專利名稱：：8－羥基喹啉衍生物的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及8-羥基喹啉衍生物、其制備方法以及其用作藥物或獸藥制劑的用途，尤其是用于治療神經性疾病、更具體地說是神經變性疾病例如阿耳茨海默氏病的用途。
背景技術：
：本說明書中所引用的所有參考文獻包括專利和專利申請在此均被引入作為參考。并不認為任意一篇參考文獻均構成了現(xiàn)有技術。這些參考文獻的討論內容表明了其作者的觀點，本申請人保留對所引用文獻的準確性和針對性進行質疑的權利。顯然應該這樣理解，盡管本文引入了很多現(xiàn)有技術出版物，但是無論在澳大利亞還是其它任何國家，這樣的引用并不表明就認為這些文獻構成了本領域的公知常識。對于每一物種而言，生命期限在生物學上被認為是確定的，人類生命期限的長度是不可預測的，但是可以長達120年。本世紀以來，由于生命期望值顯著升高，老年人成為人口中越來越多的一部分，他們的衛(wèi)生保健需求在未來數(shù)十年內持續(xù)上升。盡管正常老化是以人類大腦質量和體積逐漸減少為特征的，這可能歸因于腦細胞的萎縮和/或死亡，但是上述變化在罹患有神經變性疾病的患者大腦中意義更為深遠。大部分神經變性疾病是偶發(fā)性的并且不明緣由，但是已經表明，在很多基因中數(shù)百種不同的突變可以引發(fā)數(shù)種神經變性疾病的家族性(遺傳性)變種。在過去十年中，為了評價神經變性疾病的遺傳基礎，發(fā)現(xiàn)了越來越多可能產生突變的基因。在大腦功能長期保持正常以后，由于特定大腦區(qū)域進行性變性(即神經細胞功能障礙和死亡)，從而逐漸發(fā)展成為神經變性疾病。由于當神經細胞消亡超過由受影響的大腦區(qū)域完成的持續(xù)功能(例如記憶、運動)的“閾值”時才開始出現(xiàn)疾病的癥狀表達，因此大腦變性實際發(fā)作時間可能在臨床癥狀出現(xiàn)的數(shù)年以前。腦力以及更高的綜合認知能力越來越被削弱，并且受神經性疾病日常生活行為的干擾最終導致癡呆。在老年人群中癡呆的準確流行比例未知，但是在15％的超過65歲高齡人群中，5％出現(xiàn)重度癡呆，而10％出現(xiàn)輕度至中度癡呆。重度癡呆的流行比例由65歲的1％升高至85歲的45％。癡呆有很多原因，但是阿耳茨海默氏病(AD)在超過65歲的癡呆患者中占50％。AD是主要的大腦變性疾病。其特征在于認知功能例如記憶、思考、理解、計算、語言、學習能力以及判斷能力逐漸降低。當降低到足以影響個人日常生活行為時確診為癡呆。AD隨著逐漸惡化伺機發(fā)作。這種疾病需要明顯區(qū)別于認知功能與年齡相關的正常下降。正常下降是或多或少逐步降低最終導致輕度失去能力。AD的發(fā)作通常是在65歲之后，當然更早發(fā)作也不少見。隨著年齡增大，發(fā)病幾率迅速升高(每5年大概升高兩倍)。隨著人們生命期望值的增加，這對于患有這種疾病的個體總數(shù)而言是不言而喻的。AD的病因尚不清楚。相當多的證據(jù)證明AD的幾種形式具有可遺傳的傾向(綜述在StGeorge-Hyslop，2000中)，ApoE的某些亞型的表達也與較高可能性出現(xiàn)AD有關(Corder等人，1993；Czech等人，1994)。鋁毒素積聚被認為是AD誘發(fā)原因之一，當然這種假設目前已經被淘汰。AD患者大腦中顯示出異常的堆積物，包括β-淀粉狀蛋白質(Aβ)。已知Aβ存在于患有某些神經變性疾病的個體大腦中，但是仍然不清楚它是否就是正經歷疾病過程中的癥狀，或者它是否真正與該疾病的病原學有關。例如，一些作者認為Aβ沉積物可能是正常大腦防御機制的象征，在該防御機制中大腦試圖隔離Aβ；這類沉積物可以存在于正常個體的大腦中。神經原纖維纏結時tau蛋白產生突變，但是大腦中不存在淀粉樣蛋白斑；這種病癥稱作tauopathy。AD治療的一種推薦方法是抑制Aβ在大腦中的生成。APP通過BACE1和γ-分泌酶，溶蛋白性裂解生成完整長度的Aβ，然后從細胞中釋放出來(NunanandSmall，2000)。另外，很多研究顯示膽固醇能夠影響Aβ的釋放(Simons等人，1998；Hartmann，2001；Fassbender等人，2001；Frears等人，1999；Friedhoff等人，2001)。然而，在本領域關于降低膽固醇水平的評價仍存在一些爭論，某些研究人員認為膽固醇確實是有益的。例如Ji等人，(2002)認為，使Aβ結合至膽固醇可以通過抑制其低聚反應而預防Aβ毒性。在替代方法中，有人建議通過拆開淀粉樣前蛋白(APP)的蛋白水解步驟也可以達到很多可能的治療目的，淀粉樣前蛋白水解生成Aβ淀粉樣單體(Shearman等人，2000；Sinha等人，1999)；]，這種方法屬于臨床治療的早期水平。曾經試圖通過與Aβ發(fā)生免疫接種作用而加快從大腦中清除Aβ，同時在AD的轉基因鼠模型中保持有效(Schenk等人，1999)，已經證明該方法具有明顯的副作用(Brower，2002)。另外還有人認為淀粉樣原纖維的沉積在其它神經變性疾病中也可能是重要的。這些疾病包括帕金森氏病、伴有Lewy體形成的癡呆、多系統(tǒng)萎縮癥、哈-斯病(Hallerboden-Spatzdisease)、以及彌散性Lewy體疾病。關于AD病因學的一種競爭理論認為，其病因主要在于大腦內生源的途徑和Aβ淀粉樣蛋白的堆積(參見Selkoe的最新綜述，2001；Beyreuther等人，2001；Bush，2001)。然而直到目前，尚沒有以該途徑為目標的藥物或藥劑證明對于改變這種疾病的臨床癥狀或者在預防或改善與包括阿耳茨海默氏病在內的神經變性疾病相關的認知功能降低方面具有持久的效果。還有假說認為，AD是由Aβ淀粉狀蛋白毒素堆積引起的，部分是由于過量結合銅和鋅，這些金屬離子在最易受影響區(qū)域含量豐富。此外，還有人認為當Zn2+和Cu2+離子與Aβ相互作用時，Aβ聚集形成原纖維從而出現(xiàn)斑塊(Atwood等人，1998)；它由來自缺乏突觸Zn2+的動物的數(shù)據(jù)得到證實(Lee等人，2002)。還有人認為，具有氧化還原活性的Cu2+-Aβ相互作用可以由O2生成H2O2(Huang等人，1999)。Cu2+和Zn2+均表明可以影響Aβ-脂質膜的相互作用(Curtain等人，2001)。大腦是集中金屬離子的器官，最新的證據(jù)表明，金屬穩(wěn)態(tài)的破壞在多種與年齡有關的神經變性疾病中具有重要作用。這些疾病的共同特征包括誤折疊蛋白質沉積(每種疾病具有其自身特定的淀粉樣蛋白質)以及由于氧化應激而導致的本質上的細胞損傷。真實數(shù)據(jù)目前正在迅速積累，金屬化學反應可能成為蛋白樣變性神經病例如阿耳茨海默氏病、肌萎縮性側索硬化癥(ALS)、蛋白酶傳染性因子疾病-包括克-雅二氏病(CJD)、傳染性海綿樣變腦病(TSE)、白內障(cataracts)、線粒體紊亂、帕金森氏病和亨廷頓氏病所共有的特征。在這些例子中，特定蛋白質的病理堆積是通過生理環(huán)境下的異常氧化還原作用促進的，這種生理環(huán)境特征為存在過渡金屬和有效還原劑[Bush，2000(CurrOpinChemBiol.2000Apr；4(2)184-91)]。因此，本發(fā)明提供了一種治療神經病的方法，所述神經病包括那些特征在于蛋白質和金屬之間的相互作用出現(xiàn)異常的病癥。在P.N.GeromylatosS.A.的美國專利號5,994,323和6,001,852以及Bush等人的美國專利申請?zhí)?9/972,913中公開和保護了一種使用抗生素碘氯代羥基喹啉[也稱作氯碘羥喹(CQ)]治療AD的方法。19世紀60年代僅在日本發(fā)現(xiàn)CQ與罕見的神經性綜合癥-亞急性視神經脊髓病(SMON)相關，認為這些患者長期服用這種藥物，并且在這段時間服用劑量可能高于推薦劑量，因此在1970年CQ被撤回用作抗生素(Shiraki，1975)。然而最新證據(jù)表明，在異常情況下易感人群中，SMON是由與過度使用相關的維生素B12缺乏引起的，因此在臨床學研究中CQ可能被重新恢復名譽(Yassin等人，2000；BushandMasters，2001)。然而，在Geromylatos和Bush的專利中并沒有提供動物模型或者人的體內結果。US5,994,323公開了一種含有CQ和維生素B12的組合物、及其用于治療CQ的“對CQ給藥具有響應性的疾病或失調而同時抑制不良副作用”的用途。這些疾病包括AD。US6,001,852公開了一種使用CQ治療AD的方法，優(yōu)選同時使用維生素B12。US5,994,323和US6,001,852均建議了10-750mg每天的劑量；US5,994,323推薦指出，如果治療是長期的話，那么CQ應該間歇給藥，最多三周一次后隨后進入1-4周的“清洗”(wash-out)期。在美國申請?zhí)?9/972,913中，CQ在分解Aβ沉積物能力方面是唯一被提及到的。對神經毒性的其它機理沒有進行討論。GeneralHospitalCorporation公司的PCT/US99/05291公開了使用CQ聯(lián)合某些銅和鋅螯合劑用于加快淀粉樣斑塊的溶解以及抑制蛋白樣斑塊的形成和/或通過Aβ生成ROS的用途。US6,001,852還指出，含有CQ和維生素B12的組合物可用于治療帕金森氏?。蝗欢?，在其上下文中，CQ被認為主要是通過清除黑質中的鐵而發(fā)揮作用的。CQ在AD治療中的功效取決于其進入CNS的能力、以及隨后使過渡金屬Cu、Zn和Fe與各種Aβ實體隔離開從而降低Aβ毒性并將其清除釋放的能力。CQ的效力受其較差的水溶性限制，其水溶性較差限制了其口服生物利用度。另外還已知CQ經歷較大程度的共軛代謝，因而具有如前文所述的毒性史。CQ為二齒金屬配體的事實使得每個受俘金屬離子需要至少兩個分子。通過對下述一種或多種特性進行優(yōu)化，我們現(xiàn)在開發(fā)出一類比CQ更有效的8-羥基喹啉衍生物(a)金屬螯合作用(如本文所述)；(b)水溶性；(c)降低細胞毒性；(d)淀粉樣分散特性；(e)適合滲透CNS的膜通透性；以及(f)代謝穩(wěn)定性。這些衍生物包括那些通過主動轉運集中于CNS中的治療劑的實例，它們除了具有金屬螯合特性之外，還具有抗氧化活性，在某些情形中導致增強的金屬螯合特性并證實了這樣一種前藥策略，那就是為了有利于CNS滲透而將8-羥基部分掩飾起來，同時利用存在于血腦屏障(BBB)內表面上的已知酯酶活性。發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種用于治療、改善和/或預防神經病的方法，它包括向有該需要的患者施用有效量的式I化合物或其鹽、水合物、溶劑合物、衍生物、前藥、互變異構體和/或異構體其中R1是H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的?；?、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基、抗氧化劑(antioxidant)或導向分子(targetingmoiety)；R2是H；任選被取代的烷基；任選被取代的烯基；任選被取代的芳基；任選被取代的雜環(huán)基；任選被取代的烷氧基；抗氧化劑；導向分子；COR6或CSR6，其中R6是H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、羥基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基、抗氧化劑、導向分子、OR7、SR7或NR7R8，其中R7和R8相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；CN；(CH2)nNR9R10、HCNOR9或HCNNR9R10，其中R9和R10相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基，n為1-4；OR11、SR11或NR11R12，其中R11和R12相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基或者一起形成任選被取代的雜環(huán)基；或者SO2NR13R14，其中R13和R14相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；以及R3、R4、R5、R和R′相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的烷氧基、任選被取代的酰基、羥基、任選被取代的氨基、任選被取代的硫基、任選被取代的磺?；?、任選被取代的亞磺?；?、任選被取代的磺?；被?、鹵素、SO3H、胺、CN、CF3、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基、抗氧化劑或導向分子，限制條件是(a)當R1至R3、R和R′是H時，R4不是Cl或I且R5不是I；(b)當R1至R3、R、R′以及R5是H時，R4不是CHO、CHOHCCl3、CH2OCH3、CH2N(C2H5)2、或(c)當R1、R5、R′和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4不是溴、甲基、苯基、羥甲基或三氟甲基；(d)當R1、R4、R5和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是溴、碘、甲基、苯基、丙基、苯乙基、庚基、芐氨基甲基、3-氨基丙基、3-羥基丙基、4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、吡啶-3-基、呋喃-2-甲?；?furo-2-yl)、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-甲氧基苯基或哌啶-2-基；(e)當R1、R4、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R5不是苯基、3-羥基丙基、苯乙基、3-氨基丙-1-基或己-1-基；(f)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2H且R3是OH時，R不是N-嗎啉代甲基、溴或苯基；(g)當R1、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4和R5不是氯；(h)當R1、R4和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R和R5不是溴；(i)當R1、R、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4不是羥甲基、苯基或溴；(j)當R1、R、R4和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R′不是4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、吡啶-3-基、芐基、溴、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、3-羥基丙基或3-叔丁氧羰基氨基丙基；(k)當R1、R、R4和R′是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R5不是苯基或3-叔丁氧羰基氨基丙-1-基；(l)當R1、R、R4、R′和R5是H且R2是CO2Me時，R3不是甲苯-4-磺酰氨基、哌嗪-1-基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、3-苯甲酰基氨基丙-1-基、苯乙基、3-叔丁氧羰基氨基丙基、3-羥基丙基、氨基或己-1-基；(m)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Na且R3是OH時，R不是苯基；(n)當R1、R、R4、R′和R5是H且R2是CO2H時，R3不是苯基、4-氯苯基、苯乙基、3-羥基丙基、氨基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、甲苯-4-磺酰氨基、3-苯甲?；被?1-基、氨基丙-1-炔基、己-1-基、5-羥基戊-1-基、哌嗪-1-基或2-(1-哌嗪基)嘧啶基；(o)當R1、R′和R是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4和R5不是氯；(p)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R不是溴；(q)當R1、R′和R4是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R和R5不是溴；(r)當R1、R、R3、R′和R5是H且R2是CO2H時，R4不是苯基、4-氯苯基或苯乙基；(s)當R1、R5、R′、R4、R3和R是H時，R2不是2H-四唑-1-基；(t)當R1、R5、R4和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是3，5-二氯苯基或4-氟苯基；以及(u)R1至R5、R和R′中的至少一個不是H。本發(fā)明進一步提供了式I化合物在制造用于治療、改善和/或預防神經病的藥物中的用途。本發(fā)明還提供了式I化合物用于治療、改善和/或預防神經病的用途。本發(fā)明進一步提供了用于治療、改善和/或預防神經病的式I化合物。本發(fā)明進一步提供了式I化合物用作藥物、優(yōu)選為神經治療劑或神經保護劑、更優(yōu)選為抗淀粉樣變性劑(antiamyloidogenicagent)的用途。優(yōu)選地，所述神經病為神經變性疾病，更優(yōu)選為神經變性淀粉樣變性病例如阿耳茨海默氏病。優(yōu)選的式I化合物如下所示(i)式Ia其中R、R1和R3如上述式I中定義；以及R2a是H；任選被取代的C1-6烷基；任選被取代的C1-6烯基；任選被取代的芳基；任選被取代的雜環(huán)基；抗氧化劑；導向分子；COR6a或CSR6a，其中R6a是H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、羥基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基或OR7a、SR7a或NR7aR8a，其中R7a和R8a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；CN；CH2NR9aR10a、HCNOR9a或HCNNR9aR10，其中R9a和R10a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；OR11a、SR11a或NR11aR12a，其中R11a和R12a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基或者一起形成任選被取代的雜環(huán)基；或者SO2NR13aR14a，其中R13a和R14a相同或不同且選自H或任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。優(yōu)選的式Ia化合物如下所示式IIa其中R1如上述式I中定義；以及R2′a是任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。式IIa可以代表這樣一類化合物，在該化合物中連接于8-羥基喹啉的C2位置上的抗氧化劑也就是羥基以這樣一種方式被曝露于助氧化環(huán)境中，這樣可以得到金屬螯合特性增強了的分子。代表性實例如下所示式IIIa其中R1和R3如上述式I中定義；以及R6′a是任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、羥基、OR7′a、SR7′a、N2R7′aR8′a或NR7′aR8′a，其中R7′a和R8′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。式IIIa代表這樣一類化合物，在該化合物中親水性酰胺基連接在8-羥基喹啉的C2位置上，這樣通常可以增加溶解性同時保持膜通透性。式IIIa化合物還顯示出增強了的金屬螯合特性。代表性實例如下所示式IVa其中R1如上式I中定義；以及R2″a是CN；CH2NR9′aR10′a、HCNOR9′a或HCNNR9′aR10′a，其中R9′a和R10′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。式IVa代表具有改善了的金屬螯合作用以及在下文所述的測定板中具有優(yōu)化了的活性的化合物。代表性實例如下所示式Va其中R1如上述式I中定義；以及R11′a和R12′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜環(huán)基或者一起形成任選被取代的雜環(huán)基。式VIa其中R1如上述式I中定義；以及R13′a和R14′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。(ii)式Ib其中R1、R′、R、R2和R3如上述式I中定義；R4b和R5b相同或不同且選自H；任選被取代的C1-6烷基；任選被取代的C2-6烯基；鹵素；CN；CF3；任選被取代的芳基；任選被取代的雜環(huán)基；抗氧化劑；導向分子；SO3H；SO2NR13aR14a，其中R13a和R14a如上述式Ia中定義；或者OR15b、SR15b、SO2R15b、CONR15bR16b或NR15bR16b，其中R15b和R16b相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的C1-6?；?、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基，包括上述的限制條件(a)-(c)、(e)、(g)、(h)、(I)、(k)、(o)、(q)、(r)以及(u)。優(yōu)選的式Ib化合物如下所示式IIb其中R1、R′、R、R2和R3如上述式I中定義；以及R4′b和R5′a如上述式Ib中定義，限制條件在于其中至少一個是鹵素，包括上述的限制條件(a)、(c)、(g)、(h)、(i)、(o)、(q)和(u)。式IIIb其中R1如上述式I中定義；R4″b是H或鹵素；以及R5″b是任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。代表性實例如下所示式IVb其中R1如上述式I中定義；R″是C1-6烷氧基、鹵素、C1-6烷基、C2-6烯基或C1-6鹵代烷基；以及R5″b是H或鹵素。代表性實例如下所示式Vb其中R1如上述式I中定義；以及R″如上述式IVb中定義。