專利名稱：用于生物活性物質(zhì)持續(xù)輸送的具有凝膠化性能的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包括疏水性有機溶劑、“有機凝膠化”物質(zhì)和生物活性物質(zhì)的熱敏感化學(xué)組合物，為了生物活性物質(zhì)的持續(xù)輸送，希望將所述化合物給予活生物體。
一旦所述組合物與含水介質(zhì)，且特別是與一種生理溶液接觸放置時，該組合物具備自發(fā)或通過冷卻形成有機凝膠的能力。所述形成的有機凝膠通過身體內(nèi)的擴散和/或糜爛和/或逐漸生物降解，可以用作生物活性物質(zhì)持續(xù)釋放的載體。
本發(fā)明也覆蓋在治療領(lǐng)域中，和更特別地是在生物活性物質(zhì)持續(xù)輸送領(lǐng)域中組成此組合物的用途。
表述“熱敏感組合物”表示作為溫度的函數(shù)，能夠從液態(tài)變到凝膠態(tài)的任何組合物，術(shù)語“有機凝膠”表示由有機溶劑組成液相的任何凝膠。
此外，表述“生物活性物質(zhì)”表示具有對活生物體或其機能起防止、治愈、減輕或改進該有機體狀況作用的物質(zhì)。
表述“疏水性有機液體”表示其分子或分子的一部分具有對水分子一定程度的排斥力的有機溶劑或有機溶劑混合物。表述“親水性溶劑”表示其分子與水分子之間建立相互吸引作用的溶劑。
由于凝膠特殊物理結(jié)構(gòu)賦予它們的性質(zhì)，凝膠長時間以來用于工業(yè)領(lǐng)域。
具體地，由于凝膠由固態(tài)成分和液態(tài)成分兩者組成，所以凝膠處于物質(zhì)的中間狀態(tài)。固態(tài)成分形成三維結(jié)構(gòu)或基體，成為相互連接分子的網(wǎng)絡(luò)，此網(wǎng)絡(luò)使通過液態(tài)形式存在的組分固定。
凝膠可以歸為連接固態(tài)分子的一類鍵型的功能，或歸為由其組成液相的有機或含水溶劑類型的功能。
“水凝膠”是其液相是水相的凝膠，以此區(qū)別于其液相是有機相的“有機凝膠”。
其基體由通過共價鍵連接在一起的分子組成的凝膠一旦形成，一般處于穩(wěn)定和不可逆轉(zhuǎn)的狀態(tài)。相反，其固態(tài)基體由低能量鍵(如氫鍵，或者尤其是范德華鍵)獲得的凝膠一般是可逆轉(zhuǎn)凝膠，即凝膠可以作為周圍條件(pH、溫度、離子強度等)的函數(shù)，從凝膠態(tài)變到液態(tài)。
在熱敏感凝膠中，觀察到狀態(tài)變化的溫度稱為轉(zhuǎn)變溫度。在特定的顯示滯后狀態(tài)的體系中，凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度不同于液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度。
因此，由于其具備保持生物活性分子的能力，凝膠特別用于制藥工業(yè)，尤其是在活性物質(zhì)的經(jīng)皮膚給予的情況中。
此保持性性質(zhì)可以另外研發(fā)用于凝膠作為藥品持續(xù)輸送的載體。
因此，專利US3932624描述了水凝膠希望用于肌丙抗增壓素(saralasine)延遲輸送的用途。在所述專利中，凝膠的制備是以明膠為基礎(chǔ)的，該明膠通過在含有生物活性物質(zhì)的生理鹽水溶液中稀釋，使其飽和以此形成可以通過皮下手術(shù)植入體內(nèi)的凝膠化結(jié)構(gòu)。植入后的凝膠通過逐漸糜爛逐漸釋放所述凝膠包含的活性物質(zhì)。
然而，這一類凝膠的使用需要一種預(yù)先形成凝膠的原位手術(shù)植入。因此此操作既昂貴，而且對患者又有限制。
為克服所說缺陷，原位形成的水凝膠一直在研發(fā)中。
因此，近來，專利申請US No.20010007673描述了體內(nèi)形成的，希望用于生物活性分子，特別是蛋白質(zhì)的延遲輸送的水凝膠的使用?；诎ㄔ逅猁}的親水性聚合物、多價金屬離子和所需活性物質(zhì)的組合物以液體形式注射到體內(nèi)，一旦注入身體，液體形式變成凝膠形式。此外，由于凝膠形式的組合物的觸變本質(zhì)，組合物可能通過凝膠的形式注射，例如通過施加某些量的壓力使用注射器，其后組合物在身體內(nèi)返回到凝膠形式。此水凝膠使得進入體液的生物活性物質(zhì)的延遲擴散。
另外，專利US5575815描述了例如動脈內(nèi)或靜脈內(nèi)的腔內(nèi)植入的含水液體組合物，該組合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)變或變粘成為水凝膠。由于活性物質(zhì)的加入，此凝膠的使用特別地設(shè)想用于血管成形術(shù)。使用的水凝膠由聚醚聚合物組成。
專利US6344488描述了凝膠的受溫度控制和pH依賴性的形成，該凝膠包括殼聚糖/有機磷酸鹽的含水混合物。向殼聚糖水溶液中加入多元醇的二元單磷酸鹽或糖，導(dǎo)致受溫度控制和pH依賴性的凝膠化。在凝膠化之前將藥品引入所述凝膠。殼聚糖/有機磷酸鹽溶液在低溫下以溶液形式貯存，隨著溫度的增加，在皮下、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)注射之后形成原位凝膠。這樣形成的水凝膠可用于活性成分的釋放。
專利申請WO97/15287描述了用于生物降解聚合物基體中，藥品以液體形式向溫血動物的胃腸外(肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下)給藥的系統(tǒng)和方法，其為了藥品的控制性釋放，導(dǎo)致了凝膠沉積的形成。這種液體是能夠溶解或分散以有效量包含在生物降解共聚物單元基體中的藥品的溶液。該共聚物具有低于其給予的動物體溫的反向膠凝化溫度，并且是由疏水性聚合物單元和親水性聚合物單元組成。
