專利名稱：人β防御素分泌促進劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可以促進β防御素分泌的β防御素分泌促進劑。而且，本發(fā)明還涉及一種促進β防御素分泌的方法。
背景技術(shù)：
眾所周知，在植物、昆蟲、兩棲類、哺乳類等中，其機體內(nèi)存在抗菌物質(zhì)(抗菌肽)作為與生俱來的機體內(nèi)防御機構(gòu)。這稱為天然免疫，承擔(dān)著局部的感染防御。目前已知作為人體中的抗菌肽之一的防御素，具有對細(xì)菌、真菌、原蟲、病毒等的抗菌活性，在機體內(nèi)參與各種機體防御機構(gòu)。
作為皮膚、肺、氣管、腎、生殖器等的粘膜上皮上顯現(xiàn)的防御素，已知有β防御素?，F(xiàn)在，已離析并確定了6種人β防御素(人β防御素-1、人β防御素-2、人β防御素-3、人β防御素-4、人β防御素-5及人β防御素-6)的結(jié)構(gòu)。特別是β防御素-2，已判明其具有在皮膚、肺、氣管及口腔粘膜中進行特別強地表達，通過細(xì)菌感染和炎性細(xì)胞因子刺激表達誘導(dǎo)等特征(參照富田哲治等、「作為機體防御機構(gòu)的防御素」、日本老年醫(yī)學(xué)會雜志、2001年、第38卷、第4號、第440-443頁)，表明其與肺炎等的氣管感染和炎癥有密切關(guān)系。
另外，近年來有報告報道，β防御素不僅能防御局部感染，而且通過使桿細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞的游動，也參與后天免疫。(參照Yang，D.，Chertov，O.，Bykovskaia，S.N.et.al.，“β-Defensinslinking innateand Adaptive immunity through dendritic and T cellCCR6”，Science，1999，vol.286、p.525；Territo，M.C.，Ganz，T.，Selsted，M.E.etal.，”Monocyto-chemotactic activity of defensins from humanneutrophils”，J.Clin.invest.，1989，vol.84，p.201 7；Lillard，J.W.，Jr.，Boyaka，P.N.，Chertov O.et al.，”Mechanisms for induction of acquired host immunity byneutrophil peptide defensins”，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，1999，vol.96，p.651；長岡功等“Defensin的感熱防御和在免疫應(yīng)答中的作用”、臨床免疫、2000年、第33卷、第577頁)。
至此，已知炎性細(xì)胞因子和脂多糖類有促進人β防御素分泌的作用。然而，人β防御素的產(chǎn)生、分泌的機理，還沒有充分判明。對上述物質(zhì)以外的促進人β防御素分泌的方法，尚不明確。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種能夠促進人β防御素分泌的β防御素分泌促進劑。另外，本發(fā)明的目的還在于，提供一種可以以外用劑、內(nèi)服劑、食品等各種形態(tài)使用的人β防御素分泌促進劑。
而且，本發(fā)明的目的還在于，提供一種有效促進人β防御素分泌的方法。
本發(fā)明人為解決上述課題進行了專心致志地研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，有機酸具有促進人β防御素分泌的作用。本發(fā)明是基于這種見解進一步進行反復(fù)研究而開發(fā)的。
亦即，本發(fā)明是如下記載的人β防御素分泌促進劑。
一種人β防御素分泌促進劑，其特征在于，其以有機酸為有效成分。
如[1]記載的人β防御素分泌促進劑，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、乙酸、己二酸、酒石酸、肉桂酸、谷氨酸及丁二酸的至少一種。
如[1]記載的人β防御素分泌促進劑，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸和酒石酸的至少一種。
