化合物與式(v)的化合物優(yōu)選在堿，比如三乙胺的存在下，在鹵化溶劑，如二氯甲烷中反應(yīng)制備。應(yīng)當(dāng)理解，式(v)的化合物也可以按類似于文獻(xiàn)中所述的方法制備。
然后，可以在適當(dāng)?shù)娜軇w系，比如甲醇和水體系中，在適當(dāng)?shù)臏囟龋缁亓鳒囟认率褂美缰T如氫氧化鋰的堿將式(vi)的化合物轉(zhuǎn)化為羧酸。之后，可以使用文獻(xiàn)中熟知的條件將這樣形成的羧酸轉(zhuǎn)化為式(I)的化合物。例如，在惰性溶劑(比如二氯甲烷)中，在催化量的DMF存在下，用草酰氯處理該酸得到中間體酰氯，這一酰氯可以分離或者可以不必分離，而是隨后與羥胺在適當(dāng)?shù)臏囟?，比如室溫下反?yīng)得到希望的異羥肟酸(I)。
得到的最終產(chǎn)品或者中間體的任何混合物均可以根據(jù)組成的物理化學(xué)性能差別而通過已知的方式分離成純的最終產(chǎn)品或者中間體，例如通過色譜法、蒸餾、分級結(jié)晶或者在這種情況下如果適當(dāng)或者可能的話通過形成鹽來分離。
可以使用適當(dāng)?shù)拿敢种圃囼?yàn)，例如實(shí)施例A中所述的試驗(yàn)測定化合物抑制MMP的能力。
在我們的試驗(yàn)中，有利的是，使用本發(fā)明的化合物沒有觀察到肌腱炎。實(shí)施例B中描述的大鼠模型可以用來預(yù)測本發(fā)明的化合物導(dǎo)致產(chǎn)生關(guān)節(jié)疼痛的傾向。
有利的是，本發(fā)明的化合物具有有益的藥物代謝動力學(xué)特性，例如，優(yōu)良的生物利用度?；衔锏乃幬锎x動力學(xué)分布圖可以使用實(shí)施例C中描述的測定法來測定。
本發(fā)明還涉及對遭受到可歸屬于先前所述MMP的失調(diào)或者疾病的患者(包括人和/或奶牛場、肉類或者皮毛工業(yè)或者作為寵物飼養(yǎng)的哺乳動物)給以治療的方法，更具體地說，涉及一種治療方法，其包括給以式(I)的基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑作為活性組分。
因此，式(I)的化合物尤其可以用于治療骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，和比如在某些轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)的由這些基質(zhì)金屬蛋白酶過分表達(dá)所產(chǎn)生疾病和癥狀，或者涉及到眼睛新血管化的狀況。
如上所述，式(I)的化合物可用于人藥或者獸藥，因?yàn)樗鼈兪荕MP抑制劑。因此，在另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及在哺乳動物，特別是人中處理(意指治療或者預(yù)防)由MMP傳遞的疾病或者狀況的方法，該方法包括給予哺乳動物有效量的上式(I)的化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽；和用于人藥或者獸藥，特別是處理(意指治療或者預(yù)防)由MMP傳遞的疾病或者狀況的式(I)的化合物；和式(I)的化合物在制備用于處理(意指治療或者預(yù)防)由MMP傳遞的疾病或者狀況的藥劑方面的用途。
以上所提到的疾病或者狀況包括炎癥性疾病，自身免疫性疾病，癌癥，心血管疾病，涉及組織斷裂的疾病。適當(dāng)?shù)募膊“愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，骨質(zhì)疏松癥，神經(jīng)退行性變，阿爾茨海默氏病，中風(fēng)，血管炎，克羅恩氏病，潰瘍性結(jié)腸炎，多發(fā)性硬化，牙周炎，齒齦炎，涉及到組織斷裂的疾病(比如骨吸收，出血，凝血，急性期反應(yīng)，惡病質(zhì)和厭食)，急性感染，HIV感染，發(fā)燒，休克狀態(tài)，移植物抗宿主反應(yīng)，皮膚學(xué)狀況，外科傷口愈合，干癬，異位性皮炎，大皰性表皮松解，腫瘤生長，血管生成和由繼發(fā)性轉(zhuǎn)移產(chǎn)生的發(fā)病，眼科病，視網(wǎng)膜病，角膜潰瘍形成，多次灌注液損傷，周期性偏頭痛，腦膜炎，哮喘，鼻炎，變應(yīng)性結(jié)膜炎，濕疹，過敏，再狹窄，充血性心力衰竭，子宮內(nèi)膜異位，動脈粥樣硬化，內(nèi)硬化，與阿斯匹林無關(guān)的抗血栓癥，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，固體器官移植和眼睛病癥。