其它熱凝膠化水溶液在文獻中有所描述。這其中有泊洛沙姆(poloxamer)溶液(Johnston，T.P.等人，在菊糖/泊洛沙姆凝膠基體的肌內(nèi)給藥之后的菊糖處置，J.Parent.Sci.Technol.，vol.43，279，1989；Johnston，T.P.等人，泊洛沙姆407凝膠基體的白細胞介素-2在鼠中腹膜內(nèi)注射之后的持續(xù)輸送，Pharm.Res.9，425，1992；Pec等人，在鼠中腹膜內(nèi)注射之后泊洛沙姆407中配制的脲酶的生物活性，J.Pharm.Sci.，vol.81，626，1992)和木葡聚糖溶液(Miyazaki，S.等人，作為直腸藥物輸送載體的熱可逆木葡聚糖凝膠，J.Controlled Release，vol.56，75，1998)。
然而，這些水凝膠的主要缺點在于在長時間親水性生物活性物質(zhì)的輸送方面的效率差。這主要是因為向它們提供高水平孔隙率的高比例的水使凝膠中存在的親水性生物活性物質(zhì)相對快速地在循環(huán)中被消除。小尺寸親水性強的分子，例如某些親水性藥品或某些親水性肽的擴散現(xiàn)象尤為明顯，這些物質(zhì)持續(xù)釋放的效率因此降低。
本發(fā)明的目的是提供新穎的藥物組合物，該組合物具有形成允許活性物質(zhì)在長時間內(nèi)釋放的有機凝膠的能力。
此外，本發(fā)明的目的也是提供這樣的延遲釋放載體，該載體既是生物相容的也是生物降解的，也允許其以液體形式給藥，即容易、快速和便宜地給藥。
有機凝膠已經(jīng)用作活性成分延遲釋放的載體。
本發(fā)明的目的是在以液體形式施加之后，體內(nèi)產(chǎn)生的疏水性有機凝膠。這樣的凝膠在現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)有所描述。
專利申請No.WO94/08623公開了包含卵磷脂和用于疏水性卵磷脂的溶劑的疏水性有機凝膠，該有機凝膠用于蛋白質(zhì)的延遲釋放。該凝膠是在注射期間，使用于肌內(nèi)或皮下注射的溶液通過從間質(zhì)介質(zhì)中吸收水分而形成的。
相反，本發(fā)明的疏水性有機凝膠不是因為吸收周圍的水分形成的。
本發(fā)明涉及具有凝膠化性能的熱敏感液態(tài)組合物，該組合物包括疏水性有機液體、“有機凝膠化”物質(zhì)和生物活性物質(zhì)。
有機凝膠化物質(zhì)由能夠通過低能量鍵結(jié)合在一起的分子組成，在一定程度上這些分子的自組合體具備有利地?zé)峥赡嫘浴?br> 根據(jù)本發(fā)明的液體形式的熱敏感組合物包含疏水性有機液體、物質(zhì)分子具備可以通過低能量鍵結(jié)合的能力的有機凝膠化物質(zhì)、和生物活性物質(zhì)。當(dāng)組合物進入動物身體，特別是人類的給藥期間，特別地在注射入身體期間，例如使用常規(guī)注射器，通過血管外胃腸外或皮下肌內(nèi)途徑，與生理溶液接觸時變成有機凝膠形式。
表述“血管外胃腸外途徑”表示除消化途徑和血管途徑(靜脈、動脈和血管)以外滲透入身體的任何途徑。
本發(fā)明的組合物也可以在眼內(nèi)、腔內(nèi)或在其施加之前修復(fù)、陰道內(nèi)的開放性創(chuàng)傷或在手術(shù)期間給予。
許多文獻描述了包含卵磷脂基有機凝膠的局部使用的組合物(參見，例如US6306383)。卵磷脂是低分子量磷脂的混合物。卵磷脂是兩性的，既溶于醇，也能與水形成乳液。卵磷脂有機凝膠已經(jīng)被描述為用于促進低分子量分子滲透的載體(H.Willimann等人，“Organogel lecithinecomme matrice pour le transport transdermique des medicaments[作為藥品經(jīng)皮輸送為基體的卵磷脂有機凝膠]”，J.Pharm.Sci.vol.81，1992)。卵磷脂有機凝膠通過向在有機溶劑中的卵磷脂溶液，例如棕櫚酸異丙酯或環(huán)辛烷中加入少量水獲得。在這些文獻中，所需凝膠是通過加水形成的，以至于有機凝膠在其施加到皮膚之前已經(jīng)形成。
相反，本發(fā)明的有機凝膠在給予到活生物體時是液體形式，一旦與生理溶液接觸，就成為凝膠形式。此外，卵磷脂并沒有構(gòu)成在本發(fā)明的情況中定義的有機凝膠化物質(zhì)表述“生理溶液”表示在動物身體中循環(huán)的任何流體，例如，淋巴流體、淚流體、腦脊髓流體、羊膜流體、胃腸外流體和血液。
對于保持生物活性分子，尤其是重量小于100000道爾頓的有親水性本質(zhì)的分子，根據(jù)本發(fā)明的組合物形成的有機凝膠可以使其具備能夠被設(shè)想在多于3天的時間內(nèi)向身體內(nèi)釋放的能力。
最后，從根據(jù)本發(fā)明的組合物在身體內(nèi)形成的所述有機凝膠具有通過對被植入身體沒有毒性的逐漸糜爛和/或生物降解而緩慢除去的能力。
本發(fā)明的原位凝膠化的性質(zhì)是通過使用構(gòu)成該有機凝膠的有機相的疏水性有機液體，和通過構(gòu)成該有機凝膠的固體基體的有機凝膠化物質(zhì)得到的。
構(gòu)成此有機凝膠化物質(zhì)的分子特別為如下類型氨基酸的脂肪酸酯衍生物，其具有自發(fā)地自組合形成固定所述疏水性有機液體的基體的能力。此分子的自組合體通過由有機凝膠化分子帶有的醇基團(-OH)、酸基團(-COOH)和胺基團(-NH或NH2)類型之間建立氫鍵完成的。
如必須，通過將組合物的施加部位冷卻或由加入到本發(fā)明組合物中的親水性有機溶劑的擴散，誘導(dǎo)液態(tài)組合物的凝膠化。
申請人選擇能夠與有機凝膠化物質(zhì)的分子產(chǎn)生弱鍵(如氫橋)，并且能夠擴散到含水介質(zhì)中生產(chǎn)出根據(jù)本發(fā)明的組合物的親水性有機溶劑。
因此，引入到形成本發(fā)明組合物的混合物中的親水性有機溶劑與有機凝膠化物質(zhì)的分子發(fā)生競爭，形成防止該分子自組合成密集和統(tǒng)一網(wǎng)絡(luò)的所述分子弱鍵(如氫橋)。只要該親水性有機溶劑的分子與有機凝膠化分子保持結(jié)合，根據(jù)本發(fā)明的組合物就保持液態(tài)形式。
所述親水性有機溶劑一擴散到周圍介質(zhì)，弱鍵可逆性就根據(jù)本發(fā)明的使用有利地使得有機凝膠化基體再組合。