如[1]記載的人β防御素分泌促進劑，其成為分泌促進對象的人β防御素是人β防御素-2。
如[1]記載的人β防御素分泌促進劑，其是在口唇部或口腔內(nèi)使用的。
一種促進人β防御素分泌用的外用組合物，其含有如[1]～[4]中任一項記載的人β防御素的分泌促進劑。
一種促進人β防御素分泌用的內(nèi)服組合物，其含有如[1]～[4]中任一項記載的人β防御素的分泌促進劑。
一種促進人β防御素分泌用的食品，其含有如[1]～[4]中任一項記載的人β防御素的分泌促進劑。
另外，本發(fā)明是如下記載的促進人β防御素分泌的方法[9]一種促進人β防御素分泌的方法，其特征在于，其給藥或使其攝取有效量的有機酸。
如[9]記載的促進人β防御素分泌的方法，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、乙酸、己二酸、酒石酸、肉桂酸、谷氨酸和丁二酸的至少一種。
如[9]記載的促進人β防御素分泌的方法，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸和酒石酸的至少一種。
如[9]記載的促進人β防御素分泌的方法，其成為分泌促進對象的人β防御素是人β防御素-2。
如[9]記載的促進人β防御素分泌的方法，其在口唇部或口腔內(nèi)促進人β防御素的分泌。
如[9]記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如[1]～[5]中任一項記載的人β防御素促進劑作為有機酸。
如[9]記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如[6]記載的內(nèi)服組合物作為有機酸。
如[9]項記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如[7]記載的食品作為有機酸。
如[9]項記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如[8]記載的外用組合物作為有機酸。
而且，本發(fā)明是如下形態(tài)的用途[18]一種有機酸的用于制造人β防御素的分泌促進劑的用途。
一種有機酸的用于制造促進人β防御素分泌的內(nèi)服組合物的用途。
一種有機酸的用于制造促進人β防御素分泌的食品的用途。
一種有機酸的用于制造促進人β防御素分泌的外用組合物的用途。
一種有機酸的用于促進人β防御素的分泌的用途。


圖1是表示在試驗例1中，在將各有機酸應(yīng)用于口腔內(nèi)時，唾液中促進分泌的人β防御素-2的量(ng/min)的圖。
圖2是表示在試驗例2中，在將各有機酸應(yīng)用于口腔內(nèi)時，唾液中促進分泌的人β防御素-2的量(ng/min)的圖。
圖3是表示在試驗例3中，在將各種量的蘋果酸應(yīng)用于口腔內(nèi)時，唾液中促進分泌的人β防御素-2的量(ng/min)的圖。
具體實施例方式
(1)人β防御素分泌促進劑在本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑中，成為分泌促進對象的人β防御素含有人β防御素-1、人β防御素-2、人β防御素-3、人β防御素-4、人β防御素-5、人β防御素-6。在這些物質(zhì)中，因為人β防御素-2能更有效地進行分泌促進，所以是最合適的分泌促進對象。
本發(fā)明的β防御素分泌促進劑的有效成分是有機酸。在本發(fā)明中使用的有機酸，只要是藥學(xué)上、化妝學(xué)上或食品衛(wèi)生上允許的物質(zhì)，就沒有特別限制。本發(fā)明中使用的有機酸，例如有甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、正辛酸、正癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、軟脂酸、硬脂酸、丙烯酸、丙酰酸、肉桂酸、咖啡酸等一元羧酸；草酸、丙二酸、丁二酸、正戊二酸、己二酸、庚二酸、富馬酸、馬來酸、苯二酸、異苯二酸、對苯二甲酸等二元羧酸；谷氨酸、天冬氨酸等氨基酸；乙醇酸、蘋果酸、酒石酸、異酒石酸、檸檬酸、異檸檬酸、乳酸、羥基丙烯酸、α-羥基丁酸、甘油酸、羥基丙二酸、水楊酸、沒食子酸、托品酸、抗壞血酸、葡糖酸等羥基酸；葉酸；泛酸；煙酸；以及其它糖衍生物等有機酸。這些有機酸中優(yōu)選富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、乙酸、己二酸、酒石酸、肉桂酸、谷氨酸及丁二酸。更優(yōu)選富馬酸、蘋果酸、檸檬酸及酒石酸。這些有機酸可以單獨使用，也可以將2種以上任意組合使用。另外，在本發(fā)明中，也可以使用代替上述有機酸或與上述有機酸組合的藥學(xué)上、化妝學(xué)上或食品衛(wèi)生上允許的上述有機酸的鹽作為有效成分。