VIb其中R2至R5、R和R′如上述式I中定義；以及R1b是任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的芳基、任選被取代的芳基?；?、C1-6烷酰基或任選被取代的雜環(huán)基。式VIb代表其中喹啉上8-羥基被封端形成前藥尤其是酯前藥的化合物。8-羥基為式I化合物代謝的重要位置其與葡糖醛酸或硫酸酯(sulphate)結合得到易于排泄的親水類化合物。這種結合可能不通過血腦屏障。酯前藥可以防止式I化合物的結合。然后構成血腦屏障所必需的酯酶可以通過該屏障使化合物在CNS中作用得到活化而釋放出C8-羥基。在特別優(yōu)選的實施方案中，式I化合物是其中R4b和R5b或者Rb′b和R5′b均是鹵素、更優(yōu)選是氯取代基的式Ib或者IIb化合物。優(yōu)選地，R2、R、R3和R′中的至少一個是任選被取代的烷基，任選被取代的芳基，任選被取代的雜環(huán)基，(CH2)nNR9R10其中R9和R10定義如上且n是1-4，COR6其中R6是NR7R8、OR7或SR7其中R7和R8定義如上或者NR11R12，OR11，SR11其中R11和R12定義如上。不希望局限于理論，據(jù)信取代基R、R3和R′在本發(fā)明化合物的螯合特性方面具有電子或空間限制效應。因此，在這些位置上的取代基可用于調節(jié)其它的參數(shù)例如細胞毒性和物理化學特性包括氫鍵供體和受體數(shù)目、親油性(ClogP、ElogP和LogD)、溶解性和極性表面積。調節(jié)這些參數(shù)有利于優(yōu)化該化合物的藥物代謝動力學曲線。另外還有人認定取代基R2除了調節(jié)細胞毒性和物理化學特性之外，如果該取代基提供螯合特性的話還可以影響化合物活性。特別優(yōu)選的具有帶螯合特性的R2取代基的化合物實例如下所示。在又一方面，本發(fā)明提供了一種藥物或獸藥組合物，它含有如上所述的式I化合物以及可藥用或獸藥用載體。某些式I化合物本身具有新穎性。因此，本發(fā)明提供了一種式II化合物，它是滿足下述限制條件的式I化合物(a)當R1和R3至R5、R以及R′是H時，R2不是H、甲基、CO2H、CN、CONCH2CO2H、COCH3、CH2NH2、CNOH、(吡啶-2-基)、2-羥基苯基、CHNNH2、NH-(吡啶-2-基)、或者SO3H；(b)當R1和R4至R7是H時，R3不是OH且R2不是CO2H；(c)當R1至R3、R6和R7是H時，則(i)當R5是I時，R4不是Cl、SO3H或I；(ii)當R5是H時，R4不是SO3H、NH2或Cl；(iii)R4和R5均不是Cl、Br或CH3；以及(iv)當R2至R7是H時，R1不是或(d)當R1至R3、R和R′是H時，R4不是Cl或I且R5不是I；(e)當R1至R3、R、R′和R5是H時，R4不是CHO、CHOHCCl3、CH2OCH3、CH2N(C2H5)2、CH2CN、或者(f)當R1、R5、R′和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4不是溴、甲基、苯基、羥甲基或三氟甲基；(g)當R1、R4、R5和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是溴、碘、甲基、苯基、丙基、苯乙基、庚基、芐氨基甲基、3-氨基丙基、3-羥基丙基、4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、吡啶-3-基、呋喃-2-甲?；?-氯苯基、3，4-二氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-甲氧基苯基或者哌啶-2-基；(h)當R1、R4、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R5不是苯基、3-羥基丙基、苯乙基、3-氨基丙-1-基或己-1-基；(i)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2H且R3是OH時，R不是N-嗎啉代甲基、溴或苯基；(j)當R1、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4和R5不是氯；(k)當R1、R4和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R和R5不是溴；(l)當R1、R、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4不是羥甲基、苯基或溴；(m)當R1、R、R4和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R′不是4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、吡啶-3-基、芐基、溴、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、3-羥基丙基或3-叔丁氧羰基氨基丙基；(n)當R1、R、R4和R′是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R5不是苯基或3-叔丁氧羰基氨基丙-1-基；(o)當R1、R、R4、R′和R5是H且R2是CO2Me時，R3不是甲苯-4-磺酰氨基、哌嗪-1-基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、3-苯甲酰基氨基丙-1-基、苯乙基、3-叔丁氧羰基氨基丙基、3-羥基丙基、氨基或者己-1-基；(p)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Na且R3是OH時，R不是苯基；(q)當R1、R、R4、R′且R5是H且R2是CO2H時，R3不是苯基、4-氯苯基、苯乙基、3-羥基丙基、氨基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、甲苯-4-磺酰氨基、3-苯甲?；被?1-基、氨基丙-1-炔基、己-1-基、5-羥基戊-1-基、哌嗪-1-基、或者2-(1-哌嗪基)嘧啶基；(r)當R1、R′和R是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4和R5不是氯；(s)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R不是溴；(t)當R1、R′和R4是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R和R5不是溴；(u)當R1、R、R3、R′和R5是H且R2是CO2H時，R4不是苯基、4-氯苯基或苯乙基；(v)當R1、R5、R′、R4、R3和R是H時，R2不是2H-四唑-1-基；(w)當R1、R5、R4和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是3，5-二氯苯基或4-氟苯基；以及(x)R1至R5、R以及R′中的至少一個不是H；(y)當R1至R3、R5、R′和R是H時，R4不是氯、NH2或SO3H；以及(z)當R1、R3至R5、R和R′是H時，R2不是CH3。上述的式II化合物可以利用下文所具體描述的方法制備。發(fā)明詳述出于本說明書目的，應該清楚理解的是措詞“含有”是指“包括但并不僅僅限于”，同時措詞“包含”具有相應的含義。單獨使用或在化合物措詞例如“任選被取代的烷基”、“鹵代烷基”、“烷?；敝惺褂玫男g語“烷基”是指具有1-10個碳原子、優(yōu)選1-6個碳原子、更優(yōu)選1-4個碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴基。這類烷基的示例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。單獨使用或在化合物措詞例如“任選被取代的烯基”中使用的術語“烯基”是指具有至少一個碳碳雙鍵的2-20個碳原子、優(yōu)選2-14個碳原子、更優(yōu)選2-6個碳原子的直鏈、支鏈或者單環(huán)或多環(huán)基團。烯基的實例包括烯丙基、乙烯基、丙烯基、丁烯基、異丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-戊烯基、環(huán)戊烯基、1-甲基-環(huán)戊烯基、1-己烯基、3-己烯基、環(huán)己烯基、1-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、環(huán)辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、3-癸烯基、1，3-丁二烯基、1，4-戊二烯基、1，3-環(huán)戊二烯基、1，3-己二烯基、1，4-己二烯基、1，3-環(huán)己二烯基、1，4-環(huán)己二烯基、1，3-環(huán)庚二烯基、1，3，5-環(huán)庚三烯基、1，3，5，7-環(huán)辛四烯基等。單獨使用或在化合物措詞例如“任選被取代的?；?、“芳?；被颉巴轷；敝惺褂玫男g語“?；笔侵妇哂?-20個碳原子、優(yōu)選1-14個碳原子的氨甲?；?、脂肪族?；⒑蟹枷阕瀛h(huán)的?；?其被稱作芳香族酰基)或者含有雜環(huán)環(huán)系的?；?其被稱作雜環(huán)?；?。?；鶎嵗ò奔柞；?；直鏈或支鏈烷?；?，例如甲?；?、乙?；⒈；?、丁?；?、2-甲基丙?；⑽祯；?、2，2-二甲基丙?；?、己酰基、庚酰基、辛酰基、壬酰基、癸酰基、十一烷酰基、十二烷酰基、十三烷酰基、十四烷?；⑹逋轷；?、十六烷?；?、十七烷酰基、十八烷?；⑹磐轷；?、或者二十烷酰基；烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧基羰基或庚氧基羰基；環(huán)烷基羰基，例如環(huán)丙基羰基、環(huán)丁基羰基、環(huán)戊基羰基或環(huán)己基羰基；烷基磺?；?，例如甲磺?；蛞一酋；?；烷氧基磺酰基例如甲氧基磺?；蛞已趸酋；环减；?，例如苯甲?；⒓妆锦；蜉良柞；?；芳烷?；绫交轷；绫揭阴；?、苯丙酰基、苯丁?；⒈疆惗□；⒈轿祯；虮郊乎；蛘咻镣轷；巛烈阴；?、萘丙?；⒒蜉炼□；?；芳烯?；绫较；绫奖；?、苯丁烯?；?、苯甲基丙烯酰基(phenylmethacrylyl)、苯戊烯酰基或苯己烯?；蛘咻料；巛帘；?、萘丁烯酰基或萘戊烯?；?；芳烷氧基羰基，例如苯基烷氧基羰基如芐氧基羰基；芳氧基羰基，例如苯氧基羰基或萘氧基羰基，芳氧基烷?；?，例如苯氧基乙?；虮窖趸；及奔柞；绫交奔柞；?；芳硫基氨甲?；?，例如苯硫基氨甲?；蓟胰；?arylglyoxyloyl)，例如苯乙醛?；蜉烈胰；?；芳磺?；?，例如苯磺?；蜉粱酋；浑s環(huán)羰基；雜環(huán)烷?；玎绶砸阴；⑧绶员；?、噻吩丁酰基、噻吩戊?；⑧绶约乎；?、噻唑乙?；?、噻二唑乙?；蛩倪蛞阴；?，雜環(huán)烯?；珉s環(huán)丙烯?；?、雜環(huán)丁烯酰基、雜環(huán)戊烯?；螂s環(huán)己烯酰基；或者雜環(huán)乙醛酰基，例如噻唑乙醛?；蜞绶砸胰；为毷褂没蛟诨衔锎朐~例如“任選被取代的雜環(huán)基”中使用的術語“雜環(huán)基”是指含有至少一個選自氮、硫和氧的雜原子的單環(huán)或多環(huán)雜環(huán)基。適宜的雜環(huán)基包括含N雜環(huán)基，例如含有1-4個氮原子的不飽和3至6元單雜環(huán)基，例如吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三唑基或四唑基；含有1-4個氮原子的飽和3至6元單雜環(huán)基，例如吡咯烷基、咪唑啉基、哌啶子基或哌嗪基；含有1-5個氮原子的不飽和稠合雜環(huán)基，例如吲哚基、異吲哚基、中氮茚基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基或四唑并噠嗪基；含有氧原子的不飽和3至6元單雜環(huán)基，例如吡喃基或呋喃基；含有1-2個硫原子的不飽和3至6元單雜環(huán)基，例如噻吩基；含有1-2個氧原子和1-3個氮原子的不飽和3至6元單雜環(huán)基，例如噁唑基、異噁唑基或噁二唑基；含有1-2個氧原子和1-3個氮原子的飽和3至6元單雜環(huán)基，例如嗎啉基；含有1-2個氧原子和1-3個氮原子的不飽和稠合雜環(huán)基，例如苯并噁唑基或苯并噁二唑基；含有1-2個硫原子和1-3個氮原子的不飽和3至6元單雜環(huán)基，例如噻唑基或噻二唑基；含有1-2個硫原子和1-3個氮原子的飽和3至6元單雜環(huán)基，例如噻唑啉基；以及含有1-2個硫原子和1-3個氮原子的不飽和稠合雜環(huán)基，例如苯并噻唑基或苯并噻二唑基。優(yōu)選地，雜環(huán)基是含有1或3個氮原子的不飽和5或6元單雜環(huán)基例如咪唑基、噻唑基、吡唑基或吡啶基；不飽和稠合雜環(huán)基例如喹啉基或苯并噻二唑基；含有1-2個硫原子的不飽和5元單雜環(huán)基例如噻吩基；或者含有1-2個硫原子和1-2個氮原子的不飽和5或6元單雜環(huán)基例如噻唑基。單獨使用或在化合物措詞例如“任選被取代的芳基”或“芳?；敝惺褂玫男g語“芳基”是指含有1、2或3個環(huán)的碳環(huán)芳香環(huán)系，其中這些環(huán)可以以獨立的方式連接在一起，也可以是稠合的。術語“芳基”包括芳香族基團例如苯基、萘基、四氫萘基、茚滿和聯(lián)苯基。優(yōu)選地，芳基是5或6元芳基例如苯基。術語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。術語“任選被取代的硫基”是指連接于二價硫原子上的任選取代基例如含有1-10個碳原子、優(yōu)選1-6個碳原子、更優(yōu)選1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基的基團。烷硫基的實例包括甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基和己硫基。術語“任選被取代的亞磺?；笔侵高B接于二價-S(＝O)-基團上的任選取代基例如含有1-10個碳原子、優(yōu)選1-6個碳原子、更優(yōu)選1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基的基團。其實例包括甲亞磺酰基、乙亞磺酰基、丁亞磺?；图簛喕酋；?。術語“任選被取代的磺?；笔侵高B接于二價-SO2-基團上的任選取代基例如含有1-10個碳原子、優(yōu)選1-6個碳原子、更優(yōu)選1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基的基團。其實例包括甲磺?；?、乙磺?；捅酋；Ｐg語“烷氧基”是指直鏈或支鏈含氧基團，優(yōu)選每個具有含1至大約6個碳原子的烷基部分。烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。術語“任選被取代的”是指某基團可以也可以不被一個或多個選自下面的取代基進一步取代烷基、烯基、炔基、芳基、醛基、鹵素、鹵代烷基、鹵代烯基、鹵代炔基、鹵代芳基、羥基、烷氧基、烯基氧基、芳氧基、芐氧基、鹵代烷氧基、鹵代烯氧基、鹵代芳氧基、硝基、硝基烷基、硝基烯基、硝基炔基、硝基芳基、硝基雜環(huán)基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烯基氨基、炔基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、芐基氨基、二芐基氨基、?；?、烯基?；⑷不；?、芳酰基、?；被⒍；被ⅤＱ趸?、烷基磺酰氧基、芳基磺酰氧基(arylsulphenyloxy)、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、雜環(huán)氨基、鹵代雜環(huán)基、烷硫基苯基(alkylsulphenyl)、芳硫基苯基(arylsulphenyl)、烷氧羰基(carboalkoxy)、芳氧羰基(carboaryloxy)、巰基、烷硫基、芐硫基、?；蚧?、氰基、含磷基團等。優(yōu)選地，該任選的取代基是C1-6烷基、更優(yōu)選是C1-4烷基；CF3；氟；氯；碘；氰基；C1-6烷氧基，更優(yōu)選是C1-4烷氧基；芳基；雜芳基；氨基或烷基氨基。本文使用具有廣義的術語“抗氧化劑”，它是指具有能與反應活性氧類例如羥基反應而藉此生成非毒性產物的基團。其實例包括酚類例如3，4，5-三甲氧基苯基和3，5-二-叔丁基-4-羥基苯基，吲哚胺類例如N-乙酰-5-甲氧基色胺和黃酮類。其它實例可參見文獻(Wright，2001；Karbownik，2001；Gilgun-Sherki，2001)。本文使用具有廣義的術語“導向分子”，它是指通過主動轉運機理能夠促進藥物的腦遞送的基團。導向分子被血腦屏障所必需的特定轉運酶識別，然后這些轉運酶提供使藥物進入大腦的機理。典型地，這類轉移體是鈉依賴性的(sodiumdependent)，并且它們的底物含有羧酸例如抗壞血酸和L-谷氨酸酯(L-glutamate)。使導向分子與藥物結合主要是為了保留該酸基。其實例可參見文獻(Manfredini，2002，Tamia，1999)。本文使用具有廣義的術語“金屬螯合劑”，它是指具有兩個或更多個能夠結合金屬原子優(yōu)選是Cu、Zn或Fe的供體原子的化合物，其中供體原子中的至少兩個原子能夠同時與金屬原子結合，所得到的金屬絡合物具有比金屬離子、生物學配體絡合物更高或者與其相當?shù)臒崃W穩(wěn)定性。本發(fā)明的金屬螯合劑用于治療神經病的所述用途與先前已知的“螯合療法”的含義有所不同?！膀席煼ā笔窃谂R床上與除去塊狀金屬(bulkmetal)相關的術語，例如威爾遜(氏)病、β-地中海貧血和血色病(haemochromatosis)。在這些疾病中可以將金屬內穩(wěn)態(tài)的破壞描述成類似于水壩炸破那樣的災難性事件使得這些問題金屬勢不可擋地溢流。這類化合物的作用機理就是通過螯合劑螯合所述大體積金屬從而將其排泄清除。通過對照的方式，與本發(fā)明神經病相關的金屬內穩(wěn)態(tài)的破壞更類似于一個漏水的水龍頭在長時間滴水，如果滴水持續(xù)足夠長的時間，在一段較長時間以后最終將會引起局部損壞。本發(fā)明“金屬螯合劑”的目的就是破壞金屬-蛋白質的異常相互作用以使得金屬重新進行細致的分布，金屬分布正常之后其目的就是一旦毒性周期發(fā)生短路，內源性清除步驟可以更有效地對付積聚的淀粉樣生成蛋白質。式I或II化合物的鹽優(yōu)選是可藥用的，但是應該理解非可藥用鹽也是落入本發(fā)明范圍之內的，這是因為它們在可藥用鹽的制備過程中可用作中間體?？伤幱名}的實例包括可藥用陽離子例如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、銨和烷基銨的鹽；可藥用無機酸例如鹽酸、正磷酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氫溴酸的酸加成鹽；或者可藥用有機酸例如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、富馬酸、檸檬酸、乳酸、粘液酸、葡糖酸、安息香酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、三鹵代甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、天冬氨酸、谷氨酸、依地酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗壞血酸以及戊酸的鹽。此外，部分本發(fā)明化合物可以與水或常見有機溶劑形成溶劑合物。這類溶劑合物也落入本發(fā)明范圍之內?！翱伤幱醚苌铩笔侵溉我庖环N可藥用鹽、水合物、酯、酰胺、活性代謝物、類似物、殘余物或者任意一種其它的非生物學或希望的且可以獲得所需藥理和/或生理效應的化合物。本文使用具有廣義的術語“前藥”，它包括那些可以體內轉化為式I或II化合物的化合物。前藥策略的應用使藥物向其作用位點例如大腦的遞送達到最佳水平。在一方面，該術語是指具有C1-6烷基或芳基酯基的存在，其目的是防止被水解，直到前藥已經穿過BBB，BBB內表面上的酯酶使該酯水解從而釋放出式I或II化合物上的C8羥基。在第二方面，該術語是指在8-羥基喹啉母核的C2位置上連接抗氧化劑基團，特別是3，4，5-三甲氧基苯基或其衍生物。曝露于大腦這種助氧化環(huán)境中將會導致3，4，5-三甲氧基苯基羥基化而得到2-羥基-3，4，5-三甲氧基苯基取代基，其上面的羥基能夠增強式I或II化合物的螯合特性。本文使用具有廣義的術語“互變異構體”，它包括在兩種異構形式之間能夠存在平衡狀態(tài)的式I或II化合物。這類化合物區(qū)別可以在于連接兩個原子或基團之間的鍵以及化合物中這些原子或基團的位置。本文使用具有廣義的術語“異構體”，它包括結構、幾何和立體異構體。由于式I或II化合物可能具有一個或多個手性中心，因此可能存在對映異構形式。本發(fā)明的組合物含有至少一種式I或II化合物以及一種或多種可藥用載體以及任選的其它治療劑。每種載體、稀釋劑、輔劑和/或賦形劑必須是可藥用的，也就是意味著它與組合物中其它成分是可配伍的并且對患者不是有害的。組合物包括那些適合口服、直腸、鼻道、局部(包括口腔和舌下)、陰道或腸胃外(包括皮下、肌肉內、靜脈內以及皮內)給藥的組合物。組合物可以方便地以單元劑量形式存在，同時按照藥學領域眾所周知的方法制備。這樣的方法包括將活性成分與組成一種或多種配伍成分的載體混合在一起的步驟?？偟膩碚f，組合物的制備是通過將活性組分與液體載體、稀釋劑、輔劑和/或賦形劑或細分固體載體或者其中的兩種進行均勻且緊密的混合，然后如果需要的話使該產品成型。本文使用具有廣義的術語“神經病”，它是指其中神經系統(tǒng)的各種細胞類型退化和/或由于神經變性疾病或損傷或暴露使得這些細胞類型被損壞的病癥。特別地，式I或II化合物可用于治療由下述原因而引起的病癥，在這些病癥中由于外科介入、感染、毒劑曝露、腫瘤、營養(yǎng)不足或代謝失調而出現(xiàn)神經系統(tǒng)細胞受損。另外，式I或II化合物可用于治療神經變性疾病例如阿耳茨海默氏病、帕金森氏病、多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性側索硬化癥、癲癇癥、藥物濫用或藥物成癮(酒精、可卡因、海洛因、安非他明等)、脊髓病和/或損傷、營養(yǎng)不良或神經性視網(wǎng)膜變性(視網(wǎng)膜病變)以及外周神經病，例如糖尿病性神經病和/或由毒素誘導的外周神經病的后遺癥。