因此，例如，所述親水性有機溶劑一與水溶液，更特別地是與如間質(zhì)流體、淋巴或腹膜內(nèi)流體的生理溶液接觸時，由于它的親水性，本發(fā)明組合物中存在的親水性有機溶劑就擴散到所述的周圍流體中。
該親水性有機溶劑的擴散使得該有機凝膠化物質(zhì)的分子自組合。通過產(chǎn)生結(jié)構(gòu)網(wǎng)絡(luò)，此自組合使得引起該組合物從液態(tài)變到凝膠態(tài)的該疏水性有機液體得到保留。
本發(fā)明因此提供用于自發(fā)的原位凝膠化和容易給藥的簡單體系。
另外，本發(fā)明基于由申請人觀察到的對本發(fā)明的以有機凝膠化物質(zhì)為基礎(chǔ)的有機凝膠的滯后性能。術(shù)語“滯后”表示特別對于可凝膠的組合物觀察到的在凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度和液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度之間存在的差異的物理現(xiàn)象。具體地，可以設(shè)想具有這些性能的液態(tài)的，并且因此在室溫下(或在室溫范圍內(nèi)的溫度下)容易注射的本發(fā)明的組合物。此外，也可以制備具有這些性能的根據(jù)本發(fā)明的有機凝膠，其一旦在體內(nèi)形成，在被考慮的有機體的體溫下保持凝膠形式。之所以如此的原因在于這樣由擴散或由簡單冷卻形成的有機凝膠具有高于注射或施加部位溫度的凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度。因此，它在該有機體中是完全穩(wěn)定的。
最后，本發(fā)明具有如下優(yōu)點提供藥品或其它活性物質(zhì)持續(xù)釋放的載體。具體地，在有機體和根據(jù)本發(fā)明形成的有機凝膠中包括真正的組織基體結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)對周圍的含水介質(zhì)具有較少親合力，并且因此通過該有機凝膠的逐漸擴散、糜爛或生物降解允許活性物質(zhì)的緩慢釋放。
因此本發(fā)明提供在至少等于1天的時間內(nèi)進入身體持續(xù)釋放的，如生物活性物的物質(zhì)和更特別地重量小于100 000道爾頓的疏水性本質(zhì)分子的簡單、有效和容易給予的載體。
此外，根據(jù)本發(fā)明的組合物具有在以下所述的制造方面和在包裝、給藥兩個方面特別便宜的優(yōu)點。
根據(jù)本發(fā)明的有機凝膠化物質(zhì)是其分子具有通過低能量鍵，并且尤其是通過氫鍵結(jié)合形成熱敏感基體的能力的物質(zhì)。例如，這些分子尤其是含有酸(-COOH)或醇(-OH)或胺(-NH或NH2)端基的低分子量的分子。
另外，這些物質(zhì)優(yōu)先地為生物相容的且在所述體內(nèi)降解期間不產(chǎn)生對身體具有毒性的或有害的代謝物。
優(yōu)選使用不僅僅顯示良好的生物相容性和令人滿意的有機凝膠力，而且主要向凝膠化體系提供滯后性能的氨基酸的衍生物或氨基酸如丙氨酸的脂肪酸酯衍生物。這些性能從所述組合物在一定溫度下從液態(tài)到凝膠態(tài)的改變反映出來，而且這個溫度與該組合物從凝膠形式到液體形式的改變期間觀察到的溫度是不同的。申請人有利地注意到在這兩個轉(zhuǎn)變溫度之間的差異變化為如下參數(shù)的函數(shù)使用的疏水性有機液體的類型，和使用的有機膠凝化物質(zhì)的數(shù)量。
因此，申請人制備出可以通過對其轉(zhuǎn)變溫度和這些溫度之間的差異的簡單改進而對這兩種參數(shù)進行調(diào)節(jié)的根據(jù)本發(fā)明的組合物。反映這些變化的結(jié)果見

圖1-7。
在給予有機凝膠而沒有親水性有機溶劑的情況下，優(yōu)選地選擇這兩個轉(zhuǎn)變溫度之間差異使得液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度小于被考慮的活生物體的體溫，并且凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度高于上述溫度。
因此，丙氨酸衍生物如N-月桂?；?L-丙氨酸(LA)或丙氨酸酯衍生物如N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯(LAM)、N-月桂?；?L-丙氨酸乙酯(LAE)、N-硬脂?；?L-丙氨酸甲酯(LAM)或N-硬脂?；?L-丙氨酸乙酯(SAE)優(yōu)選用作根據(jù)本發(fā)明的有機凝膠化物質(zhì)。
有機凝膠化物質(zhì)的數(shù)量取決于選擇用于本發(fā)明有機凝膠的疏水性有機液體的類型。
然而，此物質(zhì)有利地選擇在0.5wt％和50wt％之間，相對于該組合物的總重量的比例。
申請人發(fā)現(xiàn)N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯作為有機凝膠化物質(zhì)的使用，使得所述組合物在通過簡單冷卻達到液體/凝膠轉(zhuǎn)變閾值以下的情況下變成凝膠態(tài)，并且在大于液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度的溫度下，特別地是在活生物體溫度下保持凝膠態(tài)。
具體地，申請人注意到通過冷卻形成的所述有機凝膠在液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度和凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度之間的溫度范圍內(nèi)是穩(wěn)定的。
此觀察的結(jié)合引導(dǎo)申請人研發(fā)具有凝膠化性能的熱敏感組合物，該組合物具有由簡單局部冷卻變到凝膠形式并在體溫下保持凝膠態(tài)的能力。在本發(fā)明的此特定情況下，由于該組合物是通過冷卻而不是擴散該親水性有機溶劑而進行凝膠化，所以親水性有機溶劑的數(shù)量可以特別小，或甚至為零。