式(I)的化合物也可以用于治療盆腔炎(PID)和癌癥誘導(dǎo)的骨吸收。另外，它們治療肺病，例如囊性纖維化，成人呼吸窘迫綜合癥(ARDS)，氣腫，支氣管炎o(hù)bliterans-組織性肺炎(BOOP)，特發(fā)性肺纖維化(PIF)，擴(kuò)散性肺泡損壞，肺部郎格罕氏細(xì)胞顆?；?granulamatosis)，肺部淋巴管平滑肌matosis(LAM)和慢性阻塞性肺病(COPD)。
本發(fā)明的化合物可特別用于治療炎癥性疾病，自身免疫性疾病，癌癥和眼病。因此，例如，該化合物可以用于治療和/或預(yù)防移植物抗宿主反應(yīng)，干癬，異位性皮炎，鼻炎，濕疹，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，固體器官移植，囊性纖維化，特別是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，骨質(zhì)疏松癥，克羅恩氏病，潰瘍性結(jié)腸炎，多發(fā)性硬化，牙周炎，骨吸收，細(xì)菌感染，大皰性表皮松解，腫瘤生長，血管生成，眼病，視網(wǎng)膜病，哮喘氣腫，支氣管炎，和慢性阻塞性肺病(COPD)。
涉及到眼睛新血管化的疾病或者狀況包括，但不局限于，糖尿病性視網(wǎng)膜病，早期視網(wǎng)膜病(ROP)或與年齡有關(guān)的黃斑變性(ARMD)。
為了治療前述所有的疾病，式(I)的化合物可以以含無毒的藥學(xué)上可接受的載體、助劑和賦形劑的劑量單元制劑經(jīng)口給藥，局部給藥，不經(jīng)腸道給藥，通過吸入噴霧劑給藥或者直腸給藥。這里使用的術(shù)語″不經(jīng)腸道″包括皮下注射、靜脈注射、肌肉注射、膜注射或者灌注方法。也可以使用眼睛注射，比如玻璃體內(nèi)、眼球下(subtenons)、結(jié)膜下、眼周和眼球后注射，以及眼內(nèi)緩釋設(shè)備和植入物。除了治療恒溫動物，比如小鼠、大鼠、馬、牛、羊、狗、貓等之外、本發(fā)明的化合物可有效地用于治療人。
含活性成分的藥物組合物可以呈適合于口服使用的形式，例如片劑、錠劑、糖錠、水溶液或者油性懸浮液、可分散性粉劑或者顆粒、乳液、硬或軟膠囊、或者糖漿或酏劑形式。設(shè)計(jì)用于口服的組合物可以根據(jù)本領(lǐng)域公知的用于制造藥物組合物的任何方法制備，并且為了提供藥學(xué)上精美的和適口的制劑，這種組合物可以包含一種或多種選自甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑的藥劑。片劑中包含的活性成分與適合于制造片劑的無毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑形成混合物的形式。這些賦形劑可以是例如，惰性稀釋劑，比如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒和崩解劑，例如玉米淀粉或者藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或者阿拉伯膠，以及脫模劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或者滑石。片劑可以是未涂覆的或者它們可以通過已知的方法進(jìn)行涂敷以延遲崩解和胃腸道吸收并由此提供較長時(shí)間的持續(xù)作用。例如，可以使用延時(shí)物質(zhì)，比如單硬脂酸甘油酯或者甘油基二硬脂酸酯。它們也可以通過US專利4,256,108；4,166,452；和4,265,874中描述的方法進(jìn)行涂敷以形成用于控制釋放的滲透性治療片劑。
用于口服使用的制劑也可以以硬膠囊的形式存在，其中活性成分與惰性固體稀釋劑，例如碳酸鈣、磷酸鈣或者高嶺土混合在一起；或者以軟膠囊的形式存在，其中活性成分與水或者油介質(zhì)，例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合在一起。
水混懸劑中包含的活性物質(zhì)與適合于制造水混懸劑的賦形劑形成混合物的形式。這種賦形劑是助懸劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯-吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯膠；分散或潤濕劑可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者是環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者是環(huán)氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物，例如十七乙烯基氧鯨蠟醇，或者是環(huán)氧乙烷與來自于脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物，比如含有來自于脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的聚氧乙烯，例如聚氧乙烯去水山梨糖醇單油酸酯。水混懸劑也可以包含一種或多種防腐劑，例如乙基或正丙基的對-羥基苯酸酯，一種或多種著色劑，一種或多種調(diào)味劑，以及一種或多種甜味劑，比如蔗糖或者糖精。