本文所使用的術語“神經變性疾病”是指神經元整體受到威脅的一種異常狀況。當神經元細胞顯示出降低的存活率或當神經元不能再傳播信號時，就表明神經元可能受到威脅。使用本發(fā)明化合物可以治療的神經病包括急性間歇性卟啉癥；由阿霉素誘導的心肌癥；AIDS癡呆和HIV-1誘導的神經毒性；阿耳茨海默氏??；肌萎縮性側索硬化癥；動脈粥樣硬化；白內障；大腦性局部缺血；大腦性癱瘓；腦瘤；化學治療誘導的器官損傷；順鉑誘導的中毒性腎損害；冠狀動脈旁路手術；克-雅二氏病及其與“瘋牛”病相關的新變種；糖尿病性神經??；唐氏綜合癥；溺死；癲癇癥以及創(chuàng)傷后癲癇癥；弗里德賴希氏共濟失調；額顳骨癡呆；青光眼；腎小球?。谎?；血液透析；血球溶解；溶血性尿毒癥(外耳(氏)病)；出血性中風；哈-斯??；心臟病發(fā)作和再灌注損傷；亨廷頓氏?。籐ewy體??；間歇性跛行；缺血性中風；炎性腸??；黃斑變性；瘧疾；由甲醇誘導的毒性；腦膜炎(無菌性和結核性)；運動神經元疾??；多發(fā)性硬化癥；多系統(tǒng)萎縮癥；心肌局部缺血；瘤形成；帕金森氏?。划a期窒息；皮克氏??；進行性核上性麻痹；由放射療法誘導的器官損傷；血管成形術后再狹窄；視網(wǎng)膜病；老年癡呆；精神分裂癥；膿毒癥；感染性休克；海綿狀腦??；subharrachnoid出血/腦血管痙攣；硬膜下血腫；手術創(chuàng)傷，包括神經外科；地中海貧血；暫時性缺血性發(fā)作(TIA)；外傷性腦損傷(TBI)；創(chuàng)傷性脊髓損傷；移植術；血管性癡呆；病毒性腦膜炎；以及病毒性腦炎。另外，本發(fā)明化合物還可用于加強其它治療方案的效果，例如加強腦源神經生長因子的神經保護效果。本發(fā)明具體涉及誘導中樞神經系統(tǒng)氧化性損傷的病癥，包括急性和慢性神經病例如外傷性腦損傷、脊髓損傷、大腦性局部缺血、中風(缺血性和出血性)、subharrachnoid出血/腦血管痙攣、腦瘤、阿耳茨海默氏病、克-雅二氏病及其與“瘋?！辈∠嚓P的新變種、亨廷頓氏病、帕金森氏病、弗里德賴希氏共濟失調、白內障、伴有Lewy體形成的癡呆、多系統(tǒng)萎縮癥、哈-斯病、彌散性Lewy體疾病、肌萎縮性側索硬化癥、運動神經元疾病、多發(fā)性硬化癥、致命性家族失眠癥、格斯特曼-斯特勞斯勒-杉克病(GertsmannStrausslerSheinkerdisease)以及伴有淀粉樣變性病-荷蘭型的遺傳性腦溢血。更具體地說，本發(fā)明涉及神經變性淀粉樣變性病的治療。神經變性淀粉樣變性病可以是這樣的任意一種病癥，其中神經損傷是由生物學配體例如蛋白質和促進反應性氧源形成、淀粉樣蛋白質的激進和/或沉積的氧化還原活性金屬離子之間的相互作用失常而引起的。淀粉樣蛋白可以由各種蛋白質或多肽前體形成，包括但不限于Aβ、突觸核蛋白(synuclein)、亨廷頓蛋白(huntingtin)、SOD、淀粉樣前蛋白(APP)或朊病毒蛋白質。因此，該病癥優(yōu)選選自散發(fā)性或家族性阿耳茨海默氏病、肌萎縮性脊髓側索硬化癥、運動神經元疾病、白內障、帕金森氏病、克-雅二氏病及其與“瘋?！辈∠嚓P的新變種、亨廷頓氏病、伴有Lewy體形成的癡呆、多系統(tǒng)萎縮癥、哈-斯病、以及彌散性Lewy體疾病。更優(yōu)選的神經變性淀粉樣變性病是與Aβ相關的病癥，例如阿耳茨海默氏病或與唐氏綜合癥相關的癡呆或者家族性阿耳茨海默氏病的常染色體顯性形式的幾種形式之一(綜述于StGeorge-Hyslop，2000)。與Aβ相關的病癥最優(yōu)選為阿耳茨海默氏病。在本發(fā)明所有方面的具體優(yōu)選實施方案中，在治療之前患者的認知功能已經中度或者重度受損，按照阿耳茨海默氏病評價等級(ADAS)-cog測試，例如其ADAS-cog值為25或更高。除了減慢或阻止患者認知功能下降之外，本發(fā)明的方法和化合物還可適用于治療或預防神經變性病癥，或者適用于減輕神經變性病癥的癥狀。本發(fā)明化合物至少能夠局部逆轉患者所感受到的認知能力下降的程度。如果向已鑒定為很可能發(fā)展成神經變性病癥的易感客體、或者向具有認知能力下降的潛伏期表現(xiàn)例如輕度認知損傷或最小化進行性認知損傷的患者進行給藥，本發(fā)明的方法和化合物除了能夠減慢或降低認知能力下降的速度之外，還能夠防止或延遲臨床癥狀的發(fā)作。目前，阿耳茨海默氏病以及其它癡呆癥通常是直到出現(xiàn)一種或更多種警告癥狀時才被診斷出來。這些癥狀構成稱作輕度認知缺損(MCI)的綜合癥，其最近被美國神經病學研究院定義，是指具有記憶力損傷但同時其它功能良好并且不符合癡呆的臨床診斷標準的患者所具有的臨床狀態(tài)(Petersen等人，2001)。MCI的癥狀包括(1)影響工作技巧的記憶力下降(2)完成熟練任務時表現(xiàn)有困難(3)語言障礙(4)對于時間和地點的知覺喪失(迷路)(5)判斷力變差或下降(6)抽象思考存在障礙(7)忘記放在何處(8)心情或行為變化(9)性格變化(10)缺乏主動采用常規(guī)認知篩選試驗例如小型精神狀態(tài)測試、和記憶損傷篩選試驗、以及神經學篩選試驗可以檢測MCI。本文所使用的術語“患者”是指任意一種患有疾病或病癥需要使用藥物活性劑進行治療的動物。患者可以是哺乳動物優(yōu)選人，或可以是家畜或伴生動物。盡管預期本發(fā)明化合物在人的藥物治療中特別適用，但是它也適用于獸醫(yī)治療，包括治療配對動物例如狗和貓，以及家畜例如馬、矮種馬、驢、騾、駱馬、羊駝、豬、牛和羊，或者動物園動物例如靈長類動物、貓科動物、犬科動物、?？苿游镆约坝刑泐悇游?。適宜的動物包括靈長目、嚙齒目、兔類、鯨類、食肉類、奇蹄類以及偶蹄類的成員。奇蹄類以及偶蹄類的成員由于其生物學上的相似性和經濟學上的重要性因而是特別優(yōu)選的。例如，偶蹄類動物包括大約150種分布于九大家族的生物物種豬(Suidae)、野豬(Tayassuidae)、河馬(Hippopotamidae)、駱駝(Camelidae)、麝鹿(Tragulidae)、長頸鹿和霍加皮(Giraffidae)、鹿(Cervidae)、叉角羚(Antilocapridae)和牛、綿羊、山羊以及羚羊(Bovidae)。這些動物中的很多種在不同國家均被用作飼養(yǎng)動物。更重要的是，其中很多經濟上重要的動物例如山羊、綿羊、牛和豬具有非常相似的生物學特性以及共有較高程度的基因同源性。奇蹄類動物包括馬和驢，它們在經濟上均是重要的并且彼此密切相關。實際上，眾所周知的是馬和驢都是異種交配的。本文所使用的術語“治療有效量”是指足以有效達到所需治療響應例如預防或治療神經病的本發(fā)明化合物的用量。具體而言，顯然“治療有效量”隨各種因素變化而改變，例如接受治療的具體病癥、患者的身體情況、接受治療的患者類型、治療的持續(xù)時間、協(xié)同治療的種類(如果需要的話)、以及所使用的具體配方和化合物及其衍生物的結構。本發(fā)明化合物還可以與其它藥物聯(lián)合使用而獲得有效的結合。這意味著包括與藥物活性劑的任意可化學配伍的聯(lián)合應用，只要這種合并不會消除式I或II化合物的活性。應該理解，本發(fā)明化合物與其它的藥物可以分開、連續(xù)或同時服用。其它藥物包括例如，如果病癥是與β-淀粉樣蛋白相關的病癥尤其是阿耳茨海默氏病，那么其它藥物可以是乙酰膽堿酯酶活性部位抑制劑，例如phenserine、加蘭他敏、或他克林；抗氧化劑，例如維生素E或維生素C；抗炎劑，例如任選被改良釋放出氧化氮的氟比洛芬或布洛芬(例如NCX-2216，由NicOx生產)或者雌激素劑例如17-β-雌二醇。用于制備藥物組合物的方法以及藥物載體是本領域所熟知的，參見教科書例如Remington′sPharmaceuticalSciences，第20版，Williams&amp;Wilkins，Pennsylvania，USA。本文所使用的“藥物載體”是指用于向患者遞送式I或II化合物的可藥用溶劑、助懸劑或賦形劑。載體可以是液體或固體，其根據(jù)所打算給藥的方式進行選擇。每種載體必須是可藥用的，也就是與組合物中的其它成分是配伍的并且對患者無害。式I或II化合物可以以含有常規(guī)非毒性可藥用載體、輔劑和賦形劑的劑量單元制劑進行口服、局部、或者腸胃外給藥。本文所使用的術語“腸胃外”包括皮下注射、施用至肺或鼻腔的氣霧劑、靜脈內、肌肉內、鞘內、顱骨內、注射或者灌注方法。本發(fā)明還提供了適用于本發(fā)明治療方案的新方法中的局部、口服和腸胃外藥物制劑。本發(fā)明化合物可以以片劑、水或油混懸劑、錠劑、藥片、散劑、顆粒劑、乳劑、膠囊劑、糖漿劑或酏劑的形式給藥。為了制造得到美味和可口的制劑，口服組合物可以含有一種或更多種選自甜味劑、調味劑、著色劑以及防腐劑的添加劑。適宜的甜味劑包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿司帕坦或糖精。適宜的崩解劑包括玉米淀粉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、黃原酸膠、膨潤土、褐藻酸或瓊脂。適宜的調味劑包括薄荷油、鹿蹄草油、櫻桃、柑橘或紅莓調味劑。適宜的防腐劑包括苯甲酸鈉、維生素E、α-生育酚、抗壞血酸、羥苯甲酸甲酯、羥苯甲酸丙酯或亞硫酸氫鈉。適宜的潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸、油酸鈉、氯化鈉或滑石。適宜的時間延遲劑包括單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。片劑含有與非毒性可藥用并且適合于制造片劑的賦形劑相混合的活性成分。這些賦形劑可以是例如，(1)惰性稀釋劑，如碳酸鈣、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；(2)制粒和崩解劑，例如玉米淀粉或褐藻酸；(3)粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯膠；以及(4)潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。這些片劑可以不包衣，也可以按照已知方法進行包衣以延遲在胃腸道中的崩解和吸收，從而獲得較長時間的持續(xù)作用。例如，可以使用時間延遲材料例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。為了制備用于控釋給藥的滲透性治療片劑，也可以按照美國專利號4,256,108、4,160,452和4,265,874中的方法進行包衣。對于體內給藥，式I或II化合物以及可用于本發(fā)明方法中的藥物活性劑可以通過注射或長時間逐漸灌注的方式獨立地或一起腸胃外給藥。給藥方式可以是靜脈內、動脈內、腹膜內、肌肉內、皮下、腔內、經皮或通過例如滲透泵進行灌注。對于體外研究，可以將這些藥物加入至或溶解于適宜的生物學上可接受的緩沖液中，然后再加入至細胞或組織中。腸胃外給藥制劑包括無菌水溶液劑或非水溶液劑、混懸劑和乳劑。非水溶劑的實例有丙二醇、聚乙二醇、植物油例如橄欖油、以及可注射的有機酯類例如油酸乙酯。水溶性載體包括水、醇/水溶液、乳液或懸浮液，包括鹽水和緩沖介質。腸胃外給藥介質包括氯化鈉溶液、Ringer′s右旋糖、右旋糖和氯化鈉，乳酸化的Ringer′s靜脈內介質包括液體和營養(yǎng)補充劑、電解質補充劑(例如那些基于Ringer′s右旋糖的補充劑)、等?？梢院蟹栏瘎┮约捌渌奶砑觿├缈咕鷦?、抗氧化劑、螯合劑、生長因子和惰性氣體等。通常，本文所使用的術語“治療”是指影響患者、組織或細胞以獲得所需藥理和/或生理效果。這樣的效果可以是預防性的，也就是完全或部分預防某種疾病或其病征或癥狀，和/或也可以是治療性的，也就是部分或完全治療某種疾病。本文所使用的“治療”覆蓋了任意一種治療、改善、或預防脊椎動物、哺乳動物尤其是人的疾病的方法，包括(a)預防某疾病在患者身上出現(xiàn)，該患者可能傾向于患上該疾病但并未確診已經患上這種疾?。?b)抑制疾病，也就是遏制其惡化；或者(c)減輕或改善疾病的影響，也就是使這種疾病的影響消退。本發(fā)明包括各種用于改善疾病的藥物組合物。制備根據(jù)本發(fā)明一實施方案的藥物組合物是通過利用載體、賦形劑和添加劑或者輔劑將式I或II化合物、其類似物、衍生物或鹽、或者式I或II的聯(lián)合物與一種或更多種藥物活性劑混合成適合于向患者施用的形式。經常使用的載體或輔劑包括碳酸鎂、二氧化鈦、乳糖、甘露醇以及其它的糖類、滑石、乳蛋白質、明膠、淀粉、維生素、纖維素及其衍生物、動物和植物油、聚乙二醇以及溶劑，例如無菌水、醇類、甘油和多羥基醇類。靜脈內給藥介質包括液體和營養(yǎng)補充劑。防腐劑包括抗菌劑、抗氧化劑、螯合劑和惰性氣體。其它可藥用載體包括水溶液、非毒性賦形劑，包括鹽類、防腐劑、緩沖液等，這些描述在例如Remington′sPharmaceuticalSciences，第20版.WilliamsandWilkins(2000)以及TheBritishNationalFormulary第43版(BritishMedicalAssociationandRoyalPharmaceuticalSocietyofGreatBritain，2002；http//bnf.rhn.net)中，其內容在此引入作為參考。藥物組合物的pH以及其中各種組分的精確濃度由本領域技術人員根據(jù)慣例進行調節(jié)。參見GoodmanandGilman′sThePharmacologicalBasisforTherapeutics(第7版，1985)。藥物組合物優(yōu)選以劑量單元的形式制備和服用。固體劑量單元可以是片劑、膠囊劑和栓劑。為了滿足患者的治療，根據(jù)化合物活性、給藥方式、疾病性質和嚴重程度、患者年齡和體重可以使用不同的日劑量。當然在某些情形中，較高或較低的日劑量都是適宜的。日劑量的服用既可以以分開式劑量單元或數(shù)個更低的劑量單元形式進行，也可以在特定時間間隔內多次服用再次細分的劑量。本發(fā)明的藥物組合物可以按照治療有效的劑量局部或全身給藥。當然，該應用中的有效用量取決于疾病的嚴重程度以及患者的體重和一般狀態(tài)。典型地，在體外所使用的劑量可以在用于原地施用藥物組合物的用量方面提供有用的指導，可以利用動物模型確定用于細胞毒素副作用治療的有效劑量。各種考慮因素描述在例如Langer，Science，2491527，(1990)中。口服制劑可以為硬明膠膠囊劑的形式，其中將活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合。它們也可以為軟明膠膠囊劑的形式，其中將活性成分與水或油性介質例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。含水混懸劑通常含有與適合于制造含水混懸劑的賦形劑相混合的活性物質。這類賦形劑可以是(1)助懸劑例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯樹膠；(2)分散劑或潤濕劑，其可以是(a)天然存在的磷脂例如卵磷脂；(b)環(huán)氧烷烴和脂肪酸的縮合產物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯；(c)環(huán)氧乙烷和長鏈脂肪醇的縮合產物，例如十七碳烷環(huán)氧乙烷基十六烷醇(heptadecaethylenoxycetanol)；(d)環(huán)氧乙烷和由脂肪酸與己糖醇衍生而來的偏酯的縮合產物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯；或者(e)環(huán)氧乙烷和由脂肪酸與己糖醇酸酐衍生而來的偏酯的縮合產物，例如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。藥物組合物可以是無菌可注射含水或油質混懸劑。該混懸劑可以根據(jù)已知方法利用適宜的上文提及的分散劑或潤濕劑以及助懸劑進行制備。無菌可注射制劑還可以是溶于非毒性可腸胃外給藥的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液劑或混懸劑，例如是溶于1，3-丁二醇中的溶液劑。在可以使用的介質和溶劑中，有水、Ringer′s溶液、等張氯化鈉溶液。此外，通常還使用無菌的不揮發(fā)性油作為溶劑或助懸介質。為了達到該目的，可以使用任意一種刺激性小的不揮發(fā)性油，包括合成的甘油單酯或二酯。另外，脂肪酸例如油酸也可用于制備注射劑。式I或II化合物還可以以脂質體遞藥系統(tǒng)的形式給藥，例如小單層泡囊、大單層泡囊、以及多層泡囊。脂質體可以由各種各樣的磷脂例如膽固醇、硬脂酰胺、或磷酸卵磷酯形成。式I或II化合物還可以以獸藥組合物的形式使用，它可以通過本領域常規(guī)方法制備。這種獸藥組合物的實例包括那些適合于下述目的的組合物(a)口服給藥、外用，例如獸用頓服藥(drenches)(如含水或非水溶液劑或混懸劑)；片劑或大丸藥；用于與飼料原料混合的散劑、顆粒劑或者小丸；敷貼到舌頭上的糊劑；(b)腸胃外給藥例如皮下、肌肉內或靜脈內注射，例如為無菌溶液劑或混懸劑；或者(如果適宜的話)通過乳房內注射，其中將混懸劑或溶液劑通過奶頭引入至乳房中；(c)局部應用，例如應用到皮膚上的霜劑、軟膏劑或噴劑；或者(d)陰道內給藥，例如為陰道栓劑、霜劑或泡沫。本發(fā)明式I或II化合物在正常情況下的劑量范圍為每天每千克體重大約0.5mg至大約20mg，優(yōu)選劑量范圍為每天每千克體重大約0.5mg至大約10mg(每天每個患者大約0.5gms至大約3gms)。可以與載體材料合并得到單劑量的活性成分的用量取決于所治療的寄主以及具體的給藥方式。例如，人用口服制劑可以含有大約5mg至1g活性化合物以及適當、常見用量的載體材料，載體材料的用量可以為全部組合物的大約5-95％。劑量單元形式通常含有大約5mg至500mg的活性成分。本發(fā)明化合物可以任選地按照分開式劑量時間表進行給藥，只要在該時間表中總共至少有兩次給藥。優(yōu)選至少每隔2小時至4小時或者更長時間給藥；例如可以每隔1小時或半小時服用一次該化合物。在一優(yōu)選實施方案中，分開式劑量給藥方案包括在從第一次給藥起足夠長一段時間間隔后將本發(fā)明化合物進行第二次給藥，該時間間隔足以使得血液中的活性化合物含量降低至第一次給藥后所達到最大血漿濃度的大約5-30％，從而維持活性劑在血液中的有效含量。任選地，可以在從前次給藥起相應的時間間隔后連續(xù)進行1次或更多次給藥，優(yōu)選在當血漿含量降低至前次給藥后即時最大含量的10-50％的時候。然而應該理解，針對于任意一個特定患者而言，其具體劑量水平將取決于各種各樣的因素，包括所使用具體化合物的活性、年齡、體重、健康狀況、性別、飲食情況、給藥時間、給藥方式、代謝速率、聯(lián)用藥物以及所接受治療具體疾病的嚴重程度。附圖簡述圖1為示出了由轉基因鼠大腦中獲得然后用PBT1和PBT1038處理的可溶性和不溶性Aβ部分的含量的散點圖[按照測定11中的方法]；圖2為示出了由轉基因鼠大腦中獲得然后用PBT1033和PBT1051處理的可溶性和不溶性Aβ部分的含量的散點圖[按照測定11中的方法]；圖3為示出了由轉基因鼠大腦中獲得然后用PBT1052處理的可溶性和不溶性Aβ部分的含量的散點圖[按照測定11中的方法]；圖4(a)為示出了在IV(2mg/Kg)之后向小鼠經口給藥PBT1033(30mg/Kg)的劑量標準化血漿濃度的圖表；圖4(b)為示出了在IV(2mg/Kg)之后向小鼠經口給藥PBT1038(30mg/Kg)的劑量標準化血漿濃度的圖表；圖4(c)為示出了在IV(2mg/Kg)之后向小鼠經口給藥PBT1050(30mg/Kg)的劑量標準化血漿濃度的圖表；圖4(d)為示出了在IV(2mg/Kg)之后向小鼠經口給藥PBT1051(30mg/Kg)的劑量標準化血漿濃度的圖表；圖5為總結CQ(PBT1)、PBT1033、PBT1038、PBT1051以及PBT1052對于轉基因鼠大腦中的可溶性和不溶性Aβ的效果的圖表[按照測定11中的方法]；圖6為示出了PBT1033、PBT1038、PBT1051和PBT1052對于富含于轉基因鼠大腦中的淀粉樣蛋白斑的免疫組織化學圖表[按照測定15中的方法]；圖7為接受研究患者的流程圖；圖8為示出了由基線開始起一段時間內認知能力在(A)兩組CQ對照安慰劑以及(B)中的平均變化(±SE)(利用ADAS-cog評估)的圖表，在治療組范圍內根據(jù)影響的嚴重程度進行劃分[輕度影響(ADAS-cog＜25)、重度影響(ADAS-cog≥25)(*p≤0.05；**p≤0.01)；圖9為示出了由基線開始一段時間內血漿Aβ42含量在(A)CQ對照安慰劑組以及(B)中的平均變化(±SE)的圖表，根據(jù)如圖8所示的影響嚴重程度進行劃分(***p≤0.001)；圖10為示出了由基線開始一段時間內(A)血漿Zn、(B)血漿Cu在兩組CQ對照安慰劑中的平均變化(±SE)的圖表；以及圖11為示出了AD過程中在行為(ADAS-cog)和生物化學(血漿/CSFAβ)水平方面的相對變化的圖表。實施例下面將僅僅參照下述非限制性實施例對本發(fā)明進行詳細描述。概要根據(jù)有關文獻制備得到8-羥基喹啉-2-羧酸1(Shrader等人，1988)、8-羥基喹啉-2-腈2(Shrader等人，1988)、2-氯-8-羥基喹啉3(Wang等人，1996；Fleming等人，1971)、2-氨基甲基噻唑4(Dondoni等人，1987，1996)、2，5，7-三氯-8-羥基喹啉10(Ostrovskaya等人，1986)、5，7-二氯-8-芐氧基-喹啉-2-羧酸18(Carissimi，M.，1972)、7-氯-5-碘-8-羥基喹啉20(Gershon等人，1971)、4-氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸乙酯25(Richard等人，1997)以及1-甲基-1H-組胺鹽酸鹽(Durant等人，1976)。下述化合物/試劑由商購得到喹啉類2-甲基-喹啉-8-醇、8-羥基-喹啉(8-HQ)和5，7-二溴-8-羥基-喹啉購自Fluka；4，8-二羥基-喹啉-2-羧酸、5-氯-7-碘-8-羥基-喹啉、5，7-二氯-2-甲基-喹啉-8-醇和5，7-二碘-8-羥基喹啉購自Aldrich；胺類組胺、2-氨基乙基吡啶、2-氨基噻唑、2-(2-氨基乙基)吡啶、2-(氨基甲基)吡啶、5-甲基-2-氨基噻唑、2-氨基苯酚、1，2-二氨基乙烷、甘氨酸、1，2-苯二胺、二-(2-吡啶甲基)胺以及2-(2-甲基氨基乙基)吡啶均購自Aldrich；醛類4-咪唑甲醛、2-噻唑甲醛和2-吡啶甲醛均購自Aldrich；唑類吡唑、咪唑、甲基咪唑和1H-1，2，3-三唑均購自Aldrich；硼酸類2-(三氟甲基)苯基硼酸、2-甲氧基苯基硼酸、鄰甲苯基硼酸、2-氟苯基硼酸、3-甲氧基苯基硼酸、4-甲氧基苯基硼酸、間甲苯基硼酸、4-(二甲基氨基)苯基硼酸、2-甲?