另外，上述有機酸，也可以不一定是精制過的物質(zhì)，只要是含有上述有機酸作為其中之一成分的物質(zhì)，就可以作為本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑的有效成分使用。
本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，可以是由上述有效成分構(gòu)成的物質(zhì)，也可以是在含有上述有效成分的基礎(chǔ)上，含有其他的食品衛(wèi)生上、藥學(xué)上或化妝學(xué)上允許的基劑、載體或添加物等其他成分的物質(zhì)。
本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑的應(yīng)用對象，沒有特別限制，可以是生物體的任何部位或組織。從更優(yōu)良的促進人β防御素分泌的觀點考慮，鼻腔內(nèi)、肛門部、呼吸道內(nèi)、口唇部、口腔內(nèi)、咽、眼、生殖器、皮膚、消化道內(nèi)等是優(yōu)選應(yīng)用的對象，特別是這些的粘膜過渡部位及粘膜上皮是合適的應(yīng)用對象。其中，在口唇部和口腔內(nèi)中的人β防御素分泌促進作用特別優(yōu)良，口唇部和口腔內(nèi)是本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑的最合適的應(yīng)用對象。
本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，可以配合食品、內(nèi)服藥品、內(nèi)服藥外部品等，作為人β防御素分泌促進用的食品或內(nèi)服組合物使用。另外，本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑也可以配合外用藥品、外用醫(yī)藥外部品、化妝品、外用品(橡皮膏)等，作為人β防御素的分泌促進用的外用組合物使用。
在配制含有本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑的人β防御素分泌促進用的外用組合物時，可以在上述有效成分的基礎(chǔ)上配合藥學(xué)上或化妝學(xué)上允許的基材或載體，配制成所希望的形態(tài)。而且，在該外用組合物中，在不影響本發(fā)明效果的范圍內(nèi)，也可以配合各種表面活性劑、色素(染料、顏料)、香料、防腐劑、殺菌劑(抗菌劑)、增粘劑、抗氧化劑、金屬密封劑、清涼化劑、防臭劑、pH調(diào)整劑等各種添加劑。另外，根據(jù)需要也可以含有配合于保濕劑、紫外線吸收劑、紫外線彌散劑、維生素類、植物提取物、皮膚收斂劑、抗炎劑(消炎劑)、美白劑、細(xì)胞激活劑、血管舒張劑、血液循環(huán)促進劑、皮膚機能亢進劑、抗過敏劑、抗組胺劑、抗生素等外用劑的公知的藥效成分。
上述外用組合物，只能限于用于皮膚和粘膜，其形狀沒有特別限制。例如有液狀、乳液狀、粉末狀、懸濁液狀、乳脂狀、軟膏狀、奶油凍狀、凝膠狀、膠狀、糊狀、薄殼狀、棒狀、氣溶膠狀、噴霧狀、搽劑、填充劑、粘貼劑等形狀。另外，上述外用組合物的形狀，可以根據(jù)給藥對象部位適當(dāng)設(shè)定。
另外，上述外用組合物是以發(fā)揮人β防御素的分泌促進作用為限度，具有人β防御素的分泌促進作用以外的作用的外用組合物，具體來講，可以是創(chuàng)傷治愈劑、揩拭劑、凈化劑(例如，洗顏料、清潔劑、身體洗凈料等)、基礎(chǔ)化妝料(例如，乳液、乳脂、洗液、油類及面膜等)、牙膏、漱口劑、口中清涼劑、口中用粘貼劑等形態(tài)的外用組合物。特別是從應(yīng)用于口腔內(nèi)發(fā)揮人β防御素的分泌促進作用的觀點考慮，優(yōu)選其是口中用粘貼劑、牙膏、漱口劑或口中清涼劑的形態(tài)。
另外，上述外用組合物也可以是灌腸劑、滴眼劑、滴鼻劑等形態(tài)。