油懸劑可以通過將活性成分懸浮在植物油，例如花生油、橄欖油、芝麻油或者椰子油中，或者懸浮在礦物油，比如液體石蠟中來配制。所述油懸劑可以包含增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或者鯨蠟醇?？梢约尤胫T如以上列出的甜味劑和調(diào)味劑以提供適口的口服制劑。這些組合物在保藏時(shí)可以加入抗氧化劑，比如抗壞血酸。
適合于通過加入水來制備水懸劑的可分散性粉劑和顆粒提供活性成分，其與分散或潤濕劑、助懸劑以及一種或多種防腐劑形成混合物的形式。適當(dāng)?shù)姆稚⒒驖櫇駝┮约爸鷳覄┮雅e例說明，例如，也可以存在增甜、增香和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以呈水包油乳化劑的形式。油相可以是植物油，例如橄欖油或者花生油，或者是礦物油，例如液體石蠟或者這些油的混合物。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┛梢允翘烊淮嬖诘臉淠z，例如阿拉伯膠或者黃蓍樹膠，天然存在的磷脂，例如大豆磷脂、卵磷脂，和來自于脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或者偏酯，例如去水山梨糖醇單油酸酯以及所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯去水山梨糖醇單油酸酯。所述乳液也可以包含增甜和調(diào)味劑。
糖漿和酏劑可以用甜味劑，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。這種制劑也可以包含緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑和著色劑。藥物組合物可以呈無菌的可注射水溶液或者油質(zhì)懸浮液的形式。該懸浮液可以根據(jù)已知的方法使用上述適當(dāng)?shù)姆稚⒒驖櫇駝┖椭鷳覄﹣砼渲?。無菌的可注射制劑也可以為無菌的可注射溶液或者懸浮液形式，它們處于無毒的腸道外可接受的稀釋劑或者溶劑中，例如為1，3-丁烷二醇的溶液。在可接受的賦形劑和溶劑當(dāng)中，可以使用的是水、生理鹽水和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌的硬化油類通常用作溶劑或者懸浮介質(zhì)。為了這一目的，可以使用任何溫和的硬化油，包括人造甘油單酯或者二酯。另外，比如油酸的脂肪酸也可用于注射制劑中。
為了經(jīng)直腸給以所述藥物，式(I)的化合物也可以以栓劑的形式給藥。這些組合物可以通過將藥物與適當(dāng)?shù)臒o刺激性的賦形劑混合來制備，所述賦形劑在常溫下是固體，在直腸溫度下則變成液體，因此將會在直腸中融化以釋放所述藥物。這種物質(zhì)是可可脂和聚乙二醇。
為了局部使用，要使用包含有式(I)化合物的膏、軟膏、凝膠、溶液或者懸浮液等。為了眼睛的局部給藥，可以使用包含式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的溶液、懸浮液或者凝膠劑。溶液和懸浮液也可以適合于玻璃體內(nèi)或者intracameral使用。
大約0.05毫克-140毫克每公斤體重每天的劑量濃度可用于治療上述狀況(大約2.5毫克-7克每位患者每天)。
可以與載體結(jié)合以產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將根據(jù)治療的主體和特定的給藥模式來變化。例如，設(shè)計(jì)用于人體口服的制劑可以在約5-95％的總組合物范圍內(nèi)變化。劑量單元形式通常將包含約1毫克-500毫克的活性成分。
但是，應(yīng)當(dāng)懂得，對于任何特定患者的具體劑量濃度將取決于各種各樣的因素，包括所使用具體化合物的活性，年齡，體重，一般的健康情況，性別，給藥時(shí)的飲食時(shí)間，給藥途徑，排泄速率，藥物組合，以及進(jìn)行治療的特定疾病的嚴(yán)重程度。
式(I)化合物的鹽可以通過使用常規(guī)方法使式(I)的化合物與適當(dāng)?shù)乃嵩谶m當(dāng)?shù)娜軇┗蛉軇┗旌衔镏兄苽?，所述溶劑例如是有機(jī)溶劑，比如醚，例如乙醚，或者是醇，例如乙醇。