；交鹚?、硫茚-2-硼酸、3，5-二氟苯基硼酸、2，4-二氟苯基硼酸、3-噻吩硼酸、3-氟苯基硼酸、4-氟苯基硼酸以及3-硝基苯基硼酸均購自Aldrich；以及有機鋅試劑2-吡啶基鋅溴化物、2-(甲硫基)苯基鋅碘化物、2-(乙氧基羰基)苯基鋅碘化物和6-甲基吡啶基鋅溴化物(0.5M的THF溶液)可商購得到(Aldrich)。3-吡啶基硼酸購自FrontierScientific。溶劑為分析純并儲備使用。THF由鈉和苯甲酮在氬氣在蒸餾得到。除非另有說明，1HNMR譜(δ，相對于TMS)在VarianUnity300分光計上記錄；J值以赫茲為單位給出。質譜數(shù)據(jù)在MicromassQuattroII質譜儀上記錄。實施例1-8-羥基-喹啉-2-羧酸酰胺的制備(流程圖1)R1＝H，OHR1＝HA1-A10R1＝OHB1-B6流程圖1步驟A將1，3-二環(huán)己基碳二亞胺(182mg，0.87mmol)加入至攪拌的1-羥基苯并三唑水合物(119mg，0.87mmol)和8-羥基-喹啉-2-羧酸1(150mg，0.87mmol)的DMF和二氯甲烷(1∶1，10mL)溶液中。30分鐘后，加入組胺(182mg，0.87mmol)，混合物在室溫下繼續(xù)攪拌16小時。然后真空除去揮發(fā)物，殘存的殘余物通過硅膠柱色譜純化(乙酸乙酯/i-PrOH/2NNH4OH，6∶2∶1)后，得到為奶油色固體的8-羥基-喹啉-2-羧酸[2-(1H-咪唑-4-基)-乙基]-酰胺A1。重復上述反應，利用胺類和1或4，8-二羥基-喹啉-2-羧酸組胺得到B1；2-(2-氨基乙基)吡啶得到A2，2-(氨基甲基)吡啶得到A5/B2，2-氨基噻唑得到A3，5-甲基-2-氨基噻唑得到A4，2-氨基苯酚得到A6，1，2-二氨基乙烷得到A7，甘氨酸得到A8/B3，1，2-苯二胺得到B4以及二-(2-吡啶甲基)胺得到A10。利用A8作為起始酸，與胺2-(氨基甲基)吡啶偶聯(lián)得到B5，與組胺偶聯(lián)得到B6。產率和有關數(shù)據(jù)在表1中給出。步驟B將8-羥基-喹啉-2-羧酸1(100mg，0.59mmol)或4，8-二羥基喹啉-2-羧酸(121mg，0.59mmol)和氯化氧磷(5mL)加熱回流1小時，冷卻并濃縮。向殘余物中加入THF(20mL)，混合物冷卻(0℃)后加入Et3N(0.5mL)和上述胺(1.18mmol)?；旌衔餃責嶂潦覝?。16小時后，真空除去揮發(fā)物，所得到的殘余物通過硅膠柱色譜處理之后得到8-羥基-喹啉-2-羧酸酰胺。產率和有關數(shù)據(jù)在表1中給出。實施例2-2-乙?；?8-羥基-喹啉C1的制備(流程圖2)流程圖2在-15℃下，將甲基鎂溴化物(1.2mL3M的二乙基醚溶液，3.5mmol)逐滴加入攪拌的8-羥基喹啉-2-腈2(100mg，0.588mmol)的二乙基醚(10mL)溶液中。所得到的溶液在2小時內溫熱至室溫，室溫下繼續(xù)攪拌4小時。然后反應混合物用飽和NH4Cl猝滅，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。合并萃取液，干燥(Na2SO4)并濃縮，得到為淺橙色固體的標題化合物(108mg，98％)C1。該化合物的波譜數(shù)據(jù)在表1中給出。實施例3-8-羥基-喹啉-2-甲醛肟D1的制備(流程圖3)流程圖3在50-55℃下，將2-甲基-喹啉-8-醇(536mg，3.37mmol)的二噁烷(8mL)溶液在3小時內逐滴加入至攪拌的SeO2(665mg，5.99mmol)的二噁烷(25mL)混合物中。然后所得到的混合物在80℃下加熱16小時，冷卻，過量除去固體。濃縮濾液，殘余物通過硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/MeOH，1∶0-40∶1)。得到為淡黃色固體的8-羥基-喹啉-2-甲醛4(358mg，61％)。41HNMR(CDCl3)δ10.24(s，1H)，8.34(d，J＝8.6，1H)，8.22(br，1H)，8.07(d，J＝8.6，1H)，7.64(dd，J＝7.5和8.0，1H)，7.44(d，J＝8.0，1H)，7.30(d，J＝7.5，1H)。將含有4(100mg，0.578mmol)、NaOAc(63mg，mmol)、羥胺鹽酸鹽(60mg，0.863mmol)和水(5mL)的混合物在100℃下加熱15分鐘。沉淀通過過濾分離。得到為灰白色固體的標題肟(ID969)D1(87mg，80％)；該化合物的波譜數(shù)據(jù)如表2所示。實施例4-2-氨基甲基-喹啉-8-醇E1(流程圖4)流程圖4將8-羥基-喹啉-2-甲醛肟D1(167mg，0.888mmol)和MeOH(50mL)在室溫下的氫解條件下(H2氣氛，催化劑10％Pd/碳)處理。4小時后，過濾除去催化劑，除去揮發(fā)物，得到為淺棕色固體的2-氨基甲基-喹啉-8-醇E1(126mg，82％)；該化合物的波譜數(shù)據(jù)在表2中給出。N-(8-羥基-喹啉-2-基甲基)-胍E3(流程圖4)將N，N’-雙(叔丁氧羰基)-1H-吡唑-1-碳脒(54mg，0.174mmol)加入至攪拌的2-氨基甲基-喹啉-8-醇E1(25mg，0.144mmol)的THF(5mL)混合物中。置于室溫下16小時后，真空除去揮發(fā)物，殘余物經硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶2)處理后的得到為無色固體的N-(8-羥基-喹啉-2-基甲基)-胍的(Boc)2-衍生物(52mg，87％)。然后將該固體(47mg，0.113mmol)和濃鹽酸(0.5mL)的二噁烷(1mL)溶液在室溫下攪拌16小時，濃縮。加入H2O(2mL)，調節(jié)pH至8(濃NH4OH)，混合物濃縮。固體溶解于MeOH中，溶液用乙酸乙酯研碎。過濾除去所得到的固體，濃縮濾液得到固體。后者經硅膠柱色譜(乙酸乙酯/i-PrOH/H2O，12∶4∶1)，得到為灰白色固體的標題化合物E3(23mg，94％)；波譜數(shù)據(jù)在表2中給出。2-乙酰氨基甲基-喹啉-8-醇E2(流程圖4)將2-氨基甲基-喹啉-8-醇E1(30mg，0.172mmol)和Ac2O(1mL)在吡啶(2mL)中的溶液在室溫下攪拌過夜并濃縮。然后經硅膠柱色譜(乙酸乙酯)處理，得到為無色固體的2-乙酰氨基-8-乙酰氧基-喹啉(35mg，79％)。2-乙酰氨基-8-乙酰氧基-喹啉(33mg，0.128mmol)和K2CO3(50mg，0.362mmol)的MeOH(1mL)和H2O(0.5mL)溶液在室溫下攪拌16小時。真空除去揮發(fā)物并加入H2O(2mL)。混合物的pH調節(jié)至7(2NHCl)，固體通過過濾分離，用H2O(1mL×2)洗滌并干燥。分離得到為奶油色固體的標題化合物E2(21mg，76％)；波譜數(shù)據(jù)在表2中給出。實施例5-8-羥基喹啉-2-甲醛的還原性胺化(流程圖5)流程圖5將三乙酰氧基硼氫化鈉(225mg，1.061mmol)加入至攪拌的8-羥基-喹啉-2-甲醛4(200mg，1.156mmol)和組胺(128mg，1.152mmol)的二氯乙烷(10mL)溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6小時，中和(NaHCO3水溶液)，濃縮。所得到的殘余物經硅膠柱色譜處理(乙酸乙酯/i-PrOH/2NNH4OH，6∶2∶1)，得到為淺黃色固體的2-{[2-(1H-咪唑-4-基)-乙氨基]-甲基}-喹啉-8-醇F1(190mg，61％)。重復上述方法，利用其它的胺2-(氨基甲基)吡啶得到F2，2-(2-甲基氨基乙基)吡啶得到F3，數(shù)據(jù)在表2中給出。實施例6-使用實施例5的胺進行還原性胺化(流程圖6)F1和F2F1得到G1-G3F2得到H1-H3流程圖6接著實施例5的步驟，當用F1(G系列)或F2(H系列)處理時，醛2-咪唑甲醛得到G1/H1，2-吡啶甲醛得到G2/H2以及2-噻唑甲醛得到H3。結果和波譜數(shù)據(jù)在表2中給出。實施例7-2-(吡咯)-8-羥基喹啉I1-I4(流程圖7)流程圖7將2-氯-喹啉-8-醇3(80mg，0.447mmol)和吡唑(152mg，2.233mmol)在175℃下于鋼制高壓釜中加熱48小時。然后粗產物通過硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶1)純化，得到為白色固體的2-吡唑-1-基-喹啉-8-醇(化合物ID964)I1(68mg，72％)。重復上述步驟，利用咪唑、2-甲基咪唑和1H-1，2，3-三唑得到I2、I3和I4。I4的粗產物用MeOH(10mL×3)洗滌，得到為灰白色固體的2-[1，2，3]三唑-1-基-喹啉-8-醇(化合物ID994)I4(67mg，71％)。這些產物的波譜數(shù)據(jù)在表3中給出。實施例8-5-氯-7-芳基-8-羥基喹啉K1-K17的制備(流程圖8)流程圖8將2-溴丙烷(0.46mL，4.90mmol)加入攪拌的5-氯-7-碘-喹啉-8-醇(1.00g，3.27mmol)、K2CO3(1.86g，13.5mmol)以及DMSO(10mL)的混合物中。置于室溫下16小時后，加入飽和NH4Cl(10mL)，混合物用二氯甲烷(10mL×3)萃取。合并萃取液并濃縮。向殘余物中加入二乙基醚(40mL)，所得到的混合物連續(xù)用2NNaOH、H2O和鹽水洗滌，并干燥(Na2SO4)。然后經硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶1)處理，得到為固體的5-氯-7-碘-8-異丙氧基-喹啉5(1.06g，93％)。51HNMR(CDCl3)δ8.93(dd，J＝1.5和4.2，1H)，8.52(dd，J＝1.5和8.4，1H)，7.98(s，1H)，7.53(dd，J＝4.2和8.4，1H)，5.38(m，1H)，1.43(d，J＝6.0，6H)。在氬氣保護下，向攪拌的含有5-氯-7-碘-8-異丙氧基-喹啉5(200mg，0.58mmol)、苯基硼酸(77mg，0.62mmol)、2NNa2CO3(7.2mL)、EtOH(1.2mL)和苯(6mL)的混合物中加入Pd(PPh3)4(20mg)?；旌衔镌诨亓飨聰嚢?6小時，冷卻并濃縮。其經硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶9)處理后，得到為黃色固體的5-氯-7-苯基-8-異丙氧基-喹啉。在-78℃下，向攪拌的8-異丙氧基-喹啉(0.339mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入BCl3(1.36mL1M的二氯甲烷溶液，1.36mmol)。2小時后，反應混合物溫熱至室溫，繼續(xù)攪拌2小時。加入MeOH(5mL)，混合物濃縮至干。重復上述步驟4次。殘留的殘余物再用二乙基醚(2mL×3)洗滌，得到K1，產率為91％。數(shù)據(jù)在表4中給出。按照類似的方式，使用硼酸2-(三氟甲基)苯基硼酸、2-甲氧基苯基硼酸(注釋裂解得到2-羥基苯基衍生物)、鄰甲苯基硼酸、2-氟苯基硼酸、3-甲氧基苯基硼酸、4-甲氧基苯基硼酸、間甲苯基硼酸、4-(二甲基氨基)苯基硼酸、2-甲酰基苯基硼酸、硫茚-2-硼酸、3，5-二氟苯基硼酸、2，4-二氟苯基硼酸、3-噻吩硼酸、3-氟苯基硼酸、4-氟苯基硼酸以及3-硝基苯基硼酸與5反應；然后用BCl3進行異丙氧基裂解得到5-氯-7-芳基-8-羥基喹啉K2-K17。數(shù)據(jù)在表4中給出。實施例9-5-芳基-7-溴-8-羥基喹啉L1-L2的制備(流程圖9)流程圖9根據(jù)實施例8中描述的方法，將5，7-二溴-喹啉-8-醇與2-溴丙烷反應得到5，7-二溴-8-異丙氧基-喹啉6(97％)1HNMR(CDCl3)δ8.94(dd，J＝1.5和4.2，1H)，8.48(dd，J＝1.5和8.4，1H)，8.00(s，1H)，7.52(dd，J＝4.2和8.4，1H)，5.22(m，1H)，1.43(d，J＝6.1，6H)；質譜m/z344，346，348(M++1，分別為50、100和50％)。將6與芳基硼酸反應，然后根據(jù)實施例8中概述的方法裂解除去異丙氧基，得到化合物L1和L2(數(shù)據(jù)在表4中給出)。實施例10-5，7-二芳基-8-羥基喹啉M1-M5和5-芳基-7-碘-8-羥基喹啉N2-N5的制備(流程圖10)流程圖10根據(jù)實施例8中描述的方法，將5，7-二碘-喹啉-8-醇與2-溴丙烷反應得到5，7-二溴-8-異丙氧基-喹啉7(93％)1HNMR(CDCl3)δ8.86(dd，J＝1.5和4.4，1H)，8.46(s，1H)，8.33(dd，J＝1.5和8.5，1H)，7.49(dd，J＝4.4和8.5，1H)，5.40(m，1H)，1.43(d，J＝6.1，6H)。在氬氣保護下，向攪拌的含有7(200mg，0.51mmol)、苯基硼酸(143mg，1.17mmol)、2NNa2CO3(7.2mL)、EtOH(1.2mL)和苯(6mL)的混合物中加入Pd(PPh3)4(21mg)?；旌衔镌诨亓飨录訜?6小時，冷卻并濃縮。其經硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶9)處理后，得到為黃色固體的5，7-二苯基-8-異丙氧基-喹啉(157mg，91％)。根據(jù)實施例8中概述的方法裂解除去異丙氧基，得到5，7-二苯基-8-羥基-喹啉M1，產率為91％。(數(shù)據(jù)參見表4)。將7與芳基硼酸反應，然后根據(jù)實施例8中概述的方法裂解除去異丙氧基，得到化合物M2-M5(數(shù)據(jù)在表4中給出)。在其中硼酸含有鄰位取代基的情形中，Suzuki反應得到含有5-芳基-7-碘-8-異丙氧基喹啉和5，7-二芳基-8-異丙氧基喹啉的混合物，其在異丙氧基裂解之前分離可以同時得到5-芳基-7-碘-8-羥基喹啉N2-N5和5，7-二芳基-8-羥基喹啉M2-M5。實施例11-5，5’-二氯-8，8’-二羥基-7，7’-二喹啉O1的制備(流程圖11)流程圖11在80℃下，將5(0.576mmol)、雙(頻哪子基pinacolato)二硼烷(1.1當量)、2NNa2CO3(2mL)和KOAc(3當量)的溶液在催化用量的PdCl2(dppf)存在下于DMF(10mL)中攪拌3小時。然后反應混合物用飽和NH4Cl猝滅，用二乙基醚(10mL×3)萃取，干燥(Na2SO4)并濃縮。所得到的殘余物經柱色譜(二氧化硅；乙酸乙酯/己烷，1∶1)處理，得到為固體的5，5’-二氯-8，8’-二異丙氧基-7，7’-二喹啉(化合物ID971)(56mg，22％)。根據(jù)實施例8中概述的方法，使用BCl3裂解除去異丙氧基得到O1，產率為22％。實施例12-2-芳基-8-羥基喹啉P1-P4的制備(流程圖12)流程圖122-碘-喹啉-8-醇8在室溫下，將乙酰氯(0.422mL，5.95mmol)在20分鐘內逐滴加入攪拌的2-氯-喹啉-8-醇3(500mg，2.79mmol)、NaI(649mg，4.33mmol)和AcCN(3mL)的漿狀物中。5然后混合物在35-40℃下攪拌3小時，再在70℃過夜。加入H2O(10mL)，混合物用二氯甲烷(10mL×3)萃取。合并萃取液，連續(xù)用飽和NaHCO3和硫代硫酸鈉的1∶1溶液(5mL×2)、H2O(10mL×2)洗滌，干燥(Na2SO4)。所得到的殘余物除去溶劑后再經硅膠柱色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶8-1∶3)處理后，得到為白色固體的2-碘-喹啉-8-醇8(268mg，35％)以及含有8-乙酰氧基-2-碘-喹啉和8-乙酰氧基-2-氯-喹啉的1∶2不可分離的混合物(360mg)。81HNMR(CDCl3)δ7.80-7.77(m，2H)，7.49(dd，J＝8.1和8.1，1H)，7.73(d，J＝8.1，1H)，7.21(d，J＝8.1，1H)，1.77(br，1H)；質譜m/z272(M++1，100％)。2-(吡啶-2-基)-8-羥基喹啉M1根據(jù)實施例8中描述的方法，將2-碘-喹啉-8-醇8與2-溴丙烷反應得到2-碘-8-異丙氧基喹啉9，產率為84％。91HNMR(CDCl3)δ7.75-7.67(m，2H)，7.45(dd，J＝7.0和8.0，1H)，7.33(dd，J＝1.2和8.0，1H)，7.12(dd，J＝1.2和7.0，1H)，4.80(m，1H)，1.49(d，J＝5.9，6H)。在氬氣氛下、于室溫向攪拌的9(29mg，0.093mmol)和PdCl2(PPh3)2(5mg)的THF(2.5mL)溶液中在5分鐘內滴加2-吡啶基溴化鋅(0.370mL0.5M的THF溶液，0.185mmol)。2小時后，加入飽和NH4Cl(5mL)，混合物用二氯甲烷(10mL×3)萃取。合并的萃取液用H2O(10mL)和鹽水(10mL)洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。然后經硅膠柱色譜(二氯甲烷/MeOH，19∶1)處理，得到為黃色固體的2-(吡啶-2-基)-8-異丙氧基喹啉。根據(jù)實施例8中的步驟，該異丙基醚裂解得到2-(吡啶-2-基)-8-羥基喹啉P1(22mg，89％)(數(shù)據(jù)在表5中給出)。重復該反應，利用2-(甲硫基)苯基碘化鋅、2-(乙氧基羰基)苯基碘化鋅和6-甲基吡啶基溴化鋅得到P2、P3和P4。波譜數(shù)據(jù)列表給出(表5)。實施例13-5，7-二氯-2-甲基氨基-8-羥基喹啉(PBT1047)和5，7-二氯-2-(甲基-吡啶-2-基-氨基)-喹啉-8-醇(PBT1056)的制備(流程圖13)流程圖135，7-二氯-2-甲基氨基-8-羥基喹啉(PBT1047)將2，5，7-三氯-8-羥基喹啉10(200mg，0.805mmol)以及甲基胺的乙醇(12mL的33％溶液)溶液在密封容器中于90℃下加熱26小時，冷卻。然后通過過濾分離沉淀，用二乙基醚洗滌。得到為淺黃色固體的純5，7-二氯-2-甲基氨基-8-羥基喹啉(PBT1047)(186mg，95％)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.80(br，1H)，7.98(d，J＝9.1，1H)，7.48(br，1H)，7.25(s，1H)，6.90(d，J＝9.1，1H)，2.98(d，J＝4.8，3H)；質譜m/z243，245(M++1，分別為100和66％)。5，7-二氯-8-羥基-2-(甲基-吡啶-2-基-氨基)-喹啉(PBT1056)將5，7-二氯-2-甲基氨基-8-羥基喹啉(1.02g，4.21mmol)、無水碳酸鉀(2.4g)和2-溴丙烷(0.6mL)的二甲亞砜(10mL)溶液在室溫下攪拌2天。加入飽和氯化銨溶液，混合物用二氯甲烷(30mL×3)萃取。合并萃取液，干燥并濃縮。殘余物經柱色譜(硅膠，二氯甲烷)處理后得到為灰白色固體的5，7-二氯-2-甲基氨基-8-異丙氧基-喹啉11(938mg，78％)。1HNMR(CDCl3)δ8.13(d，J＝9.0，1H)，7.28(s，1H)，6.69(d，J＝9.0，1H)，5.10(m，1H)，4.90(br，1H)，3.11(d，J＝5.0，3H)，1.43(s，3H)，1.41(s，3H)。在氬氣氛下，向5，7-二氯-2-甲基氨基-8-異丙氧基-喹啉11(200mg，0.701mmol)、外消旋BINAP(17.5mg，4mol％)、Pd2(dba)3(12.8mg，2mol％)和叔丁醇鈉(78.6mg，0.818mmol)的無水甲苯(10mL)溶液中加入2-溴吡啶(0.056mL，0.584mmol)。然后所得到的橙棕色溶液在80℃下加熱3小時。加入更多的2-溴吡啶(0.010mL，0.104mmol)，恢復加熱再持續(xù)2小時。反應混合物用飽和氯化銨猝滅，用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并萃取液，干燥并濃縮。殘余物經柱色譜(硅膠，二氯甲烷/甲醇(1∶0-100∶1)處理后得到為灰白色固體的5，7-二氯-8-異丙氧基-2-(甲基-吡啶-2-基-氨基)-喹啉12(175mg，69％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ8.47(dd，J＝1.7和5.0，1H)，8.21(d，J＝9.3，1H)，7.72(m，1H)，7.40(s，1H)，7.32(m，2H)，7.09(dd，J＝5.0和7.0，1H)，5.14(m，1H)，3.80(s，3H)，1.41(s，3H)，1.40(s，3H)。根據(jù)實施例8中的步驟，用三氯化硼裂解該異丙基醚12(171mg，0.472mmol)再經甲醇處理后得到為鹽酸鹽的5，7-二氯-8-羥基-2-(甲基-吡啶-2-基-氨基)-喹啉(170mg)。加入水(10mL)，使用飽和NaHCO3調節(jié)混合物的pH至8。然后固體通過過濾分離。然后經柱色譜(硅膠，二氯甲烷/甲醇(9∶1))處理得到為灰白色固體的標題化合物(PBT1056)(140mg，93％)。1HNMR(CD3OD，400MHz)δ8.43(dd，J＝2.0和5.0，1H)，8.18(d，J＝9.4，1H)，7.89(ddd，J＝2.0，8.0和8.0，1H)，7.41(d，J＝8.0，1H)，7.35(s，1H)，7.27(d，J＝9.4，1H)，7.25(dd，J＝5.0和8.0，1H)，3.75(s，3H)。實施例14-5，7-二氯-8-羥基-2-(2-吡啶基)喹啉的制備(流程圖14)流程圖14將2，5，7-三氯-8-羥基喹啉10(1.14g，4.61mmol)、2-溴丙烷(1.10mL，11.5mmol)和無水碳酸鉀(1.56g，11.5mmol)的DMF(15mL)混合物在60℃下加熱過夜。然后混合物傾入水中，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并萃取液，干燥。除去溶劑得到棕色油狀物(3.15g)。然后經柱色譜(硅膠，乙酸乙酯/己烷(1∶9))處理得到為白色固體的2，5，7-三氯-8-異丙氧基-喹啉13(1.15g，87％)，m.p.83-85℃。1HNMR(CDCl3，200MHz)δ8.43(d，J＝10，1H)，7.64(s，1H)，7.45(d，J＝10，1H)，5.15(m，1H)，1.46(s，3H)，1.42(s，3H)。將2，5，7-三氯-8-異丙氧基-喹啉13(5.93g，20.5mmol)、碘化鈉(12.3g，82mmol)和乙酰氯(1.4mL，20mmol)的乙腈(30mL)混合物加熱回流過夜。