另外，只要是使用蒸發(fā)性有機酸作為人β防御素分泌促進劑的有效成分的場合，也可以通過使有效成分揮發(fā)(蒸發(fā))，將其吸入，應(yīng)用于鼻孔內(nèi)、口腔內(nèi)或支氣管內(nèi)。以這種形態(tài)使用的方法，例如有加熱含有有效成分的水溶液等，吸入得到的蒸氣的方法。作為這樣使有效成分揮發(fā)使用的形態(tài)，也可以配制上述外用組合物。配制成這種形態(tài)時，上述外用組合物可以通過根據(jù)需要含有芳香成分，由此作為芳香液使用。作為人β防御素分泌促進劑的有效成分使用的蒸發(fā)性有機酸，例如有乙酸、丙酸、甲酸、丁酸、戊酸等。
關(guān)于上述β防御素分泌促進用的外用組合物中的上述人β防御素分泌促進劑的配合比例，可以根據(jù)該組合物的形態(tài)、有效成分的種類、使用對象的年齡和性別、期望的效果等適當(dāng)設(shè)定。例如，相對上述外用組合物的總重量，上述人β防御素分泌促進劑的有效成分的比例，以總量計為0.001重量％以上，優(yōu)選為0.005～99重量％，更優(yōu)選為0.01～99重量％。
本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，通過應(yīng)用于皮膚或粘膜，可以發(fā)揮β防御素分泌促進作用。對于應(yīng)用該人β防御素分泌促進劑的量以及次數(shù)，根據(jù)有效成分的種類和濃度、使用者的年齡和性別、應(yīng)用形態(tài)、所期望的程度適當(dāng)設(shè)定。例如，可以將人β防御素分泌促進劑的有效成分0.1mg以上、優(yōu)選0.5～10000mg以一日1～10次左右應(yīng)用于皮膚或粘膜。
另外，在配制含有本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑的人β防御素分泌促進用的食品時，可以在一般的食品制造中以上述有效成分為其中一個成分配合到食品(含飲料)中。另外，人β防御素分泌促進用的食品可以適當(dāng)含有食品衛(wèi)生上允許的各種食品添加劑。
上述食品，例如有特定保健用食品、營養(yǎng)輔助食品、患者用食品等。更具體的例如有飲料(碳酸飲料、清涼飲料、含乳飲料、醇類飲料、果汁飲料、茶類、營養(yǎng)飲料等)、粉末飲料(粉末果汁、粉末湯料等)、糕點類(口香糖、糖果、小甜餅、胡頹子、脆餅干、餅干、果凍、焦糖、檸檬糕點、可食性薄片、可食性薄膜、片劑等)、口中清涼劑(口香糖、糖、胡頹子、可食性薄片、可食性薄膜、片劑等)、乳制品(干酪、酸乳等)、面包、面類、串、調(diào)料(沾料、調(diào)味汁等)等。從口腔內(nèi)的人β防御素的分泌促進的觀點考慮，其中，合適的例如有口香糖、胡頹子、清涼飲料、糖果、可食性薄片及可食性薄膜。
在上述促進人β防御素分泌用的食品中，配合人β防御素分泌促進劑的比例，可以根據(jù)有效成分的種類、使用對象的年齡、性別、期望的效果等適當(dāng)設(shè)定。例如，相對上述食品的總重，上述人β防御素分泌促進劑的有效成分的比例，以總量計為0.01重量％以上，優(yōu)選為0.02～100重量％，更優(yōu)選為0.05～100重量％。
上述促進人β防御素分泌用的食品的每日攝取量，可以根據(jù)有效成分的種類和濃度、使用者的年齡和性別、食品的形狀、期望的效果程度，適當(dāng)設(shè)定促進人β防御素的分泌所必需的有效量。例如，該食品每日的攝取量，促進人β防御素分泌用的有效成分為0.1mg以上、優(yōu)選0.5～10000mg的量。
另外，在配制含有本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑的促進人β防御素分泌用的內(nèi)服藥品組合物或內(nèi)服藥外部品組合物時，在上述有效成分的基礎(chǔ)上，配合藥學(xué)上允許的基材或載體，可以配制成所希望的形態(tài)。另外，根據(jù)需要，可以任意配合結(jié)合劑、崩解劑、潤滑劑、潤濕劑、緩沖劑、保存劑、香料等藥學(xué)上所允許的添加劑。
上述內(nèi)服藥品組合物或內(nèi)服藥品外部品組合物的形態(tài)，沒有特別的限制，優(yōu)選在粘膜上、特別是在口腔內(nèi)能溶解的。例如，薄膜制劑、片劑、咀嚼片、粉劑、錠劑、顆粒劑、膠囊劑、糖漿制劑等。其中，從能在口腔內(nèi)溶解的觀點考慮，優(yōu)選例如薄膜制劑、片劑以及咀嚼片。