在希望獲得本發(fā)明特定的幾何異構(gòu)體時(shí)，可以將色譜法、重結(jié)晶及其他通用的分離方法和中間體或者最終產(chǎn)品一起使用。
以下實(shí)施例舉例說明了本發(fā)明化合物的制備。所有的溫度均為℃。使用下面的縮寫NMP1-甲基-2-吡咯烷酮；DCM二氯甲烷；TNFα＝腫瘤壞死因子α；LPS＝脂多糖；ELISA＝酶連接的免疫吸收試驗(yàn)；PBMC＝外周血單核細(xì)胞；PMA＝佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯；h＝小時(shí)所有的NMR均在300MHz或400MHz下獲得。
所有的中間體和實(shí)施例均通過Beilstein Autonom命名(得自MDLInformation Systems GmbH，Therdor-Heuss-Allee 108D 60486，F(xiàn)rankfurt，Germany)或者給以似乎一致的名稱。
實(shí)施例AMMP抑制活性-熒光試驗(yàn)使用以下方法測定式(I)化合物作為明膠酶A(MMP-2)和明膠酶B(MMP-9)抑制劑的效能將抑制劑溶于含0.02％β-巰基乙醇的二甲亞砜中并制備一系列的稀釋液。在存在和不存在抑制劑的情況下，在含50mM Tris pH 7.4，5mM CaCl2，0.002％ NaN3和Brij 35的試驗(yàn)緩沖劑中培養(yǎng)活化酶。在加入熒光培養(yǎng)基(Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2)以將最后濃度調(diào)節(jié)為10uM之前，使樣品在37℃下預(yù)孵15分鐘。培養(yǎng)試驗(yàn)在37℃下進(jìn)行20-30分鐘，然后在熒光計(jì)II中記錄λex(340nm)和λem(405nm)下的讀數(shù)。
將酶活性與缺少抑制劑的對照物進(jìn)行對比，并以完成50％酶抑制的抑制劑濃度(IC50)報(bào)告比較結(jié)果。
實(shí)施例B大鼠肌腱炎模型可以使用如WO-A9925693中所述的模型測定肌腱炎。
實(shí)施例C測定藥物代謝動力學(xué)分布圖在右邊頸動脈中插入有用于收集血液的導(dǎo)管的大鼠中測定本發(fā)明化合物的藥物代謝動力學(xué)分布圖。為了靜脈內(nèi)劑量給藥，所述化合物制備成適當(dāng)?shù)闹苿?0％v/v的DMSO，50％v/v的PEG400/水形式，并通過將導(dǎo)管插入到左側(cè)頸靜脈中進(jìn)行劑量給藥。
在劑量給藥后5分鐘、0.5小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)和8小時(shí)時(shí)收集樣品。為了口服給藥，將化合物制備成適當(dāng)?shù)闹苿┬问?，?.4％w/v的甲基纖維素/水形式。在劑量給藥后0.5小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)和8小時(shí)時(shí)收集樣品。有時(shí)，也在劑量給藥后12小時(shí)收集樣品。通過離心血樣得到血漿，然后在蛋白質(zhì)沉淀后使用標(biāo)準(zhǔn)方法，比如液相色譜-質(zhì)譜測定藥物濃度。
中間體14-(4-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯將攪拌的4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁基酯(134.8g)的N，N-二甲基甲酰胺(850ml)溶液在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在冰浴中冷卻。分步加入叔丁氧基鉀(75.2g)以使溫度不超過22℃，然后，在于15分鐘內(nèi)滴加4-氟三氟甲苯(100g)的同時(shí)，把所得混合物在0℃下另外保持1.5小時(shí)。允許反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌過夜。加入水(200ml)，并用叔丁基甲醚(1×400ml，1×300ml，1×200ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水(2×400ml)、鹽水(200ml)洗滌，然后用硫酸鎂干燥，真空蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，類白色/淺黃色固體(206.4g)。