由于可以免除親水性有機溶劑的存在，并且因此可以進一步簡化根據(jù)本發(fā)明組合物的制備方法和也可以降低其成本價格，此實施方案是特別有利的。
因此，根據(jù)一個特定的實施方案，根據(jù)本發(fā)明的熱敏感組合物包含一定比例的N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯，使得該組合物在與其進入身體的注射部位接觸時，足以能夠通過簡單冷卻從液態(tài)變到有機凝膠態(tài)。
這樣的冷卻必須足以導(dǎo)致以液體形式施加的該組合物變到其凝膠化形式。可以通過由冷物體如冰包的外部施加或冷敷布或注射部位周圍的任何其它冷卻措施進行的冷卻必須使得局部冷卻該組合物，使其溫度小于其液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度。
因此根據(jù)本發(fā)明的組合物優(yōu)選在施加部位的溫度下為液體形式，其具有高于體溫的凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度和低于被考慮的有機體溫度或植入凝膠的區(qū)域溫度的液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度。具體地，皮膚溫度可以比有機體的通用溫度低幾度。
在一個優(yōu)選的實施方案中，該組合物中N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯的含量足以使液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度低于體溫(一般37℃)和使凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度高于體溫(一般37℃)。
甚至更優(yōu)選地是，根據(jù)本發(fā)明的組合物必須包括小于30℃的液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度和大于+35℃的凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度。
因此，優(yōu)選根據(jù)本發(fā)明的組合物是其液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度和凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度之間的范圍有利地是至少20℃，液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度優(yōu)選地是+5℃～+36℃的組合物。
根據(jù)本發(fā)明的組合物的疏水性有機液體是疏水性有機溶劑或不同疏水性有機溶劑的混合物。
不同疏水性有機溶劑的混合物具有改進凝膠化情況或促進某些生物活性物質(zhì)的溶解的優(yōu)點。
可用于制備本發(fā)明組合物的疏水性有機溶劑屬于在足夠數(shù)量的上述“有機凝膠化”物質(zhì)存在下能夠產(chǎn)生有機凝膠類型結(jié)構(gòu)的與水不互溶的有機溶劑。
這些溶劑具有優(yōu)選地生物相容性，即，被基質(zhì)有機體接納，并且引起較少或沒有例如炎性或變應(yīng)性類型的免疫反應(yīng)。
最后，值得注意的是優(yōu)選地使用在室溫下為液體，能夠使制造和給予本發(fā)明組合物的方法簡化的疏水性有機溶劑。
優(yōu)選地使用可以緩慢降解，即不被在注射部位的酶，特別地是脂酶快速代謝的有機溶劑。
因此，根據(jù)本發(fā)明的疏水性有機溶劑屬于植物油、半合成油和某些脂肪酸酯，特別是甘油(特別是甘油二酯和甘油三酯)。
例如，因此可以設(shè)想使用生物相容性植物油如大豆油、玉米油、棉籽油、花生油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油、杏仁油或紅花油。
植物油，例如具有合適凝膠化行為、緩慢生物降解性和優(yōu)異生物相容性的大豆油，優(yōu)選地用作疏水性有機溶劑。
在可以用作根據(jù)本發(fā)明的疏水性有機溶劑的脂肪酸酯中，特別可以提及的例子包括油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。
更優(yōu)選地使用甘油的脂肪酸酯，特別地甘油三酯。甚至更優(yōu)選地使用包括兩種8-10個碳原子的脂肪酸的中等鏈(小于18個碳原子)的，如Labrafac CC的甘油三酯。
在可以用于根據(jù)本發(fā)明的疏水性有機溶劑的合成或半合成溶劑中，特別可以提及的是角鯊烯、苯甲酸芐酯、芐基氯和苯甲酸芐酯/芐醇混合物或CrodamolGTCC-PN。
也可以使合成疏水性有機油和溶劑結(jié)合。
根據(jù)本發(fā)明，表述“親水性有機溶劑”表示對含水介質(zhì)具有高親合力，即是與水互溶的溶劑。
可用于本發(fā)明的親水性有機溶劑的類型是能夠有利地用作有機凝膠去穩(wěn)定劑，即能夠與有機凝膠化分子產(chǎn)生弱鍵的溶劑。另外，這樣的溶劑有利地具備生物相容性，即被身體接納，使得它的擴散引起較少或沒有例如炎性或變應(yīng)性類型的免疫反應(yīng)。因此批準用于胃腸外使用的溶劑優(yōu)選地用于本發(fā)明的實施。
根據(jù)本發(fā)明的該親水性有機溶劑的使用比例有利地是小于該組合物的60wt％，更優(yōu)選地是小于20％。
可以提及的親水性溶劑包括例如醇的溶劑，例如，乙醇、甘油、芐醇、丙二醇、低分子量的聚(乙)二醇、苯醇或氯丁醇、及其混合物。此外，可以設(shè)想其它水互溶性溶劑，如二甲亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基乙酰胺、糠醛、環(huán)亞甲基甘油醚、亞異丙基甘油、乳酸乙酯、乙酸或乳酸、或其混合物。