上述內(nèi)服藥品組合物或內(nèi)服藥品外部品組合物的上述人β防御素分泌促進劑的配合比例，可以根據(jù)有效成分的種類、組成物的形態(tài)、使用對象的年齡和性別、期望的效果等適當(dāng)設(shè)定。例如，相對上述內(nèi)服藥品組合物或內(nèi)服藥品外部品品組合物的總重，上述人β防御素分泌促進劑的有效成分的比例，以總量計為0.01重量％以上，優(yōu)選為0.02～99重量％，更優(yōu)選為0.05～99重量％。
上述內(nèi)服藥品組合物或內(nèi)服藥品外部品組合物的每日給藥量，由于根據(jù)有效成分的種類和濃度、使用者的年齡和性別、組合物形狀、給藥方法、期望的程度等而異，因此不能做統(tǒng)一的規(guī)定，是促進人β防御素分泌的有效量即可。例如，每次的給藥量，將促進人β防御素分泌用的有效成分為0.1mg以上、優(yōu)選0.5～10000mg的量，每日1～10次左右給藥。
如上所述，有機酸具有促進人β防御素分泌的作用。因而，本發(fā)明進一步提供一種有機酸用于制造人β防御素分泌促進劑的使用。以及本發(fā)明還提供一種有機酸用于制造促進人β防御素分泌用的外用組合物或內(nèi)服組合物的有機酸的使用。
(2)促進人β防御素分泌的方法如上所述，有機酸可以有效地促進人β防御素的分泌。因而，本發(fā)明提供一種使用有機酸促進人β防御素的分泌的方法。
本發(fā)明的促進人β防御素的分泌的方法，可以相對以促進人β防御素的分泌為目的身體部位，通過將有機酸以外用形態(tài)給藥而進行。另外，本發(fā)明的促進人β防御素分泌的方法，可以通過將有機酸以內(nèi)服形態(tài)給藥或使其攝取而進行。本發(fā)明的方法，優(yōu)選通過使用上述(1)的人β防御素的分泌促進劑、特別是人β防御素分泌促進用的外用組合物、內(nèi)服組合物或食品來進行。
在本發(fā)明的方法中，被促進分泌的人β防御素、使用的有機酸、該有機酸的給藥量和給藥次數(shù)、成為分泌促進對象的身體部位(或組織)等，如上述(1)記載。
通過使用有機酸，可以有效地促進人β防御素的分泌。因而，本發(fā)明進一步提供一種用于促進人β防御素分泌的有機酸的使用。
(3)促進人β防御素分泌的方法-2另外，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過使口腔內(nèi)的環(huán)境暫時成為酸性環(huán)境可以促進口腔內(nèi)人β防御素的分泌?；谶@樣的見解，本發(fā)明進一步提供一種在口腔內(nèi)的促進人β防御素分泌的方法。利用這樣的方法促進人β防御素的分泌時，可以保持口腔內(nèi)環(huán)境的暫時酸性，具體來講，保持口腔內(nèi)的pH為7以下，優(yōu)選為6.2以下。另外，在這樣的方法中，保持口腔內(nèi)酸性環(huán)境的時間，可以是促進人β防御素分泌的有效保持時間。另外，在這樣的方法中，為了使口腔內(nèi)環(huán)境成為酸性，例如可以在口腔內(nèi)給藥上述有機酸。這樣的方法的優(yōu)選實施方式，例如，在口腔內(nèi)給藥上述人β防御素分泌促進劑的方法。根據(jù)這樣的方法，由于可以保持口腔內(nèi)健康，因此該方法對預(yù)防和緩和牙周病、口腔炎、齲齒、口臭等有一定作用。
需要說明的是，在上述(1)的人β防御素分泌促進劑的使用或上述(2)的人β防御素的分泌促進方法中，在皮膚和粘膜上的pH條件沒有特別限制。
實施例下面，例舉實施例及試驗例說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于這些實施例。需要說明的是，下面有時也將人β防御素略記為hBD-2。
實施例1口香糖依照常用方法制造下述處方的口香糖。
配合量(重量％)酸橙粉 5.0(在酸橙粉中含有檸檬酸75重量％)膠基(主要成分乙酸乙烯酯) 22.0木糖醇 35.0
麥芽糖醇 27.0香料 適量合計 100重量％實施例2檸檬糕點依照常用方法制造下述處方的檸檬糕點。
配合量(重量％)蘋果酸 7.5碳酸氫鈉 7.5木糖醇 40.0麥芽糖醇 30.0玉米淀粉 15.0合計 100重量％實施例3口中清涼劑(液狀)依照常用方法制造下述處方的口中清涼劑(液狀)。