然后混合物傾入水中，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。合并的萃取液用10％硫代硫酸鈉溶液、水、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮得到橙色固體(6.9g)。經柱色譜(硅膠，乙酸乙酯/己烷(1∶19))純化得到為白色固體的碘化物，5，7-二氯-2-碘-8-異丙氧基-喹啉14(4.57g，58％)，m.p.97-99℃。1HNMR(CDCl3，200MHz)δ8.05(d，J＝8.6，1H)，7.80(d，J＝8.6，1H)，7.62(s，1H)，5.02(m，1H)，1.45(s，3H)，1.42(s，3H)。在氮氣氛下、于室溫將氯化鈀雙(三苯基膦)(362mg，0.51mmol)加入至攪拌的5，7-二氯-2-碘-8-異丙氧基-喹啉14(2.80g，7.35mmol)的無水THF(150mL)溶液中。然后在15分鐘內逐滴加入2-吡啶基溴化鋅(29.4mL0.5M的THF溶液，14.7mmol)，混合物在室溫下攪拌2小時。加入飽和氯化銨，混合物用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并的萃取液干燥并濃縮。殘余物經柱色譜(硅膠，乙酸乙酯/己烷(1∶9))處理后得到為白色固體的5，7-二氯-8-異丙氧基-2-(2-吡啶基)喹啉15(1.83g，75％)，m.p.112-114℃。1HNMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.78-8.58(m，4H)，7.85(m，1H)，7.64(s，1H)，7.39(m，1H)，5.25(m，1H)，1.52(s，3H)，1.50(s，3H)。在氮氣氛下、于0℃將三氯化硼(27mL1M的二氯甲烷溶液，27.6mmol)逐滴加入至5，7-二氯-8-異丙氧基-2-(2-吡啶基)喹啉15(1.83g，5.51mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中。混合物在0℃下攪拌1小時，然后溫熱至室溫。24小時后，仍然存在部分起始原料(通過TLC分析)。加入更多的三氯化硼(14mL)，恢復攪拌持續(xù)4小時。反應用甲醇(10mL)猝滅，真空除去揮發(fā)物。重復上述步驟直到殘余物達到恒重。得到為鹽酸鹽的5，7-二氯-8-羥基-2-(2-吡啶基)喹啉。然后將該鹽酸鹽(1.68g)和水(20mL)用飽和碳酸氫鈉處理直到溶液pH為8?；旌衔镉靡宜嵋阴?30mL×3)萃取并干燥。除去溶劑后所得到的殘余物用甲醇洗滌。其得到為灰白色固體的5，7-二氯-8-羥基-2-(2-吡啶基)喹啉(PBT1052)(1.25g，78％)，m.p.＞230℃。1HNMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.8(br，1H)，9.21(d，J＝9，1H)，8.30-8.62(m，3H)，8.12(m，1H)，7.88(s，1H)，7.62(m，1H)。實施例15-5，7-二氯-2-二甲基氨基甲基-喹啉-8-醇鹽酸鹽(PBT1033)的制備(流程圖15)流程圖155，7-二氯-8-羥基喹啉-2-甲醛17在50-55℃下，將5，7-二氯-2-甲基-喹啉-8-醇16(1.5g，6.58mmol)的1，4-二噁烷(20mL)溶液在3小時內逐滴加入至攪拌的二氧化硒(1.3g，11.72mmol)的1，4-二噁烷(60mL)懸浮液中。然后所得到的混合物在80℃下加熱過夜，冷卻，過濾除去固體(硅藻土)。濃縮濾液，殘余物用二乙基醚(10mL×3)洗滌后得到為黃色固體的17(定量產率)。該物質在接下來的步驟中直接使用不再純化。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ10.26(s，1H)，8.69(d，J＝8.8，1H)，8.37(br，1H)，8.17(d，J＝8.8，1H)，7.76(s，1H)。5，7-二氯-2-二甲基氨基甲基-喹啉-8-醇鹽酸鹽(PBT1033)將三乙胺(0.55mL)逐滴加入至攪拌的5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-甲醛17(1.0g，4.13mmol)和二甲基胺鹽酸鹽(365mg，4.48mmol)的1，2-二氯乙烷(50mL)溶液中。5分鐘后，在5分鐘內分批加入三乙酰氧基硼氫化鈉(1.2g，5.66mmol)。然后將混合物置于室溫下攪拌過夜。加入二氯甲烷(100mL)，混合物用飽和碳酸氫鈉洗滌(50mL×3)，干燥(Na2SO4)并濃縮。所得到的殘余物用二乙基醚(50mL×4)萃取，合并該醚萃取液，濃縮。然后加入濃鹽酸(5mL)，混合物真空濃縮。重復上述步驟2次。殘余物用二氯甲烷洗滌后得到為淺黃色固體的5，7-二氯-2-二甲基氨基甲基-喹啉-8-醇鹽酸鹽(PBT1033)(0.96g，73％)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.80(s，1H)，10.40(br，1H)，8.60(d，J＝8.6，1H)，7.92(s，1H)，7.78(d，J＝8.6，1H)，4.83(d，J＝5.3，2H)，2.94(s，3H)，2.92(s，3H)。5，7-二氯-2-乙氨基甲基-喹啉-8-醇鹽酸鹽(PBT1051)的制備(流程圖15)在5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-甲醛17(1.00g，4.13mmol)基礎上，用乙基胺鹽酸鹽替代二甲基胺鹽酸鹽，重復實施例15中所述的步驟。得到為淺黃色固體的5，7-二氯-2-乙氨基甲基-喹啉-8-醇鹽酸鹽(PBT1051)(0.60g，47％)。1HNMR(DMSO-d6)δ9.40(br，2H)，8.59(d，J＝8.8，1H)，7.90(s，1H)，7.76(d，J＝8.8，1H)，4.64(s，2H)，3.14(q，J＝7.2，2H)，1.32(t，J＝7.2，3H)。實施例16-5，7-二氯-8-羥基-喹啉-2-羧酸[2-(1H-咪唑-4-基)-乙基]-酰胺(PBT1038)的制備(流程圖16)流程圖165，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸19將5，7-二氯-8-芐氧基-喹啉-2-羧酸18(2.56g，7.35mmol)和濃鹽酸(25mL)的混合物在室溫下攪拌48小時，然后濃縮至干。所得到的殘余物用二乙基醚(20mL×2)洗滌。得到為黃色固體的5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸19(1.78g，94％)。1HNMR(CDCl3/DMSO-d6(19∶1)，400MHz)δ10.60(br，1H)，8.53(d，J＝8.8，1H)，8.22(d，J＝8.8，1H)，7.60(s，1H)。5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸[2-(1H-咪唑-4-基)-乙基]-酰胺(PBT1038)根據(jù)實施例1中所述步驟，由5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸19(597mg，2.31mmol)、二環(huán)己基碳二亞胺(483mg，2.31mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(316mg，2.31mmol)、組胺二鹽酸鹽(425mg，2.31mmol)以及三乙胺(0.5mL)經柱純化(硅膠，乙酸乙酯/i-PrOH/水(12∶4∶1))后得到為淺黃色固體的5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸[2-(1H-咪唑-4-基)-乙基]-酰胺(PBT1038)(276mg，34％)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.40(br，2H)，9.74(m，1H)，8.64(d，J＝8.6，1H)，8.28(d，J＝8.6，1H)，7.92(s，1H)，7.53(s，1H)，6.83(s，1H)，3.59(m，2H)，2.81(m，2H)。5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-乙基]-酰胺(PBT1050)的制備(流程圖16)根據(jù)實施例1的步驟，將5，7-二氯-8-羥基喹啉-2-羧酸19(1.00g，3.88mmol)用二環(huán)己基碳二亞胺(0.96g，4.60mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(0.53g，5.20mmol)、1-甲基-1H-組胺鹽酸鹽(1.24g，7.67mmol)以及三乙胺(0.65mL)處理24小時。固體通過過濾分離并溶解于熱的甲醇中。冷卻后，得到為無色針狀物的5，7-二氯-8-羥基-喹啉-2-羧酸[2-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)-乙基]-酰胺(PBT1050)(0.99g，70％)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.25(s，1H)，9.10(m，1H)，8.14(s，1H)，7.83(d，J＝8.6，1H)，7.44(d，J＝8.6，1H)，7.12(s，1H)，6.68(s，1H)，2.95(s，3H)，2.85(m，2H)，2.15(m，2H)。實施例17-7-氯-5-(吡啶-3-基)-喹啉-8-醇(PBT1057)的制備(流程圖17)流程圖17根據(jù)實施例8中描述的步驟，由7-氯-5-碘-8-羥基-喹啉20和2-溴丙烷得到7-氯-5-碘-8-異丙氧基-喹啉21(80％)。1HNMR(CDCl3/DMSO-d6(19∶1)，400MHz)δ9.09(m，1H)，8.55(m，1H)，8.10(s，1H)，7.63(m，1H)，5.15(m，1H)，1.49(s，3H)，1.47(s，3H)。在氬氣氛下，將含有21(180mg，0.518mmol)、3-吡啶基硼酸(76mg，0.622mmol)、KF(60mg，1.04mmol)、Pd(Ph3P)4(10mg)以及甲苯-水(1∶1，10mL)的混合物回流加熱16小時。冷卻混合物，用飽和氯化銨猝滅，用二氯甲烷(10mL×3)萃取，合并濾液，干燥并濃縮。殘余物經柱色譜(硅膠，二氯甲烷/甲醇(40∶1))處理后得到為淺奶油色固體的7-氯-5-(吡啶-3-基)-8-異丙氧基喹啉22(20mg，14％)；另外還回收得到132mg起始原料。221HNMR(CDCl3，400MHz)δ9.00(m，1H)，8.08(m，1H)，7.93(d，J＝7.7，1H)，7.70-7.56(m，2H)，7.55(s，1H)，7.50-7.42(m，2H)，5.23(m，1H)，1.49(s，3H)，1.48(s，3H)。根據(jù)實施例8中概述的方法，使用三氯化硼將異丙基醚22(20mg，0.07mmol)裂解得到為淺黃色固體的7-氯-5-(吡啶-3-基)-喹啉-8-醇(PBT1057)(17mg，94％)。1HNMR(CD3OD，400MHz)δ9.16(m，2H)，9.04(d，J＝5.8，1H)，8.93(dd，J＝1.2和8.6，1H)，8.84(m，1H)，8.30(dd，J＝5.8和8.1，1H)，8.09(s，1H)，8.08(dd，J＝5.1和8.6，1H)。實施例18-3，5，7-三氯-8-羥基喹啉(PBT1058)的制備(流程圖18)流程圖18將間氯代過苯甲酸(3.10g70％試劑，26mmol)在0℃下分批加入至攪拌的5，7-二氯-8-羥基喹啉23(5.00g，23mmol)的氯仿(150mL)溶液中。1小時后，混合物溫熱至室溫，并繼續(xù)攪拌48小時。濃縮混合物，殘余物在乙酸乙酯和1NNaHCO3(200mL，1∶1)之間分層；部分1-N-氧化物24作為沉淀殘留下來，通過過濾分離。然后濾液用乙酸乙酯(40mL×3)萃取，合并萃取液，干燥并濃縮得到更多的1-N-氧化物24。得到總量為4.76g(90％)的1-N-氧化物24。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.74(d，J＝5.9，1H)，8.24(d，J＝8.8，1H)，8.02(s，1H)，7.70(dd，J＝5.9和8.8，1H)。將24(2.01g，8.8mmol)和氯化氧磷(40mL)回流加熱18小時。真空除去過量的氯化氧磷，加入濃鹽酸(80mL)，溶液回流加熱2小時，然后冷卻。然后將混合物傾入冰水和氨水中，調節(jié)pH至8。通過過濾分離沉淀，用水洗滌。然后將所得到的物質溶解于二氯甲烷中，連續(xù)用硅膠墊和硅藻土過濾。除去溶劑得到為灰白色固體的3，5，7-三氯-8-羥基-喹啉(PBT1058)(0.92g，42％)，m.p.144-147℃(文獻值.(Gershon等人，1999)159-160℃)。1HNMR(CD3OD)δ8.85(d，J＝2.2，1H)，8.53(d，J＝2.2，1H)，7.71(s，1H)；質譜m/z248，250，252(M++1，分別為100、100和33％)。實施例19-3-氨基-5，7-二氯-8-羥基喹啉(PBT1060)的制備(流程圖19)流程圖194，5，7-三氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸乙酯26向攪拌的4-氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸乙酯(1.00g，3.76mmol)的氯仿(50mL)溶液中在1小時內逐滴加入磺酰氯(15mL)的氯仿(15mL)溶液，同時保持溫度為25-30℃。然后溶液在60-70℃下加熱48小時。在該過程中，再以一定的時間間隔(2、24和30小時)繼續(xù)加入磺酰氯(2mL)。使溶液冷卻至室溫，然后加入至冰水-氨水中，調節(jié)pH至8。然后混合物用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并萃取液并濃縮。柱色譜(硅膠，二氯甲烷/甲醇(100∶1))處理得到為奶油色固體的標題化合物26(0.36g，29％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ9.04(s，1H)，7.78(s，1H)，4.51(q，J＝7.1，2H)，4.14(s，3H)，1.46(t，J＝7.1，3H)。5，7-二氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸乙酯27將鋅粉(0.70g)的懸浮液在20℃下攪拌于4，5，7-三氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸乙酯26(364mg，1.09mmol)和乙酸(2.2ml)的1，4-二噁烷(15ml)溶液中。20分鐘后，加入乙酸乙酯(20ml)，所得到的混合物通過硅藻土墊過濾。濾液用飽和氯化鈉溶液(10ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，真空除去溶劑。殘余物經快速硅膠色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶9)處理，得到為白色固體的130mg(39％)標題化合物27。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ9.51(d，J＝2.0，1H)，9.15(d，J＝2.0，1H)，7.72(s，1H)，4.51(q，J＝7.2，2H)，4.18(s，3H)，1.47(t，J＝7.2，3H)。5，7-二氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸酰肼28將5，7-二氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸乙酯27(404mg，1.35mmol)和肼一水合物(1.0g)的乙醇(10ml)溶液回流加熱5小時。冷卻后，沉淀析出白色結晶固體。將其通過過濾分離，用乙醇洗滌，干燥，得到為白色固體的酰肼28(307mg，80％)。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.32(br，1H)，9.33(d，J＝2.4，1H)，8.89(d，J＝2.4，1H)，8.02(s，1H)，4.66(br，2H)，4.06(s，3H)。3-氨基-5，7-二氯-8-甲氧基-喹啉29將亞硝酸鈉(180mg，2.61mmol)在0℃下加入至攪拌的5，7-二氯-8-甲氧基-喹啉-3-羧酸酰肼28(248mg，0.87mmol)的1M鹽酸(2ml)、乙酸(5ml)和水(20ml)的溶液中。攪拌在0℃持續(xù)1小時，移去冰水浴直到溫熱至室溫，將該非均質混合物回流加熱。大約30分鐘后混合物變得均勻，繼續(xù)加熱直到總時間達到6小時。冷卻后，真空除去揮發(fā)物，殘余物在乙酸乙酯(20ml)和10％氨水溶液(10ml)之間分配。分離兩層，水層用更多的乙酸乙酯(5ml×2)洗滌。干燥合并的乙酸乙酯層(Na2SO4)，過濾然后真空除去乙酸乙酯。殘余物經快速色譜(乙酸乙酯/己烷，1∶1)處理后得到為白色固體的標題化合物29(106mg，50％)。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.48(d，J＝2.4，1H)，7.63(s，1H)，7.28(d，J＝2.4，1H)，6.16(br，2H)，3.97(s，3H)。3-氨基-5，7-二氯-喹啉-8-醇將三溴化硼(2.0ml1M的二氯甲烷溶液，2.0mmol)在-30℃下加入至攪拌的3-氨基-5，7-二氯-8-甲氧基-喹啉(104mg，0.43mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中。在冷水浴中繼續(xù)攪拌14小時直到達到室溫。然后混合物冷卻至0℃，加入水(1ml)。再除去二氯甲烷，加入乙酸乙酯(10ml)和更多的水(5ml)。通過過濾收集所形成的黃色沉淀，干燥得到74mg含有起始原料和產物的混合物(NMR分析)。將濾液中的乙酸乙酯層干燥(Na2SO4)，過濾，真空除去溶劑得到42mg固體，其也為含有起始原料和產物的混合物(NMR分析)。合并這兩份固體試樣，組分通過快速色譜(乙酸乙酯/2-丙醇，1∶0-3∶1)分離。得到為氫溴酸鹽的標題化合物(30mg)和回收的起始原料(57mg)。向3-氨基-5，7-二氯-喹啉-8-醇氫溴酸鹽和水(10mL)的混合物中加入飽和NaHCO3直到pH為8。分離固體得到為奶油色固體的標題化合物(PBT1060)(25mg，26％)。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.15(br，1H)，7.24(br，1H)，7.14(br，1H)，5.70(br，2H)；質譜m/z229，231(M++1，分別為100和66％)。3-氨基-5，7-二氯-喹啉-8-醇氫溴酸鹽1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ8.43(d，J＝2.6，1H)，7.46(d，J＝2.6，1H)，7.42(s，1H)。表1實施例1和2的數(shù)據(jù)a參見實驗部分＝一般步驟A；B＝一般步驟B。表2實施例3、4、5和6的數(shù)據(jù)表3實施例7的數(shù)據(jù)表4實施例8、9、10和11的數(shù)據(jù)表52-芳族基團-取代的8-HQ衍生物的數(shù)據(jù)(通過Negishi偶聯(lián)反應制備)a實施例20-式I或II化合物的評價在式I或II化合物的評價中，利用下面的測定評價其在本發(fā)明方法中的適用性。測定1.熒光H2O2測定利用熒光測定法測試受試化合物通過Aβ在基于二氯熒光黃雙乙酸酯(DCF；MolecularProbes，EugeneOR)的銅存在下抑制過氧化氫生成的能力。將DCF(5mM)的100％二甲亞砜(預先在20℃下用氬氣凈化2小時)溶液在0.25MNaOH存在下脫乙酰化30分鐘，然后在pH7.4中和至總的濃度為1mM。辣根過氧化物酶(HRP)儲備溶液制成1μM、pH為7.4。反應在PBS、pH7.4的96孔板(總體積＝250μl/孔)中進行。反應溶液含有濃度為50nM至1μM的Aβ1-42、銅-甘氨酸螯合物(Cu-Gly)，它是通過將CuCl2以1∶6的比例加入至甘氨酸中，然后再以2Cu-Gly∶1Aβ的比例加入至Aβ中制備得到的，還原劑包括多巴胺(5μM)或抗壞血酸、脫乙?；腄CF100μM、和HRP0.1μM。還可以含有1-10μMEDTA或者其它螯合劑作為游離銅的對照，但這對于完成測定并不是必需的。反應混合物在37℃下孵育60分鐘。溶于PBS中pH為7.4的過氧化氫酶(4000單元/ml)和H2O2(1-2.5μM)標準物可以作為陽性對照。利用板式讀數(shù)器、分別在485nM和530nM激發(fā)和發(fā)射的濾波器記錄熒光。通過對照含有H2O2標準物的熒光可以確定H2O2的濃度。通過在測試孔中置入給定濃度的受試化合物，從而測定Aβ抑制H2O2生成的能力。測定2.神經毒性測定主要皮層神經元培養(yǎng)物按照先前所描述的方法制備皮層培養(yǎng)物(White等人，1998)。在胚胎日第14天除去BL6Jx129sv鼠皮層，切除掉腦膜，在0.025％(wt/vol)胰島素中解離。解離后的細胞裝盤于48孔培養(yǎng)板中，在含有25％(vol/vol)FCS和5％(vol/vol)HS的MEM中密度為2×106細胞/mL，然后在37℃下培養(yǎng)2小時。然后介質用Neurobasal介質(InvitrogenLifeTechnologies)和B27補充劑(InvitrogenLifeTechnologies)替代。培養(yǎng)物在37℃下、于5％CO2中保存。在進行試驗之前，培養(yǎng)介質用Neurobasal介質和無抗氧化劑的B27(InvitrogenLifeTechnologies)替代。主要小腦顆粒體神經元培養(yǎng)物從初生5-6天(P5-6)的小鼠取下小腦，切除掉腦膜，在0.025％胰島素中解離。小腦顆粒體神經元(CGN)裝盤于24孔培養(yǎng)盤中，在用10％胎牛血清(FCS)、2mM谷酰胺和25mMKCl補充的BME(InvitrogenLifeTechnologies)中為350000細胞/cm2。