這些例子沒有限制性，并且完全可以設(shè)想使用具有凝膠去穩(wěn)定性能，即與本發(fā)明的有機凝膠化物質(zhì)形成弱鍵的能力的其他親水性有機化合物實施本發(fā)明。
可以從本發(fā)明的有機凝膠釋放到身體的生物活性物質(zhì)有利地是由于用于持續(xù)釋放而難以包裝的物質(zhì)，如親水性或親水性本質(zhì)強的低分子量分子。，該生物活性物質(zhì)的使用比例有利地為本發(fā)明組合物的0.5wt％-70wt％。因此，申請人測試預(yù)先形成的有機凝膠中的通過熒光分子FITC(異硫氰酸熒光素)標記的葡聚糖分子的釋度。
通過測定熒光20天內(nèi)體外監(jiān)測葡聚糖的釋放情況，如圖8所示。熒光通過磷酸鹽緩沖的鹽水水溶液的規(guī)則取樣測量的。
因此，對于特別具有治療興趣的如α-干擾素、β-干擾素、生長抑素、降鈣素、肝素、白細胞介素或紅細胞生成素的蛋白質(zhì)，肽，氨基酸或維生素，釋放周期都設(shè)計在3天以上。
這些例子決沒有限制性，并且完全可以設(shè)想用于來自本發(fā)明有機凝膠的持續(xù)釋放的其他類型分子，特別是其它蛋白質(zhì)。
因此可以設(shè)想通過本發(fā)明的有機凝膠進入身體來釋放分子，如某些激素，特別地是某些肽激素如人生長激素、促甲狀腺激素和醋酸亮丙瑞林。
因此，可以設(shè)想將本發(fā)明用于核酸、寡核苷酸或特別地是核酸衍生物進入身體的持續(xù)釋放。
相似地，完全可以設(shè)想以持續(xù)方式溶解并隨后釋放疏水性生物活性物質(zhì)，即對于有機凝膠具有強親合力和對于周圍含水介質(zhì)具有弱親合力的物質(zhì)為目的而實施本發(fā)明。
本發(fā)明可因此用于許多需要進入身體持續(xù)釋放的治療或醫(yī)療興趣的物質(zhì)。
通過例子，根據(jù)本發(fā)明的組合物可以采用如下方式制備。
擴散凝膠化體系的情況首先自發(fā)地或通過在親水性有機溶劑中加熱和/或攪拌來溶解有機凝膠劑。
其后，將活性物質(zhì)和疏水性有機溶劑引入此混合物，可因此呈現(xiàn)兩種情況a)可能活性物質(zhì)能夠溶于有機相，因此形成在此情況下，將活性物質(zhì)溶于形成的有機相。自發(fā)地或通過加熱，采用或不采用攪拌進行溶解。
在此情況下，也可以設(shè)想將該活性物質(zhì)直接溶于疏水性有機溶劑。
b)也可能活性物質(zhì)少量地溶于或不溶于有機相在此情況下，首先活性物質(zhì)可以通過在由親水性有機溶劑和有機凝膠化物質(zhì)形成的有機相中分散而變“潮濕”。在攪拌之后混合物中的活性物質(zhì)懸浮液形成。然后可以將此懸浮液加入到本發(fā)明組合物的其它組分中。
也可以在微量的水中溶解活性物質(zhì)。將該活性物質(zhì)水溶液加入到由親水性有機溶劑和有機凝膠化物質(zhì)形成的有機相中。然后在有機相中由劇烈攪拌使有機相乳化。攪拌越劇烈，有機懸浮液中形成的含水粒子的尺寸越小，且乳液越穩(wěn)定。然后此乳液可用于本發(fā)明組合物的制備。
然而，應(yīng)當(dāng)注意到使用乳液的該技術(shù)具有如下優(yōu)點使活性物質(zhì)的絡(luò)合分子保持含水微環(huán)境中，當(dāng)經(jīng)受環(huán)境的變化時，其極大地限制分子可易于發(fā)生的破裂傾向，特別地是物質(zhì)變性的可能性。
然后將疏水性有機液體加入到先前獲得的混合物中，任選地采用攪拌和/或適當(dāng)加熱直到獲得均勻的混合物。
將根據(jù)本發(fā)明的此均勻混合物使用皮下注射的常規(guī)注射器通過血管外胃腸外途徑注入活生物體中。在由所選制劑而定的延滯期之后，在注射部位觀察到的形成的硬化區(qū)域是本發(fā)明有機凝膠體內(nèi)形成的證明。
如果不手術(shù)除去，由其構(gòu)成組分的尺寸和本質(zhì)決定的有機凝膠會在較長或較短周期內(nèi)在身體內(nèi)逐漸生物降解和/或糜爛。此逐漸生物降解會導(dǎo)致包含在根據(jù)本發(fā)明的有機凝膠中的活性物質(zhì)的釋放。
優(yōu)選地制備其生物降解在長于3天的時間內(nèi)進行的此類有機凝膠。
冷卻凝膠化體系的情況在此情況下，首先將具有滯后性能的有機凝膠化物質(zhì)與疏水性有機液體混合。
其后，將活性物質(zhì)引入此混合物中。如果活性物質(zhì)具有有機溶解性，將其直接或采用輕微攪拌的方式在混合物中溶解。當(dāng)活性物質(zhì)僅具有少量有機溶解性或不具有有機溶解性，如前所述那樣將該物質(zhì)分散在有機相中或如前所述，在形成的有機相中制備活性物質(zhì)預(yù)溶于水的穩(wěn)定乳液。
這樣形成的組合物是穩(wěn)定的且在室溫下優(yōu)選為液體。通過例如血管外胃腸外途徑注射該組合物。
在注射之后，立刻使冷物體(或任何其它冷卻系統(tǒng))與注射部位保持接觸足夠長的時間，以允許根據(jù)本發(fā)明的組合物的原位凝膠化。
當(dāng)凝膠化完成時，除去冷卻系統(tǒng)。然后注射部位返回到體溫，根據(jù)本發(fā)明的有機凝膠在所述溫度下保持穩(wěn)定。
例如，根據(jù)本發(fā)明具有凝膠化性能的熱敏感組合物可用于生物活性物質(zhì)在長時間內(nèi)，即在至少一天至多一周，一般大于3天的時間內(nèi)的延遲釋放。此組合物可因此用作任何類型物質(zhì)，特別地具有治療或醫(yī)療興趣的物質(zhì)延遲釋放的載體。
因此可以設(shè)想使用根據(jù)本發(fā)明的熱敏感組合物用于藥品的延遲釋放，該藥品需要在血液中保持恒定水平。因此本發(fā)明證明特別有利于通常一天給藥幾次和希望在身體中保持有效治療水平的藥品。
因此可設(shè)想使用本發(fā)明用于如嗎啡的治療物質(zhì)或用作心血管系統(tǒng)或神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)劑的藥品。