配合量(重量％)乳糖 0.21-薄荷醇 1.0乙醇 40.0甘油 20.0單月桂酸癸甘油酯 0.5香料 0.1純水 剩余量合計 100重量％實施例4口中清涼劑(片劑)依照常用方法制造下述處方的口中清涼劑(片劑)。
配合量(重量％)酒石酸451-薄荷醇 1碳酸氫鈉 24乳糖 25蔗糖脂肪酸酯 3香味增強劑1甜味劑1合計 100重量％實施例5食品(片劑)依照常用方法制造下述處方的食品(片劑)。
配合量(重量％)抗壞血酸 5.0乳糖 85.5木糖醇5.0蔗糖脂肪酸酯 4.0香味增強劑0.5合計 100重量％實施例6液體牙膏依照常用方法制造下述處方的液體牙膏。
配合量(重量％)富馬酸451-薄荷醇 1碳酸氫鈉 24乳糖 25蔗糖酯肪酸酯 3
香味增強劑 1甜味劑 1合計 100重量％實施例7芳香液依照常用方法制造下述處方的芳香液。
配合量(重量％)純水 54無水乙醇 40檸檬提取物 4葡萄柚提取物 1乙酸 1香料 適量合計 100重量％實施例8滴鼻劑依照常用方法制造下述處方的滴鼻劑。
成分名 配合量(重量％)氯化鈉 0.9檸檬酸 1.0pH調(diào)整劑 適量純水 剩余量合計 100重量％實施例9滴眼劑依照常用方法制造下述處方的滴眼劑。
成分名 配合量(重量％)氯化鈉 0.9
氯化鉀 0.1黃素腺嘌呤二核苷酸 0.05透明質(zhì)酸鈉 0.1檸檬酸 1.0pH調(diào)整劑 適量純水 剩余量合計 100重量％試驗例1確認(rèn)促進β防御素分泌的試驗-1為了評價各種有機酸的促進β防御素分泌的效果，以健康人1名為被驗者，進行下列試驗。
通過吐出法回收被驗者在安靜狀態(tài)下3分鐘分泌的唾液(下面，將此唾液記作對照)。其后，將富馬酸50mg放入口腔內(nèi)，保持1分鐘后，與分泌的唾液一起回收。通過ELISA法測定回收的唾液中的人β防御素-2的濃度，依照下述計算式算出在1分鐘內(nèi)，利用該有機酸分泌的人β防御素-2的量。其中，下面計算式中的唾液量(ml)，以1g唾液的重量＝1ml唾液量，從回收的唾液重量(g)算出。用抗壞血酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、己二酸、乙酸和酒石酸代替富馬酸，進行和上述同樣的試驗。需要說明的是，在使用乳酸和乙酸的情況下，通過將在50mg該有機酸中加水至總量為1g而配制成的水溶液吸入口腔內(nèi)，進行上述試驗。
計算式[1分鐘分泌的hBD-2的量(ng/min)]＝{[唾液中hBD-2的濃度(ng/ml)]×[唾液量(ml)]}/[唾液回收時間(min)]#唾液回收時間，在對照的情況下是3分鐘，在有機酸給藥后的情況下是1分鐘。
得到的結(jié)果如圖1所示。由此可知，通過在口腔內(nèi)應(yīng)用有機酸，增大了唾液中分泌的人β防御素-2的量。由該結(jié)果可以確認(rèn)，有機酸具有在機體內(nèi)促進人β防御素-2的分泌的作用，特別是在口腔內(nèi)的促進人β防御素-2分泌的作用優(yōu)良。
試驗例2確認(rèn)促進β防御素分泌的試驗-2為了評價各種有機酸促進β防御素分泌的效果，以健康人6名為被驗者，進行下列試驗。使用檸檬酸、蘋果酸、富馬酸、L-谷氨酸、反式肉桂酸、L(+)-抗壞血酸、丁二酸、DL-酒石酸、己二酸、L-乳酸及乙酸作為有機酸。
通過吐出法回收被試驗者在安靜狀態(tài)下3分鐘分泌的唾液(下面，將此唾液記作對照)。其后，將有機酸50mg放入口腔內(nèi)，保持1分鐘后，與分泌的唾液一起回收。通過ELISA法測定回收的唾液中的人β防御素-2的濃度，依照下述計算式算出在1分鐘內(nèi)，利用該有機酸分泌的人β防御素-2的量。其中，下面計算式中的唾液量(ml)，以1g唾液的重量＝1ml唾液量，從回收的唾液重量(g)算出。需要說明的是，在使用乳酸和乙酸的情況下，通過將在50mg該有機酸中加水至總量為1g而配制成的水溶液吸入口腔內(nèi)，進行上述試驗。
計算式[1分鐘分泌的hBD-2的量(ng/min)]＝{[唾液中hBD-2的濃度(ng/ml)]×[唾液量(ml)]}/[唾液回收時間(min)]#唾液回收時間，在對照的情況下是3分鐘，在有機酸給藥后的情況下是1分鐘。
得到的結(jié)果如圖2所示。由此結(jié)果可以看出，和試驗1的結(jié)果同樣，通過在口腔內(nèi)應(yīng)用有機酸，增大了唾液中分泌的人β防御素-2的量。