向全部培養(yǎng)板介質中加入慶大霉素硫酸鹽(100μg/mL)，培養(yǎng)物在37℃下、于5％CO2中保存。測定3.細胞存活力測定(a)細胞存活力的MTS測定利用MTS測定法測定細胞存活力。培養(yǎng)介質用新鮮的Neurobasal介質加無抗氧化劑的B27補充劑替代。將1/10體積的MTS溶液(CellTitre96AqueousOne，PromegaCorporation)在37℃下培養(yǎng)2小時。利用560nm的分光光度計測量200微升的整分溶液(aliquots)。(b)細胞存活力的LDH測定由不含血清和細胞碎片的培養(yǎng)物上清液利用乳酸脫氫酶(LDH)細胞毒性檢測試劑盒(BoehringerIngelheim)，根據(jù)制造商說明書測定細胞死亡情況。(c)Aβ神經毒性和Aβ神經保護性測定神經元皮層細胞按照測定2培養(yǎng)5天。在第6天將neurobasal(NB)介質(InvitrogenLifeTechnologies)和B27補充劑(InvitrogenLifeTechnologies)用NB介質和B27補充劑(無抗氧化劑)替代。在第6天，向神經元細胞培養(yǎng)物中分開加入受試化合物。將受試化合物以2.5mM(如果按每小瓶稱量過量化合物的話為10mM，那么將其稀釋至2.5mM)的濃度溶解于100％DMSO中。2.5mM儲備溶液以1∶10連續(xù)稀釋，得到250uM、25uM、2.5uM的操作溶液。Aβ的制備將Aβ首先溶解于20mMNaOH中，濃度為1mM，超聲5分鐘。然后將肽稀釋于H2O和10XPBS中，使得在1XPBS中的最終濃度為200uMAβ。再次將肽超聲5分鐘，然后在14000rpm下旋轉5分鐘，轉移至干凈試管中。將受試化合物溶解于100％DMSO中，濃度為2.5mM(如果按每小瓶稱量過量化合物的話為10mM，那么將其稀釋至2.5mM)。2.5mM儲備溶液以1∶10連續(xù)稀釋，[在NB介質和B27(無抗氧化劑)中]，得到250uM、25uM、2.5uM的操作溶液。受試化合物不直接加入至細胞中，而是加入至含有下述成分的48孔‘藥物盤’中“藥物盤”的制備向48孔盤中加入孔1515ulNB+B27(無抗氧化劑)*+24ul25uM受試化合物+60ulAβ稀釋液**孔2515ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul250uM受試化合物+60ulAβ稀釋液孔3515ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul受試化合物稀釋液***+60ulAβ1-42孔4515ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul2.5uM受試化合物+60ulAβ1-42孔5515ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul25uM受試化合物+60ulAβ1-42孔6515ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul250uM受試化合物+60ulAβ1-42稀釋液孔7515ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul受試化合物稀釋液+60ulAβ1-42稀釋液孔8600ulNB+B27(無抗氧化劑)N.B.60ulAβ1-42相當于20ulAβ1-42每孔相當于20uMAβ1-42藥物盤在37℃下孵育15分鐘。將每個孔中的200ul分成三份加入至相應的細胞盤中。細胞盤在37℃下孵育4天。*NB介質+B27(無抗氧化劑)**Aβ稀釋液2mMNaOH，1XPBS***PBT稀釋液10％DMSO的NB溶液+B27(無抗氧化劑)測定的完成在細胞處理后第4天，通過向細胞中加入MTS從而完成測定。(d)受試化合物細胞毒性測定按照測定2在NB介質和B27補充劑中將神經元皮層細胞培養(yǎng)5天。在第6天，將受試化合物加入至在NB介質和無抗氧化劑的B27補充劑中的神經元細胞培養(yǎng)物中。將受試化合物溶解于100％DMSO中，濃度為2.5mM(如果按每小瓶稱量過量化合物的話為10mM，那么將其稀釋至2.5mM)。2.5mM儲備液以1∶10連續(xù)稀釋，得到250uM、25uM、2.5uM的操作溶液。受試化合物不直接加入至細胞中，而是加入至含有下述成分的48孔‘藥物盤’中“藥物盤”的制備向48孔盤中加入孔1576ulNB+B27(無抗氧化劑)*+24ul2.5uM受試化合物孔2576ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul25uM受試化合物孔3576ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul250uM受試化合物孔4576ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul2.5uM受試化合物孔5576ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul25uM受試化合物孔6576ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul250uM受試化合物孔7576ulNB+B27(無抗氧化劑)+24ul受試化合物稀釋液**孔8600ulNB+B27(無抗氧化劑)藥物盤在37℃下孵育15分鐘。將每個孔中的200ul分成三份加入至相應的細胞盤中。細胞盤在37℃下孵育4天。*NB介質和B27(無抗氧化劑)**PBT稀釋液10％DMSO的NB溶液+B27(無抗氧化劑)完成測定后，將1/10體積的MTS加入至測定盤的每個孔中(即25ul/250ul)。測定盤在37℃下孵育2小時，然后讀取560nm處的吸光度。測定4.半胱天冬酶測定為了測定神經元培養(yǎng)物中的半胱天冬酶活性，除去生長介質，細胞用對照鹽溶液(pH7.4)洗滌2次，直接向培養(yǎng)物中加入冰冷的細胞萃取緩沖液。該萃取緩沖液由20mMTris(pH7.4)、1mM蔗糖、0.25mMEDTA、1mM二硫代蘇糖醇(DTT)、0.5mMPMSF、1％TritonX-100(Tx-100)和1μg/mL胃酶抑素和抑肽酶組成。在冰上孵育15分鐘后，除去萃取緩沖液，在4℃、于微量離心機中離心5分鐘，將100μL的上清液加入至96孔盤的每個孔中。向每個孔中加入100μL的200μM底物(對于半胱天冬酶3、6和8分別為DEVD-pNA、VEID-pNA或IETD-pNA)，使最終濃度達到100μM底物。盤在37℃下孵育2、4、6或24小時，在波長為415nm處測量吸光度(Abs415)。將所讀取得到的吸光度與單獨的pNA的已知標準進行對照。測定5.膜聯(lián)蛋白V測定為了測定膜聯(lián)蛋白V對細胞的結合水平，培養(yǎng)物用對照鹽溶液(pH7.4)洗滌2次，然后加入濃度為大約0.5μg/mL的膜聯(lián)蛋白V-FITC的對照鹽溶液(pH7.4)。同時還向培養(yǎng)物中加入碘化丙錠(10μg/mL)。細胞在黑暗中于環(huán)境溫度下培養(yǎng)30分鐘，接著用新鮮對照鹽溶液洗滌3次。利用LeicaDMIRB顯微鏡分析FITC熒光(488nm處激發(fā)，510nm處發(fā)射)。采用利用ASA400彩色片的MPS60照相機拍攝得到照片，底片掃描入AdobePhotoshopv2.0.1。測定6.脂蛋白氧化反應測定可以利用兩類不同的金屬介導脂質過氧化反應測定法。第一類測定法包括測量金屬化蛋白的氧化活性。它通過將透析金屬化或天然蛋白質(以指定濃度)與0.5mg/mLLDL混合24小時(37℃)進行測定。利用脂質過氧化測定試劑盒(LPO486，OxisInternationalInc.Portland，OR)按照試劑盒說明書測得脂質過氧化反應性(LPO)。通過與單獨的LDL(100％LPO)的吸光度(486nm)進行對照，從而確定LPO水平。利用第二類測定法在游離、無蛋白質束縛的Cu的存在下測定天然蛋白質的LPO活性。這類方法包括將非金屬化的肽類(140μM)和20μMCu-gly加入至0.5mg/mLLDL中，然后按照金屬化蛋白質的方法測定LPO。通過與LDL+Cu-gly(100％LPO)的吸光度(486nm)進行對照，從而確定LPO水平。作為陰性對照，也將LDL曝露于透析Cu-gly溶液中，這與用于Cu-金屬化蛋白質的溶液相似。測定7.由Cu-金屬化蛋白質誘導的細胞毒性將蛋白質或合成肽與金屬-甘氨酸溶液以等摩爾或金屬比蛋白質為兩倍的濃度進行混合。金屬-蛋白質混合物在37℃培養(yǎng)過夜，然后利用裝有3,500千道爾頓切口的袖珍型透析杯(Pierce，Rockford，IL)充分透析(24小時，在室溫下2次變化dH2O(3L/變化))。利用PBSpH7.4將蛋白質透析得到具有與dH2O透析相當?shù)幕钚缘慕饘倩鞍踪|。為了測定它們的神經毒性活性，將金屬化蛋白質、天然蛋白質或肽加入至已經培養(yǎng)2天的主要皮層神經元培養(yǎng)物中。還將培養(yǎng)物曝露于Cu-gly(5或10μM)或者LDL中。陽性對照培養(yǎng)物用Cu-gly+LDL或者LPO產物4-羥基-壬烯醇(HNE，SigmaChemicals)處理。利用乳酸脫氫酶(LDH)測定試劑盒(RocheMolecularBiochemicals，Nunawading，Australia)，根據(jù)制造商說明書測定培養(yǎng)物的細胞死亡情況。測定8.由Aβ-介導的溶酶體酸化作用降低的吖啶橙測定將培養(yǎng)后的鼠皮層神經元用Aβ1-42(20μM)處理16小時，然后用5mg/ml吖啶橙(AO)在37℃下染色5分鐘。在37℃下15分鐘。利用置于熒光顯微鏡上的紅色濾波器測量由AO-誘導的熒光。AO為向溶酶體弱堿，它堆積在核內質/溶酶體隔室中并且在孵育過程中顯示出橙色熒光。只要在溶酶體隔膜上存在明顯的質子梯度，AO就被隔離在溶酶體中。將細胞用Aβ1-42處理破壞了溶酶體隔膜的質子梯度，從而將AO重新分布于細胞溶膠中，所指示的即為16-24小時內橙色熒光的降低程度。測定9.人腦淀粉樣蛋白溶解性測定進行該測定是為了評價受試化合物將Aβ從postmortem人AD大腦組織的萃取液中的不溶相遷移至可溶相中的能力。利用DIAX900均化器(HeudolphandCo，Kelheim，Germany)或者其它3個30秒周期均為全速的適宜裝置，將多達0.5g的帶有斑塊無腦膜的皮層在2ml冰冷的磷酸鹽緩沖鹽溶液(pH7.4)中均化。為了得到磷酸鹽緩沖的鹽溶液萃取部分，所得到的勻漿在100,000xg下離心30分鐘，除去上清液?；蛘?，組織凍干后研磨成粉末，將其稱量成整份再按照上述方法進行提取。將上清液、或者凍干并再次懸浮或非濃縮形式溶解于200μl的Tris-Tricine十二烷基硫酸鈉(SDS)樣本緩沖液(pH8.3，含有8％SDS、10％2-巰基乙醇)中。然后將各整份(10μl)煮沸10分鐘，隨后進行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。通過將最初的片狀樣本再懸浮于1ml的磷酸鹽緩沖鹽水中得到皮層樣本的不溶部分。然后該懸浮液中的50-μl整份部分按照上述方法在200ml樣本緩沖液中煮沸。通過適當?shù)貙⑾♂寴颖狙b填在10％至20％梯度凝膠(Novex，SanDiego，CA)上，然后遷移至0.2-μm硝基纖維素膜(Bio-Rad，Hercules，CA)，從而完成Tris-Tricine聚丙烯酰胺凝膠電泳。Aβ利用單克隆抗體W02(或者其它適宜抗體)檢測，單克隆抗體W02可以檢測到與辣根過氧化物酶-共軛的兔抗鼠IgG(Dako，丹麥)相結合的殘基5-8、17，然后通過使用放大的化學發(fā)光(例如ECL；AmershamLifeScience，Buckinghamshire，UK)可視化。與對照標準一樣，每一凝膠包括三條含0.5、1和2ng合成Aβ40(KeckLaboratory，耶魯大學，NewHaven，CT)的泳道。斑點薄膜通過利用適宜的成像系統(tǒng)例如UVP凝膠記錄系統(tǒng)掃描，然后利用適宜的軟件例如UVPLabworks完成密度計量處理。通過利用踏階式板(steptablet)(No.911ST600，Kodak，RochesterNY)、由制造商揭示的提供已知增加強度步驟的校準薄膜來確定薄膜/掃描儀的動態(tài)范圍。對單聚和二聚Aβ帶進行密度計分析的信號強度的可計量范圍基于對照通過掃描所獲得的曲線與踏階式板的光密度法。其中信號強度低的樣本在開始測定之后，還可以通過利用更低或更高濃度的合成標準物重新測定。所有的樣本至少分析兩次，調節(jié)凝膠裝填量和稀釋度以落入標準曲線的可計量范圍內?！扇苄浴c‘不溶性’Aβ的比例可以用來確定受試化合物與已知化合物例如氯碘羥喹(PBT1)相比其萃取的效率。含有球狀部分的不溶性Aβ由上述皮層樣本的淀粉樣蛋白斑衍生而來，而可溶性部分含有單聚和/或寡聚可溶性Aβ。測定10.金屬分布情況為了測定各種金屬包括鋅和銅的分布情況，在存在受試化合物的條件下萃取腦組織之后，制備得到人腦組織萃取液中的可溶性和不溶性部分以供淀粉樣蛋白溶解性測定。兩部分中的金屬通過誘導偶聯(lián)的血漿質譜分析，然后如果需要的話，適當?shù)赜孟跛岷?或過氧化氫進行預處理。測定11.施用受試化合物對于轉基因動物中的Aβ沉積的效果轉基因鼠模型可用于一系列神經病，包括阿耳茨海默氏病(Games等人，1995；Hsiao等人，1996)；帕金森氏病(Masliah等人，2000)；家族性肌萎縮性脊髓側索硬化癥(ALS)(Gurney等人，1994)；亨廷頓氏病(Reddy等人，1998)；以及克-雅氏病(CJD)(Telling等人，1994)。我們已經發(fā)現(xiàn)，一種針對阿耳茨海默氏病的轉基因模型，APP2576轉基因鼠(Hsiao等人，1996)也很容易出現(xiàn)白內障。這些動物模型適合于測試本發(fā)明的方法。使用APP2576菌株的轉基因鼠(Hsiao等人，1996)。選擇8-9個月大的雌鼠并分成數(shù)組供治療。每隔一段時間殺死轉基因鼠，檢查它們的大腦以確定使用受試化合物治療是否降低了大腦淀粉樣蛋白的形成，同時鑒別出最有效的給藥方案。利用標準的蛋白質斑跡法，按照測定9大腦淀粉樣蛋白溶解性測定中所描述的方法測量大腦和血漿中可溶性和不溶性Aβ的濃度。利用Morris水迷宮，根據(jù)標準方法測試各組中的其它老鼠在長達8個月的期間內的認知能力。另外，通過隨機抽取還測量了這些動物一般的健康狀況，利用五整數(shù)等級對各種特征的組合進行主觀評價，包括活動能力、機敏程度和一般健康體征。測定12.溶解性測定在二甲亞砜中制備得到式I或II化合物的儲備溶液(1mM)。不溶解的化合物被分類為不溶性(N)。將DMSO儲備溶液以1∶100稀釋于PBSpH7.4中。得到透明溶液的化合物被分類為可溶性(Y)，而那些在DMSO溶解之后得到半透明懸浮液的化合物被分類為“crashedout”(C)。測定13.物理化學特性極表面積(PolarSurfaceArea)計算(PSA)極表面積值利用網(wǎng)頁程序計算，可使用一種計算分子特性的文件包“Molinspiration”。比濁溶解度測量在pH2.0和pH6.5同時測量溶解度估計值?？梢灶A期這樣的pH范圍很接近于人的胃腸道環(huán)境。將化合物以適宜濃度溶解于DMSO中，然后摻入0.01MHCl(大約pH＝2.0)或pH6.5的等張磷酸鹽緩沖液，最終的DMSO濃度為1％。隨后通過比濁法分析樣本以確定其溶解度范圍[按照D.Bevan和R.S.Lloyd，Anal.Chem.2000，72，1781-1787]。cLogP值利用ACDLogP軟件確定LogP理論值。引用值由未經處理的數(shù)據(jù)庫計算得到且適用于未離子化的物質。ELogD通過利用SUPELCOSILLC-ABZ柱和pH為7.4的辛醇飽和流動相的色譜法測得LogD有效值。參見F.Lombardo等人，J.Med.Chem.2000，43，2922-2928。測定14.血腦屏障滲透性將受試化合物溶解于DMSO中，加入磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)得到在含有1.25-2.5％DMSO的PBS中濃度為50μM的溶液。為了評價每次灌注過程中BBB的完整性以及估計大腦組織樣本中的殘留血管空間(RVS)的體積(也就是在每次灌注之后殘留在血管內腔中的液體體積)，向每份儲備輸液劑(大約0.01μCi/mL)中加入微量的14C-蔗糖作為不能滲透過血腦屏障(BBB)的標志物。按照1.0mL/100g體重的劑量使用腹膜內注射烏拉坦(25％w/v)將成年雄性SpagueDawley鼠(180-190g)麻醉。右頸總動脈通過手術曝露在外，插入導管以進行大腦循環(huán)的灌注。然后將右頸外動脈(其供給顱骨外的組織)末梢結扎至其與右頸總動脈的分支，這樣所有的輸液劑均可以通過剩下的右頸內動脈流入大腦中。然后將心臟曝露在外，在開始灌注之前立即切斷。灌注速率通過泵控制在以3.2mL/min的速率(大約為向同樣大小老鼠的大腦正常供血的85％)遞送。灌注插管最初含有0.5mL的肝素化PBS(10IU/ml)預洗液，它具有沖洗血管的作用從而防止血液凝結并阻塞小血管。1.5分鐘后輸液泵自動停止，從頸動脈拆掉插管，然后從輸液插管的頂端收集輸液劑樣本(1-1.5mL)。隨后切開大腦，分為3份右半球和右中腦、左半球和左中腦以及后腦(小腦、腦橋和腦干)。在接下來的測量中只使用大腦的右部分，這是因為通過右頸內動脈的灌注優(yōu)先供應右半球和右中腦(左半球和后腦接受不定量的間接輸液)。來自各種動物的大腦組織樣本在-30℃下冷凍，均化并稱量成等份，通過LC-MS分析得到總的大腦濃度。使用MicromassTripleQuad裝置完成分析。流動相由乙腈/水梯度(含有0.05％甲酸)組成，柱為PhenomenexLunaCN。通過液體閃爍計數(shù)法對少許等份的各大腦組織樣本以及相應的輸液劑進行分析以測定14C-蔗糖濃度。通過將所測得的大腦組織中的蔗糖濃度(dpm/mg)除以其在相應輸液劑中的濃度(dpm/μL)，計算得到各大腦組織樣本中的殘留血管空間(RVS)。這就是在每次灌注結束時殘留在血管內部的液體體積。將該RVS與輸液劑中的受試化合物濃度相乘得到存在于每個大腦組織樣本的血管內的受試化合物總殘留量(也就是還沒有通過BBB的受試化合物)。將其從總的大腦濃度中減去得到位于血管之外的每個大腦組織樣本中的藥物含量(也就是已經通過BBB的受試化合物)。將其除以用RVS校正的大腦濃度，得到大腦攝取比例(等式1)。等式1.對于每種受試化合物進行總共5-6次大腦灌注試驗，計算其平均大腦攝取比例。比例高于50％表明化合物進入大腦非常迅速；比例介于10和50％之間表明化合物進入大腦良好；比例低于10％(未觀察到)說明化合物進入大腦非常緩慢，不適合于治療性給藥；比例低于1％(未觀察到)表明化合物實際上沒有進入大腦。測定15.轉基因鼠大腦的免疫組織化學在本測定中使用測定11中所引用的APP2576轉基因鼠(Hsiao等人，1996)。將對側的用福爾馬林處理的老鼠腦組織冠狀切除。由相應位置取出部分(10μm)用80％甲酸處理供抗原修補(retrieval)。所使用的一抗是單克隆抗體1E8，它可以識別Aβ(SmithKlineBeecham，UK)殘基18和22之間的表位。使用連接于辣根過氧化物酶(利用3，39-二氨基聯(lián)苯色素原(chromagen))(Dako)和堿性磷酸酶(使用5-溴-4-氯-3-羥基吲哚磷酸酯和硝基藍四唑鎓氯化物色素原)(Dako)的二抗改善免疫反應活性。按照下面的等級，由兩名對本治療方案不知情的實驗員對每組斑塊多度進行評價0＝無顯著斑塊1＝存在斑塊但是很少2＝存在幾處斑塊3＝在限制區(qū)域可以看見許多斑塊4＝斑塊很多且不限于某些特殊區(qū)域。中間值例如2.5被認為是可實際應用的。利用學生的‘t’測驗將各組進行對照。測定16.藥物代謝動力學曲線(a)PBT-1033·在5分鐘內向2只小鼠靜脈灌注給藥PBT-1033；2mg/Kg(1mL0.5mg/mL的7.5％DMSO溶液，用0.1mCaptisol的檸檬酸鹽緩沖溶液調節(jié)pH為3.0)，直至24小時采集動脈血樣本?！は?只小鼠通過口飼法口服給藥PBT-1033；30mg/Kg(在CMC-SSV*中的懸浮液)，直至26小時采集動脈血樣本?！BT-1033的血漿濃度通過LCMS(LOQ3.7nM)測得。對于小鼠020710-D，與PBT-1033出現(xiàn)重疊峰。*標準懸浮介質-0.5％w/vNa-羧甲基纖維素(CMC)、5％v/v芐醇、溶于0.9％NaCl中的4％v/vTween80。計算CL總＝IV給藥后總的血漿清除率Vdβ＝IV給藥后消除期過程中的分布體積BA＝口服生物利用度AUCIV＝血漿濃度對時間曲線下從時間0到IV給藥后無限長時間范圍內的面積AUC口服＝血漿濃度對時間曲線下從時間0到口服給藥后無限長時間范圍內的面積β＝IV給藥后的末期消除速率常數(shù)結果如圖4(a)所示。(b)PBT-1038·在5分鐘內向2只小鼠靜脈灌注給藥PBT-1038；(0.5mg/Kg7.5％DMSO的檸檬酸鹽緩沖溶液pH3.0)，直至24小時采集動脈血樣本。·向2只小鼠通過口飼法口服給藥PBT-1038；(30mg/Kg0.05％CMC懸浮液)，直至24小時采集動脈血樣本?！BT-1038的血漿濃度通過MS(LOQ3nM)測得。計算同前面PBT-1033所描述的方法。結果如圖4(b)所示。(c)PBT-1050·在5分鐘內向2只小鼠靜脈灌注給藥PBT-1050；(2mg/Kg7.5％DMSO的檸檬酸鹽緩沖溶液pH3.0)，直至24小時采集動脈血樣本?！は?只小鼠通過口飼法口服給藥PBT-1050；(30mg/Kg0.05％CMC懸浮液)，直至24小時采集動脈血樣本?！BT-1050的血漿濃度通過MS(LOQ3nM)測得。計算同前面PBT-1033所描述的方法。結果如圖4(c)所示。(d)PBT-1051·在5分鐘內向2只小鼠靜脈灌注給藥PBT-1051；2mg/Kg(1mL0.6mg/mL的7.5％DMSO在檸檬酸鹽緩沖溶液pH3.0中的溶液)，直至24小時采集動脈血樣本?！は?只小鼠通過口飼法口服給藥PBT-1051；30mg/Kg(在CMC-SSV*中實施例35.1-(2，6-二甲基-吡啶-4-基)-3-[(S)-1-(2，2-二苯基-乙基)-吡咯烷-3-基]-脲.(S)-1-(2，2-二苯基-乙基)-吡咯烷-3-基胺(實施例A5.，66.6mg，0.25mmol)，TEA(35μL，0.25mmol)和1，3-雙-(2，6-二甲基-吡啶-4-基)-脲(實施例B4.