質(zhì)譜m/z 331(M-14)+用類似的方法制備中間體24-(3-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯將氫化鈉(0.9g，60％的礦物油分散液)加入到4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁基酯(4克)的NMP(40毫升)溶液中，并將溶液攪拌1小時(shí)，之后加入3-氟三氟甲苯(3.5克)的NMP(10毫升)溶液，并把混合物在80℃下攪拌2小時(shí)。將混合物加入到水(200毫升)中并用乙醚(2×100毫升)萃取，用水、1M氫氧化鈉和鹽水洗滌溶劑，干燥并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，黃色油狀物(5.2克)，不經(jīng)純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。
質(zhì)譜m/z 331(M-14)+中間體34-(4-三氟甲基苯氧基)哌啶將攪拌的中間體1(206g)的二氯甲烷(1236ml)溶液在冰浴中冷卻并在0.5小時(shí)內(nèi)加入三氟乙酸(365ml)。繼續(xù)攪拌4.5小時(shí)，同時(shí)將混合物在冰浴中冷卻并用4M氫氧化鈉溶液猝滅，直到pH達(dá)到≥13。分離各層，水相再用新鮮的二氯甲烷(125ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用鹽水(1×500ml，1×250ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，然后真空蒸發(fā)。得到標(biāo)題化合物，類白色固體(101g)。
質(zhì)譜m/z 246(M+1)+用類似的方法制備中間體44-(3-三氟甲基苯氧基)哌啶遵循用于中間體3的方法，由中間體2(5.2g)制備標(biāo)題化合物，類白色固體(4.2g)。
TLC Rf0.3(1％的NH4OH/乙酸乙酯)。
中間體54-[4-(4三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺酰基甲基]四氫吡喃-4-羧酸甲酯將三乙胺(12ml)加入到攪拌的中間體3(9.6g)的二氯甲烷(50ml)溶液中并在氮?dú)獗Ｗo(hù)下把所得混合物在冰浴中冷卻。然后在大約5分鐘內(nèi)滴加4-(氯磺基)甲基四氫吡喃-4-羧酸甲酯(CAS號374822-74-9)(10g)的二氯甲烷(50ml)溶液，并使得所得混合物升溫至室溫并攪拌過夜。加入水(50ml)，并分離各層。水層用新鮮的DCM(30ml)萃取，合并的有機(jī)萃取液用水(40ml)、稀鹽酸(3×40ml)洗滌，最后再用水(40ml)洗滌。有機(jī)溶液轉(zhuǎn)入到用于在大氣壓下蒸餾的燒瓶中并濃縮到體積為50ml。分步加入叔丁基甲醚(1×50ml，1×30ml)，在每一次加入之后都將混合物濃縮回50ml?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，在冰浴中冷卻，通過過濾回收產(chǎn)物。濾餅用冷的叔丁基甲醚(20ml)洗滌，然后在真空箱中干燥，得到標(biāo)題化合物，類白色固體(12.5g)。
質(zhì)譜m/z 466(M+1)+中間體64-[4-(4三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺?；谆鵠四氫吡喃-4-羧酸將中間體5(5g)和氫氧化鋰一水化物(0.9g)在甲醇(25ml)與水(25ml)中形成的混合物回流加熱4.5小時(shí)。反應(yīng)設(shè)定為在大氣壓下進(jìn)行蒸餾的方式，并且以″加入并取出″的方式加入水(33.5ml)。繼續(xù)蒸餾直到上部溫度＞90℃。將所得溶液冷卻到60-70℃，同時(shí)滴加濃鹽酸(1.8ml)。允許反應(yīng)混合物冷卻到室溫并攪拌過夜。通過過濾回收產(chǎn)物，用水(4×10ml)洗滌并在真空箱中干燥，得到標(biāo)題化合物，類白色固體(4.42g)。
質(zhì)譜m/z 450(M-1)-中間體84-[4-(3-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺?；谆鵠四氫吡喃-4-羧酸將中間體4(0.50克)加入到4-(氯磺基)甲基四氫吡喃-4-羧酸甲酯(0.60g)的DCM溶液中并加入三乙胺(0.5ml)。溶液攪拌2小時(shí)，然后用檸檬酸水溶液(10％的水溶液，20ml)、水和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。殘余物溶于甲醇(20毫升)中并加入氫氧化鋰(250mg)的水(20毫升)溶液。溶液回流攪拌2小時(shí)，冷卻并將體積蒸發(fā)到一半。水溶液用乙醚洗滌，用檸檬酸酸化到pH值＝4，用DCM萃取。溶劑用水和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，白色固體(0.65g)。