相似地，可以設(shè)想使用根據(jù)本發(fā)明的組合物可以達到克服身體中的某些缺乏，特別地維生素或激素缺乏的目的。因此，本發(fā)明可用作需要每日攝取而目前仍然在給予時帶來疼痛和限制的注射給藥的激素持續(xù)釋放的載體?？紤]到其容易給藥，無害性和低成本，由有機凝膠制成的釋放載體會消除患者的這些約束。
此組合物也可用于制造希望通過血管外胃腸外途徑和特別地皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)注入身體，從眼內(nèi)、血管內(nèi)或陰道內(nèi)注射到開放性創(chuàng)傷或在手術(shù)期間注射的藥品。
另外，此化合物可以制造希望用作生物活性物質(zhì)進入身體的持續(xù)釋放的載體的藥品。
附1是在苯甲酸芐酯(圓)或苯甲酸芐酯/5％芐醇(三角形)存在下，N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯(LAM)的液體-凝膠轉(zhuǎn)變溫度(實線)和凝膠-液體轉(zhuǎn)變溫度(虛線)的圖。
圖2是在大豆油(菱形)或LabrafacCC(正方形)存在下，LAM的液體-凝膠轉(zhuǎn)變溫度(實線)和凝膠-液體轉(zhuǎn)變溫度(虛線)的圖。
圖3是在大豆油存在下，N-月桂酰基-L-丙氨酸乙酯(LAE)(三角形)的液體-凝膠轉(zhuǎn)變溫度(實線)和凝膠-液體轉(zhuǎn)變溫度(虛線)的圖。
圖4是在油酸乙酯存在下，LAM(正方形)和N-硬脂?；?L-丙氨酸甲酯(SAM)(菱形)的液體-凝膠轉(zhuǎn)變溫度(實線)和凝膠-液體轉(zhuǎn)變溫度(虛線)的圖。
圖5是在玉米油中LAM(正方形)，LAE(三角形)，SAM(圓)，N-硬脂?；?L-丙氨酸乙酯(SAE)(十字)和N-月桂酰基-L-丙氨酸(LA)(菱形)的凝膠-液體轉(zhuǎn)變溫度的圖。
圖6和7是分別在西番蓮油和CrodamolGTCC-PN(甘油三酯)中LAM(正方形)，LAE(三角形)，SAM(圓)，SAE(十字)和LA(菱形)的凝膠-液體轉(zhuǎn)變溫度的圖。
圖8是在37℃PBS中，從由大豆油和30％LAM組成的凝膠的FITC-葡聚糖(分子量＝9500)在20天內(nèi)體外釋放情況的監(jiān)測。
圖9是根據(jù)實施例5的植入物在注射部位的照片。
實施例1從根據(jù)本發(fā)明的組合物的有機凝膠的體內(nèi)形成此實施例試圖尋求根據(jù)本發(fā)明的組合物確實能夠體內(nèi)凝膠化。用鼠進行測試。
大豆油用作根據(jù)本發(fā)明的疏水性有機溶劑，乙醇用作根據(jù)本發(fā)明的親水性有機溶劑。
選擇的有機凝膠化物質(zhì)是LAM(N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯)。
使用的比例總結(jié)于下表
首先在乙醇中溶解有機凝膠劑。然后，在混合物中加入大豆油。攪拌和加熱由此獲得的混合物直到完全均勻。此混合物在室溫下保持穩(wěn)定和液體狀態(tài)。
然后皮下注射由此獲得的組合物。在背側(cè)區(qū)域中使用皮下注射的常規(guī)注射器進行注射。在2小時之后，將動物殺死，并從注射部位提取凝膠展示有機凝膠的體內(nèi)形成。實施例2從根據(jù)本發(fā)明的組合物的有機凝膠的體內(nèi)形成大豆油用作根據(jù)本發(fā)明的疏水性有機溶劑，乙醇用作根據(jù)本發(fā)明的親水性有機溶劑。
選擇的有機凝膠化物質(zhì)是LAM(N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯)。
使用的比例總結(jié)于下表
注射過程與實施例1的相同，在注射2小時30分鐘之后出現(xiàn)有機凝膠。
實施例3包含F(xiàn)ITC-葡聚糖的本發(fā)明組合物的制造此組合物允許包含在預(yù)形成有機凝膠中的活性物質(zhì)逐漸釋放的體外測量。
FITC-葡聚糖用作活性成分，其允許通過測定結(jié)合的熒光來測量由本發(fā)明的有機凝膠釋放的葡聚糖數(shù)量。
參見圖8。
每個點表示平均值+/-sd(n＝3)。曝露的凝膠面積是0.64mm2。
首先在大豆油中熱溶LAM。然后，在使用研缽研磨它之后，在形成的有機相中熱分散FITC-葡聚糖，直到獲得均勻的液體組合物。
然后此液體混合物通過在測試管中冷卻引入凝膠化。向凝膠中加入磷酸鹽緩沖的鹽水的鹽水溶液。
然后在20天的周期內(nèi)取得圍繞本發(fā)明有機凝膠的液體的樣品?？梢詼y定由這些樣品發(fā)射的熒光并可因此確認FITC-葡聚糖向周圍介質(zhì)的持續(xù)釋放。在體內(nèi)和根據(jù)本發(fā)明給予凝膠的情況下，應(yīng)當(dāng)加入如乙醇類型的有機溶劑抑制注射之前的凝膠化過程。
此測定的結(jié)果總結(jié)于圖8。
實施例4根據(jù)本發(fā)明的有機凝膠滯后性能的體內(nèi)證明。沒有親水性溶劑的凝膠化實施例。
由如下組分制備有機凝膠化溶液
預(yù)先測定此有機凝膠的滯后性能，使得液體/凝膠轉(zhuǎn)變溫度小于30℃和凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度大于37℃。
首先通過加熱使有機凝膠化溶液達到液態(tài)，然后將冷卻到室溫的180μl體積該溶液皮下注入鼠體內(nèi)。一旦注射完成，在4℃下對注射部位施加壓布3分鐘，以降低其溫度并帶來凝膠化。
在2小時30分鐘之后，將注射過的動物殺死，進行植入物形式的目測觀察。然后將植入物從注射部位提取并稱重。
在此試驗中，植入物具有盤形形狀，直徑為約1cm和重量為130mg。
實施例5從由疏水性有機溶劑的混合物組成的基體的有機凝膠的體內(nèi)形成在此實施例中，需要檢查由疏水性有機溶劑的混合物組成的有機凝膠體內(nèi)有機凝膠劑凝膠化的能力。用鼠進行測試。
用于本發(fā)明的疏水性有機溶劑有作為親水性溶劑的大豆油、油酸乙酯和乙醇。