，67.5mg0.25mmol)的二惡烷(2mL)液組成的懸濁液，加熱回流24小時。蒸發(fā)溶劑，殘余物經過HPLC提純得到標題化合物。下述實施例是由實施例A5-A12與實施例B2，按照實施例35所述的方法制備的。<p>式IIa式IIa式IIIa式IIIa式IVa式IVa式Va式VIa式IIb式IIb式IIb式IIb式IIb式IIIb式IIIb式IVb式Vb式VIb式VIb式VIb表9.轉基因鼠大腦中可溶性Aβ和不溶性Aβ的濃度[按照測定11的方法]表10.血腦屏障滲透性[按照測定14的方法]表11.物理化學特性[按照測定13的方法]表12.轉基因鼠大腦免疫組織化學[按照測定15的方法]表13(a).向小鼠靜脈內和口服給藥PBT1033后的藥物代謝動力學參數(shù)[按照測定16的方法]a總的血漿清除率b利用被截的AUC0-1560計算得到的口服BA表13(b).向小鼠靜脈內和口服給藥PBT1038后的藥物代謝動力學參數(shù)[按照測定16的方法]表13(c).向小鼠靜脈內和口服給藥PBT1050后的藥物代謝動力學參數(shù)[按照測定16的方法]表13(d).向小鼠靜脈內和口服給藥PBT1051后的藥物代謝動力學參數(shù)[按照測定16的方法]a總的血漿清除率b利用被截的AUC0-1440計算得到的口服BA。該值可能高于實際的生物利用度。實施例21-式I或II化合物用于治療阿耳茨海默氏病的臨床試驗為了研究口服PBT-1治療在患有中度嚴重AD患者的隨機、雙盲、安慰劑-對照組2期臨床試驗中的效果，著手進行式I或II化合物用于治療AD的II期臨床試驗。將36名患者按任意順序排列[18名服用安慰劑、18名服用PBT-1，具有32個completions]并分為重度影響和輕度影響組。在預防認知能力衰退方面，重度影響患者在36周內的治療效果在統(tǒng)計學上具有顯著性(基線ADAS-cog≥25)。輕度影響組的表現(xiàn)(ADAS-cog＜25)在該時間間隔內輕度惡化可忽略不計，因此從這個角度來說并不能區(qū)別兩者之間的認知變化情況。血漿Aβ42在PBT-1組中降低而在安慰劑組中有所升高(p＜0.001)。血漿Zn水平在PBT-1組中顯著性升高(≈30％)。劑量對劑量的選擇需要考慮幾方面的因素。在以前對轉基因鼠的研究中，每天口服20-30mg/kg劑量的PBT-1、每周5天持續(xù)治療2-3個月后在抑制Aβ堆積方面顯著有效。1500-2250mg/天的人等效劑量接近于前述PBT-1的抗生素劑量(600mg，口服每日4次)。然而，此劑量大小給藥數(shù)月將會增加對SMON毒性的擔憂。假設平均體重75kg，起始劑量為3.3mg/kg/天，這與轉基因鼠模型的有效劑量的數(shù)量級相同，但僅僅約為抗生素劑量的十分之一。由于從轉基因鼠研究中并沒有得出有效劑量低于20mg/kg/天的數(shù)據(jù)，因此我們分析理由認為有益的效果應該需要比9-12周的老鼠研究持續(xù)時間更長的治療時間(Cherny等人，2001)。所以選擇了36周的試驗時間長度以及平均劑量大約為轉基因鼠有效用量的三分之一。10mg/kg/天的最終劑量為鼠的有效劑量的一半。3.3mg/kg/天的起始劑量與轉基因鼠模型中的有效劑量數(shù)量級相同，但僅僅約為抗感染劑量的十分之一。本研究推動了對作用于金屬和Aβ水平上的生物化學作用的發(fā)掘，這與在轉基因研究中所發(fā)現(xiàn)的成果具有相同的意義。實驗步驟倫理問題根據(jù)澳大利亞法律針對那些認知功能可能受損至不能清楚作出判斷或決定的程度的個人的意見，每個不能主張其自身利益的參與者均同意由維多利亞法院和行政法庭頒布的“ConsenttoSpecialProcedures”。此外，第三方的主張也是獲得所有的護理者同意的。所有的患者在開始該研究之前對多奈哌齊穩(wěn)定。本研究由皇家墨爾本醫(yī)院研究基金會臨床研究中心和道德委員會批準。研究人群本研究在維多利亞精神衛(wèi)生研究所AD臨床試驗單元以及皇家墨爾本醫(yī)院完成。本研究所包括的條件有征得同意；通過NINCDS-ADRDA標準(McKhann等人，1984)診斷為可疑的AD；AD認知能力評價級別(ADAS-cog)(Rosen等人，1984)分數(shù)為18-45；簡短精神狀態(tài)檢查(MMSE)(Folstein等人，1975)分數(shù)為10-24；服用多奈哌齊5mg或10mg至少6個月；親屬或其護理者能夠支持本試驗；能夠完成試驗測試；主要知覺動能健全。將有外周或視神經病史或臨床表現(xiàn)的患者、或者正患有影響認知功能、神經傳導的疾病或有這方面疾病的病史的患者排除在外。在基線獲得下述因素以確定其是否與測試結果相關年齡、性別、病前IQ[有NationalAdultReadingTest(NART)評價]、受教育年限、以及載脂蛋白E(ApoE)同種抗免疫球蛋白。研究設計本研究為雙盲、安慰劑-對照、平行組隨機化設計。募集36名患者及其護理者參與，以1∶1的比例患者隨機服用PBT-1或安慰劑。研究持續(xù)時間為36周。PBT-1口服劑量為第0-12周125mg、每天2次，第13-24周增至250mg、每天2次，最后第25-36周375mg、每天2次。研究程序篩選程序由完整醫(yī)療史、身體、神經學以及眼科測試、血液和小便測試以及心理測試(ADAS-cog，MMSE)組成。在篩選期和基線之間進行神經傳導測試和視覺喚起應答以獲得基線測量結果。收集血液，獲得ApoE同種抗免疫球蛋白、隨機化之前金屬和Aβ的基線血漿水平。全部患者繼續(xù)進行本研究開始服用多奈哌齊，同時全部患者每4周肌肉內給藥100mg維生素B12。除了在第12、24和36周通過留置導管收集血液樣本之外，其余周均通過肘前靜脈穿刺收集血液樣本。該步驟的變化不影響生化讀數(shù)器，除了Zn水平后來發(fā)現(xiàn)其始終保持有～10％偏坦之外(可能是因為血小板活化作用的差別)。因此在分析中省略掉在這些時間間隔內獲得的Zn數(shù)據(jù)。結果評價主要臨床效果變量是由在基線獲得的ADAS-cog基線數(shù)到在第4、12、24和36周獲得的數(shù)之間的變化。選擇這樣的測試是為了使治療效果與目前所通用的治療劑例如多奈哌齊具有可比性，在后者的效能試驗中也使用ADAS-cog作為其主要的結果評價因素(Rogers等人，1998)。盡管很多的神經心理測試都可考慮被作為第二測試，但是必需避免在回顧期使患者心智衰弱。因此唯一的其它認知測試是簡短精神狀態(tài)檢查(MMSE)。另外還推導出主觀的觀察指標CIBIC+(建立在結合護理者信息變化的陳述基礎之上的醫(yī)生會診)。血漿Aβ和血漿鋅和銅均是每4周采集一次。用于檢測Aβ的雙倍抗體俘獲酶連接的免疫吸收劑測定(ELISA)將聚苯乙烯盤用mAbG210(對于Aβ40)或mAbG211(對于Aβ42)涂布。將盤清洗后加入生物素化的mAbWO2。利用抗生蛋白鏈菌素標記的銪(PerkinElmer，VicAustralia)檢測束縛抗體。由三份孔中獲得的數(shù)值是以各盤所生成的標準曲線為基礎計算得到的。另外還測定了添加有合成Aβ1-40和Aβ1-42的血漿樣本以確定該感興趣的濃度范圍的測量結果的可靠性。金屬濃度按照以前描述的方法(Cherny等人，2001)，通過誘導耦合血漿質譜法對金屬進行測量。治療性藥物監(jiān)測在第12、24和36周，通過HPLC測定PBT-1血中濃度，同時進行適當?shù)拇_定性研究(CentreforPharmaceuticalResearch，UniversityofSouthAustralia)。安全性評價建立標準的副作用報告制度，在每次訪問時記錄生化測試、腎和肝功能、全血測試、血清維生素B12以及葉酸含量。為了評估外周和視神經病，在每次訪問時進行神經學檢查，以及在篩選期、第16周以及最后試驗訪問之前進行視覺喚起應答、神經傳導研究以及眼科檢查。在篩選期、第12、24和36周完成ECG。數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)監(jiān)測和管理由獨立的簽約人(KendleInternationalandHealthResearchSolutions，墨爾本)完成。各治療方案之間的基線變化的顯著差別為其有效性提供了證據(jù)。方差分析是評價治療方案統(tǒng)計顯著性的首要方法，同時將基線的疾病嚴重程度治療方案作為主要的設計因子。如果需要的話，引入可能的顯著性協(xié)同變異。為了使效力達到最大化，利用精確的統(tǒng)計學方法對確定測量的組之間的區(qū)別進行分析?；诩僭O各測量時機之間的相關性為0.60的話，如果每組募集15名患者，發(fā)現(xiàn)由基線到第36周期間各組之間變化的標準偏差的效力將為大約80％。由于觀察到在相似人群中的磨合比例(attritionrate)為15％，因此在每組中募集18名患者。結論患者募集和人口統(tǒng)計從2000年4月開始在12個月內募集36名受試者(圖7)。其中，32名有每份診斷記錄分析的詳實數(shù)據(jù)。兩名患者從各自組中淘汰。按照計劃設計基線疾病嚴重程度因子，將樣本按照基線的ADAS-cog中間數(shù)分成兩組(值＜25、≥25)得到輕度影響和重度影響組(在治療組中n＝8和8，在安慰劑組中n＝7和9)。各組并不是根據(jù)基線的人口統(tǒng)計情況、生物學和臨床參數(shù)(表14)進行區(qū)分的，而是治療組具有比利用NART估計的安慰劑組(111.4比104.9；t(30)＝2.27，p＝0.031)更高的平均病前IQ以及更低水平的促甲狀腺激素(TSH)(1.14比2.00mU/L；t(30)＝4.400，p＜0.001)。隨后將NART和TSH臨時性作為共變量引入至分析中，但是最后發(fā)現(xiàn)它們在任何分析中均不顯著。臨床效果將由基線開始第4、12、24和36周時的ADAS-cog數(shù)變化經過具有治療組和基線疾病嚴重程度的因子的雙向方差分析。相對于PBT-1治療組，安慰劑治療組在每次測量間隔時其ADAS-cog數(shù)變化的平均值顯示出更明顯的降低(圖8A)。這種趨勢與第4周[F(1，28)＝3.55，p＝0.070]和第24周[(F(1，28)＝3.31，p＝0.080)的統(tǒng)計顯著性密切相關(圖8A)。根據(jù)診斷記錄計劃的，評價疾病的嚴重程度是通過將樣本分成輕度影響或重度影響的患者(基線ADAS-cog值＜25、≥25)。嚴重程度水平范圍內的樣本效果測試顯示，合并組很可能被分成在所有周過程中輕度組的非顯著性結果以及重度組在第4周[F(1，28)＝7.73，p＝0.010]和第24周[F(1，28)＝6.63，p＝0.016]的顯著性差異(圖8B)。將這種趨勢保持到第36周，但勉強地脫離統(tǒng)計顯著性[F(1，28)＝3.62，p＝0.068]。在更重度的影響組中，PBT-1相比于安慰劑，其基線ADAS-cog數(shù)的變化平均值差別在第24周和第36周分別相差7.37(95％CI1.51-13.24)和6.36(95％CI-0.50-13.23)(圖8B)。對血漿Aβ、Zn和Cu的影響在基線，在各治療組或重度影響組之間的血漿Aβ42濃度不存在顯著的差異。基線的血漿Aβ40/42其個體水平方差較大，使得降低了對各組之間的平均變化的顯著性差異進行檢測的注意程度。然而，對比基線的基準濃度，個體Aβ水平顯著減少了方差，從而顯示出顯著的治療效果。血漿Aβ42在PBT-1治療組中從第20周開始明顯由基線降低；在相同時間內，安慰劑組中的血漿Aβ42有所增加(圖9A)。如上所述，通過疾病嚴重程度進行劃分表明，只有在輕度影響組中的變化才是明顯的(圖9B)。服用PBT-1與總血漿Zn的明顯升高有關(≈30％)(圖10A)，但是對于血漿Cu不起作用(圖10B)?；旌系腁D組中Zn的平均基線濃度(9.4μM)低于與年齡相關的標準值(Wood和Zheng，1997)。因此，血漿Zn通過接受PBT-1治療而升高表明濃度達到正常。相反，Cu的平均基線濃度(13.1μM)落入與年齡相關的標準值范圍(Rahil-Khazen等人，2000)內。在同時或隨后測定得到的血漿Aβ42/40含量與Zn/Cu含量之間的相關性并沒有顯示出具有明顯的關聯(lián)。使用PBT-1治療AD患者的重要結果就是血漿Zn反常地出現(xiàn)升高(圖10A)，這與突觸鋅和血液之間的由ZnT3介導的傳遞得以重新恢復有關。這也表明，與典型的金屬螯合劑例如去鐵敏相反，PBT-1在該劑量下的作用機理并非是起總組織螯合劑的作用。在存在重新建立的金屬內穩(wěn)態(tài)平衡的條件下，PBT-1對于金屬的這種相對不牢固的親和力看起來似乎不足以引起被標記的系統(tǒng)性金屬損耗。PBT-1的血液含量總日劑量為250、500和750mg的PBT-1的前劑量穩(wěn)態(tài)濃度分別為4.03±2.10、6.74±3.70、7.60±2.15μg/ml，并且沒有顯示出與在同時或隨后測定得到的ADAS-cog、金屬或Aβ含量具有明顯的相關性。表14-基線人口統(tǒng)計情況和關鍵臨床變量組別總的樣本氯碘羥喹安慰劑變量P值(n＝32)(n＝16)(n＝16)平均年齡72.5073.1971.81P＝0.65(SD；最小-最大)(8.37；56-87)(8.61；58-87)(8.35；56-87)性別1789P＝1.00(n；男性％)(53.1％)(47.1％)(52.9％)ApoE態(tài)1578P＝1.00ApoE4雜合子n(％)(46.9％)(43.8％)(50.0％)321ApoE4純合子n(％)(9.4％)(12.5％)(6.3％)估計的發(fā)病前IQNART108.1111.4104.9P＝0.03平均值，(SD；最小-最大)(8.86；91-124)(8.04；94-121)(8.26；91-124)26.3125.5627.06ADAS-CogP＝0.57(7.27；15-46)(7.67；15-46)(7.01；19-41)第一次診斷年齡70.0970.8869.31P＝0.59平均值，(SD；最小-最大)(7.98；54-83)(8.50；57-83)(7.61；54-83)疾病持續(xù)時間(年)2.412.312.56P＝0.66平均值(SD；最小-最大)(1.19；1-5)(1.08；1-4)(1.32；1-5)獨立樣本t-測驗(全部測驗30df)精確的雙尾測試。對于本領域技術人員而言顯而易見的是，盡管出于清楚和理解的目的，已經詳細地對本發(fā)明進行了描述，但是可以對本文所描述的實施方案和方法進行各種變型和修飾，只要其沒有偏離本說明書所公開的發(fā)明實質范圍。在下面的篇幅中列出了本文所引用的各種參考文獻，在此將其引入作為參考。參考文獻Alvarez，A.，Alarcón，R.，Opaza，C.，Campos，E.O.，Muoz，F(xiàn).J.，Calderón，F(xiàn).H.，Dajas，F(xiàn).，Gentry，M.K.，Doctor，B.P.，DeMello，F(xiàn).，Inestrosa，N.C.(1998)Stablecomplexesinvolvingacetylcholinesteraseandamyloid-βpeptidechangethebiochemicalpropertiesoftheenzymeandincreasetheneurotoxicityofalzheimer’sfibrils.TheJournalofNeuroscience，18(9)3213-3223Ariga，T.，Kobayashi，K.，Hasegawa，A.，Kiso，M.，Ishida，H.，andMiyatake，T.(2001)Characterizationofhigh-affinitybindingbetweengangliosidesandamyloidβ-protein.Arch.Biochem.Biophys.388，225-230Avdulov，N.A.，Chochina，S.V.，Igbavboa，U.，O’Hare，E.O.，Schroeder，F(xiàn).，Cleary，J.P.，andWood，W.G.(1997)Lipidbindingtoamyloidb-peptideaggregatespreferentialbindingofcholesterola.J.Neurochem.68，2086-2091BeyreutherK，ChristenY，MastersCL(eds)NeurodegenerativeDisordersLossofFunctionThroughGainofFunction.Springer.Berlin.2001.189BrowerV.HarnessingtheimmunesystemtobattleAlzheimet’sSomeofthemostpromisingapproachestofightAlzheimer’sdiseasesaimtodevelopvaccines.EMBORep2002；3207-9BushAI，MastersCL.Clioquinol’sreturn.Science2001；2922251-2252BtlshAI.TherapeutictargetsinthebiologyofAlzheimer′sdisease.CurrentOpinioninPsychiatry2001；14341-348Carissimi，M.(1972)USPatent3,682,927ChemyRA，AtwoodCS，XilinasMEetal.Treatmentwithacopper-zincchelatormarkedlyandrapidlyinhibitsβ-amyloidacctlmulationinAlzheimer′sdiseasetransgenicmice.Neuron2001；30665-676R.C.CorcoranandS.H.Bang，TetrahedronLett.，1990，31，6757-6758.Corder，E.H.，Saunders，A.M.，Strittmatter，W.J.，Schmechel，D.E.，Gaskell，P.C.，Small，G.W.，Haines，J.L.，andPericak-Vance，M.A.(1993)GenedoseofapolipoproteinEtype4alleleandtheriskofAlzheimer’sdiseaseinthelateonsetfamilialdisease.Science261，921-923Cronin-GolombA，SugiuraR，CorkinS，GrowdonJH.IncompleteachromatopsiainAlzheimer’sdisease.NeurobiolAging1993；14471-477Curtain，C.C.，Ali，F(xiàn).，Volitakis，I.，Cherny，R.A.，Norton，R.S.，Beyreuther，K.，Barrow，C.J.，Masters，C.L.，Bush，A.I.，andBarnham，K.J.(2001)Alzheimer’sdiseaseamyloidβbindscopperandzinctogenerateanallostericallyorderedmembrane-penetratingstructurecontainingsuperoxidedismutase-likesubunits.J.Biol.Chem.276，20466-20473Czech，C.，F(xiàn)orstl，H.，Hentschel，F(xiàn).，Monning，U.，Besthorn，C.，Geigerkabisch，C.，Sattel，H.，Masters，C.，andBeyruether，K.(1994)ApolipoproteinE-4genedoseinclinicallydisgnosedAlzhiemer’sdiseaseprevalence，plasmacholesterollevelsandcerebrovascularchange.Eur.Arch.PsychiatryClin.Neurosci.243，291-292DeFerrari，G.V.，Canales，M.A.，Shin，I.，Weiner，L.M.，Silman，I.，Inestrosa，N.C.(2001)Astructuralmotiforacetylcholinesterasethatpromotesamyloidbeta-peptidefibrilformation.Biochemistry40(35)10447-57DodartJ-C，BalesKR，GannonKSetal.ImmunizationreversesmemorydeficitswithoutreducingbrainAβburdeninAlzheimer’sdiseasemodel.NatNeurosci2002；5452-457A.Dondoni，G.Fantin，M.Fogagnolo，A.MediciandP.Pedrini，Synthesis，1987，9981001.A.Dondoni，F(xiàn).L.Merchan，P.Merino，I.RojoandT.Tejero，Synthesis，1996，641-646Durant，G.J.，Emmett，J.C.，Ganellin，C.R.，Roe，A.M.andSlater，R.A.J.MedChem.，1976，19，923.Eckert，G.P.，Cairns，N.J.，Maras，A.，Gattaz，W.F.，andMuller，W.E.(2000)Cholesterolmodulatesthemembrane-disorderingeffectsofβ-amyloidpeptidesinthehippocampusspecificchangesinAlzheimer’sdisease.Dement.Geriatr.Cogn.Disord.11，181-186Fassbender，K.，Simons，M.，Bergmann，C.，Stroick，M.，Lutjohann，D.，Keller.P.，Runz，H.，Kuhl，S.，Bertsch，T.，vonBergmann.K.，Hennerici，M.，Beyreuther，K.，andHartmann，T.(2001)SimvastatinstronglyreduceslevelsofAlzheimer’sdiseaseβ-amyloidpeptidesAβ42andAβ40invitroandinvivo.Proc.Natl.Acad.Sci.USA.98，5856-5861Fleming，W.C.andPettit，G.R.J.Org.Chem.