TLC Rf0.42(乙醚)實(shí)施例14-[4-(4-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺?；谆鵠四氫吡喃-4-羧酸羥基酰胺將草酰氯(0.65ml)滴加到攪拌的中間體6(2.25g)與N，N-二甲基甲酰胺(39μl)的四氫呋喃(35ml)溶液中。所得混合物在氮?dú)獗Ｗo(hù)下在室溫下攪拌大約3小時(shí)，同時(shí)真空除去溶劑。將甲苯(1×20ml，1×10ml)加入到殘余物中，然后在每次加入溶劑后均再次蒸發(fā)。向殘余物中加入四氫呋喃(27ml)，并把所得溶液在冰浴中冷卻，同時(shí)加入羥胺(1.5ml，50％w/w的水溶液)。允許混合物升溫至室溫并攪拌2.5小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物在大氣壓下蒸餾，以″加入并取出″的方式加入水(23.5ml)直到上部溫度＞65℃。將混合物冷卻到室溫，用氨水溶液把pH值調(diào)節(jié)到8-8.5。在室溫下攪拌過夜之后，通過過濾分離產(chǎn)物，用水(3×10ml)洗滌，然后在真空箱中干燥，得到標(biāo)題化合物，類白色/淺棕色固體(1.98g)。
質(zhì)譜m/z 467(M+1)+1HNMR(d6-DMSO，400MHz)δ1.72(m，4H)，1.98(m，4H)，3.15(m，2H)，3.35(m，2H)，3.46(m，2H)，3.65(m，2H)，4.67(m，1H)，7.17(d，2H)，7.65(d，2H)，8.87(brs，1H)，10.58(brs，1H)用類似的方法制備實(shí)施例24-[4-(3-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺酰基甲基]四氫吡喃-4-羧酸羥基酰胺以實(shí)施例1的方式從中間體7(0.65克)制備得到標(biāo)題化合物，淡棕色固體(450mg)。
TLC Rf0.44(7％的甲醇/二氯甲烷)質(zhì)譜m/z 465(M-1)-
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物及其鹽、溶劑化物或者水合物 其中R1和R2可以相同或不同，各自為氫原子或CF3，CF2H或CFH2基團(tuán)，條件是當(dāng)R1或R2中的一個(gè)是氫原子時(shí)，另一個(gè)是CF3，CF2H或CFH2基團(tuán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中其中R1是氫原子，R2是CF3，CF2H或者CFH2基團(tuán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2是氫原子，R1是CF3，CF2H或者CFH2基團(tuán)。
4.一種化合物，其是4-[4-(4-三氟甲基苯氧基)哌啶-1-磺?；谆鵠四氫吡喃-4-羧酸羥基酰胺；及其鹽、溶劑化物或者水合物。
5.包含權(quán)利要求1-4的化合物和藥學(xué)上可接受的稀釋劑或者載體的藥物組合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4的化合物，用于治療癌癥，發(fā)炎，或者自身免疫性、感染性或者眼睛疾病。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4的化合物，用于治療移植物抗宿主反應(yīng)，干癬，異位性皮炎，鼻炎，濕疹，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，固體器官移植和囊性纖維化。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-4的化合物，用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、多發(fā)性硬化、牙周炎、骨吸收、細(xì)菌感染、大皰性表皮松解、腫瘤生長、血管生成、眼科疾病、視網(wǎng)膜病、哮喘、氣腫、支氣管炎和慢性阻塞性肺病(COPD)。
全文摘要
式(I)的化合物及其鹽、溶劑化物或者水合物其中，R
文檔編號A61P37/08GK1568320SQ02820022
公開日2005年1月19日 申請日期2002年8月7日 優(yōu)先權(quán)日2001年8月9日
發(fā)明者H·J·戴克, R·J·瓦特森 申請人:細(xì)胞技術(shù)研究及開發(fā)有限公司