選擇的有機凝膠化物質(zhì)是LAM(N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯)。
選擇的生物活性物質(zhì)是醋酸亮丙瑞林。在第一步中制備0.67％w/v的醋酸亮丙瑞林水溶液。
使用的比例總結(jié)于下表
首先在大豆油和油酸乙酯的溫?zé)峄旌衔镏腥芙庥袡C凝膠劑。然后，在此混合物中加入乙醇。將由此獲得的混合物攪拌和加熱直到完全均化。此混合物在室溫下保持穩(wěn)定和液體狀態(tài)。將醋酸亮丙瑞林溶于蒸餾水和然后加入到液體混合物中。將此混合物攪拌之后，由超聲粉碎乳化兩分鐘。
然后將由此獲得的組合物進行皮下注射。使用皮下注射的常規(guī)注射器注射到鼠的背側(cè)區(qū)域。在2小時之后，將動物殺死，并從注射部位提取凝膠，證明由疏水性有機溶劑的混合物組成的有機凝膠的體內(nèi)形成。圖9顯示在注射部位，根據(jù)此實施例中描述的組合物獲得的植入物的形式。
實施例6包含在本發(fā)明的組合物中的含有生物活性物質(zhì)的乳液的形成尋求設(shè)計包含溶于水相的(分散相)如醋酸亮丙瑞林一樣的親水性生物活性物質(zhì)的油包水(W/O)穩(wěn)定乳液。
選擇的生物活性物質(zhì)是醋酸亮丙瑞林。以7.62％w/v的比例將它溶于水。
兩種表面活性劑，聚山梨酸酯20(Tween 20)和三油酸脫水山梨醇酯(Span 85)使乳液穩(wěn)定，可以設(shè)計調(diào)節(jié)其每種比例來作為乳液親水性/疏水性平衡的函數(shù)。
使用的比例總結(jié)于下表
制備10％w/v Span 85的大豆油溶液和10％w/v Tween 20的水溶液。然后結(jié)合各個相并將混合物攪拌和加熱直到完全均化。此混合物在室溫下保持穩(wěn)定和液體狀態(tài)，直接加入到油、有機凝膠劑和N，N-二甲基乙酰胺(DMAc)的混合物中(參見實施例7)。
實施例7使用包含乳液和乙醇以外的親水性有機溶劑的組合物的有機凝膠體內(nèi)形成在此實施例中，試圖檢查在室溫下乙醇以外的親水性有機溶劑抑制有機凝膠凝膠化的能力。
大豆油用作疏水性有機溶劑，N，N-二甲基乙酰胺(DMAc)用作親水性有機溶劑。
選擇的有機凝膠化物質(zhì)是LAM(N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯)。
使用的比例總結(jié)于下表
首先在溫狀大豆油中溶解有機凝膠劑。然后，在此混合物中加入DMAc。攪拌和加熱這樣獲得的混合物，然后加入乳液，攪拌混合物直到完全均化。此混合物保持穩(wěn)定，并且在室溫下為粘性的(相似于乳膏)且可以以此形式使用常規(guī)注射器皮下注射。注射此粘性制劑之后，凝膠形成。
權(quán)利要求書(按照條約第19條的修改)17.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其特征在于有機凝膠化物質(zhì)屬于丙氨酸酯衍生物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其特征在于所述有機凝膠化物質(zhì)是N-月桂?；?L-丙氨酸甲酯或N-月桂酰基-L-丙氨酸乙酯。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其特征在于所述有機凝膠化物質(zhì)是N-硬脂?；?L-丙氨酸甲酯或N-硬脂?；?L-丙氨酸乙酯。
20.從根據(jù)權(quán)利要求1-18任一所述的組合物獲得的有機凝膠，其特征在于其在施加溫度和所述組合物的凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度之間保持穩(wěn)定的凝膠化形式。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-20任一所述的組合物的應(yīng)用，用于希望通過血管外胃腸外途徑和特別地皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)注入身體，或希望眼內(nèi)或陰道內(nèi)給予到開放性創(chuàng)傷或在手術(shù)期間的藥品制造。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-20任一所述的組合物的應(yīng)用，用于希望用作生物活性物質(zhì)進入身體的持續(xù)釋放的載體的藥品制造。
23.一種制備權(quán)利要求1的組合物的方法，其特征在于將非必要地在水溶液中的生物活性物質(zhì)加入到由有機凝膠化物質(zhì)和疏水性有機溶劑組成的混合物中。
24.一種制備權(quán)利要求3的組合物的方法，其在于-在親水性有機溶劑中溶解有機凝膠化物質(zhì)，并隨后再引入生物活性和疏水性有機溶劑。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其特征在于當(dāng)生物活性物質(zhì)少量地溶于或不溶于有機相時，采用攪拌將所述物質(zhì)的水溶液分散進入由有機凝膠化物質(zhì)和親水性有機溶劑組成的有機相。
權(quán)利要求