試驗例3確認(rèn)促進β防御素分泌的試驗-3(濃度依賴性)為了評價有機酸促進β防御素分泌的效果濃度的依賴性關(guān)系，以健康人3名作為被試驗者，進行下列試驗。
通過吐出法收集被試驗者在安靜狀態(tài)下3分鐘分泌的唾液(下面，將此唾液記作對照液)。其后，將0.01重量％的蘋果酸水溶液1ml(蘋果酸攝取量0.1mg)放入口腔內(nèi)，保持1分鐘后，與分泌的唾液一起回收。通過ELISA法測定回收唾液中的人β防御素-2的濃度，依照下述計算式算出1分鐘內(nèi)通過攝取0.1mg蘋果酸而分泌的人β防御素-2的量。其中，下面計算式中的唾液量(ml)，以1g唾液的重量＝1ml唾液量，從回收的唾液重量(g)算出。而且，用0.05、0.1、0.2、0.5和1重量％的蘋果酸水溶液(攝取量0.5、1、2、5、10mg)，進行和上述同樣的試驗。
計算式[1分鐘分泌的hBD-2的量(ng/min)]＝{[唾液中hBD-2的濃度(ng/ml)]×[唾液量(ml)]}/[唾液回收時間(min)]#唾液回收時間，在對照的情況下是3分鐘，在有機酸給藥后的情況下是1分鐘。
得到的結(jié)果如圖3所示。從圖3可知，唾液中分泌的人β防御素-2的量隨蘋果酸水溶液濃度的增大而增大。從此結(jié)果可以確認(rèn)，有機酸的促進人β防御素-2分泌的效果有濃度依賴性，即使是0.01％的濃度(攝取量0.1mg)，也具有人β防御素-2分泌誘導(dǎo)效果。
工業(yè)實用性已知人β防御素具有以下優(yōu)良的特性(a)由于其自身具有抗菌性，因此在短時間內(nèi)可以發(fā)揮抗菌作用；(b)由于其在機體內(nèi)分泌，因此即使對于難以采用外用或內(nèi)服的形態(tài)給藥現(xiàn)有的抗菌劑的部位，也可以發(fā)揮其優(yōu)良的抗菌作用。(c)使桿狀細(xì)胞和記憶T淋巴細(xì)胞游動(chemolaxis)(亦即，調(diào)動免疫活性細(xì)胞參與后天免疫)。
本發(fā)明的人β防御素的分泌促進劑，在應(yīng)用過的部位中，可以促進β防御素的分泌，特別是人β防御素-2的分泌。其原因在于，根據(jù)本發(fā)明的β防御素分泌促進劑，可以促進β防御素的分泌增強機體內(nèi)的抗菌作用和免疫作用，因此，可以提高機體防御機構(gòu)的防御作用。由此，本發(fā)明的β防御素分泌促進劑，可以有效預(yù)防和緩和由細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲感染引起的癥狀。特別是有效預(yù)防特應(yīng)性皮炎的二次感染、預(yù)防粉刺、防止口臭、防止腳臭、預(yù)防剃須或脫毛后的二次感染、預(yù)防尿布疹的二次感染、預(yù)防痱子的二次感染、預(yù)防燙傷的二次感染、預(yù)防因使用類固醇引起的感染等的皮膚護理。另外，對細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲感染引起的皮膚皸裂、皮膚干燥、手的皸裂等皮膚護理有效。
另外，本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，有望具有基于人β防御素的分泌促進作用的藥理效果。因此，本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，例如，在眼內(nèi)給藥的情況下，可以用于預(yù)防和治療病毒性結(jié)膜炎、細(xì)菌性結(jié)膜炎、麥粒腫等；在鼻腔和咽內(nèi)給藥的情況下，可以用于預(yù)防和治療感冒、流感等；在鼻腔內(nèi)給藥的情況下，可以用于預(yù)防和治療鼻炎、膿性鼻涕、副鼻竇炎等；在口腔內(nèi)給藥的情況下，可以用于預(yù)防和治療牙周病、口炎、齲齒等；在口唇部使用的情況下，可以用于預(yù)防和治療單純皰疹等；在皮膚使用的情況下，可以用于預(yù)防和治療癬菌病、膿皰病、疣、傳染性軟疣、水痘、傳染性生殖器皰疹、念珠菌病、帶狀皰疹、單純皰疹、粉刺、特應(yīng)性皮炎、創(chuàng)傷治愈劑等；在其他部位使用的情況下，可以用于預(yù)防或治療肺炎、胃炎、腫瘤、后天性免疫不全癥候群、錐蟲病等。在這些疾病中，特別是對于預(yù)防和治療由細(xì)菌、真菌、病毒、原蟲等參與的疾病有效果。