，1971，36，3490-3493.FolsteinMF，F(xiàn)olsteinSE，McHughPR.Mini-mentalstateapracticalmethodforgradingthecognitivestateofpatientsfortheclinician.J.Psychiatr.Res.1975；12189-198Frears，E.R.，Stephens，D.J.，Walters，C.E.，Davies，H.，andAusten，B.M.(1999)Theroleofcholesterolinthebiosynthesisofb-amyloid.NeuroReport10，1699-1705Friedhoff，L.T.，Cullen，E.I.，Geoghagen，N.S.，andBuxbaum，J.D.(2001)Treatmentwithcontrolled-releaselovastatindecreasesserumconcentrationsofhumanβ-amyloid(Aβ)peptide.Int.J.Neuropsychopharmacol.4，127-130Gershon，H.，Clarke，D.D.andGershon，M.MonashaftefurChemie，1999，130，653.Gershon，H.andMcNeil，W.M.J.Heterocycl.Chem.，1971，8，821.Gordon，L.M.，Curtain，C.C(1988).InAloiaR.C，CurtainC.C，GordonL.M.(eds)AdvancesinMembraneFluidity1MethodsforStudyingMembraneFluidity.AlanR.LissNewYork，pp25-89Hartmann，T.(2001)Cholesterol，AβandAlzheimer’sdisease.TrendsNeurosci.24，S45-S48Hertel，C.，Terzi，E.，Hauser，N.，Jakob-Rotne，R.，Seelig，J.，andKemp，J.A.(1997)Inhibitionoftheelectrostaticinteractionbetweenβ-amyloidpeptideandmembranespreventsβ-amyloid-inducedtoxicity.Proc.Natl.Acad.Sci.USA.94，9412-9416HobaraN，Taketa，K.Electrophoreticstudiesofclioquinolbindingtohumanserumproteins.BiochemPharmacol1976；251601-1606Hope，M.J.，Bally，M.B.，Webb，G.，C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的雜環(huán)基、抗氧化劑、導向分子、OR7、SR7或NR7R8，其中R7和R8相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；CN；(CH2)nNR9R10、HCNOR9或HCNNR9R10，其中R9和R10相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基，n為1-4；OR11、SR11或NR11R12，其中R11和R12相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基或者一起形成任選被取代的雜環(huán)基；或者SO2NR13R14，其中R13和R14相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；以及R3、R4、R5、R和R′相同或不同且選自H、任選被取代的烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的烷氧基、任選被取代的酰基、羥基、任選被取代的氨基、任選被取代的硫基、任選被取代的磺?；?、任選被取代的亞磺?；?、任選被取代的磺?；被?、鹵素、SO3H、胺、CN、CF3、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基、抗氧化劑或導向分子，限制條件是(a)當R1至R3、R和R′是H時，R4不是Cl或I且R5不是I；(b)當R1至R3、R、R′以及R5是H時，R4不是CHO、CHOHCCl3、CH2OCH3、CH2N(C2H5)2、或(c)當R1、R5、R′和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4不是溴、甲基、苯基、羥甲基或三氟甲基；(d)當R1、R4、R5和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是溴、碘、甲基、苯基、丙基、苯乙基、庚基、芐氨基甲基、3-氨基丙基、3-羥基丙基、4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、吡啶-3-基、呋喃-2-甲?；?、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-甲氧基苯基或哌啶-2-基；(e)當R1、R4、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R5不是苯基、3-羥基丙基、苯乙基、3-氨基丙-1-基或己-1-基；(f)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2H且R3是OH時，R不是N-嗎啉代甲基、溴或苯基；(g)當R1、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4和R5不是氯；(h)當R1、R4和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R和R5不是溴；(i)當R1、R、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4不是羥甲基、苯基或溴；(j)當R1、R、R4和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R′不是4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、吡啶-3-基、芐基、溴、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、3-羥基丙基或3-叔丁氧羰基氨基丙基；(k)當R1、R、R4和R′是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R5不是苯基或3-叔丁氧羰基氨基丙-1-基；(l)當R1、R、R4、R′和R5是H且R2是CO2Me時，R3不是甲苯-4-磺酰氨基、哌嗪-1-基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、3-苯甲?；被?1-基、苯乙基、3-叔丁氧羰基氨基丙基、3-羥基丙基、氨基或己-1-基；(m)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Na且R3是OH時，R不是苯基；(n)當R1、R、R4、R′和R5是H且R2是CO2H時，R3不是苯基、4-氯苯基、苯乙基、3-羥基丙基、氨基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、甲苯-4-磺酰氨基、3-苯甲酰基氨基丙-1-基、氨基丙-1-炔基、己-1-基、5-羥基戊-1-基、哌嗪-1-基或2-(1-哌嗪基)嘧啶基；(o)當R1、R′和R是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4和R5不是氯；(p)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R不是溴；(q)當R1、R′和R4是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R和R5不是溴；(r)當R1、R、R3、R′和R5是H且R2是CO2H時，R4不是苯基、4-氯苯基或苯乙基；(s)當R1、R5、R′、R4、R3和R是H時，R2不是2H-四唑-1-基；(t)當R1、R5、R4和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是3，5-二氯苯基或4-氟苯基；以及(u)R1至R5、R和R′中的至少一個不是H。2.根據(jù)權利要求1的方法，其中式I化合物是(i)式Ia其中R、R1和R3如權利要求1中定義；以及R2a是H；任選被取代的C1-6烷基；任選被取代的C1-6烯基；任選被取代的芳基；任選被取代的雜環(huán)基；抗氧化劑；導向分子；COR6a或CSR6a，其中R6a是H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、羥基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基或OR7a、SR7a或NR7aR8a，其中R7a和R8a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；CN；CH2NR9aR10a、HCNOR9a或HCNNR9aR10，其中R9a和R10a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；OR11a、SR11a或NR11aR12a，其中R11a和R12a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基或者一起形成任選被取代的雜環(huán)基；或者SO2NR13aR14a，其中R13a和R14a相同或不同且選自H或任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；或者(ii)式Ib其中R1、R′、R、R2和R3如權利要求1中定義；R4b和R5b相同或不同且選自H；任選被取代的C1-6烷基；任選被取代的C2-6烯基；鹵素；CN；CF3；任選被取代的芳基；任選被取代的雜環(huán)基；抗氧化劑；導向分子；SO3H；SO2NR13aR14a，其中R13a和R14a如上述式Ia中定義；或者OR15b、SR15b、SO2R15b、CONR15bR16b或NR15bR16b，其中R15b和R16b相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的C1-6?；⑷芜x被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基，包括如權利要求1中定義的限制條件(a)-(c)、(e)、(g)、(h)、(I)、(k)、(o)、(q)、(r)、以及(u)。3.根據(jù)權利要求2的方法，其中式Ia化合物是式IIa其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；以及R2′a是任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；式IIIa其中R1和R3如權利要求1或權利要求2中定義；以及R6′a是任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、羥基、OR7′a、SR7′a、N2R7′aR8′a、或NR7′aR8′a，其中R7′a和R8′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；式IVa其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；以及R2″a是CN；CH2NR9′aR10′a、HCNOR9′a或HCNNR9′aR10′a，其中R9′a和R10′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；式Va其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；以及R11′a和R12′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基和任選被取代的雜環(huán)基或者一起形成任選被取代的雜環(huán)基；或式VIa其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；以及R13′a和R14′a相同或不同且選自H、任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的C2-6烯基、任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基。4.根據(jù)權利要求2的方法，其中式Ib化合物是式IIb其中R1、R′、R、R2和R3如權利要求1或權利要求2中定義；以及R4′b和R5′a如上述式Ib中定義，限制條件在于其中至少一個是鹵素，包括如權利要求1中定義的限制條件(a)、(c)、(g)、(h)、(i)、(o)、(q)和(u)；式IIIb其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；R4″b是H或鹵素；以及R5″b是任選被取代的芳基或任選被取代的雜環(huán)基；式IVb其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；R″是C1-6烷氧基、鹵素、C1-6烷基、C2-6烯基或C1-6鹵代烷基；以及R5″b是H或鹵素；式Vb其中R1如權利要求1或權利要求2中定義；以及R″如上述式IVb中定義；或者式VIb其中R2至R5、R和R′如權利要求1或權利要求2中定義；以及R1b是任選被取代的C1-6烷基、任選被取代的芳基、任選被取代的芳?；1-6烷?；蛉芜x被取代的雜環(huán)基。5.根據(jù)權利要求1、2或4中任意一項的方法，其中式I化合物是其中R4b和R5b或者R4′b和R5′b均為鹵素的式Ib或IIb化合物。6.根據(jù)權利要求5的方法，其中該鹵素是氯。7.根據(jù)權利要求1、2或4-6中任意一項的方法，其中R2、R、R3和R′中的至少一個是任選被取代的烷基、任選被取代的芳基、任選被取代的雜環(huán)基、CH2NR9R10其中R9和R10如權利要求1中定義、COR6其中R6是NR7R8其中R7和R8如權利要求1中定義或者NR11R12其中R11和R12如權利要求1中定義。8.根據(jù)權利要求1、2或4-7中任意一項的方法，其中式I化合物是9.根據(jù)權利要求1-8中任意一項的方法，其中該神經病是神經變性疾病。10.根據(jù)權利要求9的方法，其中該神經變性疾病是神經變性淀粉樣變性病。11.根據(jù)權利要求9或權利要求10的方法，其中該神經變性疾病是散發(fā)性或家族性阿耳茨海默氏病、肌萎縮性脊髓側索硬化癥、白內障、帕金森氏病、克-雅二氏病及其與“瘋牛”相關的新變種、亨廷頓氏病、伴有Lewy體形成的癡呆、多系統(tǒng)萎縮癥、哈-斯病、彌散性Lewy體疾病、致命性家族失眠癥、格斯特曼-斯特勞斯勒-杉克病或者伴有淀粉樣變性病-荷蘭型的遺傳性腦溢血。12.根據(jù)權利要求11的方法，其中該神經變性疾病是帕金森氏病。13.根據(jù)權利要求9-11中任意一項的方法，其中該神經變性疾病是Aβ-相關病癥。14.根據(jù)權利要求13的方法，其中該Aβ-相關病癥是阿耳茨海默氏病或與唐氏綜合癥相關的癡呆或者家族性阿耳茨海默氏病的常染色體顯性形式的幾種形式之一。15.根據(jù)前述權利要求中任意一項的方法，它減緩、降低或者阻止了患者的認知能力下降。16.根據(jù)前述權利要求中任意一項的方法，它還包括分開、連續(xù)或者同時服用其它藥物。17.根據(jù)權利要求16的方法，其中所述其它藥物是乙酰膽堿酯酶活性部位的抑制劑、抗氧化劑、抗炎劑或者雌激素劑。18.根據(jù)前述權利要求中任意一項的方法，其中式I化合物是經口、局部或者腸胃外給藥。19.如權利要求1-8中任意一項定義的式I化合物在制造用于治療、改善和/或預防神經病的藥物中的用途。20.如權利要求1-8中任意一項定義的式I化合物用于治療、改善和/或預防神經病中的用途。21.用于治療、改善和/或預防神經病的如權利要求1-8中任意一項定義的式I化合物。22.如權利要求1-8中任意一項定義的式I化合物用作藥物的用途。23.根據(jù)權利要求22的用途，其中該藥物是神經治療或神經保護劑。24.根據(jù)權利要求22或權利要求23的用途，其中該藥物是抗淀粉樣變性劑。25.一種藥物或獸藥組合物，它含有如權利要求1-8中任意一項定義的式I化合物以及可藥用或可獸藥用載體。26.根據(jù)權利要求25的組合物，它還含有其它藥物。27.根據(jù)權利要求26的組合物，其中所述其它藥物是乙酰膽堿酯酶活性部位的抑制劑、抗氧化劑、抗炎劑或者雌激素劑。28.一種式II化合物，它是滿足下述限制條件的如權利要求1-8中任意一項定義的式I化合物(a)當R1和R3至R5、R以及R′是H時，R2不是H、甲基、CO2H、CN、CONCH2CO2H、COCH3、CH2NH2、CNOH、(吡啶-2-基)、2-羥基苯基、CHNNH2、NH-(吡啶-2-基)、或者SO3H；(b)當R1和R4至R7是H時，R3不是OH且R2不是CO2H；(c)當R1至R3、R6和R7是H時，則(i)當R5是I時，R4不是Cl、SO3H或I；(ii)當R5是H時，R4不是SO3H、NH2或Cl；(iii)R4和R5均不是Cl、Br或CH3；以及(iv)當R2至R7是H時，R1不是或(d)當R1至R3、R和R′是H時，R4不是Cl或I且R5不是I；(e)當R1至R3、R、R′和R5是H時，R4不是CHO、CHOHCCl3、CH2OCH3、CH2N(C2H5)2、CH2CN、或者(f)當R1、R5、R′和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4不是溴、甲基、苯基、羥甲基或三氟甲基；(g)當R1、R4、R5和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是溴、碘、甲基、苯基、丙基、苯乙基、庚基、芐氨基甲基、3-氨基丙基、3-羥基丙基、4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、吡啶-3-基、呋喃-2-甲?；?、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-甲氧基苯基或者哌啶-2-基；(h)當R1、R4、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R5不是苯基、3-羥基丙基、苯乙基、3-氨基丙-1-基或己-1-基；(i)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2H且R3是OH時，R不是N-嗎啉代甲基、溴或苯基；(j)當R1、R和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R4和R5不是氯；(k)當R1、R4和R′是H，R2是CO2H且R3是OH時，R和R5不是溴；(l)當R1、R、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4不是羥甲基、苯基或溴；(m)當R1、R、R4和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R′不是4-甲氧基苯基、3-甲基苯基、吡啶-3-基、芐基、溴、4-氯苯基、3，4-二氯苯基、3-羥基丙基或3-叔丁氧羰基氨基丙基；(n)當R1、R、R4和R′是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R5不是苯基或3-叔丁氧羰基氨基丙-1-基；(o)當R1、R、R4、R′和R5是H且R2是CO2Me時，R3不是甲苯-4-磺酰氨基、哌嗪-1-基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、3-苯甲?；被?1-基、苯乙基、3-叔丁氧羰基氨基丙基、3-羥基丙基、氨基或者己-1-基；(p)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Na且R3是OH時，R不是苯基；(q)當R1、R、R4、R′且R5是H且R2是CO2H時，R3不是苯基、4-氯苯基、苯乙基、3-羥基丙基、氨基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基、4-甲基哌嗪-1-基、甲苯-4-磺酰氨基、3-苯甲?；被?1-基、氨基丙-1-炔基、己-1-基、5-羥基戊-1-基、哌嗪-1-基、或者2-(1-哌嗪基)嘧啶基；(r)當R1、R′和R是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R4和R5不是氯；(s)當R1、R4、R′和R5是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R不是溴；(t)當R1、R′和R4是H，R2是CO2Me且R3是OH時，R和R5不是溴；(u)當R1、R、R3、R′和R5是H且R2是CO2H時，R4不是苯基、4-氯苯基或苯乙基；(v)當R1、R5、R′、R4、R3和R是H時，R2不是2H-四唑-1-基；(w)當R1、R5、R4和R是H，R2是CO2H且R3是OH時，R′不是3，5-二氯苯基或4-氟苯基；以及(x)R1至R5、R以及R′中的至少一個不是H；(y)當R1至R3、R5、R′和R是H時，R4不是氯、NH2或SO3H；以及(z)當R1、R3至R5、R和R′是H時，R2不是CH3。29.本文所述的用于制備權利要求28中所定義的式II化合物的方法。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療、改善和/或預防神經病尤其是神經變性疾病的方法，它包括向有該需要的患者施用有效量的式(I)化合物。本發(fā)明還涉及式(II)化合物及其制備方法。文檔編號A61P25/28GK1681791SQ03821942公開日2005年10月12日申請日期2003年7月16日優(yōu)先權日2002年7月16日發(fā)明者凱文·J·巴恩哈姆,伊麗莎白·C·L·高蒂爾,蓋克·B·科克,蓋伊·克里普納申請人:普拉納生物技術有限公司