1.一種液體形式的熱敏感組合物，包含-疏水性有機液體，-其分子具有通過低能量鍵結(jié)合在一起的能力的有機凝膠化物質(zhì)和-生物活性物質(zhì)，當(dāng)該組合物在對動物身體，特別地人類的給藥期間，與生理溶液接觸時，變成有機凝膠形式。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其特征在于通過冷卻該組合物的施加部位形成有機凝膠。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其特征在于包含能夠與有機凝膠化物質(zhì)產(chǎn)生弱鍵的親水性有機溶劑，并且通過親水性有機溶劑擴散進入含水介質(zhì)形成有機凝膠。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合物，其特征在于該有機凝膠具有在沒有親水性有機溶劑而給予有機凝膠時，低于施加部位溫度的從液態(tài)到凝膠態(tài)的轉(zhuǎn)變溫度，和具有高于體溫的從凝膠態(tài)到液態(tài)的轉(zhuǎn)變溫度。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的組合物，其特征在于該有機凝膠從液態(tài)到凝膠態(tài)的轉(zhuǎn)變溫度小于30℃和從凝膠態(tài)到液態(tài)的轉(zhuǎn)變溫度大于+35℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求3-5任一所述的組合物，其特征在于親水性有機溶劑的比例小于所述組合物的60wt％并優(yōu)選小于20wt％。
7.根據(jù)權(quán)利要求3-6任一所述的組合物，其特征在于所述親水性有機溶劑屬于乙醇、甘油、芐醇、丙二醇、N-甲基吡咯烷酮和二甲亞砜(DMSO)、低分子量的聚(乙)二醇、氯丁醇、糠醛、N，N-二甲基乙酰胺、環(huán)亞甲基甘油醚、亞異丙基甘油、乳酸乙酯、乙酸和乳酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的組合物，其特征在于所述親水性有機溶劑是乙醇。
9.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于所述疏水性有機液體屬于植物油、甘油三酯、半合成油和與水不互溶的有機溶劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其特征在于所述疏水性有機液體包括大豆油、角鯊烯、苯甲酸芐酯、甘油三酯、或苯甲酸芐酯與芐醇的混合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10的組合物，其特征在于所述疏水性有機液體是不同疏水性有機溶劑的混合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的組合物，其特征在于所述混合物是大豆油和油酸乙酯的混合物。
13.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于所述生物活性物質(zhì)屬于蛋白質(zhì)、肽、氨基酸、維生素、核酸和寡核苷酸。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其特征在于所述生物活性物質(zhì)選自嗎啡、α-干擾素、β-干擾素、生長抑素、肝素、白細胞介素、紅細胞生成素、降鈣素、人生長激素、促甲狀腺激素和醋酸亮丙瑞林。
15.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于有機凝膠化物質(zhì)為0.5wt％-50wt％，相對于所述組合物的總重量。
16.根據(jù)前述任一權(quán)利要求所述的組合物，其特征在于有機凝膠化物質(zhì)是含有酸、醇或胺端基的低分子量分子，特別地是氨基酸衍生物。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其特征在于有機凝膠化物質(zhì)屬于丙氨酸酯衍生物。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其特征在于所述有機凝膠化物質(zhì)是N-月桂酰基-L-丙氨酸甲酯或N-月桂?；?L-丙氨酸乙酯。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其特征在于所述有機凝膠化物質(zhì)是N-硬脂?；?L-丙氨酸甲酯或N-硬脂酰基-L-丙氨酸乙酯。
20.從根據(jù)權(quán)利要求1-18任一所述的組合物獲得的有機凝膠，其特征在于其在施加溫度和所述組合物的凝膠/液體轉(zhuǎn)變溫度之間保持穩(wěn)定的凝膠化形式。
21.根據(jù)權(quán)利要求1-20任一所述的組合物的應(yīng)用，用于希望通過血管外胃腸外途徑和特別地在皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)注入身體，或希望眼內(nèi)或陰道內(nèi)給予到開放性創(chuàng)傷或在手術(shù)期間的藥品制造。
22.根據(jù)權(quán)利要求1-20任一所述的組合物的應(yīng)用，希望用作生物活性物質(zhì)進入身體的持續(xù)釋放的載體的藥品制造。
21.一種制備權(quán)利要求1的組合物的方法，其特征在于將在水溶液中生物活性物質(zhì)任選地加入到由有機凝膠化物質(zhì)和疏水性有機液體組成的混合物中。
22.一種制備權(quán)利要求3的組合物的方法，其在于-在親水性有機溶劑中溶解有機凝膠化物質(zhì)，并隨后再引入生物活性和疏水性有機液體。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其特征在于當(dāng)生物活性物質(zhì)少量地溶于或不溶于有機相時，采用攪拌將所述物質(zhì)的水溶液分散進入由有機凝膠化物質(zhì)和親水性有機溶劑組成的有機相。
全文摘要
本發(fā)明涉及包括有機疏水性液體、分子具有通過低能量鍵結(jié)合在一起的能力的有機凝膠化物質(zhì)、和生物活性物質(zhì)的液體形式的熱敏感組合物，所述組合物在對動物身體，特別地是人類的給藥期間，與生理溶液接觸時變成有機凝膠形式。
文檔編號A61K38/04GK1649567SQ03810055
公開日2005年8月3日 申請日期2003年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月12日
發(fā)明者J·C·勒魯, A-C·庫芬-瓦羅 申請人:愛的發(fā)制藥集團, 蒙特利爾大學(xué)