另外，本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，因為在口腔內(nèi)和口唇部可以發(fā)揮其更優(yōu)良的人β防御素分泌促進作用，所以作為預(yù)防和治療牙周病、口炎、齲齒、口臭、單純皰疹等的藥，特別有效。因此，本發(fā)明的人β防御素分泌促進劑，適用于保持健康的口腔內(nèi)環(huán)境的口部護理制品。
權(quán)利要求
1.一種人β防御素分泌促進劑，其特征在于，以有機酸為有效成分。
2.如權(quán)利要求1記載的人β防御素分泌促進劑，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、乙酸、己二酸、酒石酸、肉桂酸、谷氨酸及丁二酸的至少一種。
3.如權(quán)利要求1記載的人β防御素分泌促進劑，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸及酒石酸的至少一種。
4.如權(quán)利要求1記載的人β防御素分泌促進劑，其成為分泌促進對象的人β防御素是人β防御素-2。
5.如權(quán)利要求1記載的人β防御素分泌促進劑，其是在口唇部或口腔內(nèi)使用的。
6.一種促進人β防御素分泌用的外用組合物，其含有如權(quán)利要求1～4中任一項記載的人β防御素分泌促進劑。
7.一種促進人β防御素分泌用的內(nèi)服組合物，其含有如權(quán)利要求1～4中任一項記載的人β防御素分泌促進劑。
8.一種促進人β防御素分泌用的食品，其含有如權(quán)利要求1～4中任一項記載的人β防御素分泌促進劑。
9.一種促進人β防御素分泌的方法，其特征在于，給藥或使其攝取有效量的有機酸。
10.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、乙酸、己二酸、酒石酸、肉桂酸、谷氨酸及丁二酸的至少一種。
11.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其有機酸是選自富馬酸、蘋果酸、檸檬酸和酒石酸的至少一種。
12.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其成為分泌促進對象的人β防御素是人β防御素-2。
13.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其在口唇部或口腔內(nèi)促進人β防御素的分泌。
14.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如權(quán)利要求1～5中任一項記載的人β防御素促進劑作為有機酸。
15.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如權(quán)利要求6記載的內(nèi)服組合物作為有機酸。
16.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如權(quán)利要求7記載的食品作為有機酸。
17.如權(quán)利要求9記載的促進人β防御素分泌的方法，其使用如權(quán)利要求8記載的外用組合物作為有機酸。
18.一種有機酸在制造人β防御素分泌促進劑中的使用。
19.一種有機酸在制造人β防御素分泌促進用內(nèi)服組合物中的使用。
20.一種有機酸在制造人β防御素分泌促進用食品中的使用。
21.一種有機酸在制造人β防御素分泌促進用外用組合物中的使用。
22.一種有機酸在促進人β防御素的分泌中的使用。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于，提供一種能夠促進人β防御素分泌的β防御素分泌促進劑，其可以以外用劑、內(nèi)服劑、食品等各種形態(tài)使用。有機酸具有促進人β防御素、特別是人β防御素－2的分泌的作用，以該有機酸為人β防御素分泌促進劑的有效成分使用。通過將該人β防御素分泌促進劑配合于外用劑、內(nèi)服劑、食品中，可以使這些物質(zhì)具有人β防御素分泌促進作用。
文檔編號A61P1/02GK1852708SQ20048002704
公開日2006年10月25日 申請日期2004年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月19日
發(fā)明者五十嵐幸代, 田中英男, 高須修, 筱原茂生, 田中雅彥, 矢后美里 申請人:大塚制藥株式會社